G-CSF预处理供者单倍体相合骨髓移植加用CD25单克隆抗体预防急性GVHD的临床研究

探索单倍体相合未去T细胞骨髓移植应用CD2 5单克隆抗体预防急性移植物抗宿主病 (GVHD)的疗效。在 1 999年 2月至 2 0 0 1年 1 1月期间 ,对 2 8例白血病病人进行HLA 2 - 3个位点不合骨髓移植 ,其中 2 0 0 0年 1 1月前完成的不使用CD2 5单抗的 1 5例为对照组 ,此后完成的 1 3例为本方案组 ,两组供者均接受粒细胞集落刺激因子(G CSF ,Lenograstim) 2 50 μg/d ,皮下注射 ,连用 7天后采髓 ;环孢菌素A ,氨甲蝶呤 ,抗胸腺细胞球蛋白和霉酚酸酯(MMF)联合用于GVHD预防。研究组病例在移植前 2小时和移植后第 4天加用CD2 5单克隆抗体 (Basiliximab)进一步预防GVHD ;并对两组移植后植入 ,GVHD发生和无病存活情况进行比较。结果表明 ,2 8例患者移植后均植入成功 ,植入直接证据的检测证实完全供者造血 ,两组造血重建时间比较无显著性差异 (P >0 .0 5) ;未用抗体的对照组急性Ⅱ -Ⅳ度GVHD发生率 33 .3 % ,本方案组加用CD2 5单克隆抗体 ,无 1例发生急性Ⅱ -Ⅳ度GVHD ,两组之间差异有显著性 (P <0 .0 5) ;慢性GVHD发生均为局限性 ,两组的差异无显著性 (P >0 .0 5)。对照组中位随访2 6(1 5 - 36)月 ,活存 9/ 1 5例 ,本方案组中位随访 8(3 - 1 5)月 ,活存 1 2 / 1 3例 ,Kaplan Meier存活曲线分析与对数秩检验 ,本方案组 1?

脾照射治疗老年特发性血小板减少性紫癜的临床和实验研究

目的 为评价脾照射治疗老年特发性血小板减少性紫癜 (ITP)的临床疗效与细胞生物学机制。方法 对 2 1例激素耐药性重症 ITP老年病人进行总剂量 1 5 Gy～ 2 0 Gy脾照射治疗 ,并用流式细胞术和脾病理切片方法研究脾照射对 BALB/ C鼠脾淋巴细胞亚群的影响。结果 6/ 2 1例缓解 ,6/ 2 1显效 ,4/ 2 1例有效 ,5/ 2 1例无效。 1 5 Gy和 2 0 Gy对 BALB/ C鼠脾照射后 ,脾 CD8辐射损伤率分别是 47.6%和 53.2 %。 CD4辐射损伤率分别是 2 0 .6%和 2 3.1 %。脾小体和套区细胞增生减少。结论 脾照射是治疗老年 ITP一种安全有效方法 ,其细胞生物学效应是减少脾 T和 B淋巴细胞增生 ,特别是减少 Ts细胞增生。

短程大剂量盐酸米托蒽醌与阿糖胞苷治疗难治复发急性白血病的临床研究

目的 :评价大剂量盐酸米托蒽醌 40 mg/ m2单剂与阿糖胞苷 (1～ 1.5 ) g/ m2连用 5 d,治疗难治复发急性白血病的疗效及推广应用价值。方法 :以该方案对 2 0例难治复发急性白血病进行 2 2例次治疗。结果 :2 2例次治疗中的 2 0例次获得完全缓解 (CR90 .9% ) ,1例次取得部分缓解 (PR4.5 4% ) ,其中 14例急淋的 16例次治疗 ,14例次取得完全缓得 ,1例次部分缓解 ,1例无效 ,6例急性粒细胞白血病治疗均取得完全缓解 ,无治疗相关死亡。结论 :短程大剂量米托蒽醌联合阿糖胞苷对难治复发急性白血病有较高的疗效 ,可提高缓解率 ,降低死亡率。

体外骨髓净化在缓解或复发粒细胞白血病自体移植的应用研究

8例急性粒细胞白血病,预处理后,4～9天回输人胎肝低分子抑瘤物体外净化骨髓,进行自体骨髓移植,5例缓解期移植病人,除1例在移植后16个月复发,余4例无病存活6～42个月,中位数28个月。而在早期复发移植3例,移植后分别1个月,2个月,18个月复发。骨髓重建中位数31天,白细胞】0.5×10~9/L中位数36天,血小板】20×10~9/L,中位数18天,本净化方法对正常骨髓细胞生长,无明显影响。

脾栓塞与脾照射治疗免疫性血小板减少性紫癜

脾栓塞与脾照射治疗免疫性血小板减少性紫癜纪树荃中国人民解放军空军总医院（１０００３６）免疫性血小板减少性紫癜（ＩＴＰ）是一种多发于年青女性的常见的血液病，多年来使用激素与手术脾脏切除治疗，由于手术并发症及病人具体对手术的耐受以及对术后免疫功能的影响，...

人类天然抑瘤物净化骨髓在缓解或复发白血病自体移植中应用

7例急性髓系白血病经大剂量化疗或放疗加化疗预处理后，输回经小分子抑瘤物净化骨髓，平均中性粒细胞达0.5×10^9/L37天，血小板达20×10^7/L35天，2例早期复发接受移植病例分别于移植后30天，150天复发。结果提示，白血病复发期中行移植的疗效差，用人类胎肝小分子抑瘤物净化骨髓对正常祖细胞生长无影响。

脾栓塞术在血液病中的应用

25例病人经导管血管进行了脾栓塞,其中2例经2次栓塞,共27例次,均操作成功,术中术后无严重合并症。部份脾栓塞用于免疫性血小板减少,达到了切脾疗效,且保留了机体免疫功能。

单倍体相合未去T细胞骨髓移植治疗高危白血病

异基因造血干细胞移植受限制的因素之一是缺乏HLA匹配供者,欧美约30％要移植的病人可找到HLA相合和5％病人有一个位点不合的同胞供者。国内单生子女政策及建立骨髓库需要时间,找到相关相合与无关相合供者十分困难,此外寻找无关供者费时3～6个月,许多病人将失去移植机会,但所有人几乎均有相关的HLA半相合供者。20世纪80年代国外开始单倍体相合移植,由于重症移植物抗宿主病(GVHD),使本工作停顿,80年代末90年代初,对单倍体移植更深入的研究及临床实践,观察到去除植入物中的T细胞可控制GVHD的发生,

单倍体相合骨髓移植新技术治疗难治复发白血病

国内单生子女政策及无一定规模的骨髓库,使多数需要造血干细胞移植的白血病病人找到HLA匹配相关与非相关供者非常困难,但几乎所有人均有单倍体相合相关供者,它为造血干细胞移植治疗奠定了基础.80年代国外开始单倍型相关造血干细胞移植,由于重症移植物抗宿主病(GVHD),结果失败.去除植入物中T细胞后,可控制GVHD发生,但是植入物的排斥、白血病的复发及移植后免疫功能重建迟缓等原因,移植同样是失败的.90年代,单倍体移植取得了很大进步,1997年报道体外和体内T细胞去除相结合以及移植后连续免疫调节的方法,用T10B9进行选择性T细胞清除,提高了移植后无病生存.

单倍体相合骨髓移植白血病患者造血重建的临床研究

为研究未去除T细胞的单倍体骨髓移植后造血重建的特点 ,对 15例HLA 2 - 3个位点不匹配骨髓移植亲属供者使用G CSF 3- 4 μg/ (kg·d) ,连续 7天后采髓。预处理方案采用大剂量阿糖胞苷联合环磷酰胺和全身照射。应用环孢菌素A和氨甲喋呤、抗胸腺细胞球蛋白及霉酚酸酯 (MMF)预防移植物抗宿主病。移植后观察血像、骨髓像、行染色体分析及HLA位点鉴定。移植后分别于 3,6和 12个月及 2年追踪鉴定植入状态。结果发现 ,15例患者全部移植物植入 ,移植后中性粒细胞 >0 .5× 10 9/L和血小板 >2 0× 10 9/L的时间分别为 18(13- 2 3)天及 2 2 (16- 32 )天。骨髓像显示各系造血均恢复。 7例应用染色体检查 ,8例应用HLA位点 ,4例应用血型 ,1例应用DNA指纹检测 ,植入鉴定结果除 1例复发患者于移植后 2个月骨髓复发植入鉴定为供、受者嵌合外 ,其他患者均呈持续全部稳定植入。移植后发生I度急性GVHD 8例 ,II-IV度GVHD 5例 ,可评价的慢性GVHD共 8例。结论 :供者应用G CSF后采髓 ,加大预处理剂量 ,联合应用作用机理不同的多种免疫抑制剂进行HLA单倍体的骨髓移植 ,可跨越人类HLA多样性屏障。

供者使用G-CSF与受者加用ATG和霉酚酸酯的单倍体相合骨髓移植

为了探讨供者应用G CSF与受者加用抗胸腺细胞球蛋白 (ATG)与霉酚酸酯 (MMF)HLA单倍体相合未去T细胞骨髓移植的可行性 ,对 1 7例白血病病人进行HLA 2 - 3个位点不匹配的相关供者的骨髓移植。 1 7例病人中 1 1例急性淋巴细胞白血病 (CR2 6例 ,>CR2 4例 ,复发状态 1例 ) ,2例急性非淋巴细胞白血病 (CR1 1例 ,CR21例 ) ,4例慢性粒细胞白血病 (慢性期 2例 ,加速期 2例 )。预处理方案是阿糖胞苷 3 0 g/m2 ,2次 /日 ,连用 3天 (于移植前 7至 5天 )、环磷酰胺 45mg/ (kg·d) ,连用 2天 (于移植前 5天和移植前 4天 )和全身照射 1 0Gy ,分 2次 (于移植前 2天和移植前 1天进行 )。供者应用G CSF 2 50 μg/d ,连用 7日后采髓 ;预防GVHD除应用CSA和MTX外 ,在移植前 4至 1天应用ATG 5mg/ (kg·d) ,移植后 7天开始每天加用霉酚酸酯 1 0 g ,连用 1 0 0天。结果表明 :1 7例移植后均取得植入 ,中性粒细胞 >0 5× 1 0 9/L的中位天数是 1 8(1 3 - 2 3)天 ,血小板 >1 0× 1 0 9/L的中位天数是 2 0 (1 6 - 32 )天。Ⅱ -Ⅳ度急性GVHD病人 5例 (2 9 4% ) ,其中 2例肠道Ⅱ度急性GVHD ,2例肠道Ⅲ度急性GVHD ,1例肝和肠道Ⅳ度GVHD。可评价的慢性GVHD病例 9例 ,均发生慢性局限性GVHD。未发生移植方案相关Ⅲ级以上的毒性。中位随访?

杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因及其配体相合或错配对单倍相合骨髓移植效果的影响(英文)

本研究分析杀伤细胞免疫球蛋白样受体(killer cell Ig-like receptor,KIR)及其配体分子相合与否对单倍体相合骨髓移植效果的影响。分析了74例KIR基因及其配体分子HLA-Cw的分布频率和特点,同时比较KIR分子配体缺失与否对单倍相合骨髓移植患者总体生存、无病生存、GVHD发生以及复发等的影响。结果表明:19个KIR基因表型中2DL1、2DL4和3DL2-3在所有个体100%分布,其他高频率分布的还有3DP1(98.6%)、2DP1(98.6%)、3DL1(97.3%)、2DL3(97.3%);抑制型基因分布频次是活化型的1.37倍;所有单倍体都含有2DL1、KIR3DL2、3DL3和2DL4,其中每个单倍体中均含有2DL2和/或2DL3。HLA-C14个等位基因中Cw7分布频率最高为37.8%;KIR2DL2/2DL3识别配体Group2(HLA-Cw1,3,7,8,13,14)组占43.2%。32例单倍相合骨髓移植中KIR基因错配发生比例为43.8%,其中9/14例为2DL不相合、5/14为2DL2或3DL1不相合;46对单倍相合骨髓移植中HLA-Cw全相合者29例,不相合者14例,HLA-Cw发生完全错配比例为30.4%,全相合比例为63.4%。14例KIR基因不相合和13例KIR基因相合移植病例中,KIR基因相合组生存率高于KIR基因不相合者(p=0.032);17例KIR分子配体HLA-Cw不相合移植患者的DFS明显高于24例相合者(p=0.024)。按供受者KIR配体是缺失的GVHD矢量组生存率高于非GVHD矢量组(p=0.015)。急性重症GVHD发生与活化型KIR2DS1/2DS2有关,2DS1/2DS2不相合组高发急性重症GVHD同时复发减低,而2DS1/2DS2相合组低GVHD但是复发增多。14例KIR配体不相合髓系白血病患者骨髓移植后1例复发死亡,而12例KIR配体相合组患者有4例复发死亡。结论:单倍体相合骨髓移植的主要特点就是HLA不全相合,KIR基因表型不一致性及其配体缺失也是其主要免疫学特征,供者型KIR配体的缺失与移植效果有密切关系,在单倍相合移植中分析KIR基因及其配体对于供者选择和判断预后有重要意义。

联合应用抗生素对中性粒细胞减少期感染的经验性治疗

目的评价经验性联合抗生素治疗粒细胞缺乏伴发热感染的临床效果。方法结合分析我院2001年1月至2003年12月间病原菌流行病学资料,把202例接受预处理或化疗后粒细胞缺乏期感染患者分3组给予经验性治疗:碳青酶烯类抗生素联合万古霉素治疗组84例、单用碳青酶烯类抗生素治疗组78例和头孢类抗生素或喹诺酮类治疗组40例。结果碳青酶烯类联合万古霉素有效率为93%,碳青酶烯类单药组66%,头孢类或喹诺酮类组有效率为30%。结论结合G+菌分离率和致病率逐年升高特点,碳青酶烯类抗生素联合万古霉素一线治疗粒缺期感染可能是有效的治疗策略。

单倍体相合骨髓移植后CD4^+CD25^+ T细胞免疫恢复的临床研究

本研究探讨单倍体相合骨髓移植后CD4+CD25+T细胞免疫恢复及其与移植物抗宿主病(GVHD)和复发的关系。采集27例单倍体相合骨髓移植患者在移植后不同时间内的外周血标本,用流式细胞仪检测分析CD4+CD25+T细胞百分比和绝对数,同时比较该细胞亚群恢复与GVHD和白血病复发的关系。结果表明:经过G-CSF动员后供者外周血中CD4+CD25+细胞百分比明显增高(p<0.05)。移植后30天CD4+CD25+细胞恢复到正常水平的20%,但在移植后3个月内恢复颇为缓慢,直到180天才恢复到正常水平的50%。CD4+CD25+细胞恢复与急性GVHD的发生无关,但是在慢性GVHD组CD4+CD25+显著增高。移植后1年内未发现复发与CD4+CD25+细胞绝对计数有关。结论:在骨髓移植后给予抗CD25抗体预防GVHD的治疗模式下,CD4+CD25+细胞恢复与急性GVHD的发生无关,但与慢性GVHD的发生似乎有关,而与白血病的复发的关系不明确。

自体骨髓移植治疗急性白血病的现状

骨髓移植(BMT)已有40年历史,70年代由于移植免疫学,组织配型等基础医学进展,使BMT的研究与临床日趋活跃,主要取得进展原因:(1)明确病员做BMT的最佳时期。(2)采取新的组织配型。(3)采用合理有力的支持治疗及分流无菌室的使用。(4)有效的免疫抑制药物使用。以上工作据国际骨髓移植登记组资料,使399例急性淋巴白血病。

G-CSF预处理供者的HLA相合同胞异基因骨髓移植治疗慢性粒细胞白血病研究(英文)

为了评价供者应用G-CSF的骨髓移植治疗慢性粒细胞白血病的临床疗效,用HLA相合的、混合淋巴细胞培养阴性的同胞供者骨髓,对单一病种慢性粒细胞白血病行移植治疗.供者应用G-CSF 250微克/天,连用7天后供髓的32例为研究组,对照组18例常规采髓移植,在预处理方案,GVHD预防和支持治疗方法相同的情况下,比较研究组和对照组移植后在加速造血重建,降低GVHD发生和延长无病生存的疗效.移植结果显示,供者应用G-CSF在慢性粒细胞白血病移植中造血重建加速,中性粒细胞＞0.5×109/L和血小板＞20×109/L的中位天数分别是第15(10-22)天和第17.5(13-28)天,对照组是第21和24天(P＜0.01),研究组发生急性Ⅱ-Ⅳ度GVHD2例(6.3%),对照组5例(27.8%),通过比较,两组差异有显著性(P＜0.05),慢性GVHD发生分别是24%和33.3%(P＞0.05).研究组移植相关死亡、复发和无病生存与对照组比较无统计学差异(P＞0.05).结论:使用G-CSF动员供者的HLA相合的异基因骨髓移植,造血重建加快和重度急性Ⅱ-Ⅳ度GVHD减轻,有可能提高CML移植的无病生存率.

单倍体相合骨髓移植术后肺部并发症

为了探讨单倍体相合骨髓移植术后不同时期肺部并发症发生情况 ,对 18例单倍体相合骨髓移植术后肺部并发症的发生时间、病因、治疗措施及预后等临床资料进行了总结分析。结果表明 :70例接受单倍体相合骨髓移植病人中 18例发生肺部并发症 ,其中细菌性肺炎 7例 ,发生在移植后 3- 12月 ,治疗过程中继发真菌感染 4例 ;肺真菌病 5例 ,CMV肺炎 4例 ,均发生在移植后 2 - 3月 ;阻塞性细支气管炎伴机化性肺炎 1例 ,发生在移植后 12月 ;原发肺炎综合征 1例 ,发生在移植后 5 0天 ;因肺部并发症直接导致死亡 8例。结论 :单倍体相合骨髓移植术后肺部并发症是移植术后常见并发症 ,主要是真菌肺炎 。

高三尖杉酯碱通过抑制P210^(bcr/abl)诱导K562细胞凋亡

为探讨高三尖杉酯碱 (homoharringtonine ,HHT)抗慢性髓细胞白血病 (CML)的机制 ,以CML细胞系K5 62细胞为对象 ,应用AnnexinV PI双标志和Western印迹杂交技术 ,观察HHT对细胞凋亡和P2 10 bcr/abl癌蛋白的影响。结果表明 ,5 - 2 0ng/ml浓度的HHT可诱导K5 62细胞凋亡 ,但随着药物浓度的增加细胞出现坏死性死亡 ;HHT可使细胞内融合蛋白P2 10 bcr/abl的含量约减少 70 % ,而对正常存在于细胞内的P145 c abl无影响。上述结果证实 ,HHT通过对P2 10 bcr/abl的定向抑制作用促进CML细胞凋亡 ,这可能是其抗CML的分子机制。

山莨菪硷治疗再生障碍性贫血与体外试验的相关性研究

用人骨髓细胞培养贴壁细胞层,建立基质层。在此层上培养粒系祖细胞(CFU-c),以不带基质层的CFU—c为对照(100％),发现第3周有基质层CFU-c产率为无基质层对照150.7±17.63％,此方法发现基质层上接种CFU-c,可反映再障病人骨髓微环境病变,基质层上生长CFU—c状况与山莨菪硷治疗呈负相关。本文为确定再障患者微环境病变建立了方法。