原发肝癌AFP基因的表达与血清HBsAg关系的观察

目的：探讨ＡＦＰｍＲＮＡ的表达与ＨＢＶ感染的关系。方法：采用逆转录ＰＣＲ技术对３１例原发肝癌组织中ＡＦＰｍＲＮＡ的表达进行了观察。结果：３１例肝癌组织有２６例（８３．９％）检出ＡＦＰｍＲＮＡ，阳性者中有７例同时伴有癌旁肝组织ＡＦＰｍＲＮＡ的表达，此７例患者均伴有明显的肝硬化。肝癌组织ＡＦＰｍＲＮＡ检出率在血清ＨＢｓＡｇ阳性组（８６．９％），伴有肝硬化组（８７．０％）和血清ＡＦＰ＞３０ｎｇ／ｍｌ组（１００％）分别显著高于血清ＨＢｓＡｇ阴性组（５０％）、无伴有肝硬化组（５０．０％）和血清ＡＦＰ≤３０ｎｇ／ｍｌ组（４６．０２％）（Ｐ＜０．０５～０．０１）。结论：肝癌组织ＡＦＰｍＲＮＡ的表达可能与ＨＢＶ感染，肝细胞再生修复有关。

采用PCR—RFLP技术分析石蜡包埋胃癌组织ras和p53基因点突变

采用多聚酶链延伸反应一限制性片段长度多态性分析（ＰＣＲ—ＲＦＬＰ）法对福尔马林固定、石蜡包埋胃癌组织ｒａｓ和ｐ５３基因点突变进行分析，结果表明，Ｃ—Ｈａ—ｒａｓ第１２位密码子突变率为１３．６％（１２／８８），第６１位密码子为３．８％（３／８０）；Ｃ—Ｋｉ—ｒａｓ第１２位密码子点突变率为７．２％（５／６９），第１３位密码子未发现有点突变者；Ｎ—ｒａｓ第１２位密码子点突变率为１．４％（１／６８）。ｐ５３基因第２４８位密码子点突变率为７．４％（５／６８），第２４９位密码子未见有点突变者。以上提示采用ＰＣＲ—ＲＦＬＰ技术可对多数从石蜡包埋胃癌组织提取的ＤＮＡ进行ｒａｓ和ｐ５３基因点突变分析。

胃癌组织P^（53）蛋白产物的表达与病人预后的关系

采用免疫组化方法对Ｐ￣（５３）蛋白的表达进行观察。结果表明：胃癌组织Ｐ￣（５３）蛋白染色阳性率为３６．５％，肿瘤大于５ｃｍ组、有淋巴结转移和浆膜侵犯及Ⅲ、Ⅳ期胃癌组织Ｐ￣（５３）蛋白染色阳性率分别显著高干肿瘤小于５ｃｍ、无淋巴结转移和浆膜侵犯及Ⅰ、Ⅱ期胃癌组（Ｐ＜０．０１）。Ｐ￣（５３）染色阳性者５年存活率为２１．１％，染色阴性者为５０．０％，两组５年存活率差非常显著（Ｐ＜０．０１）。以上结果提示检测胃癌组织Ｐ￣（５３）蛋白有助于判断胃癌患者预后。

原发性肝癌、肝硬化血清铜、锌、锰含量的变化

近年文献报道肝硬化与肝癌患者体内微量元素有不同程度的失调。关于血清中微量元素与肝硬化和肝癌的关系研究较少。本文对肝硬化和肝癌患者血清中微量元素进行了分析,结果报告如下: 1 材料及方法 1.1 病例选择 本组共74例。正常人20例;均为健康献血员。

高师院校教育实习模式改革初探

教育实习是高等师范教育一门具有师范特点的综合实践课程,它对确保师范教育培养目标的实现方面有特殊的功能。然而,近些年来,我国的师范教育实习仍存在着不少问题。本文分析目前高师院校教育实习的现状与存在的问题,借鉴国外教育实习一些成功的经验,提出进一步完善高师院校的教育实习模式。

大肠癌组织APC/MCC和DCC基因杂合缺失的研究

采用聚合酶链反应(PCR)技术.并配合限制性片段长度多态性(RFLP)分析。对41例大肠癌组织APC/MCC和DCC基因的杂合缺失(LOH)进行研究。APC基因LOH率为28.0％(7/25),MCC基因LOH率为36.40％(8/22),两者综合分析LOH率为38.9％(14/38)。DCC基因LOH率为55.3％(21/38)。DCC基因在有淋巴结转移组的LOH率(80.0％),显著高于无淋巴结转移组(39.1％)(P<0.05),在Dukes C、D期组的LOH率(71.4％)显著高于A、B期组(35.3％)。以上结果提示,APC/MCC和DCC基因的LOH是大肠癌常见的基因改变,DCC基因LOH的测定有可能成为大肠癌病人预后评估的指标。

对中学物理教材机械运动概念表述的探讨与思考

1中学物理教材中机械运动的表述关于机械运动的概念初中物理课本是这样表述的：“在物理学里，我们把物体位置的变化叫做机械运动．”高中物理课本的表述：“物体相对于其它物体的位置变化，叫做机械运动，简称运动．”在运动描述的相对性性问题上，教材上进一步描述，如果物体A相对于物体B的位置没有发生变化，

浅析具体和抽象相统一的原则在物理教学中的应用

具体和抽象相统一原则是指人类在认识客观事物的过程中从具体到抽象,再从抽象到具体的统一,是学生获得正确认识并不断深化的正确途径。结合物理教学特点,指出在教学中运用时需从三个方面努力:运用具体事例,丰富感性认识;在具体的感性认识基础上,指导学生进行分析、综合、抽象概括;加强物理知识在生活、生产和社会科学技术中的联系和应用,使学生的感性认识和理性认识经常地发生联系。

高师院校中学物理教学论课程的改革与创新

中学物理教学论是高师院校物理教育专业的一门重要必修课和特色课,但历来不受人们所重视。在调查研究基础上,从该课程普遍存在的问题出发,提出三点改革措施:改变课程设置;重视任课教师选择和培养;将教育科学研究作为教学论的重要研究内容。

大肠癌组织大肠癌缺失基因杂合缺失的研究

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和限制性片段长度多态性分析（ＲＦＬＰ）技术，对４ｌ例大肠癌组织大肠癌缺失基因杂合性缺失进行研究。结果表明，３８例大肠癌信息个体中有２１例（５５．３％）发现ＤＣＣ基因杂合缺失。ＤＣＣ基因杂合性缺失与肿瘤大小、组织学类型和浸润深度无关，但有淋巴结转移（８０．００％）和ＤｕｋｅｓＣ、Ｄ期（７１．４％）大肠癌Ｄｃｃ基因杂合缺失率显著高于无淋巴结转移（３９．１％）和ＤｕｋｅｓＡ、Ｂ期组（３５．３％，Ｐ＜０．０５）。结果提示，ＤＣＣ基因杂合缺失多发生于大肠癌的晚期，ＤＣＣ基因杂合性缺失的检测有可能成为大肠癌病人预后评价的指标。

用虚功原理解题应注意坐标原点的选择

本文从实例出发,论述了应用虚功原理解题时坐标原点必须选在定点上。

不同病变胃粘膜端粒酶活性及其亚单位的检测

目的：探讨端粒酶及其亚单位（ＴＰ１、ｈＴＲ、ｈＴＲＴ）在胃粘膜癌变过程中的作用。方法：端粒酶的检测采用端粒末端重复序列扩增技术（ｔｅｌｏｍｅｒｉｃ ｒｅｐｅａｔ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｐｒｏｔｏｃｏｌ，ＴＲＡＰ），端粒酶亚单位的检测采用ＲＴ－ＰＣＲ法。结果：端粒酶阳性检出率在慢性萎缩性胃炎、肠上皮化生、异型增生及胃癌中分别为２４．６％（１４／５７）、３８．９％（７／１８）、３７．５％（３／８）及９２．３％（６０／６５），正常胃粘膜未检测到端粒酶活性，与以上各病变组织有显著性差异（Ｐ＜０．０５～０．０１），而慢性萎缩性胃炎、肠上皮化生和异型增生组织中端粒酶阳性率亦明显低于胃癌组织（Ｐ＜０．０１）；端粒酶的表达与临床病理指标无相关性；ＲＴ－ＰＣＲ定性检测发现端粒酶亚单位ｈＴＲ和ＴＰ１在大多数胃粘膜中都有表达，而ｈＴＲＴ主要在胃癌及部分癌前组织中表达，且在胃癌中ｈＴＲＴ的表达与端粒酶活性之间具有明显的相关性（Ｐ＜０．０１）。结论：端粒酶不仅在胃癌组织中高表达，在部分癌前组织中也有表达。提示端粒酶在胃癌的发生过程中可能具有重要作用；端粒酶亚单位ｈＴＲＴ不仅可能作为胃癌的诊断指标，而且还可能作为胃癌基因治疗的靶?

β-榄香烯诱导人肝癌细胞株SMMC-7721凋亡的研究

目的：探索榄香烯对体外培养人肝细胞株的作用及其机制。方法：应用ＭＴＴ方法分析榄香烯对肝癌细胞株ＳＭＭＣ－７７２１生长的影响。结果：榄香烯能明显抑制肝癌细胞生长，其半数生长抑制剂量为３７．４μｇ／ｍｌ；流式细胞术证实榄香烯能阻滞肝癌细胞从Ｇ０／Ｇ１期进入Ｓ期，并诱发细胞凋亡；透射电镜超微结构证实榄香烯能诱发肿瘤细胞凋亡的典型形态变化；免疫组化ＳＰ法及流式细胞术定量分析榄香烯能使肝癌细胞癌基因ｂｃｌ－２、ｃ－ｍｙｃ表达降低，抑癌基因ｐ５３表达增强。结论：榄香烯能诱导肝癌细胞凋亡，其作用机制可能与癌基因ｂｃｌ－２、ｃ－ｍｙｃ表达减少、ｐ５３表达增加有关。

RT-PCR技术检测外周血/骨髓中肿瘤细胞

应用RT－PCR技术检测外周血或骨髓中的肿瘤细胞是近年来发展起来的新方法，具有灵敏度高、特异性强的优点，该方法的推广使用不仅有助于判断肿瘤的转移、复发，而且也可能为临床选择、评价治疗方案提供有效的依据。

As_2O_3对胃癌细胞周期及端粒酶活性的影响

目的 探讨三氧化二砷 (As2 O3 )对SGC 790 1胃癌细胞端粒酶活性及细胞周期的影响及其机制。方法 细胞凋亡、细胞周期分布及相关蛋白的表达采用流式细胞术 ;端粒酶活性的检测采用端粒末端重复序列扩增 ELISA法 (TRAP ELISA) ,端粒酶亚单位mRNA及c mycmRNA的表达采用RT PCR技术。结果 As2 O3 可明显抑制SGC 790 1细胞的生长 ,细胞凋亡率明显增加 ,G0 /G1期细胞减少 ,S和G2 /M期细胞增加 ,Bcl 2、c myc、PCNA蛋白表达减少 ,Bax蛋白表达增加 ,端粒酶活性明显下降 ;端粒酶亚单位hTR和TP1mRNA无明显变化 ,hTRTmRNA表达减少 ,同时 ,c mycmRNA的表达亦减少。结论 As2 O3 对SGC 790 1细胞的抑制作用可能是通过二条途径实现 :一个是诱导细胞凋亡 ,另一个是通过下调hTRTmRNA的表达来下调端粒酶活性 ,其机制有可能与c myc和Bcl 2基因的减少以及Bax基因的增加有关。

人端粒酶蛋白催化亚单位反义基因转染对胃癌细胞恶性表型的逆转作用

目的 探讨人端粒酶蛋白催化亚单位（ｈＴＲＴ）反义基因治疗对胃癌细胞恶性表型的逆转作用。方法 采用基因重组技术，构建ｈＴＲＴ正、反义真核表达载体，采用脂质体法导入ＳＧＣ－７９０１细胞，检测细胞生长曲线、端粒酶活性凋亡、细胞周期、软琼脂中克隆形成率及裸鼠体内成瘤性的变化。结果 成功构建ｈＴＲＴ正、反义真核表达载体，并导入ＳＧＣ－７９０１胃癌细胞株中，获得稳定表达正、反义基因的细胞系７９０１－Ｓ、７９０１－ＡＳ１和７９０１－ＡＳ２。７９０１－ＡＳ１和７９０１－ＡＳ２出现显著生长抑制现象，端粒酶活性明显下降，细胞凋亡增加，异型性减小，Ｇ０／Ｇ１期细胞增加，Ｓ和Ｇ２Ｍ期细胞减少，增殖指数减小，软琼脂中无克隆形成，裸鼠体内成瘤消失。结论ｈＴＲＴ反义基因治疗可以明显抑制ＳＧＣ－７９０１细胞的增殖，部分逆转肿瘤细胞的恶性表型，其机制可能主要是通过诱导细胞分化而非诱导细胞凋亡途径实现的，提示ｈＴＲＴ基因可以作为肿瘤治疗的靶基因。

糖尿病大鼠胃窦SCF-Kit信号改变及其对Cajal间质细胞的影响

目的研究糖尿病胃轻瘫大鼠胃Cajal间质细胞(interstitialcellsofCajal,ICC)的形态学改变,测定干细胞因子(stemcellfactor,SCF)及Kit含量变化,探讨糖尿病大鼠胃窦SCF-Kit信号在Cajal间质细胞受损中作用。方法用链尿佐菌素建立大鼠糖尿病模型,3个月后采用美蓝方法测定胃排空速率,对胃窦组织进行透射电镜观察Cajal间质细胞超微结构变化,采用RT-PCR方法测定胃窦平滑肌组织SCFmRNA的表达,Westernblot法检测胃窦平滑肌组织c-kit蛋白变化结果与正常大鼠相比,糖尿病大鼠胃排空明显延迟,胃Cajal间质细胞与其他细胞间的缝隙连接显著减少、结构破坏、连接松散;细胞器变性、减少;胞质广泛溶解;核周间隙增宽。糖尿病大鼠胃窦平滑肌组织SCFmRNA以及c-kit蛋白表达均明显低于正常大鼠。结论SCF-Kit系统受损与糖尿病大鼠胃窦Cajal间质细胞变性、数量减少以及网络结构破坏有关最终导致胃运动障碍。

KAI1基因对MHCC97-H肝癌细胞粘附力的影响

目的探讨KAI1基因对MHCC97-H肝癌细胞粘附力的影响,从而推测KAI1基因影响MHCC97-H肝癌细胞侵袭转移的机制。方法采用微管吸吮技术研究我们前已转染人类KAI1全长正、反义结构基因的人肝癌MHCC97-H细胞粘附力。结果在纤维连接蛋白(fibronectin,FN)裱衬表面,利用微管吸吮系统测得的各组肝癌细胞的粘附力分别为MHCC97-H-S组(678·4±101·8),MHCC97-H-AS组(1083·6±113·8),MHCC97-H-pCI组(853·0±105·4)及MHCC97-H亲本细胞组(834·6±130·5)(单位为10-10N,细胞数为25)。与MHCC97-H亲本细胞组比较,MHCC97-H-S组细胞对FN的粘附力显著下降(P<0·01),MHCC97-H-AS组细胞对FN的粘附力显著增加(P<0·01),而MHCC97-H-pCI组细胞对FN的粘附力无明显变化(P>0·05)。结论KAI1基因可能降低肝癌细胞对细胞外基质FN的粘附力,从而抑制转移的初始步骤,进而抑制MHCC97-H肝癌细胞的侵袭和转移。

针对端粒酶蛋白催化亚单位的肿瘤免疫治疗研究

端粒酶蛋白催化亚单位(hTERT)相对分子质量Mr 127 000, 包含1 132个氨基酸,其基因位于5号染色体短臂的最末端(5p15.33),在90%以上的人类肿瘤中高表达,而正常成熟组织中则基本没有表达,可作为广谱的抗肿瘤治疗分子靶点.DC是已知体内激活静息T细胞功能最强的专职抗原递呈细胞,经DC递呈hTERT抗原表位信息后,CTL能识别从hTERT提取的多肽表位,并在体外杀伤多种组织来源的hTERT阳性的肿瘤细胞.因此hTERT是迄今发现的一个最具应用前景的肿瘤广谱相关抗原,针对hTERT的肿瘤免疫基因治疗有可能成为肿瘤免疫治疗的又一研究热点.