肠道微生物相关的结肠动力学机制研究进展

肠道微生物及其代谢产物可作为维持肠道微生态的重要影响因素,胃肠道壁内的感觉神经末梢可能对细菌信号作出反应,为肠道运动和微生物稳态的关键生物过程提供基础。本文主要讲述肠道微生物相关的结肠动力学机制,从肠道微生物相关的信号转导、与Toll样受体的相互作用、细菌代谢产物与结肠动力的相关关系四个方面进行阐述,同时也探索了细菌微泡充当肠道微生物和宿主之间通信的连接桥梁的观点。为结肠动力学机制提供了新的研究思路,从而促进肠道动力相关疾病的病因研究和个体化治疗的发展。

血常规、生化指标对重症急性胰腺炎的预测价值探讨

目的探讨血常规、生化指标对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)患者早期预测的临床价值。方法选取2020年1月至2022年7月于武汉大学人民医院住院治疗的急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)患者236例,根据是否存在持续(超过48 h)器官功能障碍,将患者分为SAP组(n=55)和非SAP组(n=181),收集患者一般情况、入院后首次血常规、生化相关指标,计算BMI、中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrophil to lymphocyte ratio,NLR)和预后营养指数(prognostic nutritional index,PNI),两组通过比较分析之后,将差异有统计学意义的指标全部纳入多因素二元Logistic回归分析,筛选出影响SAP发生的独立危险因素,然后使用ROC曲线评价分析不同血常规、生化指标对早期SAP的预测价值。结果一般情况对比,SAP组合并糖尿病比例高于非SAP组(P<0.05),住院天数大于非SAP组(P<0.05),而性别、年龄及不同年龄分层SAP比例、吸烟史、饮酒史、高血压、病因比较,差异无统计学意义(P>0.05);实验室检查指标中,SAP组Glu、白细胞计数和NLR大于非SAP组(P<0.05),PNI和Ca^(2+)则小于非SAP组,其余纳入指标则差异无统计学意义(P>0.05)。多因素二元Logistic回归分析显示,Ca^(2+)水平为SAP独立保护因素,Glu、NLR为SAP的独立危险因素。ROC曲线分析表明:Glu、NLR以及Ca^(2+)的AUC分别为0.718、0.756、0.781,Glu+NLR、Glu+Ca^(2+)、NLR+Ca^(2+)两两联合的AUC分别为0.794、0.808、0.821,均对早期SAP具有良好的预测价值,且三者联合时对于早期SAP的整体预测效能进一步提升(AUC=0.843,P<0.05)。结论Glu、Ca^(2+)水平和NLR对SAP患者有较好的早期预测价值,且三者联合可显著提高预测效能。

车前番泻颗粒联合生物反馈治疗出口梗阻型便秘疗效评价

目的:评价车前番泻颗粒联合生物反馈(BF)治疗出口梗阻型便秘(OCC)的疗效。方法:66例OCC患者BF治疗一个疗程后比较治疗前后直肠压力变化,按患者意愿分为继续BF治疗组和车前番泻颗粒联合治疗组,分组治疗2月后比较2组患者临床症状改善状况。结果:BF治疗前后比较患者直肠静息压、力排结果和直肠最大耐受量显著提高(P<0.05),肛管静息压、肛门直肠缩榨压、直肠初始感觉、初始欲望、强烈欲望均无改变(P>0.05);治疗2月后,BF组和联合组患者较治疗前症状均有显著改善,且联合组优于BF组(P<0.05)。结论:BF联合车前番泻颗粒治疗方案改善患者临床症状优于单独BF治疗,是OCC的有效治疗方案。

肠易激综合征临床诊断的潜在生物学标记物

肠易激综合征(IBS)是一种以腹痛或腹部不适,伴排便习惯或粪便性状改变为主要临床特征的功能性肠病。IBS的病因和发病机制尚未完全明确,使诊断存在一定困难。目前IBS的诊断主要是基于临床症状,易漏诊、误诊。随着基础和临床研究的深入,一些潜在的IBS相关生物学标记物受到广泛关注。本文就IBS临床诊断的潜在生物学标记物作一综述。

非甾体类抗炎药对胃癌SGC7901细胞增生及环氧合酶活性的影响

目的:探讨非甾体类抗炎药(nonsteroidal anti-inflammatory drugs,NSAID)对体外培养的胃癌细胞SGC7901生长及环氧合酶活性的作用。 方法:用MTF法观察阿司匹林、尼美舒利对胃癌细胞SGC7901生长的影响;免疫细胞化学方法检测Ki-67及COX-2蛋白表达;采用放射免疫分析法测定细胞培养上清PGE2水平。 结果:阿司匹林和尼美舒利呈时间、剂量依赖性方式抑制细胞增生,减少Ki-67蛋白表达。胃癌细胞SGC7901COX-2蛋白表达阳性,并伴有PGE_2释放,尼美舒利可减少PGE_2产生,但对COX-2蛋白表达无影响。 结论:阿司匹林和尼美舒利均可抑制COX-2表达阳性的胃癌细胞SGC7901生长,尼美舒利通过抑制COX-2酶活性而减少PGE_2释放,该研究提示COX-2可能在胃癌细胞SGC7901增生中起重要作用。

环氧合酶-2对胃癌血管内皮生长因子及血管形成的影响

目的 探讨环氧合酶 2 (COX 2 )对胃癌血管内皮生长因子 (VEGF)的表达及血管生成的影响。方法 应用免疫组织化学技术检测胃癌组织中COX 2 ,VEGF表达和微血管密度 (MVD)。结果 COX 2在62 .2 %胃癌组织中表达增高 ,COX 2表达与VEGF表达显著相关 (γS=0 .5 85 ,P <0 .0 1 ) ,且COX 2和VEGF均阳性的胃癌组织MVD(64.0± 2 5 .4)亦明显高于两者均阴性者 (3 0 .7± 1 1 .5 ) (P <0 .0 1 )。结论 胃癌组织中存在COX 2的高表达 ,COX

人类乳头瘤病毒HPV_(16,18)型感染与胃癌发生的关系

目的探讨人类乳头瘤病毒ＨＰＶ１６，１８型感染与胃癌发生的关系．方法采用ＨＰＶ１６Ｅ６和ＨＰＶ１８Ｅ６／Ｅ７特异性引物，通过多聚酶链反应（ＰＣＲ），检测３７例新鲜胃癌组织标本及２０例新鲜癌旁正常胃粘膜标本中的ＨＰＶＤＮＡ．结果新鲜胃癌组织３７例中ＨＰＶ１６，１８型ＤＮＡ检出率分别为２１６％和５４％．新鲜癌旁正常胃粘膜标本２０例中检出率为０．ＨＰＶ１６型ＤＮＡ在胃癌和癌旁正常胃粘膜中检出率存在显著性差异（Ｐ＜００５），而ＨＰＶ１８则没有显著性差异（Ｐ＞００５）．新鲜胃癌组织３７例中ＨＰＶ１６，１８型ＤＮＡ总检出率为２７０％，２０例新鲜癌旁正常胃粘膜标本中总检出率为０，两者有显著性差异（Ｐ＜００５）．新鲜胃癌组织３７例中ＨＰＶ１６，１８型双重感染检出率为０．ＨＰＶ１６和（或）ＨＰＶ１８型ＤＮＡ的检出率在不同分化程度的胃癌中无显著性差异，但ＨＰＶ１６型ＤＮＡ在不同部位的胃癌中检出率却有显著性差异，以贲门部胃癌检出率最高．结论高危类ＨＰＶ１６型感染可能与胃癌发生有关。

沉默肝癌衍生生长因子对大肠癌细胞增殖的抑制

目的:研究沉默肝癌衍生生长因子(hepatoma-derived growth factor,HDGF)对人大肠癌lovo细胞增殖的影响.方法:将3条HDGF的特异性小干扰RNA(HDGF-siRNA)通过脂质体介导瞬时转染入大肠癌lovo细胞,RT-PCR及Western blot法分别检测HDGFmRNA和蛋白质表达受抑程度,并筛选出1条沉默效率最高的siRNA用于后续试验;MTT法观察HDGF-siRNA对大肠癌细胞增殖生长的影响;Westernblot法检测增殖细胞核抗原(PCNA)及ERK通路蛋白在转染前后大肠癌lovo细胞中表达含量的变化.结果:HDGF-siRNA转染能有效抑制大肠癌lovo细胞中HDGF的表达;与空白及阴性对照组相比,RNA干扰组大肠癌lovo细胞增殖率明显降低(t=4.432,4.263,均P<0.01)、PCNA和p-ERK1/2蛋白均明显下调(t=14.89,11.92,均P<0.01).结论:HDGF-siRNA不仅有效阻断HDGF在大肠癌lovo细胞的表达,而且明显抑制大肠癌lovo细胞的增殖,其作用机制可能与下调PCNA,抑制ERK1/2蛋白活化有关.

碱性成纤维细胞生长因子在胃溃疡愈合中的表达及意义

目的:探讨人胃溃疡愈合过程中碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)的变化及其作用.方法:采用免疫组织化学法,对正常胃黏膜(20例)、胃溃疡活动期(24例)、愈合期(26例)和瘢痕期(20例)组织的bFGF的表达进行定位观察和图像半定量分析.结果:bFGF在正常胃黏膜呈弱阳性表达,在胃溃疡急性期呈阳性表达,在愈合期和瘢痕期呈强阳性表达.阳性信号主要位于腺上皮、细胞外基质、成纤维细胞和内皮细胞中.bFGF平均光密度值和面密度值在胃溃疡活动期、愈合期、瘢痕期与正常胃黏膜相比均有显著性差异(0.247±0.042&0.321±0.096&0.296±0.048vs0.125±0.062,P<0.05;0.131±0.024&0.165±0.031&0.162±0.028vs0.081±0.008,P<0.05),在愈合期及瘢痕期组织与活动期溃疡相比也有显著性差异(0.321±0.096&0.296±0.048vs0.247±0.042,P<0.05;0.165±0.031&0.162±0.028vs0.131±0.024,P<0.05).结论:在人胃溃疡愈合过程中,存在着内源性bFGF由弱到强的演变,说明bFGF与胃溃疡愈合密切相关.临床上合理应用bFGF有助于消化性溃疡愈合.

肝细胞生长因子抗肝纤维化作用及对MMP-1,TIMP-1表达的影响

目的:研究肝细胞生长因子对实验性大鼠肝纤维化的防治作用,及其对大鼠肝脏基质金属蛋白酶1(MMP-1)抑制因子1(TIMP-1)表达的影响,探讨HGF抗肝纤维化作用的可能机制.方法:将Wistar♂大鼠80只随机分为正常对照组(A组,16只),肝纤维化模型组I(B组,54只),HGF治疗组I(C组,10只),采用CCl4复合因素造模,治疗组于造模同时予HGF0.5μg/Kg,ip,qd,6wk末造模成功处死C组大鼠,同时随机处死A组及B组大鼠各6只;对B组剩下大鼠行二次随机分组为模型对照组II(D组,12只),HGF治疗组II(E组,10只),E组于第7周开始给予HGF治疗,10wk末处死大鼠.检测大鼠肝功能,血清透明质酸(HA),层粘蛋白(LN),III型前胶原(PcIII),IV型胶原(CIV);免疫组化法检测肝组织MMP-1,TIMP-1的表达.结果:C组与B组比较,ALT,AST,HA,LN,CIV,PcIII均显著降低(P<0.01),MMP-1活性升高(0.25±0.02,vs0.22±0.05,P<0.05);TIMP-1活性明显降低(0.34±0.05,vs0.45±0.05,P<0.01).E组与D组相较,MMP-1活性变化无显著性,TIMP-1活性有明显降低(0.31±0.07,vs0.42±0.06,P<0.01).结论:肝细胞生长因子对肝纤维化有明显的防治作用,并可能通过促进MMP-1的活性或抑制TIMP-1活性而促进肝纤维化降解.

生物蛋白胶在消化道隆起性病变切除术后的应用

目的 :观察消化道隆起性病变切除术后应用国产医用生物蛋白胶 (FG)对电凝创面愈合及预防出血、穿孔的作用。方法 :6 5例隆起性病变均采用高频电凝切除术 ,术后随机分为 2组 :31例切除术后创面喷洒FG ;35例不作特殊处理。 2周内观察胸骨后、腹部疼痛及有无出血、穿孔并发症。结果 :FG组溃疡创面愈合率为 96 .77% ,对照组为 76 .4 1% (P <0 .0 1) ;FG组 1周内有疼痛者 5例 ,对照组为 19例。两组差异有显著性 (P <0 .0 1) ;治疗组 1周内出血 0例 ,而对照组有 6例 ,两者差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论 :FG能有效预防消化道隆起性病变切除术后电凝创面的出血和穿孔 ,并能加速创面的愈合。

黄连素及其衍生物对钙、钾离子通道的作用

黄连素是从毛莨科黄连属植物根状茎中提取的一种异喹啉生物碱,用于腹泻的治疗已有3000余年。近年来对黄连素及其衍生物的研究更加深入,研究发现小檗碱不仅可以治疗腹泻,还具有抗心律失常和抑制肿瘤细胞生长的作用。上述作用与小檗碱及其衍生物对钙、钾离子通道的影响有关,小檗碱及其衍生物对不同组织细胞膜的钙通道表现出激活剂、抑制剂或双向调节作用,而对钾通道主要表现出抑制剂作用,这可能是其治疗腹泻、抗心律失常和抑制肿瘤细胞增生的机制。

母乳脂肪含量对婴儿生理性腹泻的影响

目的：研究母乳脂肪含量对婴儿生理性腹泻的影响。方法：随机抽取健康初产妇180例为研究对象，测定其产后3～5、14、42、60、90d乳汁中的脂肪含量及调查婴儿生理性腹泻发生情况。以发生腹泻者为研究组，未发生腹泻者为对照组。对比分析两组母乳脂肪含量。结果：产后3～5、14和90d研究组母乳脂肪含量明显高于对照组。结论：母乳脂肪含量过高可能是新生儿期母乳喂养儿发生生理性腹泻的重要原因。

Smad4在大肠癌发生中的作用及意义

目的探讨Smad4基因在大肠癌中的表达及其生物学意义。方法应用免疫组织化学(ABC)法观察60例大肠癌患者的癌组织和10例正常组织中Smad4蛋白的表达。结果大肠癌组织Smad4的阳性表达相对含量(PU)值(28.75±8.56)明显低于正常组织(58.76±10.14),差异存在显著性(P<0.05),正常大肠黏膜中Smad4蛋白呈高表达Smad4蛋白的阳性表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小无相关性(P>0.05),与癌组织的分化程度、淋巴结转移和Ducks分期相关。低分化、有淋巴结转移和DucksC/D期的Smad4蛋白表达显著低于相关组别。结论Smad4基因在大肠癌组织中表达下调,Smad4的表达与大肠癌的恶性生物学行为有关。

益生菌制剂治疗肠易激综合征的荟萃分析

目的系统评价益生菌制剂对肠易激综合征的疗效。方法利用英文检索词检索相关电子数据库,对纳入的文献进行质量评价,提取基本数据进行荟萃分析。结果检索到文献29篇,有9个双盲随机对照研究符合要求。共1 105例患者纳入分析,对能提取数据的文献作系统评价,提示益生菌制剂对肠易激综合征总体疗效优于安慰剂[OR=1.42,95%可信区间(95%CI)=(1.11,1.82),P=0.006],能有效改善腹痛[SMD=-0.90,95%CI=(-1.47,-0.33),P=0.002]、腹胀[OR=2.79,95%CI=(1.46,5.33),P=0.002],但胃肠胀气[SMD=-0.46,95%CI=(-0.93,0.02),P=0.06]未显著改善。结论益生菌制剂能有效改善肠易激综合征的总体症状,尤其是腹痛和腹胀等方面。

生物制剂治疗炎症性肠病的安全性评价

新型的抗TNF-α制剂阿达木单抗(Adalimumab)是一种经皮下注射的重组人源性Ig G1型抗TNF-α抗体。已应用于临床的生物制剂有英夫利昔(Infliximab)、阿达木单抗(Adalimumab)、赛妥珠单抗(Certolizumab)、那他珠单抗(Natalizumab)等,其中以英夫利昔应用时间最长。生物制剂对中重度溃疡性结肠炎(UC)及克罗恩病(CD)患者可诱导和维持缓解,减少或停止糖皮质激素的应用,促进黏膜愈合,提高患者生活质量。阿达木单抗对英夫利昔单抗不耐受或失去应答的患者有较好的疗效,并能促进瘘管型CD患者的瘘管闭合。但随着生物制剂在临床应用越来越广泛及应用时间的延长,生物制剂在治疗炎症性肠病中的安全性倍受关注,本文对此作一概述。

生长抑素对应激下胆囊收缩素介导的胆汁反流的抑制作用

目的:探讨应激下胃肠肽-八肽胆囊收缩素(CCK-8S)、生长抑素(SS)的变化,以及二者在应激所致胆汁反流中的相互作用和相关机制.方法:(1)放射免疫方法检测血浆CCK-8S和SS水平,并与正常对照组进行比较;(2)多导生理记录仪记录胃窦离体肌条在不同条件下的收缩活动;(3)免疫印迹法和免疫沉淀法检测胃窦平滑肌细胞(SMC)三型1,4,5-三磷酸肌醇受体(InsP3R3)磷酸化水平;(4)Fura-3/AM标记胃窦SMC,观察硫化CCK-8S和SS对胞内钙离子浓度([Ca2+]i)的影响;(5)全细胞膜片钳检测胃窦SMC的L-型电压门控钙通道电流(ICa-L)的变化情况.结果:(1)应激各时段血浆CCK-8S浓度和胃内胆汁反流水平明显增强(均P<0.01),以应激结束后1-2h最为显著,而血浆SS浓度则呈下降趋势(均P<0.05);(2)CCK-8S作用下胃窦和幽门纵行及环形肌条收缩幅值、频率改变明显(均P<0.01),SS作用相反且能阻断CCK的增强效应;(3)CCK-8S显著增强胃窦平滑肌细胞[Ca2+]i荧光强度和ICa-L(均P<0.01),SS作用相反且能阻断CCK的增强效应;(4)SS作用下CCK-8S上调的InsP3R3磷酸化水平可被显著增强.结论:应激下胆汁反流及其介导的损伤效应与CCK和SS变化介导的胃动力紊乱密切相关.CCK-8S通过增强胞内钙释放和促进外钙内流增强胃窦收缩,该效应可被SS所阻断,二者在应激所致的胃动力紊乱中起到重要作用.

生存素和血管内皮生长因子在食管癌中的表达及临床意义

目的:探讨生存素(survivin)和血管内皮生长因子(VEGF)在食管癌中表达的相关性及临床意义。方法:利用高通量的组织芯片技术结合免疫组化法检测70例食管癌组织、5例正常及炎症组织中survivin和VEGF的表达。结果:食管癌组织中survivin和VEGF的阳性表达率均显著高于正常组织(P<0.05)。survivin的表达与食管癌的TNM分期、有无淋巴结转移有关(P<0.05),VEGF的表达与食管癌的病理分级有关(P<0.01),两者均与患者的年龄、性别及远期转移无关。70例食管癌组织中survivin和VEGF的表达呈显著正相关。结论:食管癌中survivin、VEGF表达均上调,共同参与食管癌的发生和发展,VEGF与survivin可能存在交互作用,当两者同时表达阳性时组织芯片病理类型恶性的几率较大,对鉴别食管癌的恶性程度及预测预后具有重要意义。

瘦素在实验性大鼠肝纤维化发生中的作用机制初探

目的通过检测肝纤维化大鼠血清及肝组织中瘦素(Leptin)的表达水平,初步探讨瘦素在大鼠肝纤维化发生中的作用机制。方法32只雄性SD大鼠,皮下注射四氯化碳(CCl4)油剂制备肝纤维化模型,分别于注射后1、4、8周处理动物,抽取血清并留取肝组织,采用放射免疫学方法检测血清中瘦素的表达水平,应用免疫组化方法检测肝组织中瘦素及转化生长因子β1(Transforming growth factorβ1,TGF-β1)的表达。结果放免及免疫组化结果均显示,与正常对照组相比,注射CCl4诱导后,肝纤维化大鼠血清及肝组织中瘦素的表达水平明显升高(P<0.01,<0.05),且1,4,8周组瘦素的表达强度呈明显递增趋势(P<0.01,<0.05)。瘦素主要表达于肝星状细胞胞质中。结论瘦素主要表达于肝星状细胞,并可能通过窦内皮细胞发挥重要的促纤维化作用。

PDCD5因子增强顺铂抑制结肠癌细胞生长作用的体内研究

目的通过体内实验研究稳定转染程序性细胞死亡5(PDCD5)因子的结肠癌细胞对顺铂的敏感性,探讨PDCD5因子与顺铂联合治疗结肠癌的可行性。方法稳定转染PDCD5因子的结肠癌细胞SW480/PDCD5、稳定转染空载体的结肠癌细胞SW480/Neo及正常结肠癌细胞SW480分别接种到裸鼠皮下,形成皮下移植瘤后,顺铂(10 mg/kg)腹腔内注射,绘制移植瘤生长曲线;组织学观察皮下移植瘤,TUNEL法检测皮下移植瘤的凋亡情况;Western印迹法检测皮下移植瘤caspase-9和caspase-3的表达水平。结果 SW480/PDCD5对顺铂更加敏感,肿瘤体积增加幅度低于SW480和SW480/Neo(P<0.05);SW480/PDCD5有更多的细胞出现变性坏死,更多的细胞染色体边集并出现凋亡小体,出现凋亡细胞的比例高于SW480和SW480/Neo(P<0.05);SW480/PDCD5中caspase-9和caspase-3的活化片段较SW480和SW480/Neo更多(P<0.05)。结论稳定转染PDCD5因子可以增加结肠癌细胞对顺铂的敏感性,二者联合应用在结肠癌治疗中有潜在的价值。