套式PCR检测新生儿肺炎衣原体

衣原体是8种致病微生物之一。肺炎衣原体(chlamydia Pneumonia CPn)是衣原体属中的一种。肺炎衣原体统称为TWAR因子,其正式命名于1989年版Bergey's系统细菌手册。主要引起获得性呼吸道感染,有时甚至是致死的病因之一。

无症状女性人群及宫颈炎患者泌尿生殖道标本的沙眼衣原体MOMP基因分布

目的了解广东省部分地区沙眼衣原体泌尿生殖道感染者的基因型分布特点。方法运用扩增沙眼衣原体外膜蛋白（ＭＯＭＰ）基因限制性内切酶片段长度多态性（ＲＦＬＰ）方法对无症状女性及宫颈炎患者泌尿生殖道标本进行了基因分型检测。结果基因Ｅ型在两组人群中分布最高，宫颈炎患者以Ｆ、Ｇ二型多见，无症状组以Ｄ型多见。结论实验结果对进一步分析常见的沙眼衣原体慢性迁延感染机理提供了实验依据。

空心莲子草有效成分抗呼吸道合胞病毒作用的实验研究

目的利用呼吸道合胞病毒(RSV)感染的小白鼠模型,观察空心莲子草对小白鼠感染RSV的保护作用。方法空心莲子草经口服治疗RSV感染的BALB/C鼠,药物剂量为2.5、4.5和6.5g/(kg·d),疗程5d,同时以病毒唑作为标准阳性对照,观察动物的发病情况,血液和肺组织内病毒滴度和病毒检出率作为考核药物的疗效指标。结果空心莲子草4.5g/(kg·d)和6.5g/(kg·d)剂量作用下的小白鼠其病死率与未经治疗的病毒对照比较,有显著差异;空心莲子草6.5g/(kg·d)剂量作用后动物血液中病毒检出率为31.3%,肺组织病毒检出率为37.5%,与病毒对照比较有显著性差异,4.5g/(kg·d)剂量作用后动物肺组织病毒检出率为43.8%,与病毒对照比较有显著性差异;空心莲子草3个不同剂量作用下小鼠的肺指数与病毒对照比较均有显著性差异。结论空心莲子草有望成为治疗RSV感染的有效药物。这亦为中草药抗病毒作用的研究开辟了新的途径。

空心莲子草抗登革病毒作用的实验研究

目的采用中药空心莲子草提取液进行体外抗登革病毒的研究,寻找新的抗登革病毒药物。方法利用四甲基偶氮唑盐(MTT)法和细胞病变效应(CPE),观察检测空心莲子草对C6/36传代细胞株的细胞毒性作用和抗登革病毒作用。结果空心莲子草的4种提取物除>320μg/ml组以外,各浓度组均未见对细胞有明显的毒性作用。用统计软件SPSS11.5的Probit回归法计算药物的半数毒性浓度(TD50)和半数有效抑制浓度(ED50),香豆精类提取物对细胞的毒性最小(TD50=535.91),石油醚提取物对病毒的抑制作用大于另3种提取物和药物对照(ED50=47.43)。结论空心莲子草在体外有抗登革病毒作用。

多重PCR快速检测金黄色葡萄球菌中氨基糖苷类抗生素耐药基因及其临床应用

目的建立金葡菌氨基糖苷类抗生素耐药基因的多重PCR快速检测体系,了解耐药基因acc(6′)-Ie+aph(2″)、aph(3′)-Ⅲat ant(4′)-Ia在广州地区的流行分布。方法采用VITEK-60或PHOENIX-100微生物自动鉴定系统鉴定菌株及药敏试验,利用琼脂扩散法检测4种氨基糖苷类抗生素的耐药表型。通过优化PCR体系建立多重PCR并应用于检测金葡菌氨基糖苷类抗生素耐药基因。结果构建了四重PCR快速检测体系,124株金葡菌临床分离株中,acc(6′)-Ie+aph(2″)、aph(3′)-Ⅲa和ant(4′)-Ia的检出率分别为62.1%、32.3%和1.6%;所有庆大霉素、奈替米星以及阿米卡星耐药的金葡菌菌株均检测到上述3个耐药基因中的1个或1个以上基因;74株mecA阳性菌株中72株(97.3%)检测到acc(6′)-Ie+aph(2″)基因。结论所构建的多重PCR检测体系为临床实验室提供快速而有效的菌株耐药基因检测手段。编码AAC(6′)-APH(2″)双功能酶的acc(6′)-Ie+aph(2″)基因是金葡菌最重要的氨基糖苷类抗生素耐药基因,其次为aph(3′)-Ⅲa,ant(4′)-Ia则少见。

冠心病患者血清中肺炎衣原体免疫复合物及抗体检测的临床分析(英文)

目的了解冠心病患者肺炎衣原体感染状况,探讨肺炎衣原体(Cpn)感染与冠心病的发生发展关系。方法采用双抗体夹心法、间接ELISA法检测了160例经冠状动脉造影证实的冠心病患者和40例非冠心病患者血清中肺炎衣原体免疫复合物(CPn CIC)和IgG抗体。结果冠心病组Cpn IgG型免疫复合物的阳性率(63.8%)高于对照组(40.0%, P<0.05)。CPn IgG抗体阳性率冠心病组为65.0%对照组为32.5%,前者阳性率显著同于后者(P<0.05)。结论Cpn感染与冠心病关系密切,但尚需进一步深入探讨。

冠心病患者肺炎衣原体感染的临床实验研究

目的:了解冠心病患者肺炎衣原体感染状况,探讨肺炎衣原体感染与冠心病发生发展的关系。方法:采用PCR技术对161例经冠状动脉造影证实的冠心病患者和41例非冠心病患者进行肺炎衣原体DNA检测。结果:冠心病组肺炎衣原体DNA阳性率为44.17％,非冠心病组阳性率为7.32％,前者阳性率非常显著高于后者(P<0.01)。结论:肺炎衣原体感染与冠心病存在一定的关系。

冠心病患者肺炎衣原体DNA及抗体检测

目的:探讨肺炎衣原体(Cpn)与冠状动脉粥样硬化心脏病(CHD)之间的相互关系。方法:采用PCR和ELISA ,分别对2 0 0例经冠状动脉造影证实的冠心病患者和非冠心病对照组进行全血标本肺炎衣原体DNA和血清中抗肺炎衣原体IgG检测。结果:冠心病组肺炎衣原体DNA阳性率为4 3 4 0 % ,对照组阳性率为7 32 %。冠心病组肺炎衣原体IgG抗体阳性率为6 4 78% ,对照组阳性率为31 71%。两组肺炎衣原体DNA和IgG抗体阳性率差异均有显著性(P <0 0 1)。

不同样品提取方法对地中海贫血基因诊断的影响

目的:考察不同全血基因组提取方法对地中海贫血基因诊断的影响。方法:使用酚/氯仿抽提法、盐析法、Chelex快速法和硅吸附法提取全血基因组DNA。使用分光光度计和电泳法检测提取DNA的质量。结果:4种方法提取的DNA无明显质量差异,但地中海贫血基因检测试剂盒检测结果标明,除Chelex快速法提取的DNA有时会出现扩增效果不好外,其他方法提取的DNA都可获得满意的效果。结论:4种基因组提取方法均可用于地中海贫血的基因诊断,但在临床应用中应格外小心。

老年病房肠杆菌科细菌耐药性监测分析

目的：分析2000—2004年在老年病房分离的肠杆菌科细菌菌种分布及耐药特征变迁，以指导临床合理用药。方法：采用美国梅里埃公司生产的全自动微生物鉴定系统VITEK-60进行菌种鉴定及体外药敏试验。结果：老年患者35．2％的细菌感染由肠杆菌科细菌引起，其中，5种主要的细菌为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、奇异变形杆菌、产气肠杆菌。在所测试的十四种抗菌药物中，喹诺酮类药物的体外抗菌活性下降最快。第三、四代头孢菌素有一定敏感程度，敏感率介于50％～70％。亚胺培南一直保持优秀的体外抗菌活性，耐药率不足3％。结论：肠杆菌科细菌是老年患者感染常见致病菌，追踪其对常用抗菌药物的耐药性变迁，对临床准确、合理使用抗菌药物具有指导意义。

老年呼吸系统疾病患者呼吸道合胞病毒感染状况

目的 了解广州地区部分老年呼吸系统疾病患者呼吸道合胞病毒 (RSV)感染状况。 方法 用间接酶联免疫吸附试验 (ELISA)、酶联免疫荧光试验 (ELFA)和逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)对老年呼吸疾病患者进行RSVIgG、RSV抗原、特异性核酸检测。 结果 164例呼吸疾病患者血清标本 ,RSVIgG阳性率为 39 63% ,其中老年组为 45 63% ,中青年对照组 2 7 87% (P <0 0 5 )。ELFA与RT PCR法检测支气管肺泡冲洗液标本中RSV抗原和RSVRNA阳性率分别为 10 98% ( 18/164)和 13 42 % ( 2 2 /164) ,2组比较无显著性差异。 结论 在有呼吸系统疾病的老年人中 ,RSV感染较为普遍 。

老年心脏病患者血清柯萨奇病毒B特异性抗体和核酸的检测

目的了解柯萨奇B组病毒(CVB)在老年人中的感染状况,探讨CVB感染与心血管疾病的内在关系。方法采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)和反转录PCR方法对230例老年人进行了CVB IgG 抗体和核酸检测。结果心脏病组CVB IgG抗体阳性率为43.61%(75/172),对照组抗体阳性率为15.52%(9/58),两者比较有显著性差异(P<0.01)。CVB RNA 检测结果显示,心脏病组阳性率为20.93%(36/172),对照组为3.45%(25/58),两者比较有显著性差异(P<0.01)。结论在老年心脏病患者中CVB感染较为普遍,应引起重视。

两种基因检测方法在病毒性心肌炎诊断中的应用

目的:阐明基因检测手段在病毒性心肌炎(VMC)病原诊断中的作用。方法:采用RT-PCR、地高辛标记CBV3 -cDNA探针对PCR扩增产物进行斑点杂交,检测血标本中的柯萨奇病毒B组病毒(CBV)。结果:RT-PCR阳性检出率:心肌炎组为48.33%.对照组4.41%(P<0.01)。斑点杂交阳性率:心肌炎组为51.67%,对照组4.41% (P<0.01)。检测CBV的两种方法阳性率无显著差异(P>0.05)。结论:两种方法特异性均高,敏感性无显著差异。

习惯性流产的病毒病因探讨

目的用多种技术方法研究探讨柯萨奇B组病毒(CBV)与习惯性流产的病毒病因。方法采用ELISA、RT-PCR和病毒分离对86例习惯性流产和40例人工流产妇女进行了CBV-IgM抗体、病毒RNA和病毒粒子检测。结果检测结果表明习惯性流产和人工流产两组妇女柯萨奇B组病毒IgM阳性率分别为87.2%和35.0%,血淋巴细胞CBVRNA阳性率则为53.5%和17.5%;而胎盘组织中病毒RNA阳性率各为59.3%和17.5%,胎盘组织中病毒分离阳性率在两组妇女各为41.9%和6.9%。其各项指标经!2检验,两组均有显著性差异(P<0.01)。结论柯萨奇B组病毒可能是习惯性流产的发生因素之一。

凝血酶原基因3'-UTG20210A变异与中国人种脑血栓病关系及其变异频度研究

目的了解FG20210A基因变异与中国人脑动脉血栓形成的关系,该基因变异是否脑动脉血栓形成的危险因素及其在中国汉族人种的分布频率。方法49例首发脑动脉血栓形成40～78岁患者及46例健康对照组作为研究对象,进行FG20210A突变分析。结果患者及健康对照组均为FG20210G纯合子。结论中国汉族人脑动脉血栓形成患者中不存在FG20210A变异,FG20210A突变不足以构成脑动脉血栓性疾病的独立危险因素及发病原因。

用Hela229细胞培养法研究呼吸道肺炎衣原体感染

本文用Ｈｅｌａ２２９细胞培养与单克隆抗体免疫荧光法对９４０例咽拭子及２２４例纤支镜取材标本进行肺炎衣原体分离鉴定。结果正常组、上呼吸道感染组、下呼吸道感染组、肺部肿瘤组的咽拭子标本分离率分别为０％（０／２４８），２．１３％（１０／４６８），２．１％（３／１４６），１．２８％（１／７８）。上呼吸道感染组和下呼吸道感染组的分离率均高于正常组和肺部肿瘤组。前二组与正常组的差异有显著性意义（Ｐ＜０．０５），与肿瘤组的差异无显著性意义（Ｐ＞０．０５）。下呼吸道感染组、肺部肿瘤组的纤支镜取材分离率分别为１０．９６％（１６／１４６）和５．１３％（４／７８），其差异无显著性意义。本结果说明本实验用Ｈｅｌａ２２９细胞培养法可从呼吸道感染患者及肺部肿瘤患者中分离出肺炎衣原体，并用单克隆抗体免疫荧光法加以鉴定。证明我国呼吸道感染病原中同样存在肺炎衣原体感染。

PCR/RFLP对临床标本沙眼衣原体直接基因分型

建立泌尿生殖系统沙眼衣原体感染阳性标本直接基因分型方法。先用敏感的扩增沙眼衣原体特异质粒的引物扩增５００份临床标本，初筛选出１００份阳性标本再用扩增沙眼衣原体主要外膜蛋白（ＭＯＭＰ）基因的引物扩增，并用嵌套式ＰＣＲ使阳性标本能扩增出ＭＯＭＰ基因，对获得的ＭＯＭＰ基因用限制性酶切片段长度多态性（ＲＦＬＰ）方法进行基因分型，并用银染观察结果。其中Ｅ型比例最高，占４７％；Ｆ型为１６％；Ｄａ、Ｇ型均为６％；Ｂａ、Ｄ型各占５％；Ｈ型及Ｋ型均为１％，混合型Ｋ／Ｆ型２％；混合型Ｄ／Ｊ、Ｅ／Ｇ均为１％；未能分型有９％。

血透病人的巨细胞病毒感染

目前,血液透析仍然是终末期肾功能衰竭病人维持生命的重要手段之一。随着肾移植技术的日趋完善,有许多血透病人都在积极创造条件,准备接受肾移植。然而,由于血透病人抵抗力下降,经常输血等原因,使患者易罹患各种感染,如巨细胞病毒(CMV)感染,影响病人生活质量及肾移植的效果。据此,我们对本院52例终末肾衰维持血透病人进行了血清CMV-IgM的检测。

沙眼衣原体感染

沙眼衣原体感染广东省人民医院内科（５１００８０）陈刚，谭新洪，褚云霞，林英广东省老年医学研究所病毒室汪玎妍，蒋文玲，罗宪玲沙眼衣原体（Ｃｈｌａｍｐｄｉａｔｒａｃｈａｍａｔｉｓ）是衣原体的一种，是介于病毒和细菌之间的细胞内寄生物。类似Ｇ杆菌（直径３００...