机械通气相关高拉伸通过miRNA-mRNA相互作用调节气道平滑肌细胞嘌呤代谢影响细胞刚度

目的机械通气为呼吸危重症患者提供生命支持,但也引起肺损伤(VILI),后者因病理机制不明一直是呼吸与危重症学科的重大难题。气道平滑肌细胞(ASMC)是气道内对拉伸极为敏感细胞,但ASMC在VILI中的作用及其机制尚不清楚。本研究结合全基因组测序、生物力学和细胞分子生物学相关方法,在机械通气相关高拉伸条件下分析ASMC对机械通气的主要响应机制及力学调控作用。方法采用Flexcell-5000在体外高拉伸(13%)处理人ASMC,全基因组测序分析细胞mi RNA和m RNA表达并进行mi RNA-m RNA生物信息学的整合分析,光学磁微粒扭转系统、牵张力显微术分析细胞力学特性。结果全基因组学mi RNA-m RNA整合分析发现机械通气相关高拉伸主要通过影响mi RNA-m RNA相互作用调节ASMC嘌呤代谢,如通过mi R-370-5p(↓)-PDE4D/AK7(↑)调节ATP、c AMP合成;体外细胞水平研究发现高拉伸调节ASMC内的c AMP/ATP并改变ASMC细胞刚度,且可以被mi R-370-5p模拟物部分逆转。结论本研究揭示了机械通气相关高拉伸(>10%应变)通过调控mi RNA-m RNA网络调节ASMC力学行为从而影响肺功能,为VILI的生物标志物筛选及新型治疗靶点提供新见解。

彗星实验检测紫外线诱导的K562细胞DNA损伤

背景与目的研究紫外线(Ultraviolet,UV)诱导K562细胞DNA损伤情况,评价彗星实验改良方法及分析参数的可靠性。材料与方法采用0.3mW/cm2UV以用不同时间(3、5、10、40、60、120、180、240s)照射K562细胞,诱导细胞DNA损伤,用彗星实验检测,CASP软件分析。结果尾长、彗星长、尾矩、Olive尾矩4个参数与紫外线照射时间有良好的时间依赖关系。结论0.3mW/cm2的紫外线照射K562细胞3s即可造成细胞DNA损伤,CASP分析软件可以用于彗星检测分析,其中尾长、彗星长、尾矩、Olive尾矩可作为彗星实验的分析指标,所改良的彗星实验系统可靠性较强,且基本上解决了实验中常见的脱胶现象,采图更方便。

强磁重力环境对MG63成骨样细胞钙离子/钙调蛋白信号的影响

目的:研究强磁重力环境对MG63成骨样细胞钙离子浓度和钙离子下游信号分子表达的影响。方法:利用大梯度强磁场提供μg(12T),1g(16T)和2g(12T)三组不同强磁重力复合环境处理MG63成骨样细胞后,经Fluo-3/AM标记的细胞用激光共聚焦显微镜检测处理0.5 h对细胞胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响;用Western blot检测处理3 h对钙调蛋白(CaM)和肌球蛋白轻链激酶(MLCK)表达以及钙离子/钙调蛋白依赖蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)活性的变化。结果:钙离子浓度检测结果表明,与对照组细胞(1 g,地磁)相比,1 g(16 T)组细胞Fluo-3荧光强度增加,结果显示强磁场导致[Ca2+]i增加;与2 g(12 T)组相比,μg(12 T)组细胞Fluo-3荧光强度下降,结果显示模拟失重导致[Ca2+]i降低,抑制钙离子信号。蛋白质表达的检测结果表明,与对照组相比,1 g组细胞CaM和MLCK表达以及CaMKⅡ活性没有明显变化;与2 g(12 T)组相比,μg(12 T)组细胞CaM表达以及CaMK活性下降,结果显示模拟失重抑制CaM/CaMKⅡ信号。结论:强磁场导致MG63成骨样细胞胞内游离钙离子浓度增加,模拟失重抑制成骨样细胞钙离子/钙调蛋白信号。

肝细胞原代培养研究综述

对国内外肝细胞培养研究作出综述.首先介绍了分离肝细胞的各种方法及各自的优缺点, 重点对各种酶分离技术进行了比较.其次阐述了肝细胞的纯化方法和生物学性状检测,最后综述了 影响肝细胞体外培养的因素.

三维回转培养动物细胞模拟失重生物效应研究进展

空间失重环境会影响生物体功能,表现出失重生物效应。在地面可以采用多种方式(探测火箭、回转器、磁悬浮)模拟失重环境或失重生物效应,探索失重效应的细胞分子机制。近年来研究动物细胞在三维回转条件下模拟失重生物效应及机制研究的论文逐年增加。本文对三维回转培养条件下模拟失重生物效应的原理进行了简单介绍,分析了三维回转模拟失重的结果 ,重点综述了三维回转培养条件下采用多种动物细胞模拟失重生物效应研究进展,并对有待解决的问题进行了展望。

全球结核病疫情与诊断新技术

结核病是全世界重点防控的一类传染病。全球结核病在1993年进入紧急状态,随着"千年发展目标"结核病防控战略的实施,全球结核病防控取得了巨大进展。2016年,全球进入"结核病终止策略"新阶段,这对结核病的诊断,尤其是潜伏性感染诊断和耐药结核诊断提出了更高的要求。概述了全球结核病疫情和防控情况,并对相关诊断技术的进行了比较,为今后结核病的精准防控提供参考。

人骨肉瘤MG-63细胞自分泌可溶性纤连蛋白参与细胞形态维持

目的:探讨MG-63细胞自分泌可溶性纤连蛋白(FN)在细胞形态维持中的作用。方法:将培养24 h MG-63细胞随机分成对照组、更换新鲜培养基组(不含自分泌可溶性FN)、更换培养MG-63细胞24 h的条件培养基组(含自分泌可溶性FN)和更换添加FN的新鲜培养基组(添加FN),在0.5 h、1 h和2 h观察细胞形态;采用ELISA法检测新鲜和条件培养基中可溶性FN含量;采用免疫荧光方法观察细胞微丝骨架和不溶性FN的分布变化。结果:检测新鲜和条件培养基可溶性FN浓度结果表明,条件培养基中可溶性FN含量明显高于新鲜培养基(P<0.01);与对照组相比,不含自分泌可溶性FN组细胞0.5 h时回缩明显,由梭形变成圆形,1 h时开始重新铺展,2 h时形态恢复明显;含自分泌可溶性FN组和添加FN组细胞形态没有明显变化;观察细胞微丝骨架和不溶性FN分布发现,与对照组相比,不含自分泌可溶性FN组细胞0.5 h时应力纤维解聚,细胞外纤丝状FN明显减少。结论:细胞自分泌可溶性FN可能通过参与调节不溶性FN和微丝骨架的重构,参与细胞形态调节。

印度经济增长面临的能源约束与应对策略

本文通过梳理印度能源供需的历史数据,分析了印度经济发展与能源消耗之间的关系,并结合印度"十二五"规划对印度经济增长和能源消耗进行了预测。本文认为,印度未来经济增长将不可避免的遭遇制造业发展所带来的能源消耗瓶颈,要保证理想的经济增长速度就必须先确保能源供应安全。为此,本文最后对印度能源政策以及应对经济增长过程中能源约束的具体策略进行了总结和分析。

一种新型胞内游离钙离子检测探针Fura-2

钙离子是细胞内的一种重要的信号分子,采用各种荧光染料进行胞内钙离子浓度和分布检测对了解细胞生理活动具有重要意义。Fura-2是一种被用来测定胞内钙离子浓度的第二代紫外激发的双波长Ca2+荧光指示剂,结合比例荧光成像系统可以有效地检测胞内钙离子浓度和分布.本文介绍了Fura-2的基本化学性质、导入细胞的方式,以及采用比率荧光成像系统检测胞内钙离子浓度的优缺点及其对策.

随机回转条件动物细胞培养装置研制

目的设计一种细胞培养装置,使其适合在随机回转(random positioning machine,RPM)条件下进行动物细胞培养。方法根据在RPM条件下进行动物细胞培养的相关要求,提出总体设计方案,包括培养盒、培养小室及密封装置三个模块的设计方案;采用此装置培养MC3T3-E1成骨样细胞,从细胞形态、面积和活性3方面评价其培养效果。结果研制的细胞培养装置操作简单,密封效果好;与传统细胞培养瓶相比,采用此装置培养细胞培养基用量少,且细胞铺展面积和活性增加。结论研制出一种可用于RPM模拟失重生物效应研究的动物细胞培养装置,为进一步的研究RPM对动物细胞的影响奠定基础;该装置还可用于地面其它密闭系统细胞培养实验。

多壁碳纳米管抑制MC3T3-E1成骨细胞迁移的实验研究

目的探讨多壁碳纳米管(MWCNT)对MC3T3-E1成骨细胞迁移的影响。方法采用超声法分散MWCNT,经扫描电镜、投射电镜和动态光散射仪检测分散效果。采用MWCNT(100 g/mL)处理MC3T3-E1成骨细胞,原子力显微镜检测细胞表面形态,划痕实验检测细胞迁移情况,Gradientech Tracking软件分析细胞迁移特性。结果 MWCNT获得较好分散,细胞处理12 h后,MWCNT大量吸附于细胞表面。划痕实验显示对照组愈合率为80%,MWCNT处理组愈合率为45%(P<0.01),其迁移距离、直线距离和迁移速度均显著低于对照组。结论 MWCNT可大量吸附于成骨细胞表面并显著抑制MC3T3-E1成骨细胞迁移。

磨砂和光滑载玻片对彗星实验检测的影响

比较磨砂载玻片和常规光滑载玻片对彗星实验结果的影响,以筛选最佳彗星实验用玻片。分别采用磨砂载玻片和常规载玻片进行彗星实验,检测紫外线处理K562细胞3 min和6 min诱导的DNA损伤,采用CASP分析软件比较两种不同载玻片检测的灵敏度。结果表明,常规载玻片的背景荧光较弱,而磨砂载玻片背景荧光较强,且有斑点状杂质荧光;软件分析结果显示照射3 min时,分别采用磨砂和常规载玻片检测到的尾长为54.83±16.22像素和60.05±17.25像素;照射6 min时的尾长分别为62.73±15.29像素和74.96±15.67像素。结果显示磨砂载玻片影响图像的采集和分析,降低了彗星实验检测的灵敏度,提示在彗星实验中应选择常规光滑载玻片进行实验。

会展经济将引领四川开放新格局

随着第十五届中国西部国际博览会（以下简称西博会）在成都隆重举行，新一轮会展经济的盛宴拉开序幕。 会展经济对于四川经济发展最本质的意义，不在于为GDP增长贡献了多少，也不在于会展产业带动系数的高低，而是在于会展发展实现了四川经济更大范围的对内对外开放、更有效的资源配置，进而提供了四川经济发展的广阔平台、增强了四川经济发展的内生动力。

骨细胞分泌sclerostin抑制骨形成

骨细胞可以感受理化刺激然后分泌多种信号分子调节骨重建.Sclerostin是成熟性骨细胞分泌的一种抑制骨形成的糖蛋白.对sclerostin的发现、分泌细胞类型、分子特点和作用受体进行了简单回顾,并介绍sclerostin抑制成骨作用的信号通路,重点介绍sclerostin通过Wnt信号抑制成骨作用的分子机制.随后对基于sclerostin的作用机制设计药物用于治疗骨丢失的前景进行了展望.

龙胆苦苷等6种中草药提取物对SMMC-7721人肝癌细胞增殖的影响

目的 研究龙胆苦苷等 6种中药有效成分对 SMMC- 772 1人肝癌细胞增殖的影响。方法 MTT法测定不同浓度的 SMMC- 772 1人肝癌细胞活力 ,观察药物对癌细胞增殖的影响。结果 10 2 ,10 4和 10 6nmol.L-1的土贝母皂苷、10 4nmol.L-1和 10 2 nmol.L-1的龙胆苦苷、10 2 nmol.L-1的白屈菜红碱、 3个不同浓度的血根碱及 1g.L-1的败酱草提取物作用于细胞 4 8h后对细胞具有明显的杀伤效应 ;10 mg.L-1的败酱草提取物和 1g.L-1和 10 mg.L-1的威灵仙提取物对肝癌细胞具有促生长作用。结论 龙胆苦苷、土贝母皂苷、白屈菜红碱和血根碱能抑制 SMMC- 772 1人肝癌细胞增殖 ;败酱草提取物能促进肝癌细胞增殖 ;低浓度威灵仙提取物抑制、高浓度促进肝癌细胞增殖。

黄精的组织培养与植株再生

研究离体条件下黄精不同外植体的愈伤组织诱导及其植株再生。结果表明,黄精的根茎、嫩茎及幼嫩的组培叶片在MS+6-BA 2.0 mg.L-1+2,4-D 1.0 mg.L-1和MS+6-BA 2.0 mg.L-1+NAA 1.0mg.L-1的培养基中均诱导产生愈伤组织,并在MS+6-BA2.0 mg.L-1+2,4-D2.0 mg.L-1和MS+6-BA2.0 mg.L-1+NAA2.0 mg.L-1的培养基上继代增殖良好。黄精愈伤组织在MS+6-BA3.0 mg.L-1+IAA1.0 mg.L-1的培养基上可诱导出不定芽,出芽率达66.33%,平均每块愈伤组织可分化出5.2个芽。试管苗在MS附加IAA0.5 mg.L-1培养基上诱导生根,生根率达86.67%。

老年人旅游时间分配影响研究——文化差异视角

银发旅游一直是学术界研究的热点,但少有研究从时间分配角度探析收入和闲暇时间这两个旅游必备条件对老年旅游的影响。老年群体的时间分配存在跨国差异,文化是造成这一差异的一个重要因素。文章利用跨国时间使用数据(multinational time use study,MTUS),运用Becker时间分配理论和Hofstede文化维度,以西方国家老年群体(65岁及以上)为研究对象,采用回归分析和工具变量法,考察了收入和闲暇时间对老年人旅游时间分配的影响机制,并验证了国家文化差异的调节效应。结果表明,收入和闲暇时间对老年人旅游时间分配影响显著。较之收入,闲暇时间对老年人旅游时间分配的影响作用更大。国家文化差异对收入和闲暇时间与老年人旅游时间分配的关系起调节作用。研究结果有助于旅游管理者进一步认识不同国家老年人旅游行为特征,对老年旅游市场开发和营销策略具有一定指导意义。

^(12)C^(6+)离子辐射对细胞存活增殖及模拟失重和辐射对家蚕卵发育的影响

目的:观察重离子辐射后人骨肉瘤细胞MG-63、人胚胎皮肤成纤维细胞ESF-1和人胚胎肝正常细胞HEL-1的生存和增殖情况,及重离子辐射和模拟失重环境处理后家蚕卵的孵化和发育情况,初步探讨重离子辐射对细胞及复合环境对家蚕卵的一些生物学效应.方法:利用超导磁体模拟失重环境,利用重离子加速器产生12C6+离子,用不同剂量辐射细胞和家蚕卵,检测在重离子辐射后细胞的存活和克隆形成能力及复合条件下家蚕卵的发育情况.结果:HEL-1细胞在0.1Gy时存活率已经开始降低,且随辐射剂量的增大这种影响也增加,到1.5Gy时存活率降低50%.ESF-1细胞在1.5Gy时存活率下降约20%,但辐射对骨肉瘤MG-63细胞的存活率影响不大.HEL-1和ESF-1细胞受到0.1Gy的辐射后克隆形成能力就明显降低90.2%和79.1%,而MG-63细胞一直保持较高的克隆形成率,直到1.5Gy时迅速降低75%.家蚕的出蚁率随辐射剂量的增大而降低,到30Gy时出蚁率降到2.22%.当辐射剂量为0～10Gy时,家蚕卵在两种不同重力条件下的孵化率没有明显差异.但当辐射剂量增加到15,20和30Gy时,失重环境明显促进了家蚕卵的孵化.另外,失重环境下家蚕卵的孵化时间比正常条件下缩短约3d左右.同时,高剂量的辐射处理会延迟家蚕幼虫的生长.结论:重离子辐射降低了细胞的存活和增殖能力,同时影响了家蚕从受精卵到幼虫的发育,降低了出蚁率.失重环境可以缩短家蚕卵的孵化时间.

三维回转骨细胞条件培养基对成骨细胞功能的调节作用

骨细胞是骨组织中主要的力学感受器.研究失重条件下骨细胞对效应细胞的调控作用对于揭示失重引起的骨丢失机制具有重要意义.本研究拟采用三维回转器模拟失重,探讨模拟失重骨细胞条件培养基(RCM)对成骨功能的调节作用.小鼠骨细胞系MLO-Y4三维回转培养72h后,收集回转条件培养基(RCM)和未回转对照组的条件培养基(CCM),用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法、对硝基苯磷酸(pNPP)法和流式细胞术(FCM)分别检测RCM对小鼠成骨样细胞系MC3T3-E1增殖、周期及细胞分泌碱性磷酸酶(ALP)活性的影响.采用RT-PCR方法检测RCM对MC3T3-E1成骨相关基因表达的影响.结果显示,三维随机回转72h后的MLO-Y4RCM可促进MC3T3-E1增殖:条件培养基培养MC3T3-E124h和48h后,50%RCM组比CCM组分别增加了1.62和1.60倍,差异显著(*P<0.05),培养72h后,100%RCM组比CCM组增加了1.69倍,差异显著(*P<0.05);细胞周期检测结果表明,条件培养基培养24、48和72h后,RCM组部分恢复CCM引起的MC3T3-E1细胞周期阻滞;MC3T3-E1的ALP活性在RCM组和CCM组之间无差异;RT-PCR检测结果表明,100%MLO-Y4条件培养基培养MC3T3-E148h后,降低了成骨相关基因ALP、Runx2、OPN、OC的表达.差异显著(*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001).实验结果表明,三维随机回转模拟失重培养骨细胞72h后的条件培养基促进了成骨细胞增殖,抑制了成骨相关基因表达.

综合国家距离对中国入境旅游的影响——基于CAGE距离框架的实证研究

入境旅游在旅游发展中具有重要战略地位,而我国入境旅游发展相对滞后,甚至影响到我国服务贸易的高质量发展。旅游具有异地性特征,现有研究往往从文化距离、行政距离、地理距离或经济距离等单一距离开展研究。然而,多种距离同时影响游客决策,单一距离模型降低了距离因素的解释力,同时纳入模型又会造成共线性问题,导致现有研究结论间存在矛盾,阻碍理论发展与应用。Ghemawat提出的国家距离框架基于多种距离形成评价总体国家距离的综合国家距离,得到普遍认可。文章基于国家距离框架,整合来自世界银行数据库、霍夫斯泰德文化维度官方数据、双边地理距离数据库、世界经济论坛等相关数据,形成2006—2018年我国55个客源国入境旅游的平衡面板数据,系统分析了综合国家距离对入境游客量的主效应、非线性影响,以及客源国互联网使用率的调节作用,得到如下结论:(1)综合国家距离是影响我国入境游客量的显著变量,距离对入境游的影响是文化距离、行政距离、地理距离和经济距离的复合效应;(2)综合国家距离与入境游客量之间呈正U形关系,综合国家距离可以是入境旅游的阻碍因素,也可以是促进因素,入境游客量随着综合国家距离增加而先减少后增加;(3)客源国互联网使用率没有弱化综合国家距离的影响,反而产生极化作用,极化了综合国家距离在拐点左侧的负影响和在拐点右侧的正影响。以上发现的主要价值为:(1)增进了对距离因素在国际旅游中作用的理解,提出影响入境游客量的综合国家距离变量;(2)识别出综合国家距离与入境游客量呈现正U形关系,证实综合国家距离是细分客源国市场的新变量;(3)揭示出客源国互联网使用率对综合国家距离产生的极化效应,突出了我国采用互联网传播目的地形象的必要性和重要性。