菠菜甜菜碱醛脱氢酶基因在棉花中的过量表达和抗冻耐逆性分析

分离出菠菜甜菜碱醛脱氢酶基因(SoBADH)构建成由CaMV35S驱动的双元植物表达载体pBSB,农杆菌菌株LBA4404携带该载体转化棉花,获得转基因棉花植株。65株转基因植株经过PCR筛选、Southern blotting分析证明有45株为成功的转化株,外源基因已经被整合到棉花的染色体组中,并以单拷贝插入居多。对部分株系的SoBADH基因的表达进行分析表明均有较高的mRNA和蛋白的表达。经测定这些株系中的甜菜碱脱氢酶活性显著提高,达到0.66～1.70nmol/min/mg水平。同时这些转基因株系在盐胁迫下比对照长势强,株高和地上部分的鲜重显著高于非转基因对照;在低温胁迫下,这些转基因株系表现出显著的抗冻性能。结果表明菠菜甜菜碱醛脱氢酶能够在异源植物棉花中过量表达,并具有较高的酶活性,转基因棉花可作为抗逆育种的种质材料。

多环芳烃在中国两种典型土壤中的吸附和解吸行为研究

采用批量实验的方法,研究了多环芳烃类有机化合物萘和菲在两种中国典型土壤样品(草甸土和黑土)中的吸附和解吸行为,并用一种新型解吸模型——"双元平衡解吸(DED)模型"对解吸行为进行了预测.结果表明,萘和菲在两种土壤中的吸附符合传统的线性模型,解吸行为则表现出明显的滞后现象,且DED模型的预测值与实验结果相吻合.DED模型能够利用简单的理化参数更加准确地定量描述憎水性有机污染物的解吸行为,该模型可为我国的土壤风险评价和土壤环境质量标准的制定等工作提供量化手段.

早熟棉体细胞胚胎发生和植株再生体系的建立

以8个早熟或特早熟棉花为材料,通过不同激素组合(1.0 mg/L IBA+0.5 mg/L KT;0.1 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L KT)诱导其愈伤组织,为早熟棉花的遗传转化以及基因功能研究奠定基础.结果表明,2种激素组合均能诱导产生4种主要类型的愈伤组织:淡黄色颗粒状愈伤组织,褐化的愈伤组织,翠绿致密的愈伤组织,疯长型愈伤组织.4种愈伤组织转入增殖培养基中前2种愈伤组织能够分化出胚性愈伤组织,胚性愈伤组织再转到分化培养基上培养能够产生胚状体,即体细胞胚;体细胞胚进一步发育成为再生小苗.用该组织培养再生系统,成功地使晋棉5号、中棉27号和辽棉10号等3个早熟棉品种在5～7个月内通过体细胞胚胎分化获得再生小苗.

黄芪扶正汤对免疫抑制小鼠的免疫调节功能

目的:探讨黄芪扶正汤对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。方法:以氢化可的松造成免疫低下小鼠模型,用黄芪扶正汤和玉屏风散水煮液进行灌胃,检测小鼠血清溶血素的生成、IL-2和INF-γ的含量以及外周血淋巴细胞CD3+,CD4+和CD8+的表达。结果:黄芪扶正汤能明显提高免疫抑制小鼠的血清溶血素、IL-2和INF-γ的水平,提高CD4+和CD8+的比值,效果比玉屏风散更显著。结论:黄芪扶正汤对免疫抑制小鼠的免疫功能有正调节作用。

不同剂量阿托伐他汀对急性冠脉综合征患者纤溶活性的影响

目的:研究80mg/d的阿托伐他汀对急性冠脉综合征患者纤溶活性的影响是否优于常规剂量20mg/d。方法:收集急性冠脉综合征患者64例,随机分成对照组(阿托伐他汀20mg/d)和强化组(阿托伐他汀80mg/d)两组。分别于治疗前、治疗后1个月后随访,观察患者心绞痛、再发心梗情况,检测总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)、肝肾功能、心肌酶、高敏C反应蛋白(hs-CRP)、纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)水平及组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)活性。结果:强化组(阿托伐他汀80mg/d)与对照组(阿托伐他汀20mg/d)比较,强化组再发心绞痛、心肌梗死明显下降。两组治疗后TC、LDL-C、HDL-C、TG、hs-CRP、PAI-1及t-PA水平均比治疗前下降,差异有统计学意义。强化组比对照组下降更明显(P<0.05)。结论:80mg/d阿托伐他汀比常规剂量降低了复发心绞痛及再发心梗的发生率,减少急性心脏事件,改善患者预后。强化阿托伐他汀治疗能进一步降低血清TC、LDL-C、TG及hs-CRP水平,同时减少血浆PAI-1含量,升高t-PA含量。

基于尺度划分的滦河河流生态健康评价

为提高河流管理质量,在已有河流生态系统健康研究的基础上,提出了基于尺度划分的河流健康评价理论。以滦河为例,建立了其上游、中游和下游的评价指标体系,通过构建改进的模糊物元可拓模型对滦河河流生态健康进行了评价。结果表明:滦河上游、中游、下游均存在一定程度的不健康,滦河全河总体为轻度疾病状态,评价结果与实际相符。因此,本文方法具有合理性和有效性,可用于其他区域的河流生态健康评价。

南瓜韧皮部特异性启动子在转基因棉花中的表达

以自行构建的重组南瓜韧皮部特异启动子dENP构建了植物表达载体pBII2。利用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)LBA44O4介导转化棉花(Gossypium hirsutum L.)品种珂字312,共获得转pBII2和对照pBI121的抗卡那霉素棉花再生植株243株,筛选出172株为转基因阳性植株。Southern blot分析确证外源Gus基因插入拷贝数在1个或2个以上。对这些转基因棉花植株进行Gus染色结果表明dENP和CaMV35S启动子一样均能驱动Gus基因的表达,前者仅在棉花的韧皮部内特异表达,而CaMV35S启动子驱动的Gus基因为组成性表达。Gus酶活力测定结果进一步表明dENP和CaMV35S启动子驱动Gus基因表达水平相当,但是转pBII2棉花植株的Gus富集在韧皮部组织。证明了dENP启动子驱动的外源基因在棉花中具有韧皮部特异而高效表达的特征,从而可用于棉花抗病、抗蚜虫转基因研究。

黄芪扶正汤对老年人免疫功能及氧化应激的影响

目的探讨黄芪扶正汤能否提高老年人的免疫和抗氧化功能。方法选择无严重疾病、能生活自理的老年人(年龄>60岁)60例。分为观察组和对照组,观察组服用黄芪扶正汤剂300 mL,每天分2次服用,150mL/次。对照组肌肉注射卡介菌多糖核酸注射液(BCG-PSN)1 mg/次,每周2次。两组均用药4周。治疗前后分别使用流式细胞术测人外周血T细胞亚群和NK细胞数量,检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、血清总抗氧化能力及微量丙二醛(MDA)浓度。结果治疗后,观察组老年人全血CD4+/CD8+T细胞升高,治疗前后的差值高于对照组;观察组全血CD56+细胞数量升高,但与对照组相比差异无统计学意义。观察组的血清SOD和总抗氧化能力水平较治疗前提高,而对照组与治疗前相比无明显改变(P>0.05)。观察组的血清MDA水平较治疗前降低,而对照组无明显改变(P>0.05)。结论黄芪扶正汤能提高老年人的细胞免疫功能,增加外周血NK细胞数量,能改善氧化应激状态,这可能是其改善免疫衰老的机制之一。

转cry3A基因马铃薯外源蛋白表达和对马铃薯甲虫抗性分析

利用生物技术工程的方法获得了转cry3A基因马铃薯株系,首先对这些转基因株系的表达量和抗虫性进行分析,结果显示,Cry3A抗虫蛋白在4个株系C3-6,C3-11,C3v-5,C3-9新鲜叶片中表达量分别为1.4,2.8,5.0,9.0μg/mg;4个转基因株系离体叶片喂养马铃薯甲虫6 d的致死率分别为30.0%,46.7%,50.0%,100%,幸存的马铃薯甲虫发育滞后1.4～4.2 d,表明抗虫性和蛋白表达量呈正相关。其次,田间调查C3-9转基因株系幼苗期叶片为害情况低于对照,C3-9百株虫口数为26.6头,对照为1 993头,该株系农艺性状和对照没有明显差异,在不使用任何农药的情况下其产量和使用农药的对照相似。因此,转基因株系C3-9为高抗马铃薯甲虫且农艺性状优良的材料。

转Bt基因棉花的研究应用及问题与对策

20世纪80年代初Bt毒蛋白基因被克隆并转化到植物当中,转Bt基因棉花的应用已取得了相当的效益。但随着转Bt基因棉花的种植,也出现了许多问题,诸如抗药性的产生、抗虫谱狭窄、表达水平低等。现在转抗虫基因棉花的研究主要围绕着转多基因抗虫棉的培育,采用特异启动子调控外源抗虫基因在棉株体内的高效表达,修饰Bt基因以改善Bt毒蛋白的杀虫效能,重视外源与内源抗虫系统间的协调性,加强现代基因工程与传统抗虫育种相结合和筛选广谱性抗虫基因培育广谱性抗虫棉花,等等。

冠状动脉介入术后肝素相关性极重度血小板减少症一例报告

第三军医大学大坪医院野战外科研究所心内科近期发现1例患者冠状动脉介入术后发生肝素相关性极重度血小板减少症,血小板仅为2×109/L（2000/mm3）,检索相关资料未发现更低者,报告如下。

头颈肩面罩在鼻咽癌调强治疗中的摆位误差分析

目的探讨头颈肩面罩在鼻咽癌调强治疗中的固定效果及对摆位精度的影响。方法40例鼻咽癌患者均采用头颈肩面罩固定,在第一次治疗前和每周拍摄验证片,与DRR片进行比较,测量出X、Y、Z三方向的摆位误差,并查找误差原因。结果头颈肩面罩用于鼻咽癌调强治疗,重复性高,摆位误差小,系统误差和随机误差都控制在2 mm以内,左右方向X移动小些,头脚方向Y前后Z移动大些。结论在鼻咽癌调强治疗中,用头颈肩面罩固定效果好,摆位误差小,重复性高,值得广泛推广。但同时也存在着一定的摆位误差,为减少误差,应不要反复使用面罩,制作过程要紧贴患者体表部位,当患者消瘦、肿瘤缩小或面部肿胀的减轻时则需重新制作面罩和治疗计划。对于误差>2 mm者要进行实时摆位误差纠正,提高摆位精度,确保治疗效果。

不同继代时间调控棉花愈伤组织褐化死亡和植株再生效率的研究

棉花组织培养中愈伤组织褐化常常严重影响植株再生的效率,如何解决棉花组织培养过程中愈伤组织和胚性愈伤组织首次继代的两次褐化死亡高峰,是关系到是否能够大幅度提高棉花植株再生和遗传转化效率的关键因素之一。本研究分析了冀合713和珂字312两品种愈伤组织的继代时间与褐化死亡程度、植株再生时间和再生率,结果表明继代时间对棉花愈伤组织两次褐化死亡高峰存在着显著调控作用。在第一次高峰发生时延长继代时间间隔到50d,可以显著降低愈伤组织继续褐化死亡,提高胚性愈伤组织的发生率和缩短胚胎发生时间。在第二次高峰发生时缩短继代时间间隔为15d,可以显著降低愈伤组织褐化死亡程度,从而增加植株再生率和缩短植株再生时间。通过继代时间间隔的调控,有助于提高两个棉花品种的转化效率,为棉花基因功能验证和功能基因组研究提供了保证。

凝血酶注射法治疗股动脉假性动脉瘤对血液凝血功能的影响

目的:观察凝血酶注射法治疗股动脉假性动脉瘤的疗效及对血液凝血功能的影响。方法:冠状动脉介入诊治术后股动脉假性动脉瘤(PSA)患者16例,在超声引导下穿刺PSA瘤腔并注射200IU凝血酶行封闭治疗,所有病例均在治疗后24h和3～5天复查超声,并在注射凝血酶前及注射凝血酶后48h检测有关凝血指标。结果:11例患者在注入凝血酶后4～8s瘤腔即刻闭合,5例患者动脉与瘤腔通道血流明显减弱,经超声引导压迫后亦完全闭合,治愈率100%,无并发症发生。所有病例24h及3～5天后复查无复发。注射凝血酶前后机体凝血指标无显著差异。结论:凝血酶注射法治疗PSA简便、安全、有效,且对机体凝血功能无明显影响。

超声引导下凝血酶注射法治疗股动脉假性动脉瘤对血液流变特性的影响

目的评价超声引导下凝血酶注射法治疗股动脉假性动脉瘤(pseudoaneurysm,PSA)的疗效及对血液流变特性的影响。方法冠状动脉介入诊治术后股动脉PSA患者16例,在超声引导下穿刺PSA瘤腔并注射200IU凝血酶行封闭治疗,所有病例均在治疗后24h和3～5d复查超声,并在注射凝血酶前及注射凝血酶后48h检测有关血液流变参数。结果11例患者在瘤囊内注入200IU凝血酶后瘤腔即刻闭合,5例患者动脉与瘤腔通道血流明显减弱,在超声引起下压迫5～10min闭合,治愈率100％,无并发症发生。所有病例24h及3～5d后复查无复发。注射凝血酶前后血液流变参数无显著差异。结论该法治疗PSA简便、安全、有效,且对机体血液流变特性无明显影响。

重组人脑利钠肽治疗急性重症心肌炎伴心力衰竭患者的临床观察

目的观察重组人脑利钠肽(rhBNP)用于急性重症心肌炎伴心力衰竭患者临床疗效和安全性。方法选择急性心肌炎合并心力衰竭的患者21例,随机分为常规治疗组(10例)和rhBNP治疗组(11例),rhBNP组在常规治疗基础上加用重组人脑利钠肽,先静脉推注1.5μg/kg负荷量,再以0.0075μg/kg/min维持静脉用药48h。用药前后检测血清NT-proBNP水平,肌钙蛋白、CK-MB、肝肾功能、超声心动图评价EF,并重新评估患者(NYHA)分级。结果两组NT-proBNP水平均下降,rhBNP组更明显(P<0.05),两组EF、心功能均提高,rhBNP组更明显(P<0.05)。结论与常规治疗组比较,rhBNP能更好地改善急性重症心肌炎伴心力衰竭患者的临床状况,且无明显不良反应。

老年男性代谢综合征患者血清铁蛋白增高

目的探讨血清铁蛋白(SF)水平与老年男性代谢综合征(MS)的关系。方法选择年龄>60岁男性 MS 患者60例为试验组,非 MS 者30例为对照组。所有病人均测定腹围、血压、空腹血糖、血脂、胰岛素和 SF水平,分析 SF 与老年男性 MS 的关系。结果 MS 组血清 SF 水平明显高于对照组,SF 水平与腰围(r=0.37,P=0.004)、收缩压(r=0.31,P=0.016)、舒张压(r=0.30,P=0.020)、空腹血糖(r=0.287,P=0.026)和胰岛素抵抗指数(r=0.381,P=0.004)成正相关。多因素线性回归分析,排除上述因素后,SF 与胰岛素抵抗仍独立相关(P=0.001)。结论体内铁储存过多与老年男性 MS 独立相关,其机制尚需进一步研究。

肺癌患者行体部伽玛刀治疗的护理

目的总结肺癌患者行体部伽玛刀治疗的护理。方法对443例肺癌患者行体部伽玛刀治疗的护理进行分析总结。结果本组病例均能顺利完成体部伽玛刀治疗的整个疗程,未发生护理并发症。结论良好的护理是顺利完成整个伽玛刀治疗疗程的重要保证。

棉花人工突变体的研究进展及其利用展望

棉花突变体的创造是棉花功能基因组研究的基础。对棉花突变体来源、种类及研究进展进行了总结和评述,提出了未来棉花突变体发掘和创制的方法;并针对棉花突变体研究所面临的问题进行分析,对其利用前景进行了展望。