超声快速组织处理技术在鼻咽癌病理诊断中的应用

目的探讨超声快速组织处理技术应用于鼻咽癌诊断中的可行性。方法收集2020年1月至2021年5月湖北省中西医结合医院病理科接收的鼻咽肿物标本39例。每例标本取材2块,同时进行超声快速石蜡处理(超声处理组)和常规石蜡处理(常规处理组)。分别对石蜡切片进行HE染色、免疫组织化学染色和显色原位杂交EB病毒编码核糖核酸染色。在显微镜下观察2组切片,比较2种不同组织脱水处理方式对诊断结果的影响。结果39例鼻咽肿物标本同时进行超声快速组织处理和常规组织处理,其中诊断为鼻咽癌的均为9例、良性均为30例。显色原位杂交EB病毒编码核糖核酸染色阳性者均为7例,且均出现在鼻咽癌患者中。超声处理组HE染色效果优于常规处理组,镜下可见切片透明度好,背景干净,核质对比清晰,色彩明艳,且细胞形态更加饱满,结构完整,无收缩。超声处理组和常规处理组免疫组织化学染色结果相似,镜下均可见阳性细胞强度好,定位准确,无非特异性着色,背景干净。超声处理组和常规处理组显色原位杂交EB病毒编码核糖核酸染色结果相似,镜下均可见细胞核呈棕褐色,结果定位准确。结论对鼻咽肿物标本进行超声快速组织处理不会影响染色结果,且能有效缩短出片时间,提高病理诊断效率,可以应用于鼻咽癌的病理诊断。

一种节约六胺银染液单片染色的简易方法介绍

目的探讨一种能节约六胺银染液单片染色方法的可行性。方法收集湖北省中西医结合医院病理科2022年1月至2024年4月病理诊断为真菌感染阳性的组织标本20例。每个标本蜡块切片二片,分为传统六胺银染色组和改良六胺银染色组,同时进行六胺银染色。在显微镜下观察2组切片,对比2种不同的染色方法对结果的影响。结果镜下见改良六胺银染色组切片染色呈阳性。真菌呈黑色或黑褐色,组织结构清晰,形态完整。与传统六胺银染色组染色效果及诊断准确率相比较,结果均无明显差异。结论改良后的单片六胺银染色方法既能保证染色效果,亦能有效地节约试剂,适合在基层实验室广泛推广使用。

N-myc下游调控基因2在消化道恶性肿瘤中的作用机制

N-myc下游调控基因2(N-myc downstream regulated gene 2,NDRG2)是NDRG家族的一员,作为一种研究比较热门的抑癌候选基因,与细胞增殖、分化、凋亡和缺氧、脂肪毒性等应激反应及细胞迁移、侵袭等密切相关。全文阐述了NDRG2的分子特征及基因启动子甲基化、蛋白质磷酸化修饰等表观遗传作用机制,总结了NDRG2与长链非编码RNA(long noncoding RNA,LncRNA)、非编码单链RNA分子微小核糖核酸(MicroRNA,miRNA)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)及细胞连接相关基因E钙黏着蛋白/上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin,E-Cad)等相互调控关系,系统地阐述了NDRG2在消化道恶性肿瘤:食管癌、胃癌及结直肠癌的发生发展中的作用机制。本文有助于进一步探索消化道恶性肿瘤的特异性诊断标记物和靶向药物的分子靶点,对消化道肿瘤的防治具有重要意义。

右美托咪定对肺缺血/再灌注损伤小鼠内质网应激相关分子Caspase-12表达的影响

目的:探讨右美托咪定(DEX)对肺缺血/再灌注(I/R)损伤小鼠内质网应激(ERS)相关分子天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-12(Caspase-12)表达的影响。方法:选用C57BL/6J小鼠复制在体左肺原位I/R损伤模型。随机将40只小鼠分为4组(n=10):假手术组(sham组),I/R损伤组(I/R组),生理盐水对照组(NS组),右美托咪定干预缺血/再灌注组(DEX组)。DEX组在夹闭小鼠左肺门30 min前经腹腔注射DEX 25μg/kg,NS组为用同DEX组等体积的生理盐水替代DEX,其余操作同DEX组。3 h肺再灌注结束后,留取左肺。测定肺组织湿/干重比(W/D)及总肺含水量(TLW),光镜观察肺组织形态学改变,对肺组织进行损伤评估(IQA)。原位末端标记(TUNEL)法检测组织细胞凋亡指数(AI),蛋白免疫印迹法(Western blot)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测Caspase-12、葡萄糖调节蛋白78(grp78)蛋白和mRNA表达水平。结果:与sham组比,I/R组和NS组肺W/D、TLW、IQA、AI均明显升高(P<0.01),肺组织形态结构破坏明显,Caspase-12、grp78蛋白和mRNA表达量增加(P<0.01);I/R组与NS组相比,两组Caspase-12、grp78蛋白和mRNA表达量无明显差异(P>0.05)。DEX组与I/R组比,W/D、TLW、IQA和AI均有下降(P<0.01或P<0.05),肺组织形态学改变明显减轻,Caspase-12和grp78蛋白和mRNA表达量下降(P<0.01)。结论:DEX可有效缓解小鼠肺缺血/再灌注性损伤,其机制可能与其对抗ERS中Caspase-12引起的细胞凋亡有关。

右美托咪定对大鼠I/R损伤肺组织TLR4表达及保护作用的影响

目的:探讨右美托嘧啶对大鼠再灌注损伤肺组织Toll样受体素4(TLR4)表达的调控,并分析其对肺保护作用机制。方法:采用大鼠在体左侧肺缺血/再灌注(I/R)模型,50只健康雄性成年SD大鼠随机分为5组(n=10):对照组(Sham组)、缺血/再灌注组(I/R组)、右美托咪定组(Dex组)、阿替美唑组(Atip组)、右美托咪定+阿替美唑组(Dex+Atip组),实验结束后处死大鼠,留取左肺,检测肺湿干重比(W/D)和总肺水含量(TLW);光镜下观察肺组织形态结构变化;PCR检测肺组织TLR4 mRNA表达;Western blot检测肺组织TLR4的蛋白表达。结果:与Sham组相比,其余各组W/D和TLW明显升高(P<0.05,P<0.01),TLR4 mRNA和蛋白表达量上升(P<0.01),光镜显示肺组织结构出现明显损伤性变化;与I/R组相比,Dex组W/D和TLW下降(P<0.05,P<0.01),TLR4 mRNA和蛋白表达量降低(P<0.01),光镜下肺组织损伤减轻;与Dex组比较,Dex+Atip组W/D和TLW明显升高(P<0.05,P<0.01),TLR4 mRNA和蛋白表达量上升(P<0.01),光镜肺组织结构损伤严重;I/R组、Atip组、Dex+Atip组两两比较,以上各指标均无统计学差异(P>0.05)。结论:I/R可引起大鼠肺组织TLR4表达上调和肺组织损伤;右美托咪啶可减轻肺I/R损伤,抑制TLR4表达,这种作用与α2-肾上腺素能受体有关。

血必净注射液对缺氧/复氧大鼠心肌功能与结构的影响

目的:探讨不同剂量的血必净注射液对缺氧/复氧大鼠心肌功能的保护作用。方法:采用Langendorff方法制备大鼠离体心脏缺氧/复氧模型。130只雄性SD大鼠随机分为对照组(sham组),缺氧/复氧组(H/R组),低、中、高剂量血必净组(XBJ_L、XBJ_M、XBJ_H组),除对照组外,其他四组按复氧不同时相(复氧0.5 h、1 h、2 h)又分别分为3个亚组(n=10)。对照组在平衡灌注20 min时纪录左室发展压(LVDP)、左心室发展压最大上升/下降速率(±dp/dt_(max))、左心室内压(LVP)、心率(HR)的值,ELISA检测心肌中肌酸激酶同工酶(CK-MB)的浓度,光镜下观察心肌组织结构的改变;其余各组平衡灌注20 min后,灌注ThomasⅡ停搏液使心脏完全停搏30 min之后复灌K-H液使其心脏复跳,连续记录LVDP、±dp/dt_(max)、LVP、HR在复氧不同时间点的动态变化,ELISA检测各组复氧不同时间点心肌中CK-MB的浓度,光镜下观察各组复氧不同时间点心肌组织结构的改变。结果:与sham组相比,其余各组LVDP、±dp/dt_(max)、LVP值均降低(P<0.05),心肌中CK-MB浓度上升(P<0.05),心肌组织结构发生异常改变,随着复氧时间延长,以上指标异常变化逐渐加剧;在复氧0.5 h、1 h、2 h,各剂量血必净组LVDP、±dp/dt_(max)、LVP的值均高于H/R组对应时间点的值(P<0.05),心肌中CK-MB浓度均低于H/R组,心肌组织结构异常变化减轻,以中剂量改善效果最佳(P<0.05)。结论:血必净注射液能够有效改善缺氧/复氧大鼠心肌的功能及形态学结构,以中剂量血必净(4 ml/100 ml)效果最佳。

益气活血通络解毒方通过抑制caspase-12减轻小鼠肺缺血/再灌注损伤

目的：探讨益气活血通络解毒方（Yiqi Huoxue Tongluo Jiedu Fang,YHTJF）对小鼠肺部缺血/再灌注损伤及caspase-12表达的影响。方法：选取雄性10~12周龄C57BL/6J小鼠70只,体重21~25g,复制在体左肺缺血/再灌注（ischemia-reperfusion,I/R）损伤模型。随机分为7组：正常对照（control）组,羧甲基纤维素钠（carboxyl methyl cellulose-Na,CMC-Na）组,假手术（sham）组,I/R模型组,YHTJF低（low,L）、中（meddle,M）、高（high,H）浓度干预组。CMC-Na、sham和I/R组术前连续7 d腹腔注射CMC-Na溶液,YHTJF-L、YHTJF-M和YHTJF-H组术前连续7 d腹腔注射低、中、高浓度的YHTJF溶液。术毕,取左肺测定肺组织湿/干比值（W/D）及总肺含水量（TLW）,行肺泡损伤评估（IQA）;光、电镜观察肺组织形态学及超微结构改变;原位末端标记法（TUNEL）测组织细胞凋亡指数（AI）;RT-PCR和Western blot分别检测caspase-12和葡萄糖调节蛋白78（GRP78）的mRNA和蛋白表达量。结果：相比control组,I/R组的W/D、TLW、IQA和AI明显升高（P〈0.01）,肺组织形态学破坏显著,caspase-12和GRP78的mRNA和蛋白表达量增加（P〈0.01）,而CMC-Na组和sham组各项指标与control组无明显差异;与I/R组比较,YHTJF-L组、YHTJF-M组和YHTJF-H组各项指标（除GRP78外）数值均下降（P〈0.01）,组织损伤明显减轻。结论：YHTJF可有效减轻小鼠缺血/再灌注性肺损伤,其机制可能与其抑制caspase-12通路所致凋亡有关。

益气活血通络解毒方对肺缺血／再灌注损伤小鼠细胞凋亡及c—Jun氨基末端激酶通路的影响

目的观察益气活血通络解毒方（YHTJF）对小鼠肺缺血／再灌注（I／R）损伤（LIRI）的影响，并探讨c-Jun氨基末端激酶（JNK）是否参与其凋亡机制。方法选择雄性C57BL／6J小鼠70只，按随机数字表法分为正常对照组（C组）、羧甲基纤维素钠（CMC-Na）＋正常对照组（CMC-Na＋C组）、CMC-Na＋假手术组（CMC-Na＋S组）、CMC-Na＋I/R模型组和CMC-Na＋YHTJF低、中、高浓度干预组（CMC-Na＋YL组、CMC-Na＋YM组、CMC-Na＋YH组）。C组不进行任何处理；CMC-Na＋S组只开胸，不夹闭肺门；其余各组均开胸夹闭肺门30min，再松开动脉夹使左肺再灌注3h。术毕处死小鼠留取肺组织，光镜和电镜下观察肺组织形态学及超微结构改变，并观察肺泡损伤定量评估指标（IQA）的变化；用原位末端缺刻标记试验（TUNEL）检测肺组织细胞凋亡指数（AI）；用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）和反转录-聚酶链反应（RT-PCR）检测JNK、葡萄糖调节蛋白78（GRP78）的mRNA和蛋白表达；并分析肺组织AI与JNK、GRP78的mRNA和蛋白表达及IQA的相关性。结果CMC-Na＋I／R组IQA、AI及JNK和GRP78 mRNA和蛋白表达均较CMC-Na＋S组明显升高[IQA：（74．00±7．31）％比（7．00±1．23）％，AI：（64．40±11．97）％比（5．60±1．14）％，JNKmRNA（灰度值）：1．143±0．284比0．152±0．128，GRP78 mRNA（灰度值）：0．897±0．129比0．284±0．044，JNK蛋白（A值）：0．428±0．074比0．073±0．052，GRP78蛋白（A值）：1．075±0．145比0．589±0．060j，CMC-Na＋YL组、CMC-Na＋YM组、CMC-Na＋YH组IQA、AI、JNK mRNA和蛋白、GRP78mRNA表达均较CMC-Na＋I／R组明显下降，以CMC-Na＋YM组较CMC-Na＋YL和CMC-Na＋YH组下降程度更显著[IQA：（26．20±3．35）％比（34．00±5．34）％、（41．20±9．18）％，AI：（29．40±3．05）％比（48．20±3．83）％、（39．20±6．14）％，JNK mRNA（灰度值）：0．681±0．130比0．804±0．153、0．938±0．11，GRP78 mRNA（灰度值）：0．450±0．105比0．747±0．231、0．566±0．115，JNK赁白（A值）：0．188±0．049比0．261±0．065、0．209±0．063，均P〈0．01]，CMC-Na＋YH组、CMC-Na＋YL组和CMC-Na＋YM组GRP78蛋白表达较CMC-Na＋I／R组明显升高，以CMC-Na＋YH组升高程度较CMC-Na＋YL组和CMC-Na＋YM组更显著（A值：1．429±0．226比1．130±0．169、1．128±0．177，均P〈0．01）。光镜下可见各组细胞凋亡以肺血管内皮细胞、肺泡上皮细胞为主，棕色颗粒为阳性细胞。电镜下可见：CMC-Na＋I／R组细胞核固缩并边集在核膜下，胞质浓缩，板层体减少、排空增多，细胞膜上微绒毛减少或消失，线粒体肿胀，肺泡隔及毛细血管内炎性细胞附壁增多。与CMC-Na＋I／R组比较，CMC-Na＋YL组、CMC-Na＋YM组、CMC-Na＋YH组肺组织超微结构损伤减轻，肺泡结构超微结构清晰可辨，核染色质较均匀，胞质增多，Ⅱ型肺泡上皮细胞表面微绒毛较多，板层小体数量增多，线粒体肿胀减轻，以CMC-Na＋YM组减轻最明显。肺组织AI与JNK、GRP78的mRNA和蛋白表达、IQA均呈显著正相关性（r值分别为0．907、0．928、0．880、0．712、0．911，均P〈0．01）。结论YHTJF可有效减轻小鼠LIRI肺组织细胞的凋亡，其机制可能与抑制JNK通路有关。

益气活血通络解毒方对小鼠肺缺血／再灌注损伤的作用及其机制

目的:探讨益气活血通络解毒方(YHTJF)对小鼠的肺部缺血/再灌注(I/R)损伤,及对I/R引起的氧化应激反应的作用。方法:成年雄性10~12周龄C57BL/6J小鼠70只,体重(21~25)g,采用在体左肺门夹闭法复制缺血/再灌注损伤模型。随机分为7组:正常对照组(C),羧甲基纤维素钠carboxyl methyl cellulose-Na(CMC-Na)+正常对照组(CC),羧甲基纤维素钠+假手术组(CS),羧甲基纤维素钠+I/R模型组(CIR),羧甲基纤维素钠+YHTJF低、中、高浓度干预组(CYL、CYM、CYH)。CN、CS、CIR组术前连续7 d腹腔注射CMC溶液,CYL、CYM、CYH组术前连续7 d腹腔注射低、中、高浓度的YHTJF溶液。术毕,取左肺测定肺组织干湿比(W/D)及总肺含水量(TLW),行肺组织损伤评估(IQA),光镜观察肺组织形态学结构改变。TUNEL测组织细胞凋亡指数(AI)。检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)。结果:相比C组,CC组和CS组所有检测指标均无明显差异,CIR组的W/D、TLW、IQA、AI明显升高(P<0.01),肺组织形态学破坏显著;MDA含量、MPO活力明显升高,SOD活性显著降低。与CIR组比较,CYL组、CYM组、CYH组W/D、TLW、IQA、AI的表达均明显下降(P<0.01),组织损伤明显减轻,CYM组各项指标数值改善最明显,组织损伤最轻;3个用药组的MDA含量、MPO活力明显下降,SOD活性显著升高,其中中剂量用药组氧化应激指标变化最突出。结论:YHTJF可有效减轻小鼠缺血/再灌注性肺损伤,以中剂量效果为最佳,其机制可能与其抑制体内氧化应激反应、减轻肺组织细胞凋亡有关。

右美托咪定对A549细胞缺氧/复氧损伤时细胞凋亡及CHOP的影响

目的:探讨右美托咪定(Dex)对缺氧/复氧所致的A549细胞(起源于肺泡II型上皮细胞系)损伤及对CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)表达的影响。方法:将处于对数生长期的A549细胞随机分为4组(n=10):常氧培养组(N组),Dex常氧组(D组),缺氧/复氧组(H组),缺氧/复氧+Dex组(HD组)。D组和HD组在造模开始时加入1 nmol/L Dex,N组和D组细胞常氧培养30 h,H组和HD组细胞缺氧6 h,复氧24 h。之后用倒置显微镜观察细胞形态学变化。采用CCK-8法检测A549细胞活力。原位末端标记(TUNEL)法检测A549细胞的凋亡指数(AI)。蛋白免疫印迹法(Western blot)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测A549细胞CHOP、Grp78、caspase-3蛋白和CHOP、Grp78 mRNA表达水平。结果:与N组比较,H组细胞数量减少,细胞形态发生改变。A549细胞的吸光度值明显下降(P<0.01),AI值升高(P<0.01),凋亡细胞数明显增加。CHOP、Grp78、caspase-3蛋白和CHOP、Grp78 mRNA表达显著上升(P<0.01)。与H组相比,HD组细胞损伤减轻,吸光度值上调(P<0.01),凋亡细胞数明显减少(P<0.01)。CHOP、caspase-3蛋白,CHOP mRNA表达降低(P<0.01)。结论:Dex可有效减少缺氧/复氧引起的A549细胞凋亡,其机制可能与Dex对抗CHOP信号通路所致的凋亡有关。

缺氧/复氧大鼠心肌中IL-1β浓度的动态变化及意义

目的:探讨大鼠心肌中白细胞介素-1β(IL-1β)在心肌缺氧/复氧过程中的动态变化及其意义。方法:采用Langendorff方法制备离体大鼠心肌缺氧/复氧模型。40只雄性SD大鼠随机分为对照组(A组)和缺氧/复氧组(H/R组)。H/R组按照复氧时间分为H/R 0.5 h、H/R 1 h、H/R 2 h组(B、C、D组)(n=10)。连续纪录各组左室发展压(LVDP)、左心室发展压最大上升/下降速率(±dp/dtmax)的变化,ELISA检测各组心肌IL-1β和肌酸激酶同工酶(CK-MB)的浓度,RT-PCR检测心肌IL-1βmRNA的表达水平,光镜观察心肌结构。结果:与对照组相比,H/R组大鼠LVDP、±dp/dtmax值均降低(P<0.05),心肌中IL-1β的含量及IL-1βmRNA的表达明显升高(P<0.05),CK-MB浓度上升(P<0.05),随复氧时间的延长以上指标的变化更明显,B、C、D组间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05),H/R 2 h组心肌中的IL-1β、CK-MB的浓度以及IL-1βmRNA的表达量与A、B、C组相比,达到最高(P<0.05)。结论:大鼠心肌缺氧/复氧后IL-1β在心肌组织中的表达上升并引起心肌再灌注损伤。

促红细胞生成素通过JNK通路对再灌注损伤肺细胞凋亡的影响

目的:探讨促红细胞生成素(EPO)后处理是否通过抑制C-Jun氨基末端激酶(JNK)活化来减轻再灌注损伤肺细胞的凋亡。方法:雄性SD大鼠40只,随机分成5组(n=8):对照组(C组)、肺缺血/再灌注组(I/R组)、促红细胞生成素干预组(EPO组)、促红细胞生成素+溶剂对照组(P组)、促红细胞生成素+SP600125组(SP组)。各组分别于再灌注2 h留取左肺组织,电镜检测超微结构损伤;免疫组化法测定Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果:与C组相比,I/R组肺组织超微结构损伤明显,Bcl-2蛋白表达、Bcl-2/Bax比值明显降低,Bax蛋白表这明显升高(P<0.01);EPO组、P组、SP组与I/R组相比,组织损伤有所减轻,Bcl-2蛋白表达、Bcl-2/Bax比值明显升高,Bax蛋白表达明显降低(P<0.01);SP组与EPO组相比,组织损伤明显减轻,Bcl-2蛋白表达、Bcl-2/Bax比值明显升高,Bax蛋白表达明显降低(P<0.01)。结论:I/R通过激活JNK导致大鼠肺泡结构严重破坏,肺内细胞大量凋亡;EPO可通过抑制JNK的激活而减轻I/R损伤。

氧化应激在兔肾缺血/再灌注损伤中的作用及川芎嗪干预

目的:通过由兔肾脏缺血/再灌注损伤(IRI)导致的氧化应激体系中的变化,研究中药川芎嗪对IRI干预下的作用机制。方法:建立持续性阻断兔双侧肾动脉血流1 h,再灌注5 h的肾IRI动物模型。日本大耳兔30只,随机分成3组(n=10):假手术组(sham,S组),缺血/再灌注组(ischemia-reperfusion,IR组),川芎嗪干预缺血/再灌注组(ligustrazine+ischemia-reperfusion,LZ组)。于缺血前、缺血1 h、再灌注1 h、3 h和5 h依次经颈总动脉抽血用以检测超氧化物歧化酶(SOD)活力、黄嘌呤氧化酶(XO)活力以及丙二醛(MDA)含量。在实验结束后取兔肾组织依次检测SOD、XO活力以及MDA含量,并对其进行电镜观察。结果:与IR组相比,LZ组血浆中和肾组织的XO活力和MDA含量明显降低,SOD活力增高(均P<0.01)。LZ组肾组织细胞超微结构异常改变较IR组显著减轻。结论:川芎嗪能够使氧自由基水平降低,氧化应激损伤减轻,具有保护肾缺血/再灌注损伤的作用。

益气活血通络解毒方经CHOP通路对肺缺血/再灌注损伤的干预

目的:研究益气活血通络解毒方(yiqi huoxue tongluo jiedu fang,YHTJF)减轻小鼠肺缺血/再灌注性损伤药效及其机制。方法:取雄性C57BL/6J小鼠70只,随机分为7组:正常对照组(control,C),羧甲基纤维素钠对照组(CMC-Na+control,CC),羧甲基纤维素钠假手术组(CMC-Na+sham,CS),羧甲基纤维素钠缺血/再灌注模型组(CMC-Na+I/R,CIR),YHTJF低、中、高浓度干预组(CMC-Na+YHTJF-low、CMC-Na+YHTJFmiddle、CMC-Na+YHTJF-high,CYL、CYM、CYH)。CC、CS、CIR组术前连续7 d腹腔注射CMC溶液,中药干预组术前连续7 d腹腔注射低、中、高浓度的YHTJF溶液。术毕,取左肺,测定肺组织干湿比(W/D)及总肺含水量(TLW),行肺组织损伤评估(IQA),光、电镜观察肺组织形态学及超微结构改变,原位末端标记法(TUNEL)测细胞凋亡指数(AI),Western blot和逆转录PCR(RT-PCR)分别检测CHOP、GRP78的蛋白和mRNA表达量。结果:较之C组,CIR组W/D、TLW、IQA、AI明显升高(P<0.01),肺组织形态学破坏显著,CHOP、GRP78蛋白和mRNA表达量增加(P<0.01),而CC、CS组各项指标与C组无明显差异;较CIR组,CYL、CYM、CYH中药保护剂组各项指标数值下降(P<0.01),组织损伤明显减轻,CYM组各项指标数值下降最明显,组织损伤最轻。结论:YHTJF可有效减轻小鼠缺血/再灌注性肺损伤,中剂量效果较好,该机制可能与其抑制CHOP通路所致凋亡有关。

右美托咪定对A549细胞缺氧/复氧损伤时JNK的影响

目的:观察右美托咪定(dexmedetomidine,DEX)对缺氧/复氧所致的A549细胞损伤的干预作用以及对c-Jun氨基末端激酶(JNK)的影响。方法:培养A549细胞株,将细胞随机分为4组(n=10):正常对照组(N组),DEX组(D组),缺氧/复氧损伤组(H组),缺氧/复氧损伤+DEX干预组(HD组)。造模结束后,在倒置显微镜下观察细胞形态学的变化。CCK-8法检测A549细胞活力。原位末端标记(TUNEL)法检测A549细胞的凋亡指数(AI)。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞内葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、p-JNK、caspase-3蛋白的表达水平,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测GRP78、JNK mRNA的表达水平。结果:与N组比较,H组贴壁细胞数量明显减少,细胞形态发生改变。A549细胞的吸光度(OD)值明显下降(P<0.01),AI值升高(P<0.01),凋亡细胞数明显增加(P<0.01)。HD组与H组相比,细胞损伤减轻,OD值上调(P<0.01),凋亡细胞数相对减少,AI值下调(P<0.01)。p-JNK、caspase-3蛋白和JNK mRNA表达下降(P<0.01)。结论:DEX可有效减轻A549细胞缺氧/复氧损伤,机制可能与其抑制JNK通路激活所致的细胞凋亡有关。

超声快速石蜡切片在脱落细胞学诊断中的应用

目的探讨新型环保超声处理试剂配合超声快速组织处理仪应用于脱落细胞学诊断中的可行性。方法收集湖北省中西医结合医院病理科2020年3月到2021年3月之间临床送检的胸水、腹水的脱落细胞学标本各30例。每例标本取材2块,同时进行超声快速石蜡处理(快蜡组)和常规石蜡处理(常规组)。分别将其石蜡切片进行HE染色、免疫组织化学染色和特殊染色。在显微镜下观察二组切片,对比二种不同的细胞蜡块处理方式对结果的影响。结果与常规组比较,快蜡组切片制作周期短,HE染色切片透明度好,细胞核与细胞质染色对比清晰。细胞结构和形态保存更加完好。免疫组织化学染色切片细胞结构清晰完整,阳性结果强度好,定位准确。抗酸染色切片镜下见红色的簇状杆菌,其结果与常规组切片染色结果比较均无明显差异。结论超声快速石蜡切片不仅缩短了制片时间,而且适用于脱落细胞蜡块的制作,满足对脱落细胞病理诊断的要求。

右美托咪啶对肺缺血/再灌注损伤大鼠促炎介质IL-1β、TNF-α水平的影响及其机制

目的:评价右美托咪啶对大鼠肺缺血/再灌注损伤时促炎介质肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)的影响及机制。方法:雄性健康SPF级SD大鼠50只,体重250~310 g,8~12周龄,采用随机数字表法分为5组(n=10):假手术组(sham组)、缺血/再灌注损伤组(I/R组)、右美托咪啶组(Dex组)、阿替美唑组(Atip组)、右美托咪啶+阿替美唑组(Dex+Atip组)。采用大鼠在体左侧肺门夹闭30 min再灌注2 h制备缺血/再灌注(I/R)模型,Dex组、Atip组、Dex+Atip组分别在肺门阻断前30 min腹腔注射右美托咪啶(20μg/kg)、阿替美唑(250μg/kg)、右美托咪啶(20μg/kg)和阿替美唑(250μg/kg),其余处理同I/R组。实验结束后留取左肺检测肺湿干重比(W/D)和肺水含量(TLW);光、电镜观察肺组织形态结构变化;ELISA检测血浆中IL-1β及TNF-α的水平。结果:与sham组相比,其余各组W/D、TLW、IL-1β和TNF-α的水平明显升高(P<0.05,P<0.01),光、电镜均显示肺组织结构出现明显损伤性变化;与I/R组、Atip组、Dex+Atip组相比,Dex组W/D、TLW、IL-1β及TNF-α的含量下降(P<0.05,P<0.01),光、电镜下肺组织损伤减轻;I/R组、Atip组、Dex+Atip组两两比较,以上各指标均无统计学差异。结论:右美托咪啶通过降低促炎介质IL-1β、TNF-α浓度减轻大鼠肺缺血/再灌注损伤,其机制可能与激动α_2-肾上腺素受体有关。

血必净注射液对缺氧-复氧大鼠心肌炎性反应中TNF-α水平的影响

目的:探讨血必净(XBJI)注射液对缺氧-复氧大鼠心肌炎性反应中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的影响。方法:雄性SD大鼠随机分为正常对照组(C组)、平衡灌注组(N组)、模型组(H/R组)、低剂量XBJI组(L组,2 m L/100 m L)、中剂量XBJI组(M组,4 m L/100 m L)、高剂量XBJI组(H组,8 m L/100 m L)。大鼠进行灌注/停灌/再复灌方式制备心肌缺氧/复氧模型。对照组在平衡灌注20 min时纪录心率(HR)、左室发展压(LVDP)、左心室发展压最大上升/下降速率(±dp/dt_(max))、左心室内压(LVP)的值,其余各组再灌注结束后记录HR、LVDP、±dp/dt_(max)、LVP的变化。ELISA检测心肌组织TNF-α的浓度,Western blot检测TNF-α蛋白,RT-PCR检测心肌组织TNF-αmRNA的表达。光镜下观察心肌组织结构的改变。结果:与对照组及平衡灌注组相比,其余各组LVDP、±dp/dt_(max)、LVP、HR值均降低(P<0.01),TNF-α浓度、TNF-α蛋白水平和TNF-αmRNA的表达均显著上升(P<0.01);与模型组相比,各剂量血必净组LVDP、±dp/dt_(max)、LVP、HR的值均明显升高(P<0.01)。TNF-α浓度、TNF-α蛋白和TNF-αmRNA的表达均有降低(P<0.01或P<0.05);并以中剂量XBJI组差异最显著(P<0.01);各剂量XBJI组之间差异明显(P<0.05)。光镜下各剂量XBJI组的心肌组织结构异常变化比模型组明显减轻,以中剂量XBJI组减轻最为显著。结论:不同剂量血必净注射液可通过降低TNF-α表达减轻缺氧/复氧大鼠心肌的炎性反应,并以中剂量XBJI(4 m L/100 m L)疗效为最佳。

基于转化医学理念的病生理学教学改革探索与实践

目的:探讨以转化医学理念为指导的基础与临床相结合教学模式在病生理学教学中的应用。方法:选择我校2012级五年制医学本科生,在大班理论教学中开展综合式案例教学法,在小班理论教学中开展问题式案例教学法,在实验教学中开展综合开放性实验,病生理学教师参加临床(内科)实践,将转化医学理念运用到病生理学教学改革中,建立以转化医学理念为指导的基础与临床相结合的教学模式。结果:该教学模式进一步激发了医学生学习的兴趣,启发了学生的思维,提高了学生学习的主动性,培养了学生独立思考问题和解决问题的能力,同时提高了教师的教学水平,更好地发挥了本课程的基础–临床的桥梁作用。结论:基于转化医学理念的病生理学教学改革,提高了教学效果,值得进一步推广应用。

右美托咪啶对肺缺血/再灌注诱发小鼠肾脏超微结构改变的影响

目的:评价右美托咪啶对小鼠肺缺血/再灌注诱发肾脏损伤的影响。方法:雄性健康SPF级C57BL/6J小鼠50只,体重20 g^24 g,8~10周龄,采用随机数字表法,将其分为5组(n=10):假手术组(sham组)、肺缺血/再灌注损伤组(I/R组)、肺缺血/再灌注+生理盐水组(NS组)、右美托咪啶组(Dex组)、右美托咪啶+阿替美唑(Atip)(DA组)。采用小鼠在体左侧肺门夹闭30 min再灌注180 min方法制备肺缺血/再灌注损伤(I/R)模型。Dex组在肺门阻断前30 min腹腔注射右美托咪啶20μg/kg,NS组为用同Dex组等体积的生理盐水替代Dex,DA组腹腔注射右美托咪啶(20μg/kg)+阿替美唑(250μg/kg),其余处理同I/R组。再灌注结束后静脉取血ELISA法检测血浆中IL-1β和TNF-α浓度;取双肾组织,透射电镜下观察肾组织病理学结果。结果:与对照组相比,其余组血浆IL-1β和TNF-α浓度明显升高,肾组织病理学损伤明显加重;与I/R、NS、DA组相比,Dex组IL-1β和TNF-α浓度明显下降,差异有统计学意义(P<0.05),且肾组织超微结构损伤有所减轻。结论:右美托咪啶预先给药可减轻小鼠肺缺血/再灌注诱发肾脏损伤,其机制可能与抑制炎性反应有关。