单细胞测序揭示心脏移植物中树突状细胞和B细胞的抗原提呈特性

目的探讨心脏移植物中树突状细胞(DC)和B细胞的抗原提呈特性。方法将BALB/c小鼠的心脏移植到C57BL/6J小鼠腹腔内,术后5 d(急性排斥反应早期)提取并流式分选心脏移植物中的CD45+细胞,进行单细胞RNA测序。以心脏移植物中的DC和B细胞的亚群为主要对象,通过生物信息学分析和流式细胞术,研究其在心脏移植后变化趋势、抗原提呈能力及其与T细胞之间的胞间通讯情况。采用基因本体(GO)功能富集差异分析佐证细胞亚群特异性功能和细胞亚群注释可信度。结果生发中心样B细胞(GC-L B)是急性排斥反应期心脏移植物中增幅最大、比例高达87%的B细胞亚群,经典DC(cDC)2是心脏移植急性排斥期间唯一大量增多的DC亚群,占44%,是心脏移植后与T细胞的胞间通讯中占据最高通讯强度的DC亚群;单核样DC(moDC)与记忆性B细胞(MBC)是未心脏移植中T细胞输入信号的主要发出者,而在心脏移植后急性排斥反应期中,转变为cDC2与GC-L B;其中MBC与GC-L B分别是心脏移植前后的主要T细胞输入信号来源。结论在未移植心脏和移植心脏指向T细胞的胞间通讯中,与DC相比,B细胞均占据更高的通讯数量和权重,推测在心脏移植急性排斥反应早期,B细胞的抗原提呈活动比DC更加活跃,强度更大。

两种国产与一种进口小鼠肝炎病毒ELISA抗体检测试剂盒的比较研究

目的本研究拟对比小鼠肝炎病毒(MHV)抗体ELISA检测试剂盒的敏感性、特异性、精密性和可信度,以筛选出既经济又可靠的检测试剂盒。方法选择两种国产与一种进口的ELISA试剂盒检测MHV抗体和以下5种病毒阳性血清:小鼠仙台病毒(SV)、小鼠肺炎病毒(PVM)、小鼠细小病毒(MVM)、小鼠鼠痘病毒(MPV)及小鼠呼肠孤Ⅲ型病毒(Reo-3),并进行敏感性、特异性、精密性及可信度实验比较。结果 ELISA国产B试剂盒的敏感性是国产A试剂盒的400倍,进口试剂盒的敏感性是国产B试剂盒的4倍;特异性实验显示国产A试剂盒与MPV无交叉反应,但与其他4种病毒阳性血清均有交叉反应,国产B试剂盒和进口试剂盒与MPV以外的5种病毒阳性血清均无交叉反应;精密性实验显示进口试剂盒批内平均变异系数为5.667%,国产A和国产B试剂盒批内平均变异系数分别为13.825%和13.827%;可信度实验显示国产B试剂盒和进口试剂盒的阳性和阴性检测符合率均为100%,国产A试剂盒的阳性和阴性检测符合率分别为40%和80%。结论 ELISA检测国产B试剂盒除敏感性和精密度低于检测的进口试剂盒外,其特异性和可信度均良好,国产A试剂盒的敏感性、特异性、精密性和可信度均低于检测的进口试剂盒。