软骨细胞中SIRT1基因敲减后作用状态不明确信号通路及对相关疾病或功能的影响

背景:沉默信息调节因子1以去乙酰化的方式调控软骨细胞中相关蛋白的功能,参与软骨细胞增殖分化,促进软骨缺损修复。目的:利用高通量技术筛选软骨细胞中沉默信息调节因子1基因敲减后作用状态不明确的信号通路以及产生变化的疾病或功能。方法:取处于对数生长期的小鼠ATDC5软骨细胞,分2组转染:对照组转染沉默信息调节因子1基因敲减阴性对照慢病毒,实验组转染沉默信息调节因子1基因敲减慢病毒。转染72 h后,利用小鼠基因表达谱芯片GeneChip®Mouse Genome 4302.0 Array检测mRNA的基因层面变化情况,应用生物信息学技术筛选激活或抑制不明确的信号通路以及这些信号通路相关因子,并分析疾病或功能模块的富集情况。结果与结论:①沉默信息调节因子1基因敲减后,小鼠ATDC5软骨细胞中激活或抑制状态不明确的信号通路有245条;②根据-log(P-value)排序选择排前20的激活或抑制状态不明确信号通路中的因子情况进行报道,包括IGFBP4、TGFBR1、CTGF、COL4A5、LHX2、IL1RL1、KLF6等;③根据-log(P-value)进行排序,细胞生长和增殖、生物体存活和细胞死亡与存活等14个疾病和功能密切相关模块明显变化;根据差异基因数量排序,生物体损伤和异常、癌症和细胞死亡与存活3个疾病和功能密切相关模块明显变化;根据-log(P-value)与差异基因数量综合排序,固有免疫应答这一疾病和功能模块被显著激活。

miR⁃138⁃5p在骨关节炎中作用机制的研究进展

miR⁃138⁃5p作为一种微小RNA,在骨关节炎发病中起重要调节作用,其可通过NF⁃κB、Wnt/β⁃catenin、PI3K/AKT等信号通路作用调节细胞的炎症、细胞凋亡与增殖、基质降解等生物学过程进而影响骨关节炎的发生和发展。笔者就miR⁃138⁃5p对骨关节炎作用机制的研究进展作一综述。

医院获得性感染耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的耐药性及感染者的临床结局

目的探讨医院获得性感染耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)的耐药性及感染者的临床结局。方法选择2017-01至2023-06在武警四川总队医院住院的成年CRE感染患者341例作为病例组,336例碳青霉烯类敏感肠杆菌科细菌(CSE)感染患者作为敏感组,354例非肠杆菌科细菌感染的同时期住院患者作为对照组。使用药敏板条、肉汤稀释法检测临床常用抗菌药物对CRE的最低抑菌浓度,另外采用单变量和多变量分析医院获得性感染CRE患者的临床结局。结果分离CRE最常见的标本类型依次是痰液、尿液和血液,CRE中占比前三依次为耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CR-Kpn)、耐碳青霉烯类大肠埃希菌(CR-Eco)、耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌(CR-Ecl)。替加环素和黏菌素为CR-Kpn和CR-Eco体外敏感率最高的前两位药物,四环素对CR-Kpn的敏感率为71.86%,而对CR-Eco敏感率较低,呋喃妥因及氨基糖苷类抗生素对CR-Eco的敏感率显著高于CR-Kpn。CRE组的院内死亡率与其他两组相比,差异无统计学意义(P>0.05),不过CRE组预后不良率为19.35%,高于CSE组(11.31%)和控制组(12.15%),差异有统计学意义(P<0.05)。CRE感染患者中,肾功能不全和使用免疫抑制剂是导致预后不良的独立预测因素,而经验性使用抗生素为预后不良的保护因素。结论与其他常用抗菌药物相比,黏菌素和替加环素对CRE具有更高的体外抗菌活性,呋喃妥因及氨基糖苷类抗生素适用于CR-Eco导致的感染。医院获得性感染CRE容易导致患者预后不良,而经验性使用抗生素可以有效减少感染CRE导致的不良临床结局。

沉默信息调节因子1对软骨损伤修复机制的研究进展

软骨容易受到内外界环境影响造成损伤,但因其缺乏神经、血管和淋巴等组织,所以自我修复能力有限,在这一过程中长寿基因沉默信息调节因子1(SIRT1)发挥重要作用。软骨受损后,软骨合成分解代谢紊乱,SIRT1基因可通过影响软骨细胞炎症反应、氧化应激等因素调控软骨损伤进程。在分子机制中,SIRT1基因具有调节软骨稳态的重要作用,其可通过Notch、BMP、Wnt/β-catenin等信号通路对软骨损伤修复进行调节。在本综述中,阐述了SIRT1基因在病理生理条件下对软骨的保护作用及可能的修复机制,为恢复软骨稳态、实现软骨代谢平衡相关研究提供理论支撑。

淫羊藿苷治疗骨质疏松症的研究进展

骨质疏松症是以骨量减少、骨组织结构损害为特征的慢性疾病,在中老年人群中(尤其在绝经后女性人群中)发病率较高。该病严重威胁患者身心健康,给患者家庭带来沉重负担。临床治疗骨质疏松的西药因不良反应多和价格昂贵等影响了其应用。淫羊藿作为我国传统中药,使用安全、容易获取,被广泛应用于骨科疾病的治疗。前期研究证实,淫羊藿的主要成分淫羊藿苷在治疗骨质疏松症中有良好应用前景,其可通过上调成骨标志物碱性磷酸酶(ALP)、RUNX2、BMP-2等的表达促进成骨细胞、骨髓间充质干细胞(BMSCs)的增殖分化作用,并实现骨再生及骨形成,在这一过程中Wnt/β-catenin、OPG/RANK/RANKL等信号通路发挥重要作用。基于此,本文对淫羊藿苷治疗骨质疏松症的作用及可能机制作一综述。

固醇调节元件结合蛋白2在软骨细胞退变过程中的表达(英文)

背景:近期研究证实了固醇调节元件结合蛋白2基因在骨关节炎发生过程中起重要作用,但其具体发病机制尚未完全清楚。目的:通过白细胞介素1β体外诱导关节软骨细胞退变,观察固醇调节元件结合蛋白2在软骨细胞退变过程中的表达变化。方法:体外分离培养C57BL/6J小鼠关节软骨细胞,将第2代软骨细胞随机分为4组:对照组、白细胞介素1β24,48,72 h组。后3组细胞分别以10μg/L白细胞介素1β干预细胞。结果与结论:软骨细胞经白细胞介素1β刺激后呈肥大化表现,软骨细胞活性随白细胞介素1β刺激时间的延长而逐渐降低。与对照组相比,白细胞介素1β24,48,72 h组软骨细胞中固醇调节元件结合蛋白2与固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白mR NA表达水平增加,而蛋白聚糖和Ⅱ型胶原mR NA表达水平降低。提示白细胞介素1β能抑制软骨细胞增殖和细胞重要基质成分表达,诱导其出现肥大化退行性改变,且在退变的过程中,固醇调节元件结合蛋白2表达逐渐上调,与软骨关键基因的表达呈负向变化关系。

扩髓髓内钉与锁定接骨板治疗股骨干骨折的疗效比较

目的观察股骨扩髓髓内钉（RIN）和锁定接骨板（LCP）治疗股骨干骨折患者的临床疗效。方法对50例股骨干骨折患者分别采用RIN内固定（25例）和LCP内固定（25例）治疗。对比两组患者手术时间、术中失血量、切口长度、住院时间、术后8周骨痂面积、功能评价情况。结果50例均获得随访，时间RIN组11～28个月、LCP组10～32个月。术中出血量、住院时间及Flynn功能评价两组差异均无统计学意义（P〉0．05）。RIN组手术时间较LCP组长、切口长度较LCP组短、术后第8周骨痂面积比LCP组大，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论RIN与LCP两种内固定方式均能取得良好的治疗效果，但RIN组术后骨痂形成较多，骨折愈合情况更为理想。

成人股骨干骨折治疗进展

股骨干骨折是指股骨小转子以下至股骨髁以上部分股骨的骨折,是临床最常见的成人骨折之一,约占全身骨折的6%,多发于20～40岁青壮年,男女比例约为2.8 ∶ 1.股骨干骨折通常由高能损伤所致,30%患者伴有多发骨折、广泛软组织及脏器损伤,这些损伤会导致大量出血,严重时出现休克[1]..

微小RNA-138-5p与软骨细胞增殖和自噬的关系

背景:软骨细胞自噬活性的异常会导致软骨组织退行性病变,引发骨关节炎。近年的研究发现mircoRNA在调控软骨细胞自噬过程中发挥了重要的作用,但其作用的分子机制还不太清楚。目的:探究微小RNA-138-5p(miR-138-5p)对软骨细胞增殖和自噬活性的调节及其作用机制。方法:体外培养SW1353软骨肉瘤细胞系,对照组细胞转染阴性对照miRNA;实验组细胞转染miR-138-5p模拟物。CCK-8法检测细胞增殖活性,荧光定量PCR实验检测基质金属蛋白酶1,3,13的mRNA表达水平;免疫荧光染色法检测LC3蛋白亚细胞定位,用TargetScan7.1在线工具预测miR-138-5p与SIRT1信使RNA(mRNA)的作用位点,用蛋白质免疫印迹实验检测自噬相关蛋白和AMPK信号通路蛋白的表达水平。结果与结论:①与转染阴性对照的细胞相比,转染miR-138-5p模拟物的细胞增殖活性明显下降,细胞内LC3蛋白点状定位减少,且SIRT1、LC3-Ⅱ、p-AMPK蛋白表达水平下调,p62蛋白表达水平上升,SIRT1 mRNA的3’UTR区域存在一个保守的miR-138-5p结合位点;②与转染对照miRNA的细胞相比,转染miR-138-5p模拟物的细胞中基质金属蛋白酶1,3和13的mRNA表达均有上升;③结果提示,miR-138-5p调控细胞自噬活性和细胞增殖,其作用机制与SIRT1/AMPK信号通路相关;细胞内上调表达的miR-138-5p会促进软骨细胞基质金属蛋白酶的分泌,表明miR-138-5p在骨关节炎疾病进展中发挥了重要的作用。

沉默信息调节因子1基因敲减后ATDC5小鼠软骨细胞中被激活细胞退变相关信号通路及差异因子的表达

背景:软骨细胞退变常导致骨关节炎、椎间盘退变、半月板退变等骨科常见疾病,沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)基因与软骨细胞退变关系密切,当敲减ATDC5小鼠软骨细胞系中SIRT1基因后,可通过软骨细胞退变相关信号通路的作用影响细胞功能,进而影响骨科疾病的进程。目的:探讨SIRT1基因敲减后ATDC5小鼠软骨细胞中显著激活的软骨细胞退变相关信号通路情况及差异因子的表达情况。方法:携载或不携载SIRT1基因的慢病毒转染ATDC5细胞后,分为对照组(转染携载阴性对照慢病毒ATDC5细胞组)和实验组(转染携载SIRT1基因慢病毒ATDC5细胞组)。提取不同组别细胞中总RNA并进行质检,基因芯片检测细胞中编码RNA核酸的表达情况,结合生物信息学分析,寻找显著激活的软骨细胞退变相关信号通路,并对其中部分信号通路的差异变化因子进行阐述。结果与结论:①发现SIRT1基因敲减后ATDC5细胞中被显著激活的信号通路有42条;②选择了其中被显著激活的5条与软骨细胞退变相关且研究较少的信号通路:肝细胞生长因子信号通路(ETS1、PIK3CA、NRAS、PIK3C2A、FGFR2、ELF1、FGFR3、CDKN1A、AKT3、FRS2、PRKD3、MAP3K2)(Ratio=0.1390,Z-score=2.673)、神经调节因子信号通路(RPS6KB1、STAT5A、MTOR、BTC、HBEGF、RNF41)(Ratio=0.1360,Z-score=2.309)、胰岛素受体信号通路(TSC1、EIF4EBP1、PRKAR2B、PPP1R12A、TSC2)(Ratio=0.1060,Z-score=2.138)、趋化因子受体4信号通路(PAK4、EGR1、RHOJ、RHOB、PLCB1、GNG5)(Ratio=0.0970,Z-score=2.500)、肌动蛋白细胞骨架信号通路(ABI2、BRK1、PIP4K2B、MYLK、IQGAP1、ARPC1A、ACTA2、EZR、SSH2、ACTG1、IQGAP3)(Ratio=0.0921,Z-score=2.236)进行汇报,从而为研究软骨细胞退变相关疾病提供新颖靶点。

关节镜下微创治疗顽固性跟痛症

背景：对于这类顽固性跟痛症，目前临床上提出了关节镜下微创技术治疗方法。目的：探讨关节镜微创技术治疗顽固性跟痛症的临床效果。方法：纳入跟痛症患者21例，行关节镜微创技术治疗，随访观察治疗效果。结果与结论：随访11-28个月，21例患者疼痛显著改善，治疗后目测类比评分明显低于治疗前（P〈0．05），治疗后AOFAS-AH评分明显高于治疗前（P〈0．05）。表明关节镜辅助下治疗顽固性跟痛症是有效的微创治疗方法。

不同长度亚洲型股骨近端防旋髓内钉治疗股骨转子间骨折的比较

目的比较不同长度亚洲型股骨近端防旋髓内钉(PFNA-Ⅱ)治疗A1及A2型股骨转子间骨折的临床效果。方法采用PFNA-Ⅱ治疗80例A1及A2型股骨转子间骨折患者,根据PFNA-Ⅱ主钉长度的不同分为短钉组(170 mm,35例)和长钉组(200、240 mm,45例),比较两组的手术时间、术中失血量、隐性失血量、输血率、钉尖至股骨前皮质的距离、钉尖抵触股骨前皮质的发生率、住院时间、Harris髋关节功能评分及术后并发症等指标。结果两组住院时间、Harris髋关节功能评分及术后并发症等比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与长钉组比较,短钉组手术时间短,术中失血量、隐性失血量少,钉尖至股骨前皮质的距离长,输血率、钉尖抵触股骨前皮质的发生率低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 PFNA-Ⅱ长、短钉治疗A1及A2型股骨转子间骨折均可获得良好的临床疗效;但短钉具有减少手术创伤、吻合股骨前弓形态的优势。因此建议临床在长、短钉均适用的情况下,可选择短钉。

MRI及三维超声对肩袖损伤诊断方法的比较

目的：通过与术中肩关节镜下表现对比，探讨MRI 与三维超声对肩袖损伤（rotator cuff tears, RCT）诊断的优越性。方法2012年8月—2014年1月对46例肩袖损伤患者术前进行MRI及三维超声检查，并与其术中关节镜下表现进行对比分析，评价MRI及三维超声对肩袖损伤诊断的准确性。结果46例患者中，术前MRI检查诊断全层撕裂40例，部分撕裂6例；三维超声诊断全层撕裂37例，部分撕裂9例；术中关节镜诊断肩袖全层撕裂39例，部分撕裂7例。MRI检查对于诊断肩袖全层撕裂的敏感性是97.4%，特异性是71.4%，准确率为93.4%；三维超声对于诊断肩袖全层撕裂的敏感性是92.3%，特异性是85.7%，准确率为91.3%。三维超声与MRI检查对于冈上肌腱全层撕裂诊断的差异无显著性意义（P〈0.05），但对部分撕裂诊断MRI检查特异性优于三维超声（P〉0.05）。结论三维超声成像技术及MRI检查对肩袖全层撕裂的诊断均具有较高的准确率和敏感性，但对肩袖部分撕裂，MRI成像技术诊断价值优于三维超声检查。

慢病毒介导SIRT1基因表达降低的ATDC5细胞模型建立

背景:沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)基因是一个与衰老关系密切的基因,可以通过调节PI3K/AKT、NF-κB等信号通路影响到组织及机体的衰老过程,并参与骨科相关疾病的发生发展。建立慢病毒介导的SIRT1基因表达降低的ATDC5细胞模型,可以为研究SIRT1基因相关的骨科系统疾病如骨关节炎、骨质疏松症等提供实验基础。目的:构建携带小鼠SIRT1基因的RNAi慢病毒载体,将其转染ATDC5细胞系,建立SIRT1基因表达降低的ATDC5细胞模型。方法:根据RNAi序列设计原则设计并合成SIRT1基因的RNAi靶点序列,连接GV248(框架结构:h U6-MCS-Ubiquitin-EGFP-IRES-puromycin)载体,转化后经阳性克隆测序及PCR鉴定,质粒抽提后导入293T细胞,包装慢病毒,取上清检测滴度。将含有小鼠SIRT1基因RNAi的病毒颗粒转染ATDC5细胞系,并于荧光显微镜下进行观察,行RT-PCR检测ATDC5细胞中SIRT1 m RNA的表达情况。结果:经测序、PCR检测可知,SIRT1基因的RNAi靶点序列与GV248载体连接成功,并包装成高滴度的慢病毒。携带小鼠SIRT1基因的RNAi慢病毒感染ATDC5细胞后,荧光显微镜下观察显示感染率较高,RT-PCR检测发现,携带SIRT1基因的慢病毒感染组SIRT1基因m RNA的相对表达量为0.386±0.117,与阴性对照病毒感染组相比有统计学差异(P<0.05),敲减效率为61.4%。结论:成功建立SIRT1基因表达降低的ATDC5细胞模型,为研究SIRT1基因相关骨科系统疾病提供实验基础。

康复训练在老年人群骨科术后股四头废用性萎缩功能锻炼中的作用分析

目的分析康复训练在老年人群骨科术后股四头废用性萎缩功能锻炼中的作用。方法选取2018年5月~2019年7月我院收治的骨科老年患者130例,根据随机数字表法分为对照组和观察组各65例,对照组采用常规干预,观察组在此基础上加入康复训练,对比两组患者运动功能、肌力恢复情况、炎性指标改善情况。结果干预后,观察组Fugl-Meyer评分、Lysholm评分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);干预后,观察组TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-10以及IL-6均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论康复训练在老年人群骨科术后股四头废用性萎缩功能锻炼中有良好作用,可提高患者的运动功能,促进肌力恢复。

加速康复外科模式下全髋关节置换患者住院时长的影响因素分析

目的探讨加速康复外科(ERAS)模式下全髋关节置换(THA)患者住院时长(LOS)的影响因素。方法纳入行初次单侧THA的326例患者,统计性别、年龄、体重指数(BMI)、美国麻醉医师协会分级(ASA)、术前血红蛋白(Hb)和白蛋白(Alb)水平及围手术期指标。结果单因素分析显示不同ASA、术前Hb及Alb水平及有无合并症、术中输血及留置引流管患者的LOS比较有统计学差异(P <0.05);多因素Logistic线性回归分析显示术中输血、留置引流管和有合并症与患者的LOS有关(P <0.05)。结论患者ASA、术前Hb及Alb水平、存在合并症、术中输血及术后留置引流管等可能不同程度地延长LOS。

复杂C3型骨盆骨折内固定手术策略及效果分析

目的研究复杂C3型骨盆骨折内固定的手术策略及临床疗效。方法2016年12月至2018年5月收治的复杂C3型骨盆骨折患者43例,先行骨牵引,以锁定钢板或微创螺钉内固定,再采用有限切开复位内固定手术进行治疗。记录手术时间、术中出血量、住院时间等指标;记录手术并发症;末次随访时,采用改良的Mere d'Aubigne-Postel髋关节评分标准和Matta髋臼骨折复位标准评估手术效果。结果所有患者手术成功,手术时间180~300 min,平均(236.52±49.62)min;术中出血量200~600 mL,平均(318.23±87.24)mL;住院时间14~19 d,平均(16.81±2.17)d。全部患者术后随访12~24个月,平均(15.81±3.12)个月,末次随访时,骨盆骨折均愈合良好,愈合时间9~15周,平均时间(12.12±2.15)周。依据改良的Mere d'Aubigne和Postel髋关节评分标准,优29例、良11例、一般3例,优良率93.02%;依据Matta髋臼骨折复位标准,优32例、良7例、差4例,优良率90.70%。本组中有2例患者术后3个月负重行走时出现疼痛症状。结论对复杂C3型骨盆骨折,先采取术前骨牵引等稳定骨盆骨折,再选择适当髋臼入路有限切开复位内固定手术,可取得满意效果,具有创伤小、恢复快的特点,值得临床推广。

Wnt5a基因慢病毒的构建与RSC96雪旺细胞的感染研究

目的 构建大鼠Wnt5a基因慢病毒并感染RSC96雪旺细胞,观察慢病毒感染情况及Wnt5a表达情况。方法 设计大鼠Wnt5a基因特异性RNAi序列,构建并包装成可感染细胞的慢病毒,感染RSC96雪旺细胞后通过Celigo观察细胞中荧光表达,并通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-q PCR)检测细胞中Wnt5am RNA的表达情况。结果 构建的Wnt5a基因慢病毒在感染RSC96雪旺细胞后可表达绿色荧光,细胞中Wnt5am RNA的平均表达量为0.206±0.056。结论 Wnt5a基因慢病毒构建成功,可为研究Wnt5a调控的周围神经损伤修复时雪旺细胞功能的相关研究提供便利。

股骨距骨密度变化对老年髋部骨折类型的影响研究

背景:老年髋部骨折主要包括股骨颈骨折及股骨转子间骨折,股骨颈骨折患者的年龄略小于股骨转子间骨折患者,有学者认为这与股骨距的骨密度变化有关。目的:运用螺旋CT扫描及三维重建技术研究股骨距骨密度变化对老年髋部骨折类型的影响。方法:收集自2016年1月至2018年10月老年髋部骨折患者的CT图像,结合图像处理软件重建股骨距及股骨近端三维图像,测量股骨距、压力骨小梁、张力骨小梁、头下骨小梁、大转子骨小梁及次张力骨小梁的平均CT值,并以此CT值代表骨密度,分析股骨距密度变化与老年髋部骨折类型的关系。结果:在相同年龄阶段,不同类型老年髋部骨折患者的股骨距密度比较,差异有统计学意义(P<0.05),其中股骨颈骨折患者的股骨距平均CT值明显大于股骨转子间骨折患者。在老年女性患者中,股骨颈骨折患者的股骨距密度、张力骨小梁和次张力骨小梁密度均大于股骨转子间骨折患者(P<0.05),而男性患者上述指标比较,差异无统计学意义。结论:不同年龄老年人及老年女性股骨距骨密度变化是影响髋部骨折类型的重要因素。

股骨髓腔灌注氨甲环酸对髓内钉治疗老年股骨转子间骨折围手术期隐性失血及术后血栓风险的影响

目的:探讨股骨近端防旋髓内钉(PFNA)固定术中股骨髓腔局部灌注氨甲环酸(TXA)对老年股骨转子间骨折患者围手术期隐性失血及术后血栓风险的影响。方法:回顾性分析2019年1月至2020年12月收治的63例老年股骨转子间骨折患者,37例在PFNA术中局部应用TXA纳入TXA组,26例术中不采用TXA的患者作为非TXA组。比较两组术中出血量、隐性失血量、围手术期抽血指标(血常规、凝血功能、血白蛋白)、输血情况、术后下肢深静脉血栓及肺栓塞情况等。结果:与非TXA组相比,TXA组围手术期有较低的隐性失血量[(192±205)ml vs.(578±277)ml,P<0.001]、隐性失血量占总血容量比例(4.95%±4.93%vs.16.60%±8.62%,P<0.001)、总失血量[(299±213)ml vs.(666±303)ml,P<0.001]。TXA组围手术期输血患者比例也低于非TXA组(24.3%vs. 75.7%,P<0.001)。凝血功能方面,TXA组能防止凝血酶原时间增加,使其更接近正常值。TXA组患者均未出现深静脉血栓及肺栓塞等术后并发症。结论:PFNA术中髓腔灌注TXA能有效地减少老年股骨转子间骨折患者术后隐性失血量,降低同种异体输血率,且对凝血功能影响少,不增加血栓风险,为临床上老年股骨转子间骨折治疗及加速康复提供更安全的辅助方法。