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新型桥梁“耗能-限位”一体化弧形板装置力学性能试验及参数敏感性分析
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作者 耿波 顾冉星 +3 位作者 贾俊峰 刘海明 王浩 唐光武 《东南大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1143-1153,共11页
为解决强震作用下中小跨径简支梁桥的落梁问题,研发了一种经济高效、安装便捷的新型“耗能限位”梁一体化弧形板装置.首先采用拟静力试验研究了不同截面的弧形板装置滞回耗能行为和疲劳破坏机理,接着采用数值分析的手段探讨了参数对装... 为解决强震作用下中小跨径简支梁桥的落梁问题,研发了一种经济高效、安装便捷的新型“耗能限位”梁一体化弧形板装置.首先采用拟静力试验研究了不同截面的弧形板装置滞回耗能行为和疲劳破坏机理,接着采用数值分析的手段探讨了参数对装置力位移骨架曲线及等效阻尼比的影响规律,并补充了弧形板装置的防落梁行为模式与极限承载能力.结果表明:提出的新型弧形板装置具有优异的耗能能力,T形截面的弧形板结构更加合理,等效阻尼比最大能达到近40%;弧形板装置可通过分离几何参数对耗能能力、滞回强度、刚度及位移能力进行设计,增大中间截面的腹板高度h2是提高弧形板耗能能力的最有效手段,增加50%的h2能提高50.1%的最大强度与约4.7%的等效阻尼比.所提出的新型防落梁装置为桥梁中小震消能和强震柔性防落梁提供一体化装置解决方案. 展开更多
关键词 桥梁抗震 弧形钢板装置 消能阻尼器 防落梁装置 拟静力试验 有限元分析
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面向电力设备异常检测的深度自编码支持向量数据描述模型研究
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作者 耿波 潘曙辉 董晓旭 《湖南电力》 2024年第1期119-127,共9页
针对深度自编码支持向量数据描述模型对电力设备部分异常区分能力不足的问题,提出自监督混合专家增强的深度自编码支持向量数据描述模型,构造多种自监督变换数据集模拟潜在未知异常,引入自监督分类和掩码重构任务以学习更具区分性的表... 针对深度自编码支持向量数据描述模型对电力设备部分异常区分能力不足的问题,提出自监督混合专家增强的深度自编码支持向量数据描述模型,构造多种自监督变换数据集模拟潜在未知异常,引入自监督分类和掩码重构任务以学习更具区分性的表示。此外,将编码器部分改造为混合专家模型结构,将数据分配给不同专家子模块进行专业化的学习,使异常决策边界更清晰。在4个公开数据集和3个电厂设备数据集上的实验结果证实了自监督学习和混合专家模型的有效性。 展开更多
关键词 异常检测 深度自编码支持向量数据描述 自监督学习 混合专家模型
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某在役铆接钢桁梁桥关键构件疲劳性能研究
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作者 袁佩 张焱焜 +1 位作者 耿波 尚军年 《科技创新与应用》 2024年第22期58-61,共4页
精准评估现役钢桥的疲劳寿命对于桥梁结构的安全运营至关重要。该文以某在役铆接钢桁梁桥为研究对象,在对桥梁结构进行计算分析明确各构件的受力特点的基础上,针对原桥典型构件以及关键节点开展系列疲劳性能研究。数值计算结果表明,城B... 精准评估现役钢桥的疲劳寿命对于桥梁结构的安全运营至关重要。该文以某在役铆接钢桁梁桥为研究对象,在对桥梁结构进行计算分析明确各构件的受力特点的基础上,针对原桥典型构件以及关键节点开展系列疲劳性能研究。数值计算结果表明,城B荷载作用下原桥典型构件以及关键节点均具有良好抗疲劳性能,疲劳寿命循环次数均大于200万次。 展开更多
关键词 钢桁梁桥 在役钢桥 疲劳性能 寿命评估 应力修正
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FRP-混凝土组合式护栏防护重型车辆撞击的能力
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作者 郑植 杨波 +1 位作者 袁佩 耿波 《重庆大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期51-63,共13页
为提高低等级混凝土护栏防护重型车辆的能力,设计了3种不同构造形式的复合材料护板,分别设置在混凝土护栏表面形成组合式护栏。建立车-护栏精细化有限元模型,通过与实车碰撞试验结果对比,验证了有限元模型的可靠性。考虑撞击力、碰撞角... 为提高低等级混凝土护栏防护重型车辆的能力,设计了3种不同构造形式的复合材料护板,分别设置在混凝土护栏表面形成组合式护栏。建立车-护栏精细化有限元模型,通过与实车碰撞试验结果对比,验证了有限元模型的可靠性。考虑撞击力、碰撞角度、车辆轨迹、货厢尾部抬高、车辆动态外倾值、车辆外倾角6个评价指标,对比分析了3种方案护栏的防车撞性能。结果表明,在整体式货车撞击下,3种方案护栏均能顺利引导车辆转向,不带阻坎的方案一的各主要指标均优于其他方案,防护能力最优;在拖挂式货车撞击下,方案一的护栏导向与阻挡性能依然良好,驶出角仅为0.75°;改造后的组合式护栏防护能量达到650 kJ,防护能力是改造前的4倍。 展开更多
关键词 组合式护栏 碰撞仿真 防车撞能力 复合材料
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山区涉河桥梁墩柱冲磨破坏机理及防护措施
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作者 张焱焜 尚军年 +2 位作者 袁佩 耿波 文江福 《科技创新与应用》 2024年第8期133-136,共4页
近年来自然灾害频发,山区桥梁水毁事故时有发生,针对山区涉河桥梁墩柱冲磨性能的提升正逐渐成为研究热点。该文综述山区涉河桥梁墩柱冲磨破坏机理及防护措施研究现状,并针对一种新型防护措施的防护效果进行数值模拟分析,以期为应对桥梁... 近年来自然灾害频发,山区桥梁水毁事故时有发生,针对山区涉河桥梁墩柱冲磨性能的提升正逐渐成为研究热点。该文综述山区涉河桥梁墩柱冲磨破坏机理及防护措施研究现状,并针对一种新型防护措施的防护效果进行数值模拟分析,以期为应对桥梁结构冲磨破坏问题提供参考。 展开更多
关键词 山区 桥梁 防护装备 混凝土 冲击效应
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利用17个微卫星标记分析鳙鱼的遗传多样性 被引量:49
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作者 耿波 孙效文 +2 位作者 梁利群 欧阳洪生 童金苟 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期683-688,共6页
选用实验室克隆的17个鳙鱼微卫星分子标记分析四川泸州和江西鄱阳湖的两个种群鳙鱼的遗传多样性及种质特性,计算和统计了杂合度、多态信息含量(P/C)、有效等位基因数、等位基因频率、遗传距离、遗传相似系数、Hardy-Weinberg平衡偏... 选用实验室克隆的17个鳙鱼微卫星分子标记分析四川泸州和江西鄱阳湖的两个种群鳙鱼的遗传多样性及种质特性,计算和统计了杂合度、多态信息含量(P/C)、有效等位基因数、等位基因频率、遗传距离、遗传相似系数、Hardy-Weinberg平衡偏离指数等方面内容。结果表明:选择使用17个微卫星标记,其中有4个为单态标记,13个为多态标记。江西和四川鳙鱼群体每个微卫星位点的平均等位基因数分别为3.325及3.882,平均有效等位基因数分别为3.531及2.676,多态位点百分率分别为82.4及70.5,17个微卫星标记共有等位基因71个,多态微卫星位点的P/C在0.0770.960之间变动,平均为0.417,两群体位点平均观测杂合度为0.385和0.360,平均期望杂合度为0.452和0.422,两个群体间的遗传相似系数为0.897,群体间的遗传距离为0.109。 展开更多
关键词 微卫星标记 鳙鱼 遗传多样性 等位基因频率
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桥梁船撞风险评估系统总体研究 被引量:50
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作者 耿波 王君杰 +1 位作者 汪宏 范立础 《土木工程学报》 EI CSCD 北大核心 2007年第5期34-40,共7页
从桥梁工程船撞设计的角度出发,提出了一个桥梁船撞风险评估系统的总体框架,共包括五部分内容:船桥碰撞评估数据库、桥梁船撞安全评估模块、可接受风险准则、主动防撞方案设计和被动防撞方案设计,并阐明了各组成部分之间的逻辑关系。同... 从桥梁工程船撞设计的角度出发,提出了一个桥梁船撞风险评估系统的总体框架,共包括五部分内容:船桥碰撞评估数据库、桥梁船撞安全评估模块、可接受风险准则、主动防撞方案设计和被动防撞方案设计,并阐明了各组成部分之间的逻辑关系。同时对各部分中需要解决的关键问题进行了阐述,主要包括:用于桥梁船撞风险分析的合理船舶分类标准的定制;针对风险事件引入概率设计的思想,研究船撞力荷载与结构抗力的分布函数,提出了利用可靠度对桥梁船撞安全状态进行评估的思路和方法;桥梁船撞可接受风险标准的确定;处于不同风险水平下的桥梁的合理防撞方案的选择与优化设计等。 展开更多
关键词 船撞桥 风险评估 设计
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T91钢高温水蒸汽氧化层形成机理研究 被引量:25
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作者 耿波 刘江南 +2 位作者 赵颜芬 王正品 石崇哲 《铸造技术》 CAS 北大核心 2004年第12期914-918,共5页
为了研究T91钢高温高压水蒸汽条件下锅炉管道内壁氧化层的形成机理 ,对T91钢锅炉再热器管内壁高温高压水蒸汽条件下的氧化层形貌进行观察 ,利用X Ray物相分析仪测试氧化层的物相结构。结果表明 :T91钢在高温高压水蒸汽环境下产生的氧化... 为了研究T91钢高温高压水蒸汽条件下锅炉管道内壁氧化层的形成机理 ,对T91钢锅炉再热器管内壁高温高压水蒸汽条件下的氧化层形貌进行观察 ,利用X Ray物相分析仪测试氧化层的物相结构。结果表明 :T91钢在高温高压水蒸汽环境下产生的氧化皮内层为极薄且含有大量阳离子空位的单相无晶界CrFe2 O4(阳离子空位约为 3 7% )非晶体结构 :中层为较厚的单相CrFe2 O4细等轴晶和在其上生长的粗柱状晶结构 :外层为Fe3 O4 Fe2 O3 展开更多
关键词 水蒸汽氧化 物相结构 无晶界 非晶体 T91钢
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水蒸气温度和流量对T91钢氧化行为的影响 被引量:9
9
作者 耿波 张路 +2 位作者 范念青 夏志新 刘江南 《材料工程》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第1期52-57,共6页
研究了高温水蒸气的温度和流量对T91钢氧化行为的影响,阐述了氧化层的组织结构与氧化动力学之间的关系。结果表明:水蒸气氧化过程分为线性的初始快速氧化阶段和之后的抛物线慢速氧化阶段及线性的慢速氧化阶段。当水蒸气温度较高、流量... 研究了高温水蒸气的温度和流量对T91钢氧化行为的影响,阐述了氧化层的组织结构与氧化动力学之间的关系。结果表明:水蒸气氧化过程分为线性的初始快速氧化阶段和之后的抛物线慢速氧化阶段及线性的慢速氧化阶段。当水蒸气温度较高、流量较小时出现慢速氧化阶段。初始快速氧化阶段的氧化速率随水蒸气温度的升高而增大,但水蒸气流量对初始快速氧化阶段的氧化速率影响很小。初始快速氧化阶段单位面积增重最大值随水蒸气流量的增大而线性增大,且随温度升高而增速加快。随着水蒸气温度和流量的增加,T91钢最外层氧化层的形态发生明显改变,导致抗高温氧化性能显著下降。 展开更多
关键词 耐热钢 水蒸气 氧化行为 显微组织
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转大麻哈鱼生长激素基因鲤生态安全性检测与分析 被引量:7
10
作者 耿波 梁利群 +3 位作者 关云涛 孙效文 雷清泉 欧阳红生 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期1139-1144,共6页
评价了转大麻哈鱼(Oncorhynchus Suckley)生长激素基因鲤生态安全性问题及研究转基因鱼对天然野生鲤群体遗传污染程度。通过RAPD和SSLP方法,用265个RAPD标记和35对鲤的微卫星标记对受杂交鲤污染的哈尔滨江段黑龙江鲤群体、未受污染的抚... 评价了转大麻哈鱼(Oncorhynchus Suckley)生长激素基因鲤生态安全性问题及研究转基因鱼对天然野生鲤群体遗传污染程度。通过RAPD和SSLP方法,用265个RAPD标记和35对鲤的微卫星标记对受杂交鲤污染的哈尔滨江段黑龙江鲤群体、未受污染的抚远江段黑龙江鲤群体及模拟转基因鲤占普通鲤群体的1%和10%比例获得繁殖子代等实验群体的DNA样本进行全基因组扫描统计分析得出结论,即转基因鲤占普通鲤群体1%时对普通群体的基因污染程度是微乎其微的,远远低于杂交鲤对野生群体基因污染,转基因鲤占普通鲤群体10%时对普通鲤遗传背景的影响稍有升高,但仍然远远低于杂交鲤对野生群体基因污染程度。总之,在现有的检测技术条件及有效的监控条件下,与杂交鲤相比转基因鲤对鲤野生群体的遗传背景的影响是微弱的,而外来种和杂交种则对生态环境有严重威胁。 展开更多
关键词 大麻哈鱼生长激素基因 生态安全 基因污染
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大跨径连续箱梁桥静载试验研究 被引量:16
11
作者 耿波 张谢东 +1 位作者 沈成武 向木生 《武汉理工大学学报(交通科学与工程版)》 北大核心 2004年第5期755-758,共4页
以内蒙古磴口黄河大桥为工程背景 ,介绍了预应力混凝土连续箱梁桥静载试验的试验内容、实施方案、试验步骤以及结果的分析处理 .同时给出了部分主要控制截面的静力挠度和应变的试验观测数据 ,并通过与理论值进行分析比较 ,从中找出了产... 以内蒙古磴口黄河大桥为工程背景 ,介绍了预应力混凝土连续箱梁桥静载试验的试验内容、实施方案、试验步骤以及结果的分析处理 .同时给出了部分主要控制截面的静力挠度和应变的试验观测数据 ,并通过与理论值进行分析比较 ,从中找出了产生试验误差的原因 。 展开更多
关键词 连续梁桥 静载试验 试验研究
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鲤鱼血淋巴细胞培养及染色体制备条件探索 被引量:20
12
作者 耿波 梁利群 孙效文 《水产学杂志》 CAS 2003年第2期32-34,共3页
从鲤鱼侧线鳞处静脉采血于含有肝素的一次性注射器中 ,采用RPMI1 640全培养基进行体外淋巴细胞培养。通过对采血后细胞培养时间、秋水仙素浓度及加入时间、低渗时间及温度等条件的摸索 ,建立了较成熟的培养鱼类血淋巴细胞的实验方法。
关键词 鲤鱼 血淋巴 细胞培养 染色体 制备条件 培养时间 秋水仙素
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严重多发伤患者降钙素原对感染并发症的预测和辅助诊断价值 被引量:7
13
作者 耿波 徐祥 +1 位作者 梁华平 罗艳 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第15期1391-1393,共3页
目的 研究多发伤患者血浆降钙素原 (PCT)对伤后感染并发症的辅助和鉴别诊断价值。方法 应用双抗夹心免疫发光法测定 3 4例ISS≥ 16分的多发伤患者伤后血浆PCT含量 ,同时用ELISA法测定血浆TNF α、IL 6和C反应蛋白(CRP)含量 ,并与 11... 目的 研究多发伤患者血浆降钙素原 (PCT)对伤后感染并发症的辅助和鉴别诊断价值。方法 应用双抗夹心免疫发光法测定 3 4例ISS≥ 16分的多发伤患者伤后血浆PCT含量 ,同时用ELISA法测定血浆TNF α、IL 6和C反应蛋白(CRP)含量 ,并与 11例健康对照比较 ,应用ROC曲线进行统计学处理。结果 伤后早期未并发感染的多发伤患者PCT、TNF α、IL 6、CRP出现不同水平升高 ;在伤后早期未并发感染患者感染前血浆TNF α和CRP与非感染组相比无显著差异 ,待并发感染后则明显升高 ,而血浆PCT和IL 6在整个观察期间感染组均明显高于非感染组 ;对感染并发症的辅助诊断价值 ,PCT的灵敏度最高 ,有较高的特异性、阳性预测值和阴性预测值。结论 对多发伤伤后感染并发症的辅助诊断 ,这些指标均有一定的临床价值 ,其中PCT是最好的伤后感染并发症的预测和辅助诊断指标。 展开更多
关键词 多发伤 细胞因子 PCT 感染诊断
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三峡库区桥梁船撞主要影响参数的概率模型 被引量:12
14
作者 耿波 汪宏 王君杰 《同济大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第4期477-482,共6页
通过对三峡库区三座跨江大桥通航船舶的航迹进行实际观测,对船桥碰撞概率影响因素中的船舶航迹分布以及船撞力影响因素中的偏航角度分布和航速分布进行了统计研究,并采用拟合优度检验得到了各自的概率分布模型.船舶的航迹分布可采用正... 通过对三峡库区三座跨江大桥通航船舶的航迹进行实际观测,对船桥碰撞概率影响因素中的船舶航迹分布以及船撞力影响因素中的偏航角度分布和航速分布进行了统计研究,并采用拟合优度检验得到了各自的概率分布模型.船舶的航迹分布可采用正态分布模型,三峡库区可采用均值0.2w,标准差0.1w(w为航道宽度);船舶的偏航角分布可采用极值I型分布模型,三峡库区参数可取为0.314,4.354;船舶上下水航速分布可采用正态分布模型. 展开更多
关键词 船撞桥梁 概率模型 参数统计
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重庆东水门长江大桥设计关键技术 被引量:18
15
作者 耿波 王福敏 魏思斯 《桥梁建设》 EI CSCD 北大核心 2017年第4期90-95,共6页
重庆东水门长江大桥主桥为双塔单索面公轨两用半飘浮体系部分斜拉桥,跨径布置为(222.5+445+190.5)m。桥塔采用天梭造型。主梁采用2片桁双层桥面钢桁梁型式,桥面采用板桁组合体系。斜拉索采用单索面稀索体系,每根斜拉索由139束平行钢绞... 重庆东水门长江大桥主桥为双塔单索面公轨两用半飘浮体系部分斜拉桥,跨径布置为(222.5+445+190.5)m。桥塔采用天梭造型。主梁采用2片桁双层桥面钢桁梁型式,桥面采用板桁组合体系。斜拉索采用单索面稀索体系,每根斜拉索由139束平行钢绞线组成,最大索力15 000kN。索梁锚固采用在钢横梁中点位置设置大型钢锚箱的型式;索塔锚固采用外置式钢锚箱型式,钢锚箱通过剪力钉与分离式塔肢进行连接,索力由剪力钉、锚箱侧拉板和摩擦力共同承担。开发了用于超大吨位钢绞线斜拉索整体张拉的调索设备。开展板桁组合式桥面板的传力机理理论及试验、超大吨位钢绞线斜拉索的疲劳试验、索塔锚固区足尺模型试验等相关研究,验证了结构的安全性和合理性。 展开更多
关键词 公轨两用桥 部分斜拉桥 钢桁梁 板桁组合桥面 外置式钢锚箱 桥梁设计
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斑马鱼-新型的实验动物 被引量:10
16
作者 耿波 曹顶臣 +1 位作者 孙效文 欧阳红生 《水产学杂志》 CAS 2006年第2期105-108,共4页
斑马鱼(又名蓝条鱼、花条鱼、斑马担尼鱼,Brachydanio rerio),鲤科,原产自印度、盂加拉国,身体细长、尾部稍侧扁从微尖,臀鳍较长,尾鳍呈叉形。体侧有像斑马一样的纵向条纹,其背部橄榄色,条纹为银蓝色,在体侧从鳃盖后直伸到... 斑马鱼(又名蓝条鱼、花条鱼、斑马担尼鱼,Brachydanio rerio),鲤科,原产自印度、盂加拉国,身体细长、尾部稍侧扁从微尖,臀鳍较长,尾鳍呈叉形。体侧有像斑马一样的纵向条纹,其背部橄榄色,条纹为银蓝色,在体侧从鳃盖后直伸到尾,在臀鳍上也有与体侧相似的条纹。体长为4-6cm。雌雄鉴别较容易,雄鱼的蓝色条纹偏黄,间以柠檬色条纹;雌鱼的蓝色条绞偏蓝而鲜艳,间以银灰色条纹,身体比雄鱼丰满粗壮,各鳍均比雄鱼短小。饲养容易,对水质要求不严,水质为中性,水温以22-26℃为宜。 展开更多
关键词 斑马鱼 实验动物 动物模型
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桥梁技术状况预测的灰色马尔可夫链模型研究 被引量:9
17
作者 耿波 王君杰 张谢东 《武汉理工大学学报(交通科学与工程版)》 2007年第1期107-110,共4页
提出将灰色马尔可夫链用于桥梁的技术状况预测中,以解决传统的回归分析模型无法考虑不确定因素对结构技术状况的影响和概率型模型对单一桥梁预测的局限性问题,提出了将灰色模型GM(1,1)与马尔可夫链有机结合起来,利用二者的优点充分考虑... 提出将灰色马尔可夫链用于桥梁的技术状况预测中,以解决传统的回归分析模型无法考虑不确定因素对结构技术状况的影响和概率型模型对单一桥梁预测的局限性问题,提出了将灰色模型GM(1,1)与马尔可夫链有机结合起来,利用二者的优点充分考虑了桥梁技术状况的整体趋势和局部波动情况,最大限度地利用历史信息.通过对国外某桥的技术状况进行预测分析并与传统的预测方法进行对比,证实了该模型的预测精度. 展开更多
关键词 桥梁 技术状况 预测
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基于转化医学模式的高校图书馆参考咨询服务 被引量:4
18
作者 耿波 刘宁 +2 位作者 陈静 滕洪松 王玉忠 《中华医学图书情报杂志》 CAS 2017年第3期46-49,共4页
为提高高校图书馆的参考咨询服务层次和水平,分析了高校图书馆为转化医学研究提供参考咨询服务的必要性,从服务内容和服务方式两方面,阐述了青岛大学图书馆开展的基于转化医学的参考咨询服务实践,总结了存在的问题和不足。
关键词 转化医学 高校图书馆 参考咨询 信息服务
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粉房湾长江大桥船撞风险分析与设防标准研究 被引量:9
19
作者 耿波 徐龙 《桥梁建设》 EI CSCD 北大核心 2012年第A01期7-12,共6页
为确定粉房湾长江大桥设防船撞力标准,采用美国AASHTO规范方法和三概率参数积分路径方法对该桥进行船撞风险分析,计算桥梁的碰撞概率和年倒塌频率,并与可接受的风险准则进行比较;确定船撞设计代表船型,采用LS-DYNA软件对船舶碰撞桥梁进... 为确定粉房湾长江大桥设防船撞力标准,采用美国AASHTO规范方法和三概率参数积分路径方法对该桥进行船撞风险分析,计算桥梁的碰撞概率和年倒塌频率,并与可接受的风险准则进行比较;确定船撞设计代表船型,采用LS-DYNA软件对船舶碰撞桥梁进行数值模拟分析。分析结果表明:该桥在2010年、2020年和2050年通航密度下的船撞风险分别为4.05×10-6、2.02×10-5、7.06×10-5;P3、P4主墩的船撞设计代表船型均为5 000吨级;近期P3、P4主墩的设防船撞力可分别取38.68MN和27.57MN,远期可分别取38.68MN和24.19MN,P3、P4主墩抗力均满足船撞设防标准。 展开更多
关键词 斜拉桥 公轨两用桥 船撞分析 风险分析 数值模拟 有限元法
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黑龙江野鲤细菌人工染色体基因组文库构建 被引量:4
20
作者 耿波 关云涛 孙效文 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期165-172,共8页
为了开展鲤基因组研究,深入研究遗传连锁图谱遗传标记的定位及数量性状的定位和克隆,并最终为分子育种提供服务,本实验构建了鲤的BAC基因组文库。通过采集黑龙江野鲤(Cyprinus caxpio haematopterus)全血细胞制备琼脂糖凝胶包埋块的方... 为了开展鲤基因组研究,深入研究遗传连锁图谱遗传标记的定位及数量性状的定位和克隆,并最终为分子育种提供服务,本实验构建了鲤的BAC基因组文库。通过采集黑龙江野鲤(Cyprinus caxpio haematopterus)全血细胞制备琼脂糖凝胶包埋块的方法获得了高分子量(HMW)DNA。通过BamHⅠ部分酶切和PFGE电泳分离选择获得100~300kb的DNA片段,用电洗脱和透析的方法对产物进行浓缩和纯化。纯化的HMWDNA连接到大小为7.2kb的克隆载体pEZBAC上。为了评估构建的文库的质量使用一系列引物对文库进行了验证。本研究首次构建黑龙江野鲤的BAC文库,该库含有46656个克隆,插入片段大小在50~300kb之间,平均大小在100kb左右,覆盖鲤全基因组2.45倍,调取任一基因的概率为90%左右。获得的BAC克隆,保存在378块96孔板和27块384孔板中。建立了高效稳定的2步3维PCR筛选黑龙江野鲤BAC文库的方法。本实验为今后进一步进行鲤的功能基因定位及染色体步行、BAC-FISH等研究工作打下重要基础。 展开更多
关键词 黑龙江野鲤 细菌人工染色体(BAC) 基因组文库 超级池
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