胃印戒细胞癌临床病理特点的分析

目的:通过对胃印戒细胞癌和非印戒细胞癌患者病例资料的对比,了解胃印戒细胞癌的临床病理特点。方法:回顾性分析2000年1月至2014年12月间第四军医大学附属西京医院经术后病理确诊的5 481例胃癌患者的病例资料,根据组织学分型将其分为印戒细胞癌组和非印戒细胞癌组,对两组患者的临床病理资料进行对比分析。结果:印戒细胞癌与非印戒细胞癌在年龄、性别、肿瘤位置及大小、TNM分期、浸润深度、淋巴结转移情况上存在差异(P<0.05),在远处转移方面无显著差异(P>0.05)。早期胃印戒细胞癌的淋巴结转移率高于非印戒细胞癌。结论:胃印戒细胞癌多发生于年轻女性患者,好发部位以胃中下1/3部位多见,早期即可出现较高的淋巴结转移率。

胃黏膜肠化生的防治研究进展

胃黏膜肠化生（intestinal metaplasia,IM）被认为是胃癌最重要的癌前病变之一[1],其病理变化主要表现为胃黏膜慢性炎症和固有腺体萎缩,正常胃黏膜上皮细胞被潘氏细胞、肠型杯状细胞及吸收细胞所代替[2]。大量研究结果提示,IM的发生与年龄[3]、性别[4]、胃癌家族史[5]、吸烟[6]、饮酒[7]、高盐饮食、辛辣刺激性饮食、幽门螺杆菌（Hp）感染及胆汁反流[8]等因素密切相关。

体细胞无性系变异在枣育种中的应用展望

在枣组织与细胞培养过程中,体细胞无性系变异广泛存在,这为枣的品种改良和新品种选育提供了一个新的途径。各种人工诱导体细胞无性系变异方法的成功运用,使得枣育种的效率更高、可控性更强。现对体细胞无性系变异在枣育种方面的应用研究进展进行了综述,并通过对有关文献的分析,提出一些极具研究可行性的新方向;最后讨论了体细胞无性系变异在枣育种中存在的问题。

多糖基化位点抗体药物质控中基于单四级杆的多属性分析方法开发与验证

抗体药物已经成为生物制品的重要组成部分,此类产品具有复杂的质量属性,尤其是具有多糖基化位点的抗体药物,其质量控制面临更高挑战。虽然基于高分辨质谱的多属性分析方法(Multi-attribute method,MAM)已在抗体药物的质控中获得应用,但针对多糖基化位点抗体药物的快速且简便的检测技术仍较为少见。开发一种基于单四级杆的多属性分析方法,对于提升这类药物的质控效率具有重要意义。本研究以双糖基化位点的治疗类单抗CMAB009为模型。通过基于高分辨质谱的MAM对其进行了深入的预表征分析,成功获取了其主要质量属性。随后将预表征信息用于基于单四级杆的MAM开发。该方法在单次分析中有效监测了多种产品质量属性,其准确性通过基于高分辨质谱的方法进行了确认。随后我们对该方法进行了严格的方法学验证。验证结果显示,该方法具有良好的专属性、线性、准确度以及精密度等。基于单四级杆的MAM不仅有效地解决了多糖基化位点单抗药物的多属性检测难题,还展示了一定的方法普适性,为不同糖基化位点抗体药物的质量控制提供了一种新的、简便的技术方案。本研究结果预计将推动相关技术平台的改进和理念的更新,从而增强产品开发和质控的整体能力。

语用课堂“得意不忘言”的小妙招

在语文教学中,一篇文章无非是描述一个客观的人物、事件、景物或者自己的某些想法,抒发自己的感情。从平常听课来看,我们语文老师都注重了教会学生写字、用词、造句;了解文章的主要内容,分析文章的结构;即得文章的＂意＂。偶尔提及文章的写作特点即文章的＂形＂,也仅仅是提一提而已。阅读教学的课堂在很长时间停留在＂得意忘形＂或＂得意淡形＂阶段。

小学语文课外阅读分段指导、综合提高指导策略探微

《义务教育语文课程标准(2011年版)》指出:“课外阅读是学生学习语文由课内向课外的延伸。”“得益于课内,得法于课外”“语文教学三七开”,都强调了课外阅读的重要性。文章融合课标理念,结合自身教学实践,对低、中、高年级不同学段如何指导学生开展课外阅读以及发挥亲子阅读、阅读评价的作用做出了有效的探索。

枣育种技术述评

针对枣育种中存在的问题,阐述了相对于传统杂交育种的胚抢救技术、植物基因工程技术、多倍体诱导育种技术和原生质体融合这些新型育种技术在枣育种中的应用可能性及研究进展。

饮食和生活习惯与胃癌的相关性研究进展

胃癌是起源于胃粘膜上皮细胞的恶性肿瘤。近年来,虽然大部分国家胃癌发生率呈下降趋势,但我国胃癌的发病率和死亡率仍居高不下。胃癌的发生是多因素共同参与的复杂过程,如与种族、遗传、年龄、性别、幽门螺旋杆菌感染、饮食等因素相关,其中饮食及生活习惯被认为与胃癌的发生关系密切。而且早期胃癌的预后相对良好,降低发生率是防治胃癌的一项关键措施。因此,通过了解饮食及生活习惯因素与胃癌之间的关系,可以加强胃癌的一级预防,从而改善胃癌患者预后。本文就高盐、高脂饮食,蛋白质、蔬菜水果摄入以及吸烟、饮酒等因素与胃癌关系的研究进展进行综述,以期对胃癌的预防奠定一定基础。

反相液相色谱-质谱联用技术对重组腺相关病毒6型衣壳蛋白的表征分析

目的应用反相液相色谱-质谱(reversed phase liquid chromatography-mass spectrometry,RPLC-MS)联用技术对重组腺相关病毒6型(recombinant adeno-associated virus 6,rAAV6)载体的衣壳蛋白进行表征分析,包括一级结构和翻译后修饰(post-translational modification,PTM)。方法流动相A为0.1%二氟乙酸(difluoroacetic acid,DFA)的水溶液;流动相B为0.1%DFA的乙腈溶液;柱温:80℃;梯度洗脱10 min(0→10 min,流动相B 15%→45%)。ESI-Q-TOF质谱检测设为阳离子模式:质荷比扫描范围400~4000 m/z;扫描频率:2 Hz,锥孔电压:80 V;毛细管电压:3.0 kV;离子源温度:120℃。结果AAV衣壳蛋白VP1实测相对分子质量为81255.9,与理论值偏差为8.1 ppm;VP2蛋白实测相对分子质量为66062.9,与理论值偏差为3.8 ppm;VP3蛋白实测相对分子质量为59488.6,与理论值偏差为36 ppm。rAAV6酶切后质量肽图分析,样品序列覆盖率为89%,检测到的PTM主要包括脱酰胺、N-末端乙酰化、泛素化、磷酸化等,并未发现糖基化修饰位点。通过串联质谱分析确证了rAAV6衣壳蛋白N-末端和C-末端的序列以及N-末端的PTM。结论应用RPLC-MS联用技术分析了rAAV6衣壳蛋白的完整相对分子质量,并在肽段水平运用串联质谱深度分析了rAAV6衣壳蛋白的PTM,对AAV基因治疗制品的质量控制及生产工艺的提高具有一定意义。

盐酸小檗碱、阿莫西林、兰索拉唑、铋剂四联疗法根除幽门螺杆菌283例的临床研究

目的评价盐酸小檗碱、阿莫西林、兰索拉唑、铋剂新四联疗法根除H.pylori的有效性和安全性。方法前瞻性纳入2015年12月至2016年4月在门诊就诊的H.pylori感染初治患者566例，分为观察组（盐酸小檗碱＋阿莫西林＋兰索拉唑＋胶体酒石酸铋）和对照组（克拉霉素＋阿莫西林＋兰索拉唑＋胶体酒石酸铋）各283例，两组疗程均为14 d。治疗结束后4周，比较两组患者的H.pylori根除率和不良反应发生率。统计学方法采用t检验和卡方检验。结果两组患者基线特征包括性别、年龄、BMI、症状评分等差异均无统计学意义（P均〉0.05）。治疗结束后4周，观察组和对照组H.pylori根除率根据符合方案分析（PP）分别为87.5%（244/279）和87.1%（242/278），根据意向性分析（ITT）分别为86.2%（244/283）和85.5%（242/283），差异均无统计学意义（χ^2=0.021、0.058，P均〉0.05），两组整体不良反应发生率分别为12.5%（35/279）和16.5%（46/278），差异无统计学意义（χ^2=1.795, P=0.180）。结论盐酸小檗碱联合阿莫西林的含铋剂新四联方案与克拉霉素联合阿莫西林的含铋剂标准四联方案均能有效根除H.pylori感染，新方案可作为西安地区或克拉霉素高耐药地区的一线根除方案。

黄连素四联方案补救治疗幽门螺杆菌感染的有效性和安全性

目的:探索黄连素四联方案用于幽门螺杆菌感染根除失败患者补救治疗的有效性及安全性。方法:将经四联方案初次根除治疗失败并自愿接受补救治疗的130例患者按纳入顺序,以1:1的比例分配治疗,随机接受14天黄连素四联(埃索美拉唑20mg+胶体果胶铋200 mg+阿莫西林1000 mg,2/d+黄连素300 mg 3/d)或四环素四联(埃索美拉唑20 mg+胶体果胶铋200 mg+四环素750 mg+呋喃唑酮100 mg,2/d)方案的治疗。所有患者均于治疗14天及治疗结束至少28天后随诊,详细记录患者症状及不良反应情况。治疗结束至少28天后进行13C尿素呼气试验来判断幽门螺杆菌根除情况。结果:65例接受黄连素四联根除治疗,65例接受四环素四联方案治疗。两组分别有6例和4例患者因不良反应服药依从性小于80%,其余患者均完成了14天的治疗。黄连素组和四环素组的幽门螺杆菌根除率ITT分析分别为76.9%(50/65)和81.5%(53/65),P=0.520;PP分析分别为84.7%(50/59)和86.9%(53/61),P=0.739。黄连素组和四环素组不良事件总体发生率分别为49.2%和41.5%,P=0.370。结论:黄连素四联疗法用于幽门螺杆菌感染的二次根除治疗,根除率较高,未明显增加不良事件发生率,是有效及安全的补救治疗方案。

糖蛋白/糖肽的分离富集方法

蛋白质糖基化是一种重要的翻译后修饰,糖基化对蛋白质的结构和功能有着重要的影响。目前,作为蛋白质组学的一个组成部分,糖蛋白质组学是备受关注的研究热点,而从复杂的生物样品体系中富集糖蛋白/糖肽是蛋白质糖基化研究的重点和难点。本文就糖蛋白/糖肽分离富集方法的研究进展和应用作了简要概述。这些方法包括常用的凝集素亲和法、硼酸法、肼化学法和亲水作用法,还包括分子筛法、强阳离子交换法等新方法。

转录因子SOX2对胃癌干细胞自我更新、增殖和迁移的影响

目的:检测SOX2在胃癌组织中的表达,探讨SOX2对胃癌干细胞自我更新、增殖和转移能力的影响。方法:采用免疫组化检测SOX2在胃癌及癌旁组织中的表达情况。通过肿瘤球形成实验富集、分离胃癌干细胞。构建SOX2过表达慢病毒并感染胃癌干细胞中,通过实时定量PCR和western bolt检测感染慢病毒后胃癌干细胞中SOX2表达情况。分别利用肿瘤球形成实验检测SOX2对胃癌肿瘤干细胞自我更新能力的影响,CCK-8实验检测SOX2对胃癌干细胞增殖能力的影响,流式细胞术分析SOX2对胃癌干细胞的细胞周期的影响,Transwell实验检测SOX2对胃癌干细胞转移能力的影响。结果:SOX2在胃癌组织中表达显著低于癌旁组织。肿瘤球形成实验能够有效富集胃癌细胞SGC-7901和BGC-823的干细胞。慢病毒载体感染能够显著增强SOX2在胃癌干细胞中的表达。过表达SOX2能够抑制胃癌干细胞的自我更新、增殖和侵袭能力。结论:SOX2在胃癌中发挥抑癌基因的功能,其机制可能通过抑制肿瘤干细胞的自我更新、增殖和侵袭转移能力而抑制胃癌的发生发展。

液质联用对重组胰高血糖素样肽-1-Fc融合蛋白中的制品相关蛋白进行定性定量分析

目的：对重组胰高血糖素样肽-1-Fc融合蛋白（rGLP-1-Fc）的制品相关蛋白进行定性及定量分析。方法：利用液质联用法,对r GLP-1-Fc原液中制品相关蛋白的修饰类型进行鉴定;通过胰蛋白酶酶切液质肽图的方法,对修饰位点进行鉴定;采用反相超高效液相色谱法,测定3批原液中制品相关蛋白的比例。结果：该蛋白原液中主要存在3种制品相关蛋白;液质联用检测结果显示：1种为氧化及糖化的修饰产物,另外2种为一条二硫键解链导致的变异体;液质肽图分析发现氧化及糖化发生在第28位赖氨酸残基;对3批原液进行了检测,3种制品相关蛋白的平均含量分别为（2.37±0.04）%、（9.07±0.20）%和（4.03±0.07）%。结论：利用液质联用技术对rGLP-1-Fc原液中的制品相关蛋白进行了初步的定性、定量分析,测定结果可为同类产品的制品相关蛋白分析提供技术支持。