香芪生乳合剂的HPLC指纹图谱建立

目的:建立香芪生乳合剂HPLC-DAD法指纹图谱分析方法。方法:采用ACE EXCEL C_(18)-AR(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,体积流量为1.0 mL/min,柱温为35℃,检测波长为203 nm,进样量为10μL。采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(版本2004A)”分别对10批香芪生乳合剂的指纹图谱进行相似度评价,将对照图谱与单味药材进行色谱峰匹配,确定共有峰归属,结合混合标准溶液图谱对其共有峰成分进行指认。结果:10批香芪生乳合剂指纹图谱与对照图谱的相似度大于0.96,有36个共有峰,所有共有峰都能归属到单味药材。结论:建立的香芪生乳合剂HPLC指纹图谱可体现该复方中药制剂中多类成分的整体特征,为该制剂的质量控制提供方法依据。

显齿蛇葡萄醇提物含药血清对脂多糖诱导巨噬细胞RAW264.7炎症模型的抗炎作用

目的:采用血清药物化学的研究方法,分析显齿蛇葡萄醇提物(AGEE)大鼠口服后的入血成分,基于入血成分研究AGEE含药血清对脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞炎症的抗炎作用。方法:12只SD大鼠随机分为AGEE组和空白组,分别给予AGEE(5.4 g/kg)和纯净水灌胃,以制备含药血清和空白血清,采用HPLC-DAD分析其含药血清色谱图,通过与空白血清色谱图对比分析,探讨AGEE的体内移行成分。以RAW264.7细胞为研究对象,将细胞分为5%或15%空白血清组,5%或15%空白血清+LPS组,以及5%或15%含药血清+LPS组,按相应条件培养24 h后,采用细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK-8)法检测每组细胞存活率;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组细胞中TNF-α、IL-6、IL-10水平。结果:AGEE含药血清与空白血清比较,发现16个色谱峰,其中9种为原型成分入血,7种可能是AGEE在大鼠体内产生的代谢物。CCK-8检测结果表明,各组细胞按上述条件培养24 h后均未发现毒性。5%或15%空白血清+LPS组细胞中TNF-α、IL-6、IL-10水平高于5%或15%空白血清组(P<0.01或P<0.05)。15%含药血清+LPS组细胞中TNF-α水平低于5%空白血清+LPS组(P<0.05);5%或15%含药血清+LPS组细胞IL-6水平低于5%或15%空白血清+LPS组(P<0.01);5%或15%含药血清+LPS组细胞IL-10水平高于5%或15%空白血清+LPS组(P<0.01或P<0.05)。结论:建立了AGEE含药血清HPLC-DAD分析方法,明确了其活性物质基础。AGEE含药血清可降低LPS诱导RAW264.7细胞炎症反应。

高效液相色谱法测定盆炎灵合剂中的阿魏酸、延胡索乙素、芍药苷、丹酚酸B及原儿茶醛含量

目的采用高效液相色谱法同时测定盆炎灵合剂中阿魏酸、延胡索乙素、芍药苷、丹酚酸B和原儿茶醛等成分的含量。方法 Hypersil ODS2色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;流速：1.0 m L·min^-1;流动相A为乙腈,流动相B为0.1%磷酸溶液,梯度洗脱。结果阿魏酸、延胡索乙素、芍药苷、丹酚酸B和原儿茶醛质量浓度分别在0.008 4-0.168 4 mg·mL^-1（r=0.999 9）、0.023 6-0.471 2 mg·mL^-1（r=0.999 3）、0.030 4-0.304 0 mg·mL^-1（r=0.999 7）、0.031 3-0.625 4 mg·mL^-1（r=0.999 9）、0.010 1-0.202 8 mg·mL^-1（r=0.999 9）与其峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率分别为103.9%、96.5%、96.8%、98.7%和101.5%,RSD值分别为1.7%、2.0%、2.5%、2.0%和2.2%（n=6）。结论该方法线性、重复性、精密度、加样回收率均符合要求,可作为盆炎灵合剂的含量控制方法。

HPLC法测定地肤子中芦丁和槲皮素的含量

目的建立测定地肤子药材中芦丁和槲皮素含量的方法。方法采用高效液相色谱法结合二极管阵列检测器，选用AgilentTC—C18色谱柱，流动相为乙腈-0．2％磷酸（梯度洗脱），检测地肤子中芦丁和槲皮素的含量。结果芦丁和槲皮素的线性范围分别为0．0017-0．0532mg／mL和0．0011-0．0340mg／mL，平均加样回收率分别为98．5％、97．88％（RSD=1．57％、1．87％）。芦丁和槲皮素的平均含量分别为0．0592、0．0215mg／g。结论该方法简单易行，稳定性和重复性好，可用于地肤子中芦丁和槲皮素的含量测定。

正交试验法优选强肾益精颗粒提取工艺

目的优选强肾益精颗粒提取工艺。方法以出膏率、松果菊苷转移率和总多糖提取量为指标,加水量、提取次数、提取时间为影响因素,采用L9(34)正交试验法,综合加权评分,优选强肾益精颗粒的提取工艺。结果处方最佳提取工艺为8倍量水,煎煮3次,每次为60 min。结论该优选的工艺合理,有效成分提取率高,稳定可行。

薄层色谱和高效液相色谱用于矮地茶多糖的单糖组成分析

目的分析矮地茶多糖中的单糖组成及摩尔比值。方法采用硫酸水解多糖,1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生化高效液相色谱法和薄层色谱法同时分析矮地茶多糖的单糖组成和摩尔比,Agilent TC-C18色谱柱,流动相:乙腈-p H为7.0的磷酸缓冲液(20∶80,0.1%),检测波长:250 nm,流速:1 m L/min;柱温:25℃。结果薄层色谱法和高效液相色谱法结果皆表明矮地茶多糖由葡萄糖(Glu)和半乳糖(Gal)组成,高效液相色谱法显示矮地茶多糖中Glu和Gal的摩尔比值约为1∶2.36。结论薄层色谱法可用于矮地茶多糖的单糖组成的快速鉴别,方法快速、准确;高效液相色谱法可用于矮地茶多糖中单糖组成的鉴别和摩尔比值测量,方法简单、灵敏、分离效率高。

盆炎灵颗粒剂成型工艺及辅料筛选的研究

目的优选盆炎灵颗粒剂的最佳处方及成型工艺条件。方法采用正交试验与综合评分法优选盆炎灵颗粒成型工艺条件,并考察不同辅料对于颗粒的吸湿性、成型性、堆密度、休止角和溶化性的影响,优选出盆炎灵颗粒最佳辅料。结果最佳辅料为糊精,最佳制备工艺为浸膏干粉与糊精比例为1∶1,乙醇浓度60%,乙醇用量为0.2ml·g^(-1)。成品颗粒临界相对湿度为63.08%。结论该颗粒剂所选辅料合理,成形制备工艺可行,本研究为盆炎灵颗粒制备工艺条件的确定及生产环境的控制提供了科学的依据。

地肤子总黄酮对二硝基氯苯致大鼠接触性皮炎的抗炎作用

目的研究地肤子总黄酮(FFK)对二硝基氯苯(DNBC)致大鼠变态反应性接触性皮炎(ACD)的抗炎作用。方法SPF级SD大鼠40只,雌雄各半,按随机数字表法分为五组,每组8只,即空白对照组、ACD模型组、阳性药对照组(醋酸泼尼松龙2.5mg/kg)、FFK低剂量组(75mg/kg)、FFK高剂量组(150mg/kg);以DNBC建立大鼠ACD模型后,予以FFK灌胃给药,连续10d。观察皮肤变态性反应和肿胀度,同时测定血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)和γ干扰素(IFN-γ)表达水平,并通过免疫组化检测耳组织中核因子κBp65(NF-κBp65)表达水平。结果与空白对照组比较,ACD模型组大鼠皮肤肿胀度明显增高,血清中IL-6、IFN-γ含量与耳组织中NF-κBp65蛋白表达明显增高,而血清中IL-10含量明显降低(P<0.01);与ACD模型组比较,FFK低剂量组与FFK高剂量组大鼠的耳肿胀度、血清中IL-6、IFN-γ含量、耳组织中NF-κBp65蛋白表达水平显著降低(P<0.01),而血清中IL-10含量显著升高(P<0.01)。结论FFK对于DNBC致大鼠ACD具有抗炎作用,其机制可能是通过抑制NF-κBp65蛋白发挥作用。

不同产地炒王不留行HPLC指纹图谱及含量测定研究

目的采用高效液相色谱法建立炒王不留行的指纹图谱,同时对不同产地饮片中的王不留行黄酮苷含量进行测定。方法梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1);流动相A为乙腈,流动相B为水,梯度洗脱程序为0~10.0 min,5%→10%A;10.0~85.0 min,10%→30%A;85.0~90.0 min,30%A;检测波长280 nm。结果建立了炒王不留行的HPLC指纹图谱,共发现14个共有峰,其中5号峰为王不留行黄酮苷,不同产地的炒王不留行中所含王不留行黄酮苷的含量在0.20%~0.45%。结论建立的炒王不留行HPLC指纹图谱可用于饮片质量控制,不同产地的饮片中王不留行黄酮苷含量不同。

HPLC法同时测定胎乐颗粒中5种成分含量

目的建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定胎乐颗粒中5种成分(甘草苷、金丝桃苷、黄芩苷、黄芩素和五味子醇甲)的含量。方法梯度洗脱,乙腈-0.1%磷酸水溶液为洗脱体系,检测波长270 nm,总流速1.0 mL/min,进样量10 μL,柱温为30℃。结果甘草苷、金丝桃苷、黄芩苷、黄芩素和五味子醇甲分别在1.96~19.58 μg/mL(r = 0.9999)、1.65~16.52 μg/mL(r = 0.9998)、11.71~117.12 μg/mL(r = 0.9999)、1.63~16.26 μg/mL(r = 0.9999)和1.23~12.28 μg/mL(r = 0.9999)范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率(RSD)分别为101.75%(0.98%)、102.32%(1.70%)、98.03%(1.35%)、99.52%(1.54%)和100.12%(1.27%)。结论该方法简单易行,可用于胎乐颗粒的质量控制。

强肾益精颗粒对肾阳虚小鼠的影响

目的:研究强肾益精颗粒对氢化可的松致小鼠肾阳虚证的影响。方法:采用氢化可的松致小鼠肾阳虚模型,观察强肾益精颗粒对肾阳虚小鼠的影响。结果:强肾益精颗粒能增加肾阳虚模型小鼠体质量、增加小鼠自主活动次数和负重游泳时间,能显著增加肾阳虚小鼠胸腺指数,对脾指数亦有提高趋势。结论:强肾益精颗粒对肾阳虚小鼠有壮阳作用,并能提高其免疫功能。

阴炎净洗液HPLC-DAD双波长指纹图谱研究

目的建立阴炎净洗液的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱分析方法。方法依利特ODS2色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流速:1.0 mL/min;流动相A:乙腈,流动相B:0.1%磷酸溶液,梯度洗脱,柱温为25℃,检测波长选择210 nm和280 nm。结果建立了阴炎净的HPLC指纹图谱,标示出33个共有色谱峰,同时对其中5个色谱峰进行归属。结论双波长指纹图谱实现了较为全面的评价,建立的方法灵敏、准确、简单,分离效果好,可作为阴炎净洗液质量评价的方法。

阴炎净洗剂对大鼠接触性皮炎湿疹的防治作用及机制研究

目的:研究阴炎净洗剂对大鼠接触性皮炎湿疹(ACD)的防治作用及机制。方法:将60只大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组(地塞米松)和阴炎净洗剂高、中、低剂量组(分别给予2倍浓缩液、1倍浓缩液和原液),每组10只。除空白对照组外,其余各组大鼠均于腹、背(2 cm×2 cm)部涂布二硝基氯苯复制ACD模型。从造模第9天起,各给药组大鼠背部涂布相应药物100μL,空白对照组和模型对照组大鼠涂布纯化水100μL,每天给药3次,连续10 d。给药结束后,对皮肤变应性反应进行评分并测定皮肤肿胀度;采用苏木精-伊红染色观察皮肤病理变化;采用酶联免疫吸附法测定血清中白细胞介素2(IL-2)、IL-4、IL-6和干扰素γ(IFN-γ)含量。结果:与空白对照组比较,模型对照组大鼠变应性反应评分和皮肤肿胀度均显著升高(P<0.01);电镜下可见表皮结痂坏死、真皮层损伤严重、毛囊坏死;血清中IL-2、IL-4、IFN-γ含量显著增加(P<0.05或P<0.01),IL-6含量略有增加(P>0.05)。与模型对照组比较,除阴炎净洗剂低剂量组大鼠皮肤肿胀度、血清中IL-4含量以及各给药组大鼠血清中IL-6含量改善不显著外,其余指标均显著改善(P<0.05或P<0.01)。结论:阴炎净洗剂对大鼠ACD具有一定的防治作用,其机制可能与降低血清中IL-2、IL-4、IFN-γ含量有关。

响应面优化矮地茶多糖提取工艺研究

目的:优化矮地茶多糖提取工艺。方法:采用苯酚-硫酸法建立矮地茶中糖含量测定方法,同时以糖含量为指标,采用响应面法对矮地茶多糖提取温度、提取时间、料液比3个影响因素进行工艺优化。结果:建立了矮地茶多糖提取模型,回归模型显著;提取优化条件为:提取温度90℃,提取时间1.8 h,料液比1∶32。结论:该提取工艺合理,矮地茶多糖的提取率高。

基于氧化应激损伤保护的玉竹多糖降糖活性机制研究

目的:探究玉竹多糖(POP)的降糖活性,初步从氧化应激损伤保护作用方面阐述其改善胰岛素抵抗的作用机制。方法:CCK-8法检测POP对正常和H2O2诱导的氧化应激损伤HepG2细胞活力的影响;随机分成正常对照组、胰岛素抵抗模型组(IR)、罗格列酮组、低剂量POP组和高剂量POP组,探究POP对IR细胞葡萄糖消耗能力的影响;检测POP对IR细胞超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)水平及PI3K和PPARγ蛋白表达水平的影响。结果:POP对正常培养的HepG2细胞活力没有影响(P>0.05),10 mg/mL POP能显著改善氧化应激损伤细胞的存活率(P<0.05)。POP能显著增加IR细胞的葡萄糖消耗(P<0.05),同时升高SOD和GSH水平(P<0.01),改善MDA蓄积(P<0.01),使IR细胞的PI3K和PPARγ的蛋白表达水平均上调(P<0.05)。结论:POP能改善胰岛素诱导的HepG2细胞的葡萄糖消耗水平,同时会激活胰岛素抵抗细胞氧化应激损伤保护,POP可能通过调节PI3K和PPARγ信号调控通路产生改善IR的生物活性。

PDCA用于提高医院制剂微生物限度检查合格率

目的:探讨PDCA(Plan, Do, Check, Action)循环在提高医院制剂微生物限度检查合格率中的应用,确保产品质量和用药安全。方法:对我院医院制剂(洗剂和合剂)成品和半成品微生物限度检查结果进行统计分析,采用PDCA循环管理方法,以微生物限度检查合格率为评价指标,对实施PDCA循环前后3个月的微生物限度检查结果进行比较。结果:2016年12月至2017年5月,制剂成品合格率由最低62.50%提高到100%。结论:PDCA循环管理模式应用于医院制剂质量管理过程,有效提高了微生物限度检查合格率,可在医院制剂生产管理过程中推广运用。

HPLC法同时测定强肾益精颗粒中四种成分含量研究

目的:建立同时测定强肾益精颗粒中王不留行黄酮苷、松果菊苷、金丝桃苷及毛蕊花糖苷等4种成分含量的方法。方法:采用HPLC法,色谱柱为Agilent TC-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为0.1%磷酸溶液-乙腈,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min;检测波长为330 nm;柱温为25℃;进样量为10μL;检测时间为90 min。结果:王不留行黄酮苷、松果菊苷、金丝桃苷和毛蕊花糖苷分别在11.6~116.6μg/mL(R^2=0.999,7)、15.1~151.4μg/mL(R2=0.999,4)、6.0~60.0μg/mL(R2=0.999,5)、3.3~33.0μg/mL(R^2=0.999,8)浓度范围内与其峰面积呈良好的线性关系;王不留行黄酮苷、松果菊苷、金丝桃苷及毛蕊花糖苷平均加样回收率分别为100.1%、102.0%、99.3%和98.1%,RSD%值分别为1.33%、1.09%、1.76%和1.37%。结论:该方法结果准确、重复性好,可用于强肾益精颗粒主要成分含量控制。

6种医院制剂中羟苯乙酯含量测定方法研究

目的:建立测定我院六种医院制剂中羟苯乙酯含量的方法。方法:采用HPLC法,选用二极管阵列检测器及Hypersil ODS2(5μm 4.6 mm×250 mm)色谱柱;流动相:乙腈-水(40:60);流速:1 m L/min;检测波长:254 nm;柱温:25℃。结果:羟苯乙酯浓度在9.368μg/m L^234.2μg/m L范围内线性关系良好(r=0.9999)。结论:所建立方法简便、准确、重复性好,可以广泛适用于医院制剂中羟苯乙酯的含量测定。

响应面优化丹参乙醇提取工艺

目的:优化丹参的乙醇提取工艺。方法:采用HPLC法检测丹参酮ⅡA的含量,同时以丹参酮ⅡA为指标,采用响应面法对乙醇浓度、提取时间、料液比3个影响因素进行优化。结果:建立了丹参乙醇提取模型,回归模型显著;提取优化条件为:乙醇浓度86.00%,提取时间44 min,料液比1∶17。结论:该提取工艺合理,丹参酮ⅡA的提取率高。

地肤子高效液相色谱指纹图谱及聚类分析研究

目的:建立地肤子的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。方法:选择安捷伦TC-C_(18)色谱柱,二极管阵列检测器(DAD),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,总流速1 m L/min,检测波长355 nm,柱温25℃,进样量为10μL。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版》对10批次的地肤子进行相似度分析,选择共有峰的相对峰面积对样品进行聚类分析。结果:HPLC指纹图谱共发现19个共有峰,其中14号峰为芦丁。10批次地肤子与对照图谱相似度均>0.95。聚类分析结果显示,地肤子药材可归为3类,相同产地药材可归为1类,说明不同产地药材中成分的含量有明显区别。结论:该方法稳定性、重复性良好,可用于地肤子药材的质量评价和鉴定。