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棕色棉DFR基因的克隆与生物信息学分析 被引量:5
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作者 肖向文 朱奇朗 +6 位作者 刘海峰 王俊铎 罗城 曾闻 梁亚军 龚兆龙 李晓波 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期88-95,共8页
花色素苷是影响花色的主要色素,二氢黄酮醇4-还原酶(DFR)基因是花色素苷生物合成途径的关键酶基因。通过同源克隆策略,以新彩棉6号(XC-6)纤维的RNA以及DNA为模板克隆得到GhDFR基因的CDS全长编码序列及带有内含子的基因组序列,并进行了... 花色素苷是影响花色的主要色素,二氢黄酮醇4-还原酶(DFR)基因是花色素苷生物合成途径的关键酶基因。通过同源克隆策略,以新彩棉6号(XC-6)纤维的RNA以及DNA为模板克隆得到GhDFR基因的CDS全长编码序列及带有内含子的基因组序列,并进行了生物信息学分析。序列分析结果显示,该基因含有6个外显子,5个内含子结构,其cDNA包含一个1 020 bp的开放阅读框,编码355个氨基酸,其氨基酸序列包含具有高度保守性的NADP(H)的结合位点以及底物特异性结合位点。推定的GhDFR蛋白质分子量为39.65 kD,等电点为5.67。该蛋白氨基酸序列同毛果杨、葡萄、天竺葵等物种DFR蛋白显示出较高同源性,而系统进化分析结果表明其与天竺葵、芍药DFR亲缘关系较近。氨基酸序列分析预测表明,GhDFR基因所编码的蛋白不具备信号肽区段,无明显跨膜区域,不属于分泌蛋白,可能为亲水性蛋白,定位于细胞质的可能性最高,其主要二级结构元件为α-螺旋和无规则卷曲。GhDFR属于NADB-Rossmann superfamily。 展开更多
关键词 二氢黄酮-4-还原酶(DFR) 天然彩色棉 基因克隆 花色素苷
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5个骨干籼型恢复系再生能力的比较研究 被引量:11
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作者 肖向文 李平 +4 位作者 杨正林 钟秉强 侯磊 李德谋 何光华 《西南农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2005年第3期378-381,共4页
以5个有重要育种价值的籼型恢复系为材料,研究了影响籼稻愈伤组织诱导、生长和再生的几个重要因素。结果表明,对于籼稻品种而言,MS,NB培养基都是较为适合的培养基类型,愈伤诱导率都比较高,且愈伤质量较好,具有较强的再生能力,但是不同... 以5个有重要育种价值的籼型恢复系为材料,研究了影响籼稻愈伤组织诱导、生长和再生的几个重要因素。结果表明,对于籼稻品种而言,MS,NB培养基都是较为适合的培养基类型,愈伤诱导率都比较高,且愈伤质量较好,具有较强的再生能力,但是不同品种对不同培养基的反应有所不同,籼稻品种之间再生能力存在极大差异;分化培养基中适宜的激素配比为BAP3mg/L+NAA0.5mg/L;适当的干燥处理可以极大地提高愈伤组织的再生能力。还从这5个品种中初步确定了3个再生频率较高的品种,作为进一步研究籼稻组织培养特性的材料,并进行下一步的遗传转化试验。 展开更多
关键词 籼稻 组织培养 再生
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‘新陆早 33 号’棉花转基因体系建立及 AtPGIP1 基因的导入 被引量:3
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作者 肖向文 刘海峰 +6 位作者 李雪源 曹艳艳 王俊铎 黄芳 郑巨云 谢旗 李晓波 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期658-664,共7页
利用生物技术方法对棉花进行遗传改良主要限于有效的遗传转化系统。以新疆主栽优良陆地棉品种‘新陆早33号’为材料,利用下胚轴作为外植体对影响农杆菌介导的棉花遗传转化及体细胞胚胎发生的因素进行研究,成功建立了除草剂Basta筛选的... 利用生物技术方法对棉花进行遗传改良主要限于有效的遗传转化系统。以新疆主栽优良陆地棉品种‘新陆早33号’为材料,利用下胚轴作为外植体对影响农杆菌介导的棉花遗传转化及体细胞胚胎发生的因素进行研究,成功建立了除草剂Basta筛选的棉花遗传转化技术体系。同时将植物抗病相关基因多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因AtPGIP1导入棉花,经过对再生转化植株的PCR鉴定,初步证明外源基因已经整合到棉花基因组。研究发现:Basta是棉花遗传转化中很有效的筛选剂,低浓度Basta(2.5mg/L)就能够获得很好的筛选效果;较低的共培养温度(20℃)及合适的农杆菌浓度(OD600=0.5)有助于提高转化效率。该研究结果表明,‘新陆早33号’具备作为棉花优良遗传转化受体的基本特征,研究中获得的15株AtPGIP1转基因植株经PCR分子检测均为阳性植株。该研究为新疆棉区棉花分子生物学研究及转基因育种研究奠定了重要基础。 展开更多
关键词 棉花 组织培养 体细胞胚胎发生 遗传转化
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新疆石榴皮总多酚有效部位的抗氧化、抗菌及抗肿瘤活性 被引量:35
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作者 陆雪莹 热依木古丽·阿布都拉 +5 位作者 李艳红 肖向文 阿吉艾克拜尔·艾萨 李晓波 游雪甫 娄人慧 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第9期26-30,共5页
目的:研究和评价新疆石榴皮总多酚粗提物和有效部位在体外的生物活性。方法:采用DPPH法、平皿二倍稀释法和MTT法分别对总多酚粗提物和有效部位进行抗氧化活性、抗菌和体外抗肿瘤活性测定。结果:石榴皮总多酚提取物清除DPPH自由基的效果... 目的:研究和评价新疆石榴皮总多酚粗提物和有效部位在体外的生物活性。方法:采用DPPH法、平皿二倍稀释法和MTT法分别对总多酚粗提物和有效部位进行抗氧化活性、抗菌和体外抗肿瘤活性测定。结果:石榴皮总多酚提取物清除DPPH自由基的效果显著,并且有效部位清除能力优于粗提物;石榴皮总多酚有效部位对临床常见致病菌有明显的抑制作用,具有广谱性,并且对一些临床耐药性的致病菌也有抑制作用;同粗提物相比,总多酚有效部位有较好的抗肿瘤活性。结论:石榴皮中的总多酚有效部位具有较好的抗氧化、抗菌及抗肿瘤活性。 展开更多
关键词 石榴皮 总多酚 抗氧化性 抗菌活性 抗肿瘤
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盐芥ICE1转录因子的克隆及生物信息学分析 被引量:16
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作者 轩春雷 肖向文 +1 位作者 李晓波 祝建波 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期108-114,共7页
ICE1基因编码一个MYB类型的碱性螺旋-环-螺旋(bHLH)转录因子,在冷胁迫条件下调节CBF基因的表达,能够提高植物抗寒性。利用盐芥5′EST序列和拟南芥ICE13′UTR保守序列设计引物,从盐芥基因组中克隆得到了1个2525bp的基因xhICE。生物信息... ICE1基因编码一个MYB类型的碱性螺旋-环-螺旋(bHLH)转录因子,在冷胁迫条件下调节CBF基因的表达,能够提高植物抗寒性。利用盐芥5′EST序列和拟南芥ICE13′UTR保守序列设计引物,从盐芥基因组中克隆得到了1个2525bp的基因xhICE。生物信息学分析,表明该基因具有4个外显子,4个内含子,外显子/内含子边界符合经典的GT-AG规则。由此推导的cDNA包含一个1500bp的开放阅读框,编码500个氨基酸。与拟南芥ICE1相比,二者的内含子具有相同的类型和相对保守的位置,在核酸水平与氨基酸水平高度同源,并且具有相同的bHLH结构域。以上分析都表明,xhICE基因可能是盐芥ICE1基因,涉及抗寒相关的CBF转录调控途径。 展开更多
关键词 转录因子 表达序列标签 生物信息学 ICE1
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海岛棉GbMFT1基因的克隆及表达分析 被引量:7
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作者 顾超 李超 +3 位作者 李晓波 肖向文 崔百明 黄先忠 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1391-1399,共9页
通过RT-PCR和RACE技术,从新疆海岛棉品种新海14中克隆得到了一个MFT(MOTHER OF FT AND TFL1)类似基因,命名为GbMFT1基因(GenBank登录号为KC513744)。GbMFT1基因的开放阅读框(ORF)为528 bp,编码175个氨基酸的蛋白,含一个磷脂酰乙醇胺结... 通过RT-PCR和RACE技术,从新疆海岛棉品种新海14中克隆得到了一个MFT(MOTHER OF FT AND TFL1)类似基因,命名为GbMFT1基因(GenBank登录号为KC513744)。GbMFT1基因的开放阅读框(ORF)为528 bp,编码175个氨基酸的蛋白,含一个磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PEBP)结构域。GbMFT1蛋白的羧基端含有MFT蛋白都含有的脯氨酸。系统进化树分析表明GbMFT1编码产物与葡萄、番茄亲缘关系较近,属于同一进化分支。实时荧光定量PCR分析表明,GbMFT1基因在棉花的不同组织中均有表达,在花瓣中的表达量较高;在纤维发育的不同时期中均有表达,在开花后2 d的胚珠、9 d的纤维中表达量最高。半定量RT-PCR结果表明,GbMFT1基因在刚萌发的种子中表达量高,用不同浓度的ABA处理种子后其表达变化不明显,表明GbMFT1基因的表达不受ABA的调节。 展开更多
关键词 GbMFT1基因 早花 表达分析 成花素
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不同色彩矮牵牛DFR基因的克隆与生物信息学分析 被引量:9
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作者 朱奇朗 李晓波 +4 位作者 肖向文 李雪源 黄先忠 郑巨云 艾先涛 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期68-76,共9页
二氢黄酮醇4-还原酶基因(DFR)是花色素合成途径中的一个关键基因。以新疆种植的白、红和蓝色矮牵牛为试验材料,通过同源克隆的方法从花中克隆到3个完整的DFR基因的全长编码序列(CDS),与已知的矮牵牛DFR基因(GenBank登录号:X15537)序列... 二氢黄酮醇4-还原酶基因(DFR)是花色素合成途径中的一个关键基因。以新疆种植的白、红和蓝色矮牵牛为试验材料,通过同源克隆的方法从花中克隆到3个完整的DFR基因的全长编码序列(CDS),与已知的矮牵牛DFR基因(GenBank登录号:X15537)序列的相似性分别为97.79%、96.59%和97.99%,分别命名为PhDFR1,PhDFR2和PhDFR3;3个基因编码380个氨基酸,同已知矮牵牛DFR基因编码的蛋白(GenBank登录号:CAA33544)的同源性分别是95.53%、94.21%和95.79%;生物信息学分析表明,3个蛋白均具有NADB-Rossmann家族中高度保守的NADPH结合位点、底物特异性结合位点。3个矮牵牛品种DFR都不具有信号肽,为亲水蛋白,定位于细胞质的可能性最高;均具有两个跨膜结构,α-螺旋和β-折叠是3个DFR的主要二级结构元件,并且形成了β-α-β-α-β的Rossmann折叠,整本上呈对称分布。利用同源建模分析3个DFR蛋白与已知葡萄的DFR晶体结构有很高的相似性。系统进化树分析表明,PhDFR1、PhDFR2、PhDFR3与已知矮牵牛DFR蛋白亲缘关系最近。 展开更多
关键词 矮牵牛 二氢黄酮醇4-还原酶 同源克隆 生物信息学分析
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木犀草素抑制人胃癌BGC-823细胞增殖作用的研究 被引量:10
8
作者 陆雪莹 李艳红 +2 位作者 肖向文 阿吉艾克拜尔.艾萨 李晓波 《现代中西医结合杂志》 CAS 2012年第3期246-249,共4页
目的研究木犀草素(Luteolin,Lu)对人胃癌BGC-823细胞增殖的体外抑制作用及其机制。方法 DPPH法测定Lu抗氧化活性;MTT法测定Lu对BGC-823细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞周期分布影响及诱导凋亡的作用;倒置显微镜下观察细胞形态学变化... 目的研究木犀草素(Luteolin,Lu)对人胃癌BGC-823细胞增殖的体外抑制作用及其机制。方法 DPPH法测定Lu抗氧化活性;MTT法测定Lu对BGC-823细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞周期分布影响及诱导凋亡的作用;倒置显微镜下观察细胞形态学变化。结果 Lu清除自由基的能力与其浓度呈正相关(r2=0.979);5,10,20,40μmol/L的Lu作用48 h后对BGC-823细胞增殖抑制率分别为5.08%,7.09%,25.27%和53.77%,半数抑制浓度(IC50)为(37.88±5.81)μmol/L;Lu以浓度依赖性阻滞细胞周期在G2/M期,且S期细胞比例呈下降趋势。40μmol/L的Lu作用72 h后,BGC-823细胞凋亡率显著增高(P<0.01);镜下观察发现经Lu处理后细胞固缩并伴随细胞膜破裂的现象。结论 Lu在体外对人胃癌BGC-823细胞增殖有明显的抑制作用,且呈剂量依赖性;抗氧化、改变细胞周期及诱导细胞凋亡是其抗肿瘤作用的机制。 展开更多
关键词 木犀草素 胃癌 抗氧化性 细胞周期 细胞凋亡
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农杆菌介导快速、高效获得转基因烟草纯合株系 被引量:6
9
作者 马雪梅 胥晓 +1 位作者 李晓波 肖向文 《中国烟草学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第4期66-71,共6页
利用植物表达载体PBI121空载体,对农杆菌介导法转化烟草技术体系进行了综合改进,探索激素配比、侵染时间、分化和生根培养阶段卡那霉素的筛选压对烟草(Nicotiana tabacum cv.Petit Havana SR1)植株再生和转化效率的影响;同时根据孟德尔... 利用植物表达载体PBI121空载体,对农杆菌介导法转化烟草技术体系进行了综合改进,探索激素配比、侵染时间、分化和生根培养阶段卡那霉素的筛选压对烟草(Nicotiana tabacum cv.Petit Havana SR1)植株再生和转化效率的影响;同时根据孟德尔显性性状杂合子自交后代遗传分离规律,在转基因株系后代扩繁时用卡那霉素筛选分离,可以在T2代较快得到纯合株系。本研究通过使用整个叶片浸染、高的卡那霉素筛选剂浓度、控制生长条件以及强化管理,极大地缩短了获得纯合株系的时间,确立了该烟草品种快速、高效获得大量转基因阳性植株及快速获得转基因纯合株系的转化体系,其转化周期可减少至5-6个月,转基因植株阳性率可达到90%,其中60%的转基因植株后代卡那霉素抗性性状分离比例接近3:1。 展开更多
关键词 烟草 农杆菌介导 转化 纯合株系
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熊果酸对H22荷瘤小鼠抗肿瘤及免疫调节作用 被引量:8
10
作者 李艳红 李晓波 +2 位作者 陆雪莹 高剑峰 肖向文 《实验动物科学》 2013年第5期1-5,14,共6页
目的探讨熊果酸(UA)对H22荷瘤小鼠抗肿瘤作用及免疫功能的影响。方法皮下移植建立H22荷瘤小鼠模型,腹腔注射不同剂量UA,检测抑瘤率和免疫器官指数,MTT法检测脾脏T、B淋巴细胞增殖能力,流式细胞术检测CD4+、CD8+T细胞亚群含量及比例,ELIS... 目的探讨熊果酸(UA)对H22荷瘤小鼠抗肿瘤作用及免疫功能的影响。方法皮下移植建立H22荷瘤小鼠模型,腹腔注射不同剂量UA,检测抑瘤率和免疫器官指数,MTT法检测脾脏T、B淋巴细胞增殖能力,流式细胞术检测CD4+、CD8+T细胞亚群含量及比例,ELISA法检测血清细胞因子IL-2、IL-4和TNF-α的表达量。结果 UA对小鼠皮下移植性肿瘤H22有显著的抑制作用,可降低免疫器官中异常增大的脾指数,增强脾脏中T、B淋巴细胞增殖能力,提高淋巴细胞亚群CD4+T细胞表达及CD4+/CD8+T细胞亚群比例,促进血清IL-2、TNF-α表达,降低IL-4表达。结论 UA可抑制小鼠肝癌H22肿瘤生长,体内可以提高荷瘤小鼠的免疫能力,其抗肿瘤作用可能与机体的免疫调节作用相关。 展开更多
关键词 熊果酸 小鼠肝癌H22细胞 抑瘤率 免疫调节
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棕色棉F3'H-羟化酶基因的克隆与生物信息学分析 被引量:3
11
作者 梁明炜 刘海峰 +5 位作者 肖向文 陆雪莹 李艳红 宋武 鲁春芳 李晓波 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期199-206,共8页
根据葡萄的类黄酮3'-羟化酶(F3'H)基因全长cDNA序列Blast所得棉花的EST序列设计引物,以开花后16 d(DPA16)的新彩棉5号(XC-5)纤维为材料,利用RACE和RT-PCR技术分离得到了2个类黄酮3'-羟化酶基因cDNA序列,此2个序列编码区完... 根据葡萄的类黄酮3'-羟化酶(F3'H)基因全长cDNA序列Blast所得棉花的EST序列设计引物,以开花后16 d(DPA16)的新彩棉5号(XC-5)纤维为材料,利用RACE和RT-PCR技术分离得到了2个类黄酮3'-羟化酶基因cDNA序列,此2个序列编码区完全相同,仅在3'UTR区存在片段长短的差异,推测可能是基因转录后加工方式不同所造成。克隆所获得的棉花F3'H基因编码区全长1 533 bp,编码510个氨基酸,氨基酸序列分析预测表明,该基因所编码蛋白含有一个跨膜结构域,是一种分泌蛋白,定位于内质网上,并含有一段与细胞色素P450功能区相匹配的保守功能域;序列比对结果表明,棉花F3'H基因与其他多个物种的F3'H基因在氨基酸序列上有较高的同源性;聚类分析结果表明,棉花F3'H蛋白与双子叶植物大豆的F3'H亲缘关系较为接近,而与单子叶植物高粱等作物则较远。 展开更多
关键词 类黄酮3'-羟化酶 棕色棉 RACE 序列分析
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小麦TaNADP-ME2基因重组植物表达载体构建及对水稻的遗传转化 被引量:1
12
作者 付振艳 苟小清 +2 位作者 张正斌 肖向文 王晓军 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2013年第3期58-61,共4页
小麦TaNADP-ME2是一光反应基因,并对干旱、盐、低温等非生物胁迫作出响应。构建TaNADP-ME2基因的重组植物表达载体,并转化水稻获得转基因植株。利用重组技术构建植物表达载体,冻融法转化农杆菌,农杆菌介导方法转化水稻成熟胚诱导的愈伤... 小麦TaNADP-ME2是一光反应基因,并对干旱、盐、低温等非生物胁迫作出响应。构建TaNADP-ME2基因的重组植物表达载体,并转化水稻获得转基因植株。利用重组技术构建植物表达载体,冻融法转化农杆菌,农杆菌介导方法转化水稻成熟胚诱导的愈伤组织,潮霉素筛选和PCR鉴定转基因植株。成功构建了重组植物表达质粒pSUE2,并将pSUE2转入农杆菌EHA105,潮霉素磷酸转移酶(HPT)基因和TaNADP-ME2基因PCR鉴定获得16棵转基因阳性水稻植株。为进一步确定TaNADP-ME2基因的水分利用效率功能奠定了基础。 展开更多
关键词 TaNADP-ME2 农杆菌 基因转化 水稻
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新疆棕色棉纤维中原花青素的提取及鉴定 被引量:3
13
作者 陈艳成 吴韬 +4 位作者 刘海峰 刘力 宋武 肖向文 李晓波 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期92-96,共5页
选取新疆5个棕色棉品种(系),分别为棕86、新彩棉1号、新彩棉5号、棕196和棕470,它们的纤维色泽由深到浅依次为棕86>新彩棉5号>棕196>新彩棉1号>棕470。以普通白色棉品种为对照,用含体积分数为0.1%三氟乙酸的乙腈水溶液(乙... 选取新疆5个棕色棉品种(系),分别为棕86、新彩棉1号、新彩棉5号、棕196和棕470,它们的纤维色泽由深到浅依次为棕86>新彩棉5号>棕196>新彩棉1号>棕470。以普通白色棉品种为对照,用含体积分数为0.1%三氟乙酸的乙腈水溶液(乙腈水溶液的体积分数为50%)分别冷浸提取各品种(系)的棉纤维色素,通过紫外光谱吸收和铁盐催化法鉴定出棕色棉和白色棉纤维提取液中均含有原花青素;利用铁盐催化反应比色法定量测定棕色棉和白色棉纤维中原花青素含量。结果显示,棕色棉纤维中原花青素含量明显高于白色棉;除棕470外,棕色棉纤维的色泽同原花青素的含量明显相关,棕色棉纤维的色泽越深,其原花青素的含量越高。可见,原花青素是棕色棉纤维色素的一种重要组分。 展开更多
关键词 棕色棉 原花青素 提取 鉴定
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新疆彩色棉花遗传特性分析 被引量:3
14
作者 王利祥 刘海峰 +8 位作者 肖向文 庞志乾 宋武 鲁春芳 罗城 刘戈宇 徐吉臣 李小兵 李晓波 《安徽农业科学》 CAS 2012年第7期3926-3929,3932,共5页
[目的]研究旨在揭示新疆主栽彩棉品种的遗传学特征,为彩棉优良新品种的选育提供种质资源及深入研究的依据,并对下一步将要开展的关联作图和彩棉色素基因的定位和克隆的研究材料进行评价。[方法]选择5个白色陆地棉品种与2个白色海岛棉品... [目的]研究旨在揭示新疆主栽彩棉品种的遗传学特征,为彩棉优良新品种的选育提供种质资源及深入研究的依据,并对下一步将要开展的关联作图和彩棉色素基因的定位和克隆的研究材料进行评价。[方法]选择5个白色陆地棉品种与2个白色海岛棉品种分别与5个棕色棉品种以及5个绿色棉品种进行完全双列杂交,得到F2群体,统计其中符合孟德尔规律的群体数,并对所有F2代群体的单株纤维色泽进行统计和分析;根据农艺性状对亲本进行聚类分析,同时进一步利用SSR对亲本进行了遗传多样性分析。[结果]棕色和绿色棉纤维色泽遗传由细胞核控制,均由一对主效基因决定;棕色主要呈现显性遗传模式,而绿色棉纤维色泽遗传呈现显性遗传、不完全显性遗传或隐形遗传的模式。聚类分析表明,新疆主栽的棕色棉品种与新疆本地的陆地棉品种亲缘关系较近,与内地的陆地棉关系较远,与海岛棉关系最远;新疆主栽的绿色棉品种与新疆本地及内地的陆地棉关系均较远,与海岛棉关系最远。亲本的SSR遗传多样性分析表明,棕色和白色棉组合中,新陆早31号与新彩棉11号的多态性最高,293-zm-2与新彩棉5号的多态性最低;绿色和白色棉组合中,新陆早31号与绿85多态性最高,新陆早13号与新彩棉12号的多态性最低。[结论]为加快彩棉优良品种的定向选育提供了技术保证。 展开更多
关键词 彩色棉 遗传 农艺性状 遗传多样性 SSR
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氨基酸酯基二硫代甲酸酯类化合物的合成及体外生物活性评价
15
作者 祁红学 侯雪玲 +6 位作者 李艳红 陆雪莹 汤丹 肖向文 鲁春芳 刘戈宇 李晓波 《中南药学》 CAS 2012年第7期489-493,共5页
目的合成18种氨基酸酯基二硫代甲酸酯类化合物(化合物1~18),并进行体外抗肿瘤活性以及抗乙肝病毒(HBV)活性评价。方法以L-苯丙氨酸、L-丙氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸、L-谷氨酸及L-甘氨酸的甲酸酯为原料,通过碱催化,与CS2和卤代烷缩合... 目的合成18种氨基酸酯基二硫代甲酸酯类化合物(化合物1~18),并进行体外抗肿瘤活性以及抗乙肝病毒(HBV)活性评价。方法以L-苯丙氨酸、L-丙氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸、L-谷氨酸及L-甘氨酸的甲酸酯为原料,通过碱催化,与CS2和卤代烷缩合反应,合成18种氨基酸酯基二硫代甲酸酯类化合物。化合物的结构及组成经过质谱、1 H-NMR和熔点仪测试技术进行了表征。利用MTT法测定目标化合物1~18对子宫颈癌HeLa、肝癌HepG2、胃癌BGC-823、乳腺癌MCF-7、结肠癌SW-480细胞株的增殖抑制作用;ELISA法测定对HBsAg和HBeAg的抑制效果;实时荧光定量PCR法检测上清液中HBV DNA的表达量。结果化合物11、12、17和18对上述5种肿瘤细胞株增殖有较好的抑制作用;相对于阳性对照拉米呋啶,化合物14和15能够较好的抑制HBV抗原的分泌和病毒DNA的复制。化合物14抑制HBV DNA、HBsAg和HBeAg的IC50值分别是0.43、0.28和0.1mmol·L-1;化合物15的IC50值分别为0.24、0.02、0.03mmol·L-1。结论这些二硫代甲酸酯类衍生物中,化合物11、12、17和18在体外具有抑制肿瘤细胞增殖的活性;化合物14和15在体外对HBV有较好的抑制作用。该研究为进一步开发二硫酯在抗肿瘤及抗病毒方面奠定了很好的基础。 展开更多
关键词 二硫代甲酸酯类化合物 抗肿瘤 抗乙肝病毒 实时定量PCR HEPG2.2.15细胞
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新疆棕色棉纤维中花色苷的提取及初步鉴定
16
作者 陈艳成 吴韬 +2 位作者 刘海峰 肖向文 李晓波 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期1047-1051,共5页
以新疆深棕色棉品系‘棕86’的成熟纤维为材料,用甲醇溶液(VMeOH∶VHCl=99∶1)避光冷浸提取15d后,浓缩成浸膏.用适量蒸馏水溶解浸膏,乙酸乙酯萃取除杂,水相用HP-20大孔树脂纯化色素组分;采用紫外-可见吸收光谱分析,并结合高效液相色谱方... 以新疆深棕色棉品系‘棕86’的成熟纤维为材料,用甲醇溶液(VMeOH∶VHCl=99∶1)避光冷浸提取15d后,浓缩成浸膏.用适量蒸馏水溶解浸膏,乙酸乙酯萃取除杂,水相用HP-20大孔树脂纯化色素组分;采用紫外-可见吸收光谱分析,并结合高效液相色谱方法,对天然彩色棉纤维色素组分进行鉴定,为彩色棉花新色彩的分子改良提供参考.结果显示,棕色棉纤维提取液中含有花色苷,且至少含有4种不同的花色苷成分.对棕色棉纤维提取液中花色苷的降解分析显示,棕色棉中的色素物质很不稳定.研究表明,花色苷是棕色棉纤维色素中的一种重要组成成分,进一步补充了彩棉色素的物质基础. 展开更多
关键词 棕色棉 花色苷 紫外-可见吸收光谱分析 HPLC
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Studies on Hereditary Properties of Colored Cotton in Xinjiang
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作者 王利祥 刘海峰 +8 位作者 肖向文 庞志乾 宋武 鲁春芳 罗城 刘戈宇 徐吉臣 李小兵 李晓波 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2012年第3期541-546,582,共7页
[Objective] This study was to reveal the genetic characteristics of colored cotton varieties grown in Xinjiang. [Method] Five white upland and two white sea is- land cotton varieties were processed complete diallel cr... [Objective] This study was to reveal the genetic characteristics of colored cotton varieties grown in Xinjiang. [Method] Five white upland and two white sea is- land cotton varieties were processed complete diallel crosses with five brown cotton varieties and five green cotton varieties respectively, constructing 96 F2 populations, and the population number of those in line with Mendel's law were counted. The individual fiber colors were statistically analyzed in each F2 generation. The cluster analysis was carried out to the parents based on their agronomic traits, and the SSR was used to analyze the genetic diversity of parents. [Result] Both green and brown fiber colors were determined by single nuclear gene; brown fiber color mainly presented dominant heredity, while green fiber color presented dominant, incomplete dominant or recessive heredity. The cluster analysis indicated that brown cotton vari- eties in Xinjiang had closer genetic relationships with Xinjiang-native upland cotton varieties than other upland cotton varieties in China, but distant from sea island cot- ton varieties; while green cotton varieties grown in Xinjiang showed distant genetic relationships with both native and other upland cotton varieties in China, and most distant from sea island varieties. SSR genetic diversity analysis of the parents showed that in all white/brown cross combinations, Xinluzao31 and Xincaimian11 showed the highest polymorphism while 293-ZM-2 and Xincaimian5 showed the low- est; in white/green cross combinations, Xinluzao31 and Green 85 showed the highest polymorphism while Xinluzao13 and Xingcaimian12 showed the lowest. [Conclusion] According to the genetic model and cluster analysis of colored cotton, the quality of cotton can be improved by hybridizing the colored cotton with Xinjiang native or in- land cotton varieties of China. This study provides germplasm resources and further study basis for the breeding of new colored cotton varieties, and materials to the fiber color gene mapping and cloning in future, as well as the technical assurance for the directional breeding of quality colored cotton varieties. 展开更多
关键词 Colored cotton INHERITANCE Agronomic traits Genetic diversity SSR
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矮牵牛PhDFR基因和抗除草剂Bar基因植物表达载体的构建及对烟草的遗传转化研究
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作者 曾闻 肖向文 +4 位作者 刘海峰 王俊铎 罗城 李晓波 郑巨云 《安徽农业科学》 CAS 2014年第17期5380-5384,共5页
[目的]构建矮牵牛PhDFR基因的植物表达载体,并对烟草进行遗传转化。[方法]从不同花色的矮牵牛中克隆了2个PhDFR基因,通过目的基因序列克隆、多步载体酶切、连接、转化等技术手段,将其连入通用植物表达载体pCAMBIA2300及pCAMBIA3301。利... [目的]构建矮牵牛PhDFR基因的植物表达载体,并对烟草进行遗传转化。[方法]从不同花色的矮牵牛中克隆了2个PhDFR基因,通过目的基因序列克隆、多步载体酶切、连接、转化等技术手段,将其连入通用植物表达载体pCAMBIA2300及pCAMBIA3301。利用冻融法将重组质粒导入农杆菌GV3101继而转化烟草。[结果]构建了含卡那霉素抗性筛选标记基因NPTII和除草剂抗性筛选标记基因Bar的GFP融合蛋白植物表达载体pCAMBIA2300-PhDFR-GFP和pCAMBIA3301-PhDFR-GFP。转基因植株的GUS染色结果进一步验证了所构建表达载体的正确性和实用性。[结论]所构建的表达载体为进一步研究PhDFR基因在植物花色调控效应的功能及开展植物花色改良基因工程研究奠定了基础,为植物基因工程科研工作提供了优良的备选植物表达载体。 展开更多
关键词 DFR基因 植物表达载体 烟草遗传转化 BAR
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高电压等级真空灭弧室绝缘设计研究 被引量:12
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作者 马慧 刘志远 +3 位作者 耿英三 王建华 闫静 肖向文 《真空电子技术》 2019年第5期7-13,共7页
随着电压等级的进一步提升,真空灭弧室的绝缘水平逐渐成为制约真空断路器发展的瓶颈。本文概述了高电压等级真空灭弧室绝缘设计研究的发展现状,介绍了具有多重悬浮电位屏蔽罩的新型126kV真空灭弧室结构特性,最后分析了高电压等级真空灭... 随着电压等级的进一步提升,真空灭弧室的绝缘水平逐渐成为制约真空断路器发展的瓶颈。本文概述了高电压等级真空灭弧室绝缘设计研究的发展现状,介绍了具有多重悬浮电位屏蔽罩的新型126kV真空灭弧室结构特性,最后分析了高电压等级真空灭弧室绝缘结构设计中应用的设计方法。文中以球-板真空间隙绝缘特性研究为例,采用最大击穿场强法评估和预测,获得了其击穿电压值的预测曲线,通过试验验证了最大击穿电场强度评估方法的准确性。相关研究不仅可以指导高电压等级真空灭弧室的绝缘设计,也可以为真空间隙的绝缘耐压特性评估提供理论依据。 展开更多
关键词 高电压 真空灭弧室 绝缘 评估方法
全文增补中
山楂早期丰产栽培技术 被引量:1
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作者 肖向文 《甘肃农业科技》 1999年第9期28-29,共2页
关键词 山楂树 丰产栽培技术 幼树生长
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