复方铁苋工艺优化及抑菌成分研究

目的 基于抑菌药效优化复方铁苋最佳配伍及提取工艺,并揭示该中药复方的抑菌物质。方法 以抗嗜水气单胞菌药效为考察指标筛选复方铁苋最佳配伍,以没食子酸的含量和抑菌活性为评价指标,通过单因素实验和响应面法优化复方铁苋的提取工艺;对不同提取工艺的复方铁苋建立化学指纹图谱并指认“共有峰”,通过相关分析建立指纹图谱与抑菌药效间的“谱效关系”,并采用UPLC-Q-TOF-MS技术进行成分鉴定,找出抑制嗜水气单胞菌的关键成分。结果 复方铁苋以铁苋菜∶五倍子∶诃子=2∶2∶1(w/w/w)为最佳配伍,以料液比为1∶25,浸泡22 min后煎煮60 min为最佳提取工艺,该条件下复方铁苋提取物对嗜水气单胞菌具有最佳抑制效果;从复方铁苋指纹图谱中找出4个与抑菌活性呈高度正相关的物质:诃子酸>诃子鞣酸>没食子酸-4-O-(6-O-没食子酰)葡萄糖苷>没食子酸(相关系数在0.499~0.846之间)。结论 铁苋菜、五倍子、诃子在最佳配伍及工艺条件下具有明显抑制嗜水气单胞菌的活性,通过“谱效关系”快速找出该中药复方中潜在的抑菌物质,为复方铁苋进一步开发为防治嗜水气单胞菌的药物提供科学依据。

气-质联用(GC/MS)法测定烟草生物碱的方法优化

采用气相色谱-质谱法(GC/MS),通过优化相关技术参数建立了能够快速准确测定烟草中烟碱和微量生物碱(降烟碱、麦斯明、假木贼碱和新烟草碱)含量的方法.经正交试验确定了超声提取和有机溶剂萃取前处理方法的最佳条件,结果表明:烟碱、降烟碱、麦斯明和假木贼碱的线性范围分别为20～600、30～300、3.2～12、16～60mg/L,检测限分别为0.11、0.09、0.02和0.04mg/kg,回收率介于88.5%～105.4%,相对标准偏差(n=5)介于2.4%～9.2%.该方法具有检测烟草生物碱灵敏度高和重现性好的特点,且操作简便,解决了已有方法存在的生物碱各个组分提取不完全和含量极低的麦斯明检测效果不理想等问题.

GA施用方式对烤烟主要产质量指标的影响

2008年在长沙采用茎部扦插、注入和叶面喷施3种方式对烤烟K326施用不同浓度的GA,研究其对烤烟的烟碱、钾含量及单叶重的影响。结果表明,3种GA施用方式均能对烤烟主要品质指标产生影响,在各处理用药范围内,喷施效果最优,注入处理略优于扦插。本研究涉及的浓度范围内,喷施5 mg/株处理效果最优,可明显降低上部叶烟碱含量,并对提高上部叶钾含量及单叶重效果较好;GA施用的浓度不同对各叶位产生的影响差异较大,上、中部叶受到的影响较明显,而对下部叶的影响相对较小。

烟草专用肥与不同有机肥配施对烤烟生长及主要化学成分的影响

采用田间试验,研究了发酵血粉、腐熟菜籽饼肥与烟草专用肥配施对烤烟生长发育、化学品质及致病性的影响.结果表明:在烟草专用肥中配施部分发酵血粉和腐熟菜籽饼肥代替氮素化肥能增强烤烟的生长势,使烤烟生育期延长,产量增加;不同肥料处理对烤烟的致病性、物理指标和化学成分含量影响差异显著,以腐熟的菜籽饼肥效果最好,烟草专用肥次之,发酵血粉的效果最差,主要表现在叶片肥厚,含梗率高,耐熟性差,发病率高,密度小,烟碱含量高而糖含量低等.

不同品种烤烟各部位烟叶成熟过程中非挥发性有机酸含量的变化

为探明不同品种烤烟各部位烟叶成熟过程中多元有机酸和高级脂肪酸含量变化的差异,以红大、云烟87、K326、中烟100为材料进行了研究。结果表明,中烟100中非挥发性有机酸含量较低,而红大、云烟87和K326较高,下部叶非挥性有机酸含量显著高于中部叶和上部叶。烟叶中多元有机酸含量随成熟增加而逐渐减少,上部叶、中部叶的高级脂肪酸含量则随成熟度增加表现出先减后增再减的趋势,而下部叶则表现为随成熟度增加而逐渐下降的趋势。

烤烟叶片脉络系统化学成分含量的比较

以烤烟品种红花大金元(红大)适熟期中部叶为材料,研究了烟叶主脉、一级侧脉、二级侧脉中非挥发性有机酸、木质素、可溶性总糖和烟碱含量的差异。结果表明,叶脉占烟叶干重60%以上;非挥发性脂肪酸、木质素、可溶性总糖和烟碱含量各级叶脉间的差异均达到显著水平,其中饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸、高级脂肪酸和烟碱含量表现为二级侧脉>一级侧脉>主脉;二元脂肪酸和木质素含量表现为主脉>一级侧脉>二级侧脉;而可溶性总糖则主脉中含量最高,一级侧脉中的含量小于二级侧脉。

不同烟区和烟田烤烟挥发和半挥发性有机酸含量的差异分析

采用气相色谱法,对种植在云南大理相邻产烟县(宾川、弥渡)和相邻的水田、旱地,相同烤烟品种云烟85的不同部位烟叶中挥发和半挥发性有机酸含量进行分析。结果表明,弥渡烤烟中挥发和半挥发酸含量明显高于宾川烤烟,其中3-甲基戊酸和苯甲酸含量分别达到显著和极显著差异;而相邻地块的旱地烤烟中绝大多数挥发和半挥发性有机酸含量明显高于水田烤烟,其中3-甲基戊酸、十二酸和油酸含量差异分别达到极显著和显著水平;烤烟在部位间挥发和半挥发酸含量的差异表现为上、中部烟叶明显高于下部叶,而且烤烟部位间挥发和半挥发性有机酸含量的变化不受烟区和烟田类型的影响。

不同品种烤烟有机酸组成含量分析

通过小区试验,研究了云南宣威热水烟区烤烟主栽品种云烟85,云烟87,K326,红大的C3F烟叶中有机酸总量、挥发酸、非挥发酸及高级脂肪酸的组成含量。结果表明:同一产地,不同品种烤烟有机酸总量表现出K326>云烟85>云烟87>红大;红大品种烤烟的挥发酸含量较高,尤其是3-甲基戊酸,但非挥发酸和高级脂肪酸含量及饱和度相对较低;K326烤烟的挥发酸和非挥发酸含量均较高,尤其是异丁酸和苹果酸,高级脂肪含量相对较低,但高级脂肪酸的饱和度较高;云85,云87品种的挥发酸含量较低,而非挥发酸和高级脂肪酸含量却较高,且两品种间的差异不显著。

有机无机肥配施对烤烟有机酸含量的影响

采用田间试验,研究施用3种常用肥料(无机复合肥、有机无机复合肥、牛栏粪与无机复合肥配施)对云南保山市烤烟有机酸含量的影响。结果表明,3种施肥处理均能提高烟草中非挥发酸、高级脂肪酸和挥发酸的含量,与施用无机复合肥相比,施用有机无机复合肥和牛栏粪与无机复合肥配施能更有效提高烤烟中主要非挥发酸(苹果酸和柠檬酸)、高级脂肪酸和除异丁酸和壬酸外的挥发酸的含量,有利于提高烟叶品质。有机无机复合肥和牛栏粪与无机复合肥配施对烤烟挥发酸含量的影响差异不显著,但施用有机无机复合肥对提高烤烟非挥发酸和高级脂肪酸含量效果更好。

纳川珠利溶液剂对鸡球虫病的药效学研究

对两种不同配方的0.3%纳川珠利溶液剂,分别以6、3、1mg/L三种剂量饮水预防人工感染的鸡柔嫩艾美耳球虫,并用地克珠利预混剂以1mg/kg剂量作为对照。结果显示,0.3%纳川珠利溶液剂的两种配方以上述3种剂量饮水预防鸡球虫病,具有良好的抗球虫效果,抗球虫指数在180以上,属高效范围。表明0.3%纳川珠利溶液剂是纳川珠利的一种高效预防鸡球虫病的良好剂型。

基于P2P技术的媒体电信网

融合了P2P技术、利用电信运营商业务平台的媒体电信网(MTN)能够提供有服务质量保证、安全诚信的数字媒体业务。与现有客户端/服务器(C/S)和内容分发网络(CDN)架构的数字媒体系统相比,媒体电信网利用P2P技术,充分挖掘了用户终端资源,极大地降低网络和平台建设投资,具有低成本、高扩展性等独特优势。基于P2P技术的媒体电信网可以激活整个数字媒体产业价值链,具有广阔的市场前景。

基于P2P技术的时移电视系统方案

本文针对时移电视业务,提出了基于P2P技术的系统解决方案。时移电视系统由一个分片处理器和一个媒体定位器以及若干对等节点组成,直播媒体流经分片处理器处理后切分成媒体分段和分块,媒体定位器完成媒体分段的定位服务,对等节点以随机概率进行媒体录制和存储,节点之间直接进行媒体块传输。理论分析及实验结果表明,该系统方案具备良好的扩展性和业务体验质量。

茶学专业实践教育改革研究

茶学专业的实践教育目前存在着实验部分创新性不够,学生缺乏主动性,实习部分与社会接轨不足,基地建设和管理不完善等问题。应当通过增强实验部分的创新性和前沿性,引导学生主动学习,完善校内外实习基地的建设和管理,为学生今后踏入社会,更好地融入社会和服务社会打下坚实的基础。

不同部位烟叶和烟梗中主要挥发性、半挥发性有机酸的分析研究

采用气相色谱法对云南大理云烟85的3个不同部位B2F、C3F、X2F的初烤烟叶和烟梗中主要挥发性、半挥发性有机酸含量进行了研究。结果表明,不同部位烟叶和烟梗中的挥发性、半挥发性有机酸含量差异明显,总体上表现出上、中部叶高,下部叶低。但经方差分析得知绝大多数挥发性、半挥发性有机酸及其总量在3个部位间差异不显著。从烟叶与烟梗所含酸性成分含量的对比看,除十六酸外,其它挥发酸、半挥发性有机酸在烟叶中的含量明显高于烟梗。

烟草中主要挥发酸的分析方法

以云南4个产区(曲靖、昭通、文山和昆明)云烟87的C3F初烤烟叶为对象,比较了常见的5种不同挥发性有机酸的提取和分离方法(水蒸气蒸馏法、超声波提取法、酸碱分离法、同时蒸馏萃取法以及同时蒸馏萃取和酸碱分离相结合的方法)的差别。结果表明:在前处理方法选择上,以同时蒸馏萃取和酸碱分离相结合提取效果最佳,且在定量分析上有较好的回收率和重复性,实验结果可信,可以用于烟草样品挥发性有机酸的定性定量分析。

气相色谱法检测沙咪珠利中的残留溶剂

建立了同步测定沙咪珠利中甲醇、乙醇和甲苯残留溶剂的气相色谱法。采用DB-WAX（30m×0．25mm×0．25μm）毛细管柱，程序升温，初始60℃，保持4min，50℃／min升至80℃，保持1min。再以100℃／min升至200℃。保持4min；载气为氮气，直接进样，测定残留溶剂含量。甲醇、乙醇和甲苯线性范围分别为31．68～506．8、18．96～758．4、8．64～138．7μg/mL（R^2：0．9958～0．9971），定量限分别为2．091、1．564、0．572μg／kg，精密度RSD均小于5％，平均回收率为99．87％-100．39％。采用气相色谱方法可同时测定沙咪珠利中残留的甲醇、乙醇和甲苯的含量，方法简便准确。

抗球虫新药AC4在SD大鼠体内的药代动力学研究

本研究的目的是建立检测SD大鼠血浆内AC4的分析方法,考察高、中、低3个剂量的AC4在SD大鼠体内的药代动力学特征,获得主要的药代动力学参数。采用超高液相色谱法检测SD大鼠血浆内AC4含量,使用乙酸乙酯作为提取溶剂,妥曲珠利亚砜作为内标。研究表明,建立的方法专属性良好,标准曲线定量范围0.08-80μg/mL,线性关系良好;准确度和精密度均能达到检测目的,样品在室温放置8 h或者反复冻融3次后稳定;该方法灵敏、准确,可以用于检测SD大鼠血浆内AC4含量。药时曲线下面积和最大血药浓度存在剂量正相关关系,给药后4-5 h达到最大血药浓度,生物消除半衰期在不同性别、不同剂量组之间存在较大差异,AC4在SD大鼠的药动学存在较为明显的性别差异。本研究结果为AC4后期研究和临床合理应用提供了参考依据。

柑普提取物对HepG2和SGC-7901肿瘤细胞系的抗增殖作用

本实验研究了柑普茶加工后的成分变化以及对Hep G2与胃癌细胞SGC-7901细胞的抗增殖作用。采用高效液相色谱法对柑普茶品质成分进行了鉴定;以肿瘤细胞Hep G2与SGC-7901为模型,测定了柑普茶及其原料茶抗增殖活性(IC50),对效果较明显的Hep G2细胞系进行了进一步的细胞周期与凋亡分析。结果表明,柑普茶加工后,多酚类物质含量为17.22%,较原料茶显著降低,其中,酯型儿茶素与非酯型儿茶素含量降低显著,而以茶黄素、茶红素为代表的茶色素含量则有所提高。柑普茶在抑制SGC-7901与Hep G2细胞体外增值方面的作用明显强于普洱茶和柑橘皮,其IC50分别为176.61μg/m L与143.60μg/m L。通过对Hep G2细胞周期与凋亡分析,表明柑普茶对肝癌细胞系的抑制作用主要通过阻滞细胞周期在G0/G1期后进而诱导细胞凋亡引起。柑普茶特殊加工工艺有利于其风味改善,也有利于活性物质积累,使得其在抑制Hep G2与SGC-7901肿瘤细胞增殖方面表现出更好的活性。

超高效液相色谱法测定鸡组织中妥曲珠利及其代谢物的残留量

为建立同时检测鸡肌肉、肝脏和肾脏中妥曲珠利及其代谢物妥曲珠利砜和妥曲珠利亚砜残留量的超高效液相色谱方法，采用乙腈作提取溶剂，过固相萃取小柱净化，超高效液相色谱仪进行检测。结果显示，3种药物在3种组织的线性、精密度、准确性、特异性和稳定性良好。其中，3种药物的回收率均在81．6％～110．0％，日内相对标准偏差均小于19．0，日间相对标准偏差均小于18．3％。妥曲珠利、妥曲珠利砜和妥曲珠利亚砜在肌肉和肝脏中的检测限分别为10、10和15μg／kg，在肾脏中检测限分别为25、25和37．5μg／kg，在3种组织中定量限分别为50、50和75μg／kg，经稳定性试验表明样品稳定、方法可靠。本研究建立了同时检测鸡肌肉、肝脏和肾脏组织中妥曲珠利及其代谢物的超高效液相色谱检测方法，该方法准确可靠，重现性好，完全能满足残留检测的要求。

AC4原料药含量的HPLC测定方法研究

为建立测定AC4原料药含量的高效液相色谱（HPLC）测定方法,色谱柱：Diamosil C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相为甲醇-0.2%磷酸水溶液,65∶35（v/v）,流速为1.0 m L/min,检测波长251 nm。结果显示,AC4浓度在20~200μg/m L范围与峰面积呈现良好的线性关系,回归方程A=43743ρ＋26 016,R2=0.9999（n=5）,平均回收率100.3%,RSD为0.54%,样品至少在8 h内稳定。表明该法快速简捷、准确度高,适用于AC4原料药含量测定。