臭牡丹调控脊髓N-甲基-D-天冬氨酸受体亚基缓解神经病理性疼痛

目的:探讨臭牡丹(Clerodendrum bungei Steud.,CBS)的镇痛作用是否与N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-Daspartate,NMDA)受体相关。方法:雄性成年SD大鼠24只,随机分为假手术组(Sham组)、坐骨神经分支选择性损伤(Spared nerve injury,SNI)模型组(SNI组)和30 g·kg^(-1)CBS治疗组(SNI+CBS组)。SNI+CBS组于SNI术后第7 d灌胃给予CBS,持续21 d,Sham组和SNI组给予同等体积的生理盐水灌胃。于术后第26~28 d检测大鼠步态;第28 d取脊髓,qPCR方法检测NMDA受体亚基GluNR1、GluN2A、GluN2B和GluN3A mRNA表达,Western blot和免疫荧光方法检测GluN2A和GluN2B蛋白水平,分子对接方法模拟CBS中主要成分与GluN2B的亲和力。结果:与Sham组相比,SNI模型组大鼠患肢的站立时间、最大接触时的最大强度、足印长度、足印宽度和爪印面积降低,最大接触时间百分比升高,脊髓GluN2A、GluN2B和GluN3A mRNA表达降低,GluN2A和GluN2B蛋白水平升高。与SNI组相比,SNI+CBS组大鼠患肢的站立时间、最大接触时的最大强度、足印长度和足印宽度升高,最大接触时间百分比降低,脊髓GluN2A、GluN2B和GluN3A mRNA表达升高,GluN2A和GluN2B蛋白水平降低。各组GluNR1 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。分子对接实验结果显示,原始配体Ro25-6981与GluN2B对接的结合自由能(△G)为−11.72 KJ·mol^(-1),估计抑制常数(Ki)为2.58 nmol;CBS主要成分α-香树脂醇、赪桐酮和木栓酮与GluN2B对接的△G及Ki与Ro25-6981接近,甚至优于Ro25-6981;从对接构象上看,Ro25-6981与木栓酮占据了GluN1B结合位点,α-香树脂醇和赪桐酮则占据了GluN2B结合位点,呈现出较强的NMDA受体抑制作用。结论:CBS对SNI模型所致神经病理性疼痛具有缓解作用,其机制可能是通过抑制NMDA受体来实现。

臭牡丹对神经病理性痛大鼠背根神经节N-甲基-D-天冬氨酸受体的影响

目的:探索臭牡丹(Clerodendrum bungei Steud.,CBS)是否通过调控N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-Daspartate,NMDA)受体缓解坐骨神经分支损伤(Spared nerve injury,SNI)诱导的大鼠神经病理性疼痛。方法:雄性SD大鼠18只,随机分成假手术组(Sham组)、SNI模型组(SNI组)、SNI+CBS治疗组(SNI+CBS组)。各组连续给予30 g·kg^(-1)CBS或等体积生理盐水治疗21 d。PCR方法检测背根神经节(Dorsal root ganglion,DRG)中NMDA受体亚基NR1、GluN2A、GluN2B、GluN3A mRNA表达;Western blot方法检测DRG中GluN2A、GluN2B和IL-10蛋白表达。结果:与Sham组相比,SNI模型大鼠DRG中NR1、GluN2B和GluN3A mRNA表达降低,差异有统计学意义(P<0.05);与SNI组相比,SNI+CBS治疗组NR1、GluN2B和GluN3A mRNA表达升高,各组GluN2A mRNA表达比较差异无统计学意义(P>0.05);与Sham组相比,SNI模型大鼠DRG中GluN2A和GluN2B蛋白水平升高,IL-10蛋白水平下降;与SNI组相比,SNI+CBS组GluN2A和GluN2B降低、IL-10升高,差异均有统计学意义(P<0.05);各组GluN2A的mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:臭牡丹可能通过抑制DRG炎症和调控NMDA受体缓解SNI诱导的大鼠神经病理性疼痛。

不同电针刺激频率和频度对小鼠免疫功能的作用

目的在小鼠上探讨不同电针(EA)刺激频率和频度对其免疫功能的作用。方法应用细胞生物学和MTT方法,检测不同电针刺激频率和频度对小鼠脾指数、NK细胞活性和T细胞增殖能力等免疫学指标的影响。结果电针1次后,分别在0,24和48h时间点检测小鼠的脾指数、脾脏NK细胞活性及T细胞增殖能力,2 Hz、100 Hz和2/100 Hz EA刺激均无明显影响。连续电针3 d(每天1次)后,2Hz、100Hz和2/100 Hz EA对脾指数均无明显影响;100Hz EA显著降低NK细胞活性(P<0.05),2/100 Hz EA明显升高NK细胞活性(P<0.05),而2Hz EA无明显影响;2Hz EA显著升高脾脏T细胞增殖能力(P<0.01),而100Hz和2/100 Hz EA均无明显影响。结论电针对小鼠脾指数、NK细胞活性和T细胞增殖能力的作用存在频率和频度的特异性,这将为临床应用电针治疗与免疫相关疾病提供理论和实验依据。

α7尼古丁受体介导100Hz电针调节自然杀伤细胞活性的实验研究

目的在已有的实验基础上,进一步寻求α7尼古丁受体(α7nAChR)介导100Hz电针(EA)调节自然杀伤细胞(NK)细胞活性的新证据。方法应用α7nAChR抗体和特异性的α7nAChR拮抗剂α-银环蛇毒(α-Bgt),探讨α7nAChR在EA对NK细胞活性中的作用。结果与100Hz EA组相比,100Hz EA+α7nAChR抗体组脾脏NK细胞活性明显增强,差异有统计学意义(P<0.05);与100Hz EA组相比,1.5和3.0μgα-Bgt+100Hz EA组均NK细胞活性明显增强,差异有统计学意义(P<0.01)。结论α7nAChR介导了100Hz EA调节免疫功能的作用,这为进一步明确和扩展EA的临床应用提供理论和实践依据。

2/100Hz电针对正常小鼠免疫功能的影响

目的研究2/100 Hz电针刺激(electroacupuncture stimulation,EAS)对正常小鼠脾脏自然杀伤细胞(natural killercell,NK)杀伤活性及血清细胞因子水平的影响。方法通过运用2/100 Hz交替频率刺激双下肢"足三里"及"三阴交"穴位,每天1次刺激,重复3 d,观察小鼠脾脏NK细胞杀伤活性;相同参数重复刺激6次,每天1次,检测不同时间点外周血细胞因子IL-6及IL-2的改变。结果与只扎针不电针组比较,2/100 Hz交替频率EAS组NK活性升高;第1、3天外周血IL-6水平升高,IL-2水平变化不明显。结论 2/100Hz交替频率EAS可增强正常小鼠的NK活性,其作用可能与电针上调IL-6水平有关。

2/100Hz电针刺激不同穴位组合对NK细胞活性和吞噬指数的作用

目的:探讨2/100 Hz电针(EA)刺激不同穴位组合对人体NK细胞活性和吞噬指数的影响。方法:应用形态学和MTT方法,给予健康人每天2/100 Hz EA 30 min,观察电针刺激不同穴位组合对NK细胞活性和吞噬指数的作用。结果:2/100 Hz EA刺激右曲池-右中渚、左承山-左昆仑穴位组合后NK细胞活性和吞噬指数均无明显变化;而刺激大椎-右曲池、左足三里-左三阴交穴位组合,在末次EA的当天和停EA后第1 d的NK细胞活性和吞噬指数均有明显升高(P<0.01)。结论:2/100 Hz EA刺激大椎、曲池、足三里和三阴交等穴位组合可加强NK细胞活性和吞噬指数,证实了电针调节免疫功能具有穴位特异性。

不同频率电针刺激对人体NK细胞活性和吞噬功能的作用

目的探讨不同频率电针(EA)刺激对人体NK细胞活性和吞噬功能的作用。方法应用形态学和MTT方法,取不同穴位组合,给予健康人每天穴位电刺激30 min,观察不同频率电针刺激对NK细胞活性和吞噬功能的影响。结果 2 Hz和2/100Hz EA在末次EA当天和停EA后第1天的NK细胞活性均明显升高(P<0.05);而100Hz EA仅在停EA后第1天的NK细胞活性明显升高(P<0.05)。2 Hz EA在末次EA当天和停EA后第1天的吞噬百分率和吞噬指数均明显升高(P<0.01)且保持同一水平;2/100Hz EA在末次EA当天和停EA后第1天的吞噬百分率和吞噬指数均显著升高(P<0.05,P<0.01)且有上升趋势(P<0.01);100 Hz EA在末次EA当天和停EA后第1天的吞噬百分率均显著升高(P<0.01,P<0.05),而吞噬指数仅在末次EA当天的吞噬指数显著升高(P<0.01)。结论电针对人体NK细胞活性及吞噬功能的作用存在频率依赖性,这为电针的临床应用提供了理论和实践依据。

2/100Hz电针对NK细胞活性、吞噬功能和细胞因子的后效应作用

目的:探讨2/100 Hz电针(EA)对人体NK细胞活性、吞噬功能和细胞因子的后效应影响。方法:应用形态学、MTT和ELISA方法,给予健康人每天2/100 Hz EA 30 min,观察电针对NK细胞活性、吞噬功能和细胞因子的作用。结果:在2/100 Hz EA的第1、3 d和停EA后的前2 d,NK细胞活性明显升高(P<0.01),在停EA后的第3 d恢复到EA前水平;在末次EA的当天和停EA后的第1 d IL-2和IL-6均有明显升高(P<0.05),且在停EA后的第2 d恢复到EA前水平,而IL-4、IL-10、IL-12、TNF-α及IFN-γ均没有明显变化;在EA的第1、3 d及停EA后3 d,吞噬百分率均明显高于EA前水平(P<0.01),且基本保持在同一个水平;在EA的第1、3 d和及停EA后3 d,吞噬指数均明显高于EA前水平(P<0.01),且有上升趋势。结论:2/100 Hz电针可显著增强人体的NK细胞活性、吞噬功能和细胞因子作用,并且其针效存在后效应。

姜黄素对MPP^+诱导PC12细胞凋亡的影响

目的观察姜黄素对MPP+诱导的PC12细胞凋亡的影响。方法采用透射电镜,hoechst染色和流式细胞仪(FCM)观察PC12细胞凋亡,间接免疫荧光流式细胞术检测PC12细胞bcl2的表达。结果PC12细胞自然凋亡率为(15±01)%,05mmol·L-1、1mmol·L-1和2mmol·L-1MPP+作用24h后,PC12细胞凋亡率分别为(441±38)%、(549±21)%和(822±26)%;20μmol·L-1和40μmol·L-1姜黄素对PC12细胞作用24h后无明显凋亡诱导作用,但可分别使05mmol·L-1MPP+处理组细胞凋亡率由(441±38)%下降到(341±38)%和(179±15)%(P<001);PC12细胞经20μmol·L-1姜黄素处理24h后,其bcl2表达率由正常对照的(3643±790)%增加到(7673±860)%(P<001)。结论姜黄素可以抑制MPP+诱导的PC12细胞凋亡,其作用机制之一可能与促进bcl2的表达有关。

大豆苷元对结扎大鼠冠状动脉所致损伤的保护作用

目的观察大豆苷元对结扎大鼠左冠状动脉前降支损伤的保护作用.方法取32只雄性Wister大鼠,随机分为4组,每组8只,分别为假手术组、缺血模型组、大豆苷元高、低剂量组(5.0,2.5mg/kg).于结扎冠状动脉左前降支前10min经舌下静脉注入大豆苷元溶液,缺血模型组及假手术组经舌下静脉注入等体积生理盐水.结扎冠状动脉左前降支使心肌缺血并持续120min建立缺血模型.记录缺血前、缺血15min,给药后30,60,90和120minⅡ导联ECG,统计各标测点Ⅱ导联ECG的ST段偏移∑-ST、统计各组大鼠心电图J点和T波上升的最大变化值,评价心肌缺血程度.实验结束后心内取血测定血清LDH、CK值;测定心肌组织MDA和SOD值.另用24只Wister大鼠分缺血模型组、大豆苷元高、低剂量组(5.0,2.5mg/kg)组,同上述动物模型制作方法,取其心肌作TTC染色测心肌梗死面积.结果大豆苷元组与缺血模型组比较,心肌梗死面积明显缩小,LDH,CK值降低,MDA值减小,SOD值升高,心电图∑-ST值减少,J点和T波的上升的最大值明显降低,且呈一定剂量依赖性.结论大豆苷元对大鼠结扎冠状动脉的缺血损伤具有保护作用.

琴叶榕根中黄酮类化合物的提取条件研究

目的探讨琴叶榕根中以芦丁为标准的总黄酮含量的最佳提取条件。方法采用碱、石油醚及不同体积分数的乙醇为溶剂,在不同温度、时间条件下分别从琴叶榕根中提取总黄酮。结果在碱提取法、石油醚提取法、醇提取法中以醇提取法效果最佳。最佳提取条件为用30倍量体积分数为60%乙醇,70℃条件下浸提2h。结论本实验结果可靠,方法简便,最佳条件适合批量生产中该药材的提取。

姜黄素在AD治疗机制中的研究进展

阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)是常见的神经系统退行性疾病,患者常有进行性记忆力减退,认知功能障碍等表现,已成为全球关注的社会问题。姜黄素是天然植物的提取物,毒性低、不良反应小,具有抗炎、抗氧化、抗凋亡等作用,近年的研究发现,姜黄素能够促进神经修复,对AD具有显著的疗效。

病理生理学在五年制医学本科教学中的体会

病理生理学是联系临床医学与基础医学的桥梁学科。好的教学方法能激发学生的学习热情,增强学生的学习兴趣,提高学生的积极性和主动性,取得良好的教学效果。文章结合自身教学体会,就如何提高病理生理学课堂教学效果进行探讨,旨在与同行分享交流授课过程中的方法和经验。

夜来香提取物抑菌活性的初步研究

目的:研究夜来香提取物的抑菌活性。方法:通过滤纸片对夜来香提取物进行了抑菌试验。结果:不同浓度的夜来香提取物对痢疾杆菌和大肠杆菌有一定的抑菌效果,随着夜来香提取物浓度的增加,其对痢疾杆菌和大肠杆菌的抑菌作用增强,呈一定的剂量依赖性。但夜来香提取物对金黄色葡萄球菌却无抑菌效果。结论:夜来香提取物对痢疾杆菌和大肠杆菌有显著的抑菌作用。

MiR-204-3p靶向EphB2调控非小细胞肺癌的作用机制

【目的】探究miR-204-3p靶向EphB2基因对非小细胞肺癌增殖、凋亡、侵袭的调控机制。【方法】培养将非小细胞肺癌A549细胞系分为5组NC mimic组(miR-204-3p过表达阴性对照组)、miR-204-3p mimic组(miR-204-3p过表达组)、oe-NC组(EphB2过表达阴性对照组)、oe-EphB2组(EphB2过表达组)、miR-204-3p mimic+oe-EphB2组(miR-204-3p与EphB2均过表达组)。MTT、流式细胞术、Transwell、划痕实验分别检测细胞增殖、周期、凋亡、侵袭、迁移情况。双荧光素酶报告分析miR-204-3p与EphB2靶向关系。qPCR和Western Blot检测miR-204-3p、EphB2 mRNA和蛋白表达情况。【结果】在A549细胞系中,miR-204-3p与EphB23′UTR区存在结合位点,miR-204-3p高表达明显抑制EphB2 mRNA和蛋白的表达(P<0.01);与阴性对照组相比,miR-204-3p mimic组A549细胞增殖能力明显下降(P<0.05),凋亡率明显增加(P<0.05),细胞迁移及侵袭能力明显下降(P<0.05),共转染EphB2后逆转上述变化;此外,在非小细胞肺癌中,miR-204-3p与EphB2表达呈负相关(r=0.636,P<0.001),且EphB2高表达较低表达的总生存期短(logrankχ2=3.899,P=0.049)。【结论】miR-204-3p可通过靶向下调EphB2来抑制非小细胞肺癌的增殖、侵袭、迁移,诱导细胞凋亡。

大豆苷元对结扎大鼠冠状动脉所致损伤的保护作用

目的：观察大豆苷元对结扎大鼠左冠状动脉前降支损伤的保护作用．方法：取32只雄性Wister大鼠，随机分为4组，每组8只，分别为假手术组、缺血模型组、大豆苷元高、低剂量组（5．0，2．5mg／kg）．于结扎冠状动脉左前降支前10min经舌下静脉注入大豆苷元溶液，缺血模型组及假手术组经舌下静脉注入等体积生理盐水．结扎冠状动脉左前降支使心肌缺血并持续120min建立缺血模型．记录缺血前、缺血15min，给药后30，60，90和120minⅡ导联ECG，

染料木素抗大鼠心肌肥厚作用及其与ATPase活性的关系

目的:观察染料木素(Gen)对异丙肾上腺素(iso)所致大鼠心肌肥厚的保护作用及其对心肌组织Na+-K+-ATPase,Ca2+-Mg2+-ATPase活性及羟脯氨酸含量的影响。方法:0.2 g·L-1的iso 5 mL·kg-1·d-1,背部皮下注射,连续10 d,建立大鼠心肌肥厚模型。造模第2天开始给予不同浓度的染料木素、二甲基亚砜或NS,连续14 d,末次给药后禁食12 h,称体重,麻醉,取心脏,称全心及左心室质量,计算全心质量指数及左心室质量指数,测定心肌组织Na+-K+-ATPase,Ca2+-Mg2+-ATPase活性及羟脯氨酸(Hyp)含量。结果:模型组全心质量指数及左心室质量指数分别为(3.30±0.24),(2.55±0.14)mg·kg-1,与正常对照组相比显著升高(P<0.001);心肌组织Na+-K+-ATPase和Ca2+-Mg2+-ATPase活力为(1.81±0.25),(1.00±0.22)U·mg-1,与正常对照组相比活性显著降低(P<0.01);Hyp含量为(0.80±0.05)mg·g-1,与正常对照组相比含量显著升高(P<0.001)。与模型组相比,染料木素高、低剂量组(0.3,0.1μmol.kg-1)全心质量指数分别为(2.83±0.22),(2.97±0.19)mg·kg-1;左心室质量指数分别为(2.32±0.16),(2.34±0.13)mg·kg-1均显著降低(P<0.01或P<0.05);高剂量组心肌组织Na+-K+-ATPase(2.58±0.40)U·mg-1及Ca2+-Mg2+-ATPase(1.35±0.22)U·mg-1活性升高(P<0.01或P<0.05),染料木素高、低剂量组心肌组织Hyp含量分别为(0.48±0.11),(0.57±0.14)mg·g-1显著降低(P<0.01或P<0.05)。结论:染料木素可通过提高Na+-K+-ATPase及Ca2+-Mg2+-ATPase的活性,降低Hyp含量,从而抑制心脏纤维化,起抗心肌肥厚作用。