鱼用疫苗研究进展

近年来,随着高密度集约化等设施渔业的广泛应用,单位面积鱼产量有了大幅度提高,同时也对渔业养殖过程中的管理有更高的要求。鱼类病害,特别是病毒性疾病的暴发是危害鱼类养殖业的主要因素,它有发病快、范围广、致死率高等特点,其暴发往往造成严重的经济损失。鱼类病毒性疾病并无特定药物控制,疫苗是较好的病毒抑制剂,它能够有效抑制特定病毒的扩繁,起到提前预防的效果,因此鱼用疫苗的研究受到广泛的关注。本文介绍了鱼用疫苗的发展历程,总结了鱼用疫苗的种类、免疫方式等,旨在为研究鱼用疫苗提供参考信息。

斑马鱼TDP43负调控Ⅰ型干扰素的表达

TDP43是一种DNA/RNA结合蛋白,属于异质核糖核蛋白家族成员,在调控转录、mRNA稳定性及翻译等方面发挥重要作用。近年来有报道表明哺乳类TDP43参与了炎症和免疫反应,然而TDP43在免疫应答中的功能机制还不清楚。探索了斑马鱼TDP43在先天免疫反应中的功能。首先通过同源比对及构建TDP43的系统进化树,分析了TDP43在不同物种中的进化特征,结果表明TDP43在哺乳类和鱼类中的相似度很高(60%以上)。SVCV病毒感染斑马鱼和CIK细胞后,检测TDP43在各组织和细胞中表达发现,(脑、眼睛、肠、鳃、皮肤、心脏、肝脏和肾脏)和CIK细胞中均上调。体外构建TDP43真核表达载体或合成TDP43的小干扰RNA,在CIK细胞中过表达TDP43能够抑制了Ⅰ型干扰素表达,而敲降TDP43则上调了Ⅰ型干扰素的表达。此外,亚细胞定位分析表明TDP43主要定位于细胞核,说明TDP43可能是在细胞核中调控基因的转录而控制先天免疫反应。总之,我们研究了斑马鱼TDP43在响应病毒感染及在先天免疫反应中的功能。

草鱼生长性状相关微卫星标记的初步筛选

以63尾草鱼为样本,利用微卫星分子标记技术初步筛选出与生长性状相关的分子标记。K-S和QQ图分析显示草鱼体长、体高和体重3个主要生长性状均为正态分布。利用SPSS 20.0分析不同基因对草鱼生长性状的影响,共获得13个基因型;同时发现D基因对草鱼生长性状具有负调控作用,而B、C基因对D基因有抑制作用。微卫星标记与草鱼3个主要生长性状关联分析显示,4对引物HLJC107、HLJC111、C2056、HLJC-9均与草鱼不同生长性状相关联,其中,HLJC107与体长极显著相关,与体高、体重显著相关;HLJC111与体长、体重显著相关;HLJC-9与体长、体高极显著相关;C2056仅与体重显著相关。

鲫鱼蛋白激酶PKR-like的Zα结构域与聚肌胞苷酸的结合

根据鲫鱼类PKR蛋白激酶基因(CaPKR-like)的全长cDNA序列,克隆CaPKR-likeZα结构域cDNA(Zα1、Zα2和Zα1Zα2),原核表达成功获得3种融合蛋白PZα1、PZα2和PZα1Zα2。凝胶阻滞实验结果显示:PZα1、PZα2、PZα1和PZα2混合表达蛋白不能与聚肌胞苷酸(PolyI∶C)结合,而表达完整的Zα结构域的PZα1Zα2与PolyI∶C有明显的结合现象。另外,3种表达多肽PZα1、PZα2和PZα1Zα2在体外分别都能聚合形成二聚体。与PZα1相比,PZα2和PZα1Zα2二聚化现象显著。结果暗示病毒复制时产生的副产物dsRNA能与CaPKR-like蛋白的相关结构域结合从而调节其生理功能。

植物血凝素对兴国红鲤头肾和脾脏的比较组织学研究

PHA注射前后兴国红鲤头肾和脾脏结构基本相同。红鲤头肾有被膜 ,为淋巴样组织 ,由许多血管、血窦和淋巴索组成。脾脏是实质性器官 ,淋巴细胞聚集成团 ,有弥散的胰腺组织渗入。注射PHA后头肾和脾脏内的大淋巴细胞、小淋巴细胞、巨噬细胞以及原始型细胞显著增加 ,而粒细胞数量变化不明显。

柱状噬纤维菌免疫后兴国红鲤免疫细胞数量变化的研究

用柱状噬纤维菌灭活菌苗免疫兴国红鲤 ,于免疫后 2周、4周分别对其外周血液和胸腺、脾脏、头肾和体肾中的免疫细胞数量变化进行了测定。结果显示 :外周血液中 ,淋巴细胞有显著的增加 ,粒细胞和单核细胞有明显的下降。胸腺中淋巴细胞数目略有增加。脾脏中淋巴细胞有显著的增加 ,而粒细胞和单核细胞正相反。头肾中淋巴细胞有较多的增加 ,粒细胞数目增加不明显 ,单核细胞有大幅下降。体肾中 ,粒细胞和淋巴细胞大幅上升 ,单核细胞下降。

欧洲鳗鲡(Anguilla anguilla)寄生虫病调查

2 0 0 0年 3月 - 10月对江西省赣州、上饶、吉安、抚州、南昌、宜春等地欧洲鳗鲡寄生虫病进行了调查。发现了 9种寄生虫感染欧洲鳗鲡 ,其中小瓜虫和粘孢子虫危害性较大 ,而波豆虫、车轮虫和锚头鳋危害性较小。同时对养殖水体环境与寄生虫感染率的关系进行了探讨。

欧洲鳗鲡(Anguilla anguilla)病害调查

对江西省赣州、上饶、吉安、抚州、南昌、宜春等地的欧洲鳗鲡养殖周期出现的病害进行了调查。发现细菌性疾病 6种 ,真菌性和病毒性疾病各 1种 ,同时对各种病原体对不同生长阶段的欧鳗感染率及感染死亡率进行了统计与分析 。

牛蛙红腿病病原菌敏感药物的筛选

对嗜水气单胞菌和乙酸钙不动杆菌共同敏感的抗菌药物主要有卡那霉素、氯霉素、土霉素、诺氟沙星和新霉素。消毒药品中 ,强氯精的效果较好。

牛蛙红腿病菌苗免疫试验

针对引起牛蛙产生红腿病的 2种致病菌 (嗜水气单胞菌和乙酸钙不动杆菌 )制备灭活菌苗 ,同时对菌苗的安全性、免疫效果、菌苗保存期、牛蛙免疫应答的产生期和免疫期进行了探讨。

繁殖季节黄颡鱼[Pseudobugrus fucridraco(Rich)]性腺的研究

记叙了5月份野生黄颡鱼性腺的基本情况,描述了黄颡鱼雄性生殖细胞和雌性生殖细胞的形态特征及发生规律.

兴国红鲤血细胞对肠型点状产气单胞菌免疫反应的研究

用肠型点状产气单胞菌 (Aeromonaspunctataf.intedtinalis)福尔马林灭活菌苗免疫兴国红鲤 ,于免疫后 2 0d和 4 0d对其脾、胸腺、头肾和体肾中的淋巴细胞、中性粒细胞和单核细胞的总值 (含原始型、未成熟和成熟型细胞的百分比值 )进行了测定。结果显示 :免疫后 2 0d和 4 0d ,脾中淋巴细胞总值显著增加 ,中性粒细胞和单核细胞总值则显著减少。头肾中淋巴细胞总值稍有增加 ,中性粒细胞和单核细胞的总值在免疫后 2 0d减少 ,免疫 4 0d增加。体肾中淋巴细胞和单核细胞总值在 2 0d和 4 0d均为增加。胸腺中淋巴细胞总值在 2 0d无变化 ,4

兴国红鲤外周血细胞对不同抗原免疫反应的研究

用肠型点状产气单胞菌 (A组 )、鱼害粘球菌的灭活菌 (B组 )和PHA加佐剂 (C组 )分别免疫兴国红鲤。在免疫 2 0d后的外周血中 ,实验组的小淋巴细胞百分比值有所增高 ,同时大淋巴细胞数量在A、B两组上升 ,中性粒细胞和单核细胞两值下降 ;免疫 4 0d后 ,小淋巴细胞值在A、C两组中下降 ,在B组中上升 ,大淋巴细胞值在A组中下降 ,在B组和C组中上升 ,中性粒细胞和单核细胞值在A、C两组中上升 ,在B组中则下降。

鳙鱼(Aristichthys nobilis)外周血细胞的细微结构

本文用光镜(Wright氏染色和组化反应)和透射电镜观察鳙鱼外周血细胞.在Wright’s染色的血涂片上,可以区分:红细胞、淋巴细胞、血栓细胞、单核细胞和颗粒细胞.淋巴细胞是数目最多的白细胞,而单核细胞的数目较少.电镜观察下,红细胞的细胞器较少,只有一些囊泡样体和少量线粒体.血栓细胞由于有大量的液泡和边周微管而与小淋巴细胞有较大区别.虽然单核细胞在体积和形态上酷似颗粒细胞,但单核细胞有更丰富的粗面内质网和游离核糖体,而颗粒细胞含更多的特殊颗粒.颗粒细胞有两种类型:Ⅰ型颗粒细胞和Ⅱ型颗粒细胞.这两种颗粒细胞都是嗜中性粒细胞,是同一种细胞的不同发育时期.本文还描述了这两种颗粒细胞的重要特征.

繁殖季节日本白鲫(Carassius auratus cuvieri)性腺发育的研究

本文叙述了3～4月间日本白鲫性腺发育的基本情况,着重对各级生殖细胞形态及发育规律进行了观察和研究。发现:日本白鲫卵巢为Ⅳ期卵巢,精巢为Ⅴ期精巢。在同龄鱼中,性腺的成熟度与体重和体长没有明显联系。

温度和pH值对嗜水气单胞菌毒力基因表达的影响

为了解培养温度和pH值对嗜水气单胞菌的毒力基因表达以及致病性的影响,利用反转录PCR(RT-PCR)对4种基因的表达进行了研究。研究结果显示嗜水气单胞菌毒力基因的表达受温度和pH值影响,其中溶血素(AHH)、气溶素(AerA)、外膜蛋白(OMP)和粘附素(Aha)毒力基因在15℃、25℃和37℃下均能高效表达,在4℃AHH和AerA两基因也能持续表达,但OMP和Aha两基因的表达停止。在中性或偏酸性的条件下(pH5.0和pH7.0)4种毒力基因都得以表达,在碱性条件下(pH9.0)4种基因中只有AHH得以表达,而Aha等其它3个基因的表达减弱或停止。基因表达的研究结果得到鲫鱼攻毒试验结果的支持。此外,研究还表明细菌的毒力与鱼的体温也有关系。

二龄鲢和鳙血液的比较研究

以115尾二龄鲢和91尾二龄鳙为材料，测定了血液中红细胞数，白细胞数、血红蛋白值、红细胞脆性值、比积及比重，红细胞沉降率，白细胞分类计数值及各型血细胞大小等正常值．结果显示：红细胞和白细胞值，比积值及淋巴细胞所占百分比值均是鲢高于鳙，而红细胞沉降率和中性粒细胞值却是鳙高于鲢，在鲢上，其血液指标值也存在雌雄差异，上述血液指标值也存在周年变化。

团头鲂和日本白鲫血液的比较研究

在８２尾团头鲂（Ｍｅｇａｌｏｂｒａｍａ ａｍｂｌｙｃｅｐｈａｌａ）和 ４８尾日本白鲫（Ｃａｒａｓｓｉｕｓ ａｕｒａｔｕｓ ｃａｖｉｅｒｉ）材料鱼上测定了血液中红细胞数、白细胞数、血红蛋白值，红细胞脆性值，比积及比重，血细胞沉降率、白细胞分类计数及各型血细胞大小等正常值和上述常数值的雌雄差异，周年变化及鱼种间的差异，为鱼类血液学提供了较为系统的资料。