枳实及其主要活性成分促进脾虚模型大鼠胃肠运动的机制研究

目的:研究枳实及其主要活性成分促进脾虚模型大鼠胃肠运动的机制。方法:将170只大鼠随机分为空白组(10只)和造模组(160只),造模组大鼠以苦寒泻下+饥饱失常法复制脾虚模型。造模后,将大鼠随机分为模型组,柚皮苷低、中、高剂量组(3.267、6.535、13.070 mg/mL),新橙皮苷低、中、高剂量组(3.865、7.730、15.460 mg/mL),辛弗林低、中、高剂量组(0.252、0.504、1.008 mg/mL),3个单体成分(即柚-新-辛)低、中、高剂量配伍组和枳实水煎液低、中、高剂量组(0.104、0.208、0.416 g/mL,以生药计),每天ig给药1次,10 mL/kg,连续7 d。末次给药后,检测大鼠血清胃泌素(GAS)和血浆乙酰胆碱(ACh)、胃动素(MTL)、P物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠血清GAS水平和血浆ACh、MTL、SP水平降低(P<0.01),血浆VIP水平升高(P<0.05)。与模型组比较,除柚皮苷高剂量组和辛弗林各剂量组大鼠血清GAS水平外,其余各给药组均明显升高(P<0.05或P<0.01);新橙皮苷高剂量组、辛弗林高剂量组和枳实水煎液低剂量组大鼠血浆ACh水平显著升高(P<0.01);新橙皮苷中、高剂量组,辛弗林高剂量组,低、中剂量配伍组和枳实水煎液中、高剂量组大鼠血浆MTL水平显著升高(P<0.05);柚皮苷低、中剂量组和新橙皮苷各剂量组大鼠血浆SP水平显著升高(P<0.05或P<0.01);柚皮苷低剂量组,辛弗林高剂量组和枳实水煎液低、中剂量组大鼠血浆VIP水平显著降低(P<0.05)。结论:枳实可能通过促进GAS、ACh、MTL的分泌和抑制VIP的分泌来促进脾虚模型大鼠的胃肠运动;其与3个单体成分对胃肠激素的调节作用有差异。

对枳实和枳壳药用品种变迁的思考

枳实来源于芸香科植物酸橙及其栽培变种或甜橙的干燥幼果,枳壳来源于酸橙及其栽培变种干燥未成熟的果实,其均为中医临床常用理气药。但在宋代以前,其药用正品来源与现今不同。本文从基源变迁、化学成分和现代研究等方面对其基源变迁前后的枳实、枳壳进行比较,以寻求其基源变迁的原因,为将来找寻更加适用于现代中医临床病症的中药替代品或扩大中药资源利用的研究提供参考。

不同采收期江枳壳中柚皮素和橙皮素HPLC含量测定

目的建立HPLC法测定江枳壳药材中柚皮素和橙皮素含量的方法。方法采用Diamonsil C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水(磷酸调pH值2-3)=29:71为流动相,流速1.0 m L·min^(-1),柱温25℃,检测波长283 nm。结果柚皮素和橙皮素进样量分别在0.065 8~0.658μg和0.021 2~0.212μg范围内呈良好的线性关系,相关系数均为0.999 8;柚皮素和橙皮素平均回收率(n=6)分别为102.2%和101.7%,其RSD值分别为1.7%和2.3%。江枳壳中柚皮素和橙皮素含量分别在0.09‰~0.35‰和0‰~0.11‰范围内。结论柚皮素和橙皮素的含量随采收期的推迟而降低。本法简便、准确、可靠,可用于枳壳药材中柚皮素和橙皮素的含量测定。

绿衣枳壳中枳属苷的提取工艺研究

目的优选绿衣枳壳中枳属苷的最佳提取工艺。方法高效液相色谱法测定绿衣枳壳中枳属苷的含量,以枳属苷的含量为指标,应用单因素试验结合正交试验法优化绿衣枳壳中枳属苷的提取工艺。结果绿衣枳壳中枳属苷的最佳提取工艺为加入6倍量90%乙醇,提取3次,每次1 h。结论该提取工艺方法简单、稳定可行,可以为绿衣枳壳中枳属苷的大规模化生产工艺提供理论依据。

枳壳中芸香柚皮苷和橙皮苷配伍对正常小鼠小肠推进作用的影响

目的:分别考察枳壳(主要含有柚皮苷和新橙皮苷)和"杂交枳壳"(主要含有芸香柚皮苷和橙皮苷)水煎液以及芸香柚皮苷和橙皮苷配伍给药对正常小鼠小肠推进作用的影响,以期寻找枳壳的药效物质。方法:采用炭末推进法,以正常小鼠小肠的炭末推进率为指标,观察枳壳和"杂交枳壳"水煎液、芸香柚皮苷和橙皮苷配伍给药对正常小鼠小肠推进作用的影响。结果:枳壳和"杂交枳壳"水煎液,芸香柚皮苷和橙皮苷配伍给药各剂量组与空白对照组比较均有显著性差异(P<0.01)。结论:芸香柚皮苷和橙皮苷是枳壳的药效物质。

多溶剂萃取法分离制备绿衣枳壳中枳属苷

目的建立一种从绿衣枳壳中快速分离制备高纯度枳属苷的方法。方法采用多溶剂萃取法将枳属苷从绿衣枳壳乙酸乙酯萃取部分粗提物中分离出来,并通过多次试验优化了多溶剂萃取法条件,枳属苷最佳分离实验条件为:萃取溶剂V(甲醇):V(氯仿)=6:5,分相液为水,V(萃取溶剂):V(分相液)=11:4。结果该法所得的枳属苷单体,经HPLC峰面积归一化法计算其纯度均不低于98%。结论多溶剂萃取法是一种简单。高效的分离制备绿衣枳壳中枳属苷的方法。

星点设计-响应面法优化肉桂油β-环糊精包合物制备工艺

目的:优化肉桂油β-环糊精包合物(β-CD)的制备工艺。方法:采用研磨法制备肉桂油β-CD包合物。以包合物中桂皮醛含量为评价指标,采用星点设计-响应面法考察包合比例、包合温度和包合时间对肉桂油β-环糊精包合物制备工艺的影响,对试验数据进行多元线性回归和二项式方程拟合,通过效应面法优选包合工艺并进行预测分析。以高效液相色谱法(HPLC)和热重差热分析法(TG-DTA)对该包合物进行质量评价。结果:肉桂油β-CD包合物制备的最佳包合工艺为β-CD与肉桂油的包合比例(g/g)10∶1,包合温度50℃,包合时间58 min。包合物中桂皮醛含量预测值为10.21%。实际值测得包合物中桂皮醛平均含量为10.10%,与预测值的偏差依次为:0.68%,1.56%和0.98%。结论:HPLC和TG-DTA分析表明肉桂油包合物已制备成功,采用星点设计-响应面法优化肉桂油β-环糊精包合物制备工艺,方法简便,可预测性良好,为肉桂油的应用提供科学依据。

陈皮及其主要活性成分对脾虚模型大鼠血清胃泌素、血浆乙酰胆碱、P物质、胃动素和血管活性肠肽的影响

目的:考察陈皮及其主要活性成分对脾虚模型大鼠血清胃泌素(GAS)、血浆乙酰胆碱(ACh)、P物质(SP)、胃动素(MTL)和血管活性肠肽(VIP)的影响。方法:以苦寒泻下加饥饱失常法复制大鼠脾虚模型,陈皮水煎液、橙皮苷、辛弗林及4个单体组合物(橙皮苷、辛弗林、川陈皮素、橘皮素)分别灌胃给药,采用ELISA法检测血清GAS、血浆ACh、SP、MTL和VIP的含量变化,考察陈皮水煎液及其主要活性成分对脾虚模型大鼠的影响。结果:模型组大鼠ACh、GAS、MTL和SP含量较空白对照组明显降低,而VIP含量则显著增加。给药后,吗丁啉6 mg/kg组GAS和MTL水平较模型组显著升高;橙皮苷12.68 mg/kg剂量组血清中GAS含量与模型组比较显著增加;橙皮苷12.68、25.36 mg/kg剂量组血浆中ACh含量,6.34 mg/kg剂量组血浆中SP含量,6.34、12.68、25.36 mg/kg剂量组血浆中MTL含量以及6.34 mg/kg剂量组血浆中VIP含量较模型组明显降低。辛弗林8.4 mg/kg剂量组血浆中ACh和MTL水平较模型组显著增加;辛弗林2.1 mg/kg剂量组血浆中SP含量和8.4 mg/kg剂量组血浆中VIP含量与模型组比较明显降低。4个单体组合物46.36 mg/kg剂量组血清中GAS、血浆中ACh以及SP含量较模型组比较显著增加;4个单体组合物11.59mg/kg剂量组血清中GAS、血浆中ACh、SP含量以及四个单体组合物11.59、23.18、46.36 mg/kg剂量组血浆中MTL含量与模型组比较明显降低。陈皮水煎液1.05 g/kg剂量组血清中GAS含量,4.2 g/kg剂量组血浆中ACh和SP含量与模型组比较明显增加;陈皮水煎液1.05、2.1 g/kg剂量组血浆中MTL和VIP含量较模型组明显降低。结论:橙皮苷和辛弗林是陈皮的药效物质。橙皮苷可能通过升高GAS的含量和抑制ACh、SP、MTL和VIP的分泌来促胃肠运动;辛弗林可能通过增加ACh和MTL的分泌和降低SP和VIP的含量来促胃肠运动;陈皮可能通过升高ACh、GAS和SP的含量和抑制MTL和VIP的分泌来促胃肠运动,这可能是陈皮促胃肠动力的机制之一。

多溶剂萃取法分离制备陈皮中的川陈皮素和橘皮素

目的:建立一种从陈皮中快速分离制备高纯度川陈皮素和橘皮素的方法。方法:采用多溶剂萃取法将川陈皮素和橘皮素从陈皮三氯甲烷萃取部分粗提物中分离,并通过多次试验优化了多溶剂萃取法条件,川陈皮素和橘皮素的最佳分离实验条件为:萃取溶剂丙酮∶石油醚=6∶5(v/v),分相液为水,萃取溶剂∶分相液=11∶5(v/v)。结果:该法所得的川陈皮素和橘皮素单体,经HPLC峰面积归一化法计算其纯度均不低于98%。结论:多溶剂萃取法是一种简单、高效的分离制备陈皮中川陈皮素和橘皮素的方法。

HPLC法同时测定绿衣枳壳中水合橘皮内酯、橘皮内酯、马尔敏和葡萄内酯的含量

目的:建立绿衣枳壳中水合橘皮内酯、橘皮内酯、马尔敏和葡萄内酯同时测定的HPLC方法。方法:采用Diamonsil C_(18)柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相:甲醇-水(38∶62),流速1.0 m L·min^(-1),检测波长:324 nm,柱温:25℃。结果:水合橘皮内、橘皮内酯、马尔敏和葡萄内酯分别在0.003 8~0.022 9μg(r=0.999 7)、0.005 8~0.034 7μg(r=0.999 5),0.006 5~0.038 9μg(r=0.999 2)和0.822 6~4.935 7μg(r=0.999 8)的进样量范围内呈良好的线性关系;其平均回收率(n=6)分别为103.50%,97.80%,99.51%和105.00%,其RSD值分别为2.1%,1.7%,2.9%和2.5%。结论:本法简便、准确,可用于绿衣枳壳中水合橘皮内酯、橘皮内酯、马尔敏和葡萄内酯的含量测定。

高速逆流色谱法分离制备枳壳中水合橘皮内酯等3个标准物质的研究

目的:采用高速逆流色谱法从枳壳中分离制备高纯度的水合橘皮内酯、川陈皮素和橘皮素。方法:枳壳用乙醇回流提取,经三氯甲烷萃取得到萃取物,再应用制备型高速逆流色谱仪,通过优化各分离条件,以石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(10:9:7:8)四元两相溶剂系统上相为固定相,下相为流动相,高速逆流色谱仪转速880 r·min^(-1),流动相流速2 mL·min^(-1),制备分离枳壳三氯甲烷萃取部分粗提物,所得产物的纯度经HPLC检测,结构经EI-MS、~1H-NMR和^(13)C-NMR鉴定。结果:100 mg粗提物经270min 1次分离制备得到了3个化合物,鉴定为水合橘皮内酯、川陈皮素和橘皮素,称量,水合橘皮内酯8.8 mg、川陈皮素7.3 mg和橘皮素4.7mg,采用峰面积归一化法计算其质量分数分别为96.70%、97.89%和98.52%。结论:由该法从枳壳中分离制备水合橘皮内酯、川陈皮素和橘皮素简便、经济,所得化合物纯度高,可作为枳壳药材质量控制的参考物质。

绿衣枳壳中葡萄内酯的含量高效液相色谱法测定

目的建立HPLC法测定绿衣枳壳药材中葡萄内酯含量的方法。方法采用Diamonsil C18(150mm×4.6 mm,5 m),流动相:乙腈-水(80∶20),流速1.0ml·min^(-1),检测波长324nm,柱温25℃。结果葡萄内酯在0.088 96~0.533 76μg(r=0.9999)的进样量范围内呈良好的线性关系;其平均回收率(n=6)为98%,RSD为0.5%。结论该文法准确、简便,可用于绿衣枳壳药材中葡萄内酯的含量测定。

HPLC法测定酸橙枳壳和枸橘枳壳中黄酮苷的含量

目的:建立酸橙枳壳和枸橘枳壳中异柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和枳属苷同时测定的HPLC方法。方法:采用Dikma C_(18)(2)柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)-0.1%磷酸水(B)为流动相,梯度洗脱(0~10 min,20%A;10~11 min,20%A→30%A;11~25 min,30%A),流速1.0 m L·min^(-1),检测波长283 nm,柱温25℃。结果:异柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和枳属苷进样量分别在0.864 0~6.912μg(r=0.999 5)、418.0~3 344μg(r=0.999 1)、18.21~145.6μg(r=0.999 6)、422.1~3 376μg(r=0.999 7)、204.2~1 633μg(r=0.999 1)的范围内呈良好的线性关系;平均回收率(n=6)分别为102.5%、99.60%、101.4%、100.1%和99.61%,其RSD分别为1.5%、2.1%、1.9%、0.34%和0.23%。17批酸橙枳壳中异柚皮苷含量均为0.01%,柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和枳属苷的含量范围分别为5.73%~12.2%、0.10%~0.61%、2.18%~7.27%和1.03%~1.90%。9批枸橘枳壳中异柚皮苷含量均为0.02%;柚皮苷和枳属苷含量范围分别为1.90%~7.34%和1.11%~4.14%;部分枸橘枳壳中橙皮苷含量低于定量限,最高为0.40%;新橙皮苷含量均低于定量限。酸橙枳壳中柚皮苷和新橙皮苷含量与枸橘枳壳相比均较高,异柚皮苷、橙皮苷和枳属苷含量与枸橘枳壳相比均较低。结论:本法可用于酸橙枳壳和枸橘枳壳中异柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和枳属苷的含量测定。

枳壳及其主要活性成分对脾虚模型大鼠血清胃泌素、血浆乙酰胆碱、胃动素、P物质和血管活性肠肽的影响

目的研究枳壳水煎液及其主要活性成分对脾虚模型大鼠血清胃泌素(GAS)、血浆乙酰胆碱(ACh)、胃动素(MTL)、P物质(SP)和血管活性肠肽(VIP)的影响。方法以苦寒泻下加饥饱失常法复制大鼠脾虚模型,枳壳水煎液及其主要活性成分分别灌胃给药后,采用ELISA法检测大鼠血清胃泌素、血浆乙酰胆碱、胃动素、P物质和血管活性肠肽的含量变化,观察各组给药后对脾虚模型大鼠胃肠激素的影响。结果与空白对照组比较,模型组大鼠中ACh、GAS、MTL和SP含量显著降低(P<0.01),而VIP含量则显著升高(P<0.05)。各组给药后,柚皮苷低、中、高剂量组血浆中ACh含量,柚皮苷低剂量组血浆中SP含量和柚皮苷低剂量组中VIP含量与模型组比较显著降低(P<0.05,P<0.01),而柚皮苷中、高剂量组血浆中SP含量和柚皮苷低、中剂量组血清中GAS含量则较模型组显著升高(P<0.05,P<0.01);新橙皮苷低剂量组血浆中ACh含量较模型组显著降低,而新橙皮苷高剂量组血浆中ACh含量,新橙皮苷低、中、高剂量组血浆中SP含量,新橙皮苷中、高剂量组血浆中MTL含量和新橙皮苷低、中、高剂量组血清中GAS含量则较模型组显著升高;两个单体组合物低剂量组血浆中ACh含量和两个单体组合物低、中剂量组血浆中VIP含量与模型组比较显著降低,而两个单体组合物中、高剂量组血浆中ACh含量,两个单体组合物高剂量组血浆中SP含量,两个单体组合物高剂量组血浆中MTL含量和两个单体组合物低、中、高剂量组血清中GAS含量则较模型组显著升高;枳壳水煎液低剂量组血浆中ACh含量与模型组比较显著降低,而枳壳水煎液高剂量组血浆中MTL含量和枳壳水煎液低、中、高剂量组血清中GAS含量则较模型组显著升高。结论枳壳可能通过升高血清中GAS、血浆中ACh、MTL、SP含量和抑制VIP的分泌来促进胃肠运动,这可能是枳壳治疗胃肠动力障碍性疾病的机制之一。

不同陈皮来源药材中橙皮苷、川陈皮素、橘皮素和辛弗林的含量比较

目的比较不同陈皮来源药材(茶枝柑、温州蜜柑、大红袍、福橘)中橙皮苷、川陈皮素、橘皮素和辛弗林的含量差异,为陈皮"广东新会皮为胜"提供科学依据。方法采用HPLC法测定不同陈皮来源药材中橙皮苷、川陈皮素、橘皮素和辛弗林的含量。结果茶枝柑、温州蜜柑、大红袍和福橘中橙皮苷含量分别在4.503%~9.571%、6.065%~10.727%、4.95%~11.25%、5.417%~8.26%之间;辛弗林含量分别在0.138%~0.46%、0.256%~0.733%、0.23%~0.356%、0.236%~0.465%之间;川陈皮素含量分别在0.048%~0.42%、0.031%~0.769%、0.301%~1.048%、0.026%~0.895%之间;橘皮素含量分别在0.026%~0.375%、0.011%~0.717%、0.164%~0.546%、0.012%~0.627%之间。结论陈皮"广东新会皮为胜"可能与上述4个主要活性成分含量差异有关。