影响结核性胸腔积液并发胸膜增厚的非条件Logistic回归分析

目的探讨影响结核性胸腔积液并发胸膜增厚的相关危险因素。方法回顾性分析2019年1月至2021年3月广州市胸科医院呼吸内科收治的123例结核性胸腔积液患者的临床资料,统计患者胸膜增厚情况,采用单因素及非条件Logistic回归法分析患者胸膜增厚的影响因素。结果胸膜未增厚与胸膜增厚患者性别、年龄、肺结核、胸水分布、用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FVE1)/FVC、胸水腺苷脱氨酶(ADA)、血清ADA、胸水白细胞、胸水淋巴细胞、胸水中性粒细胞和淋巴细胞比例比较差异无统计学意义;胸膜未增厚与胸膜增厚患者胸水量、胸水吸收时间、FVE1、胸水乳酸脱氢酶(LDH)、血清LDH、胸水蛋白、血清蛋白比较差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,胸水量(中大量)、FVE1、胸水LDH、血清LDH、胸水蛋白及血清蛋白是胸膜增厚发生的危险因素(P<0.05)。结论结核性胸腔积液并发胸膜增厚是多因素作用的结果,胸水量、FVE1、胸水吸收时间、胸水LDH、血清LDH、胸水蛋白和血清蛋白与胸膜增厚的发生密切相关,建议临床予以密切监测并积极采取针对性干预措施。

亚洲分枝杆菌肺病一例并文献复习

目的:报道1例亚洲分枝杆菌肺病患者临床诊治过程,并结合文献分析该病临床特征、影像特点及预后。方法:以1971年1月至2019年9月为检索时间,分别从PubMed数据库中以“Mycobacterium asiaticum”为检索词检索到27篇相关文献,其中仅有7例为亚洲分枝杆菌肺病患者报道;而以“亚洲分枝杆菌,肺病”为检索词在万方数据库和中国知网数据库中均未检索到相关文献。总结本例患者特征并进行入选患者文献复习。结果:本例亚洲分枝杆菌肺病患者为中老年女性,且合并结构性肺病,以咳嗽、咳痰为主诉,以支气管扩张、空洞为主要影像表现,痰液及肺泡灌洗液抗酸杆菌涂片及快速分枝杆菌培养均为阳性,DNA微阵列芯片法菌种鉴定均为结核分枝杆菌复合群,药物敏感性试验(液体法)提示对利福平、异烟肼、左氧氟沙星、贝达喹啉均耐药,血γ-干扰素释放试验、痰液及肺泡灌洗液TB-RNA和TB-DNA、探针熔解曲线法检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药均为阴性,经肺泡灌洗液多种病原体靶向测序(tNGS)提示为亚洲分枝杆菌而临床确诊。抗非结核分枝杆菌药物治疗8个月后,患者呼吸道症状缓解、病灶好转,痰液及肺泡灌洗液分枝杆菌培养阴转,治疗有效。另7例报道患者中,合并结构性肺病4例,合并肿瘤1例(未启动治疗),5例肺部病灶以结节和空洞形成为主;治疗方案存在差异,其中3例接受1年以上治疗后实现临床治愈,2例临床症状及影像学有好转(包括1例实现细菌学阴转),1例复发。结论:亚洲分枝杆菌肺病相关报道较少,临床表现不典型,易误诊,对抗酸杆菌涂片及分枝杆菌培养阳性且菌种鉴定提示为结核分枝杆菌复合群但TB-RNA和TB-DNA阴性的患者,应注意排除非结核分枝杆菌肺病,tNGS检测有助于临床诊断,值得临床医生重视。

广州市非结核分枝杆菌病流行病学特征分析

目的:分析广州市非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacteria,NTM)病的一般情况及流行病学特点,为制定和实施有效的预防和管理NTM病提供参考信息。方法:回顾性分析2018年1月1日至2023年12月31日广州市新发NTM病患者2714例,并对各年度NTM病的检出率趋势,以及性别、年龄、菌种/群分布特点进行分析。使用9个连续的年龄段分析了年龄对NTM病的影响,并重点对比青年组(21~40岁)和中老年组(51~70岁)的检出差异;根据感染部位的不同,分成肺内组、肺外组、播散组三组进行分析。结果:广州市6年新发NTM病的检出率呈波动趋势,由2018年的男性构成比41.10%(194例)下降至2023年的38.10%(205例),2018年的女性构成比由58.90%(278例)上升至2023年61.90%(333例),男性所占比例逐年降低,女性所占比例逐年升高。好发年龄段为51~70岁,占总病例的51.62%(1401/2714),青年组(21~40岁)构成比呈下降趋势,由2018年的23.09%(109/472)下降至2023年的16.36%(88/538);中老年组(51~70岁)构成比呈上升趋势,由2018年的48.31%(228/472)上升至2023年的55.76%(300/538)。6年广州市新发NTM病患者2714例,其中肺内组(97.09%,2635/2714)NTM分离菌种前4位分别是:鸟-胞内分枝杆菌复合群(M.avium complex,MAC)(43.42%,1144/2635)、龟-脓肿分枝杆菌复合群(Turtle-M.abscessus complex,MABC)(36.39%,959/2635)、堪萨斯分枝杆菌(8.50%,224/2635)、偶发分枝杆菌(4.10%,108/2635);肺外组(1.69%,46/2714)NTM分离菌种前4位分别是:MABC(34.78%,16/46)、偶发分枝杆菌(21.74%,10/46)、MAC(19.57%,9/46)、海分枝杆菌(15.22%,7/46);播散组(1.22%,33/2714)NTM分离菌种前4位分别是:MAC(42.42%,14/33)、MABC(27.27%,9/33)、堪萨斯分枝杆菌(15.15%,5/33)、偶发分枝杆菌(6.06%,2/33);MAC肺病构成比略上升,由2018年的39.19%(185/472)升至2022年的48.48%(176/363)和2023年的44.61%(240/538);MABC肺病构成比呈下降趋势,由2018年的38.98%(184/472)下降至2023年的30.30%(163/538)。结论:广州市中老年患者对NTM易感,女性多于男性,青年组(21~40岁)构成比呈下降趋势,中老年组(51~70岁)构成比呈上升趋势;NTM肺病菌种以MAC、MABC为主,MABC肺病构成比呈下降趋势。

肺癌合并肺结核的蛋白组学图谱及差异表达蛋白功能分析

目的旨在分析肺癌合并肺结核(LC-PTB)患者的外周血蛋白组学特征,寻找其与肺癌(LC)患者的差异蛋白并对差异蛋白进行功能分析。方法研究共纳入8例LC-PTB患者和10例LC患者,LC均为经病理确诊且未接受任何治疗的初诊患者,PTB均为采样时结核杆菌病原性阳性。应用液相色谱-质谱串联技术对上述患者的外周血样本进行蛋白质组学检测,并评估其间的差异蛋白,进而通过生物信息学进行功能分析。结果两组共检测到5185种蛋白质,识别出190种差异蛋白,其中58种表达上调,132种表达下调。亚细胞定位分析显示,差异蛋白主要集中在细胞质、细胞核和细胞外基质。KEGG通路及GO分析进一步揭示了差异蛋白在免疫反应、新陈代谢和分泌调控等生物过程中的作用。蛋白质互作网络分析指出SORT1、SAR1B、RPS6KB1、VWF、SHC1、SRPRB、CTSD、TARDBP、RPLP0、PSMA2、RPS6、XPO1、PRKACB、HLA-DRB1等可能在LC-PTB发生发展中发挥重要作用。此外,ADA2、MAP3K1、GLS2等蛋白的表达变化也可能与LC-PTB的发展密切相关。结论蛋白组学图谱全面描述了LC-PTB的蛋白组学特征并发现众多表达差异蛋白,有望为LC-PTB生物学机制研究提供进一步的线索。

腺苷脱氨酶诊断结核性胸膜炎的影响因素探讨

目的探讨腺苷脱氨酶（ADA）诊断结核性胸膜炎的影响因素。方法收集广州市胸科医院2011年10月至2014年9月收治的162例明确诊断为结核性胸膜炎患者。检测患者胸腔积液的ADA值，并以胸腔积液ADA值43Iu／L为临界值，分成低ADA组（〈43IU／L，32例）和高ADA组（≥43IU／L，130例）。评估两组患者年龄、性别、体质量指数、吸烟、既往患结核病及合并疾病与胸腔积液ADA活性的相关性。采用SPSS20．0软件进行统计学分析，计量资料采取t检验，计数资料采用x2检验，采用多因素非条件logistic回归方程分析相关性，P〈0．05为差异有统计学意义。结果（1）两组结核性胸膜炎中，低ADA组年龄均值为（60．3±14．4）岁，明显高于高ADA组[（41．8±20．1）岁]，差异有统计学意义（t=2．105，P〈0．05）；低ADA组体质量指数值为（17．7±1．3）kg／m2，明显低于高ADA组[（21．2±3．2）kg／m2]，差异有统计学意义（t=2．341，P〈0．05）。（2）在低ADA组中，通过多因素回归分析，体质量指数、目前吸烟和年龄是影响结核性胸膜炎患者胸腔积液ADA值的独立因素，三者对其的影响强度依次下降[OR值（95％CI值）分别为3．345（2．101～5．737）、2．822（2．095～8．609）和1．338（1．080～1．825）；P值分别为0．022、0．031和0．003]。结论年龄、体质量指数和吸烟能够影响结核性胸膜炎患者胸腔积液中的ADA水平。临床医生采用ADA诊断结核性胸膜炎时需要充分考虑这些因素。

低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌RT-PCR检测中内参基因的选择

目的评价实时荧光定量PCR分析低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌基因表达时12个候选内参基因表达的稳定性,获得最适合的内参基因。方法以低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌为研究对象,选择文献报道的常用12种内参基因为候选内参基因,利用ge Norm和Norm Finder程序分析实时荧光定量PCR数据,筛选出最适内参基因。结果 12个候选内参基因在低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌表达稳定性由强到弱顺序为:TBP>B2M>HPRT1>HMBS>RPL13a>18sRNA>PPIA>ACTB>GUSB>TFRC>GAPDH>PGK1,平均表达稳定度(M值)均<0.5,ge Norm和Norm Finder评估后推荐使用TBP和B2M一起作为该研究时的内参基因。结论同时使用TBP和B2M是实时荧光定量PCR分析低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌基因表达的最适合内参基因,为低氧性肺动脉高压相关基因研究提供最优内参基因。

MAV3104与鸟胞内分枝杆菌复合群耐克拉霉素作用研究

目的研究鸟胞内分枝杆菌复合群(MAC)MAV3104基因编码蛋白与药物外排的关系。方法以MAC标准株基因组为模板,扩增MAV3104基因,构建p MV261-MAV3104c重组质粒;测序正确后,转化重组质粒到大肠杆菌DH5并在MAC标准株中诱导表达,Western Blot鉴定MAV3104表达;按照CLSIM24-A2的操作要求检测MAC标准株对克拉霉素的敏感性及外排泵抑制试验。结果经基因测序及Western Blot蛋白表达验证重组质粒构建成功;MAV3104过表达能提高鸟分枝杆菌对克拉霉素的MIC,且硫利达嗪能抑制该作用;MAV3104过表达也能提高胞内分枝杆菌对克拉霉素的MIC,但硫利达嗪对其没有抑制效应。结论 MAV3104转运蛋白介导的药物外排在鸟分枝杆菌耐克拉霉素中起重要作用。

慢性缺氧对大鼠肺静脉平滑肌细胞内钙离子浓度的影响

目的:探索原代培养肺动脉高压模型大鼠肺静脉平滑肌细胞(PVSMCs)是否具有血管平滑肌功能及L型电压依赖性钙通道(VDCC)阻断剂硝苯地平对其细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)的影响,为慢性缺氧性肺动脉高压发病机制的研究提供理论依据。方法:用显微镜操作和胶原酶消化法分离、培养肺动脉高压模型大鼠肺静脉平滑肌细胞,鉴定培养的细胞及计算纯度,利用细胞内钙离子浓度检测系统观察慢性缺氧对PVSMCs静息[Ca2+]i的影响及硝苯地平的干预作用。结果:该方法培养的肺动脉高压模型造模的PVSMCs呈典型的平滑肌特性,表现为"峰-谷"状生长,免疫化学α-Actin鉴定显色,而且培养纯度达到98%;慢性缺氧能使PVSMCs的静息[Ca2+]i从(104.3±7.9)nmol/L提高到(197.9±11.8)nmol/L(P<0.05);5 mmol/L的硝苯地平能完全阻断慢性缺氧PVSMCs的[Ca2+]i对高钾溶液的反应。结论:慢性缺氧可使PVSMCs的静息[Ca2+]i升高,其机制可能与激活PVSMCs的VDCC导致细胞外Ca2+内流有关。

原代培养的大鼠远端肺动脉平滑肌细胞的功能研究

目的探索原代培养的大鼠远端肺动脉平滑肌细胞(PASMC)是否具有血管平滑肌的功能,为缺氧性肺动脉高压等肺血管疾病发病机制及药物干预研究打下基础。方法采用显微操作和胶原酶消化法分离、培养大鼠远端PASMC,对培养细胞进行形态学观察、平滑肌α-actin免疫荧光染色鉴定,并用荧光显微镜法观测高钾(60 mmol·L-1KCl)溶液对大鼠远端PASMC的细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)的影响。结果培养的大鼠远端PASMC呈血管平滑肌细胞典型的"峰、谷"状生长,平滑肌α-actin免疫荧光染色呈阳性反应,60 mmol·L-1KCl溶液使PASMC的[Ca2+]i明显增高,5μmol·L-1硝苯地平能完全阻断PASMC的[Ca2+]i对KCl溶液的反应。结论原代培养的大鼠远端PASMC具有典型血管平滑肌细胞形态学、免疫学特征,具有功能正常的电压依赖性钙通道(VDCC),可广泛用于缺氧性肺动脉高压等肺血管疾病发病机制及药物干预的研究。

鸟-胞内分枝杆菌复合群与龟-脓肿分枝杆菌肺病并发支气管扩张的CT征象比较

目的探讨鸟-胞内分枝杆菌复合群(MAC)肺病与龟-脓肿分枝杆菌肺病并发支气管扩张患者CT征象的差异,提高对两种疾病并发支气管扩张的鉴别诊断水平。方法搜集2017年1—12月在广州市胸科医院门诊及住院治疗并经临床确诊的25例并发支气管扩张的鸟-胞内分枝杆菌复合群肺病患者(简称“A组”)和26例并发支气管扩张的龟-脓肿分枝杆菌肺病患者(简称“B组”),两组患者均为初诊或未经抗结核和抗非结核分枝杆菌(NTM)治疗。对两组患者的CT扫描资料进行回顾性分析,主要就两组患者支气管扩张(CT分型、分布)、肺内病灶的形态(微结节、树芽征、结节、实变等)、伴发空洞(类型、分布)的CT征象特点及并发症发生情况进行对比分析。结果B组左肺下叶支气管扩张、左肺下叶微结节、肺体积收缩的比率分别为57.69%(15/26)、84.62%(22/26)、61.54%(16/26),均明显高于A组[分别为28.00%(7/25)、56.00%(14/25)、32.00%(8/25)],差异均有统计学意义(χ^2值分别为4.58、5.03、4.46,P值分别为0.032、0.025、0.035)。A组柱状型支气管扩张占52.00%(13/25),高于B组(15.38%,4/26);B组囊状型支气管扩张占50.00%(13/26),高于A组(16.00%,4/25),差异均有统计学意义(χ^2值分别为7.69、6.63,P值分别为0.006、0.010)。结论龟-脓肿分枝杆菌肺病患者的CT表现中,左肺下叶支气管扩张、左肺下叶微结节、肺体积收缩的发生率高于MAC肺病患者;龟-脓肿分枝杆菌肺病多并发囊状型支气管扩张,而MAC肺病多并发柱状型支气管扩张,以上特征性CT征象有助于两种疾病的鉴别。

常压慢性持续缺氧大鼠肺动脉高压模型的建立

目的探索大鼠肺动脉高压模型的建立方法,为慢性缺氧性肺动脉高压发病机制等方面研究提供实验动物模型。方法 Wistar大鼠常压持续缺氧3周,观测大鼠体重、平均肺动脉压(MPAP)、右心室收缩压(RVSP)、右心室肥大指数[RV/(LV+S)]、红细胞比容,并观测肺血管病理学改变及血管壁相对厚度指数(RTI)。结果缺氧组大鼠体重增长缓慢,MPAP、RVSP、RV/(LV+S)、红细胞比容明显高于对照组(P<0.05)。肺组织病理检查示缺氧组大鼠肺内血管管壁明显增厚,管腔狭窄,RTI较对照组显著增加(P<0.05)。结论常压慢性持续缺氧3周能形成较理想的大鼠肺动脉高压模型。

结核性胸膜炎患者血清与胸腔积液蛋白质组的初步分析

目的:比较分析结核性胸膜炎患者血清与胸腔积液蛋白质组的异同,为探讨结核性胸膜炎的发生机制和寻找诊断标志物提供实验依据。方法:采用弱阳离子交换蛋白质芯片(WCX2)处理分析样本、应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术,以蛋白质/多肽质荷比(m/z)区分不同的蛋白质/多肽,对5例结核性胸膜炎患者血清与胸腔积液蛋白质组进行描述性分析。结果:(1)在5例患者血清中检测到134种血清蛋白质/多肽,其中76种在胸腔积液中未出现;在5例患者胸腔积液中检测到269种蛋白质/多肽,其中211种在血液中未出现。(2)在5例患者血液中均检测到m/z分别为2660、3191、4208、5903、7764、9287等6种蛋白质/多肽;在5例患者胸腔积液中均检测到m/z分别为2416、2660、2900、2940等4种蛋白质/多肽;在5例患者血液和胸腔积液中均检测到m/z为2660的蛋白质/多肽。结论:结核性胸膜炎患者胸腔积液蛋白质组远比其血清蛋白质组复杂,对其进行深入研究有助于明晰结核性胸膜炎的发生机制和寻找诊断标志物。

质量控制小组对提高结核科患者痰标本采集质量的作用

目的探讨质量控制小组对提高结核科患者痰标本采集质量的作用。方法2014年11月广州市胸科医院内科成立质量控制小组。质量控制小组采取建立患者痰标本采集流程和相关指引，加强对患者的健康教育，加强医护人员相关知识培训，普及护士对痰标本采集的规范操作和宣传教育要点，责任到人、分工细化、明确职责等措施。2014年8月1日至2014年10月31日质量控制小组成立前收治320例疑似肺结核患者，医嘱留痰2088份；2014年11月1日至2015年2月28日质量控制小组成立后收治的386例疑似肺结核患者，医嘱留痰2417份。比较质量控制小组成立前后痰标本采集率和合格率。应用SPSS19．0统计软件进行数据分析，计数资料采用z。检验，以P〈O．05为差异有统计学意义。结果质量控制小组成立前痰标本采集率为84．6％（1767／2088），痰标本合格率为86．3％（1525／1767）；质量控制小组成立后痰标本采集率为95．0％（2295／2417），痰标本合格率为96．0％（2203／2295），两者痰标本采集率和痰标本合格率差异均有统计学意义（x2值＝6．999和5．361，P值=0．008和0．021）。结论成立质量控制小组，对收集患者痰标本的工作过程进行严格的质量控制，能有效提高结核科患者痰标本的采集质量。

母牛分枝杆菌菌苗联合化疗对老年细胞免疫功能低下肺结核的疗效

目的通过循证医学方法观察和评价母牛分枝杆菌菌苗对于细胞免疫功能状况不同的老年初治免疫功能低下肺结核患者的疗效及安全性。方法采用前瞻性研究方法,将80例老年初治菌阳肺结核患者随机分入化疗联合母牛分枝杆菌菌苗(微卡)的观察组和单纯化疗对照组各40例;同时,根据老年患者治疗前外周血CD4+T淋巴细胞状况两组再分为低下组(Ⅰ组),正常组(Ⅱ组),四组分别在治疗前、治疗2个月6、个月末观察其外周血T淋巴细胞亚群、痰抗酸杆菌涂片及培养结果。结果 (1)观察组2月末CD4+T淋巴细胞和CD4+/CD8+T细胞比值显著升高、CD8+T淋巴细胞显著下降(P<0.05);对照组治疗前、2月末及6月末上述指标均变化不大(P>0.05)。观察组2月末痰菌阴转率较对照组高(P<0.05)。(2)观察Ⅰ组2月末CD4+T淋巴细胞和CD4+/CD8+T细胞比值显著升高、CD8+T淋巴细胞显著下降(P<0.05);对照Ⅰ组治疗前2、月、6月末上述指标变化不大(P>0.05)。观察Ⅰ组2月末痰菌阴转率较对照组高(P<0.05)。(3)观察Ⅱ组治疗前、2月6、月末CD4+T淋巴细胞变化不大(P>0.05);2月末CD8+T淋巴细胞显著下降(P<0.05);CD4+/CD8+T比值明显升高(P<0.05);对照II组治疗前2、个月末、6个月末上述指标变化不大(P>0.05)。两组2个月和6个月末痰菌阴转率相似(P>0.05)。结论治疗前CD4+T淋巴细胞低下的老年患者,采用母牛分枝杆菌菌苗联合治疗能显著改善患者的细胞免疫功能,提高治疗2月末痰菌阴转率。在治疗前CD4+T淋巴细胞正常的老年患者,采用母牛分枝杆菌菌苗,未能提高临床疗效。

B超检查对结核性胸膜炎患者胸腔尿激酶注入疗效评估的分析

目的探讨超声检查对结核性胸膜炎患者胸腔注射尿激酶疗效评估的价值。方法收集2009年1—6月113例结核性胸膜炎的病例资料,对比分析20例胸腔注射尿激酶治疗前后超声检查结果。结果胸腔积液超声改变分为3型,Ⅰ型49例(43.4%),Ⅱ型51例(45.1%),Ⅲ型13例(11.5%)。治疗后,未注射尿激酶组:Ⅰ型胸膜增厚率为12.2%,Ⅱ型为69.4%,Ⅲ型为100%,3组间差异有统计学意义。注射尿激酶组:Ⅱ型胸膜增厚的发生率33.3%,与未注药组(69.4%)比较,差异有统计学意义,Ⅲ型为100%,与未注药组比较差异无统计学意义。结论超声检查对于胸腔注入尿激酶的疗效评估有一定参考价值。

新一代氟喹诺酮类药物在抗结核治疗中的作用

目的探讨新一代氟喹诺酮类药物在抗结核中的作用。方法采用罗氏终点法对340株结核分枝杆菌临床分离株进行体外药敏试验。结果340株结核分枝杆菌对CPLX,LVFX,MXFX的耐药率分别为78.15%,15.88%,5.88%,LVFX,MXFX对初、复治无慢性呼吸道合并症,初、复治伴有慢性呼吸道合并症及MDR-TB的耐药率分别为7.61%、41.18%、25%、49.49%、28.57%、59.53%,1.41%、8%、11.78%、21.11%、19.05%、35.71%。结论环丙沙星不宜用于抗结核治疗,初治无慢性呼吸道疾患合并症患者可以应用左氧氟沙星抗结核治疗,而对于有慢性呼吸道疾患合并症或MDR-TB的患者最好应用莫西沙星。

耐药结核性胸膜炎胸液生化及临床特点

目的对耐药结核性胸膜炎胸液生化指标及临床特点进行分析,探讨其临床特点。方法回顾性分析59例耐药结核性胸膜炎患者(耐药组),同时选择同期住院63例敏感结核性胸膜炎患者作为对照(敏感组)。对两组患者的人口学资料、全身多器官影像学特征、痰涂片找抗酸杆菌及培养、颈部淋巴结活检病理、脑脊液检查、大便培养结核分枝杆菌、外周血及胸液腺苷脱氨酶(ADA)、乳酸脱氢酶(LDH)、蛋白含量、白细胞及分类细胞计数、胸液吸收时间等指标进行分析。结果 (1)耐药组复治病例45例(76.27%),敏感组复治病例22例(34.92%)(X^2=21.04,P<0.01)。(2)耐药组合并肺外结核13例(22.03%),敏感组为5例(7.94%)(P=0.02)。(3)胸膜厚度耐药组为(0.66±0.33)cm,敏感组为(0.44±0.22)cm(P<0.01)。(4)耐药组胸液吸收时间为(9.39±8.56)d,敏感组为(4.73±3.69)d(P=0.000 1)。(5)耐药组患者胸液白细胞数目为(5 444.76±4 270.35)×10~6·L^(-1),较敏感组患者的(3 427.95±2 294.60)×10~6·L^(-1)明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),中性粒细胞及淋巴细胞数目均较敏感组升高(P<0.05)。但分析耐药组中耐多药(MDR)与非MDR组患者间白细胞及分类细胞数目间比较差异无统计学意义(P>0.05)。(6)两组患者胸液及外周血的ADA、LDH、蛋白含量等理化方面的比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论耐药结核性胸膜炎患者的临床特点以复治患者多见、多同时合并其他肺外结核、胸膜增厚明显及胸液吸收时间延长。胸液白细胞总数及淋巴细胞及中性粒细胞计数均较敏感组明显升高,考虑耐药胸膜炎多发展为结核性脓胸或合并感染。其他理化性质(ADA、LDH、蛋白含量)与敏感组对照,差异无统计学意义。胸液理化检测未能作为预测耐药结核性胸膜炎的早期预测指标,期盼更简便、快速、准确、经济的检测方法。

结核性腹膜炎腹水LDH、ADA和T-SPOT检测及其诊断价值

目的探讨乳酸脱氢酶(LDH)、腺苷脱氢酶(ADA)及T细胞斑点试验(T-SPOT)联合检测对结核性腹膜炎患者的临床诊断价值。方法回顾性分析广州市胸科医院2013年6月至2018年6月间收治的66例结核性腹膜炎患者的实验室检测结果,所有患者均行腹水LDH、ADA和T-SPOT检测。采用受试者工作特征曲线(ROC)对各指标单独检测和联合检测的预测结局进行评价,分析LDH、ADA、T-SPOT及LDH+ADA+T-SPOT诊断结核性腹膜炎的灵敏度、特异度和准确性。结果 ROC分析结果显示,LDH+ADA+T-SPOT的预测曲线下面积最大,达0.944。LDH+ADA+T-SPOT联合检测结核性腹膜炎的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值及阴性预测值均明显高于三项指标单一检测,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论腹水LDH、ADA与T-SPOT联合检测有助于提高结核性腹膜炎诊断效果,具有较高的临床诊断价值。

分次胶原酶消化法分离、培养成人肺微小动脉平滑肌细胞

目的:建立一种简便、高效分离和培养成人肺微小动脉平滑肌细胞的方法并鉴定该方法培养的传代细胞生物学特性。方法:分次胶原酶消化法与传统胶原酶消化法进行细胞获得率、细胞存活率及培养成功率比较;绘制生长曲线对原代与传代细胞的生长特性进行分析;细胞形态学观察、平滑肌肌动蛋白(SMα-actin)测定及细胞免疫荧光化学法进行细胞鉴定及纯度计算;比较原代与第10代细胞形态、SMα-actin含量、染色体数量及形态。结果:分次胶原酶消化法优于传统胶原酶消化法,细胞获得率(3.10±0.29vs1.20±0.35)×108cells/L、细胞存活率(69%vs21%)及培养成功率(61.5%vs16.7%)(P<0.01);传代细胞长至融合时间7 d快于原代细胞21d;细胞显典型的"峰-谷"状生长,胞浆内表达SMα-actin,细胞纯度达98%以上;原代与第10代细胞形态、SMα-actin含量、二倍体数量(78.13%vs76.47%)及形态无明显差别(P>0.05)。结论:分次胶原酶消化法是一种简便、可行,获得高纯度、功能良好的成人肺微小动脉平滑肌细胞的方法。经过此方法分离、培养的细胞在10代以内传代培养细胞生物学及遗传学特性稳定,可用于实验。

经典瞬时受体电位蛋白在大鼠远端肺静脉平滑肌细胞的表达

目的：研究经典瞬时受体电位（TRPC）蛋白在大鼠远端肺静脉平滑肌细胞（PvSMC）的表达。方法：利用胶原酶消化法培养大鼠远端PVSMC，并通过形态学和免疫学鉴定PVSMC；采用Real—timePCR和免疫印迹法检测TRPC蛋白在大鼠远端PVSMC的表达。结果：原代培养的PVSMC呈长梭形，表现出典型的血管平滑肌细胞生长特点，并对平滑肌细胞ractin免疫荧光显色呈阳性反应；Real—timePCR显示，在已知的7个TRPC成员（TRPCI—7）中，大鼠远端PVSMC有TRPC-1、TRPC-2、TRPC-3、TRPC-4、和TRPC-6的mRNA表达，表达强弱顺序为：TRPC-6〉TRPC-1〉TRPC-4〉TRPC-3〉TRPC-2，不表达TRPC-5和TRPC-7；免疫印迹法进一步表明，在大鼠远端PVSMC有TRPC-1、TRPC-4和TRPC-6的蛋白表达，表达强弱顺序为TRPC-6〉TRPC-1〉TRPC-4。结论：大鼠远端PVSMC主要表达TRPC-1和TRPC-6，其可能与肺静脉平滑肌细胞内Ca^2＋浓度调节有关。