微波固定组织对超微结构影响的电镜观察

目的 :观察微波照射 (microwaveirradiation ,MI)固定对组织细胞器结构的影响。方法 :将大鼠肝组织分别浸泡在生理盐水、0 2 5 %戊二醛、2 5 %戊二醛、5 %戊二醛液体中 ,按不同时间进行微波照射固定后 ,常规制片 ,电镜观察。结果 :MI时间≤2 0s,液体的温度≤ 2 5℃ ,肝细胞内各有形成分均有一定膨胀。MI时间≥ 6 0s,液体的温度≥ 45℃时 ,肝细胞内各有形成分示不同程度破坏 ,其中戊二醛各组均较生理盐水组严重 ,且戊二醛组中 ,戊二醛浓度越高 ,对细胞内结构破坏性就越大。微波照射在 40s,各组液体的温度为 33℃左右时固定最好 ,超微结构清晰 ,细胞器中各有形成分膨胀及损伤最小。结论 :用微波照射浸泡在生理盐水内固定组织 ,做常规电镜制片 ,不失为一种组织固定的较佳方案。

微波固定对琥珀酸脱氢酶细胞化学影响的电镜观察

对浸泡在四种不同液体（生理盐水、０．２５％戊二醛、２．５％戊二醛、５％戊二醛）中的鼠肝组织进行微波照射固定，并按琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）常规孵育、制片、电镜观察。结果表明：四个组都随微波照射时间增加，液体温度不断升高，肝细胞内线粒体ＳＤＨ酶活性由强逐渐减弱，定位趋于稳定；其中生理盐水ＳＤＨ酶活性保存最好，且以微波照射４０ｓ时，ＳＤＨ酶活性及定位最佳，超微结构清晰。

人巨细胞病毒感染胎鼠大脑皮质神经元显微和超微结构观察

目的 :研究人巨细胞病毒 (HCMV)经小鼠胎盘垂直传播致胎鼠大脑皮质神经元病理改变的显微和超微结构特征。方法 :在 8～ 12周龄Balb/c雌雄小鼠腹腔内接种HCMV后 ,交配 ,待孕鼠临产时剖腹取出 10份胎鼠双侧大脑皮质 ,用光镜和透射电射观察了神经元的显微和超微结构 ,同时进行了病毒分离。结果 :光镜下可见胎鼠脑微血管扩张充血 ,神经元数目明显减少 ,残存的神经元缺血性改变 ,间质水肿 ;可见到软化灶及受染神经元核内及胞质内HCMV特征性嗜碱性和嗜酸性包涵体 ,电镜下可见受染神经元核仁消失 ,胞质内线粒体、内质网和高尔基复合体等重要细胞器结构严重破坏呈空泡状或溶解 ;并找到人类疱疹病毒样颗粒。病毒分离阳性。在同时设置的正常对照组则无上述阳性发现。结论 :HCMV能通过小鼠胎盘感染子代胎鼠大脑皮质神经元 。

医学影像幻灯片制作的体会

医学影像幻灯片制作的体会胡闻，蚁国铮目前医学影像学有很大的发展，如Ｂ超、ＣＴ、Ｘ线片、心脑电图、光镜电镜图像等。如何将这些影像能清晰反映到幻灯片上？以往是用黑白反转片直接得到或是用黑白负片和正片的＂负拷正＂获得。但黑白反转片的价格太贵，国内也很难购到...

新风胶囊对佐剂性关节炎大鼠疗效及滑膜fas、fasL及bcl-2表达的影响

目的 :观察新风胶囊对佐剂性关节炎大鼠疗效及对病变滑膜fas、fasL、bcl 2表达的影响。方法 :采用弗氏完全佐剂造模 ,设立正常组、模型组、甲氨喋呤 (MTX)组、雷公藤 (TPT)组和新风胶囊 (XFC)组 ;记录各组大鼠的关节炎指数及体重变化 ;检测fas、fasL、bcl 2在局部关节滑膜组织中的表达。结果 :与治疗前比较 ,XFC组、TPT组及MTX组治疗后大鼠的关节炎指数显著降低 (P <0 0 1,P <0 0 5 )。XFC组给药前后体重增加值与正常组比较 ,差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;TPT组及MTX组给药前后体重增加值显著低于正常组和XFC组 (P <0 0 1)。与模型组比较 ,XFC组fasL表达显著增加 (P <0 0 5 )、bcl 2、fas表达均有所减少 ,但差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;XFC组上述数据与MTX组、TPT组比较差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论 :XFC与MTX、TPT一样能降低佐剂性关节炎模型大鼠的关节炎指数 ,XFC在增加模型大鼠的体重方面优于MTX和TPT ;XFC可能通过促进fasL的表达、抑制bcl 2的表达 ,促进增生滑膜细胞的凋亡 ,达到抑制滑膜增生的目的。

五子衍宗丸对少弱精子症模型大鼠精子线粒体膜电位及超微结构影响

目的:研究五子衍宗丸对少弱精子症模型大鼠精子线粒体膜电位(MMP)水平及线粒体超微结构的影响。方法:取体重为200～220 g雄性SD大鼠60只,随机分成正常组,模型组,对照组(黄精赞育胶囊组),五子衍宗丸低、中、高剂量组,除正常组外,其他各组大鼠灌服雷公藤多苷[30 mg/(kg.d)],连续8周,制备少弱精子症模型。造模结束后,正常组、模型组给予等容量蒸馏水[10 ml/(kg.d)],对照组给予黄精赞育胶囊溶液[3.01 g/(kg.d)],五子衍宗丸各组分别给予水提液,低剂量组[2.30 g生药/(kg.d)],中剂量组[4.60 g生药/(kg.d)],高剂量组[9.20 g生药/(kg.d)],连续30 d。末次给药后30 min,采用荧光流式细胞技术(JC-1染色)测定精子MMP水平(JC-1+%),并通过透射电镜观察精子线粒体超微结构的改变。结果:①MMP:JC-1+%和强度分别为:正常组70.80±4.92、4 360±945;模型组33.77±6.19、1 4685±496;对照组56.34±10.35、3 277±895;五子衍宗丸低剂量组40.80±10.40、2 016±767;中剂量组59.40±6.51、3 897±643;高剂量组60.71±7.81、3 371±6467。造模各组大鼠精子线粒体JC-1+%及强度均明显下降,与正常组比较差异有显著性意义(P均<0.05);连续给药30 d后,给药各组均能明显提高精子MMP,增加JC-1+%,除低剂量组外,其他用药各组与模型组比较差异有显著性意义(P均<0.05)。②精子线粒体超微结构:雷公藤造模后,精子外膜松散、变性,线粒体肿胀、大小不一、线粒体膜不完整,轴丝结构不清或出现断裂。给予五子衍宗丸30 d后,精子外膜及线粒体膜结构完整,减少线粒体肿胀,轴丝及微管结构基本正常。结论:雷公藤多苷能降低精子MMP水平,破坏线粒体的结构。五子衍宗丸能明显提高少弱精子症模型大鼠精子MMP水平,减轻精子线粒体结构损伤。保护精子线粒体结构与功能的完整是五子衍宗丸治疗少弱精子症的机制之一。

新风胶囊对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞及脾脏淋巴细胞超微结构作用的实验研究

目的 :观察新风胶囊对佐剂性关节炎大鼠治疗作用及对滑膜细胞、脾脏淋巴细胞超微结构的作用。方法 :将 6 0只大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、新风胶囊组和雷公藤组 ,每组 15只 ,制备完全佐剂并分别向除正常对照组以外其余动物右后足跖皮内注射 0 1ml致炎。电镜观察滑膜细胞、脾脏淋巴细胞超微结构变化 (包括线粒体肿胀、空泡变、嵴突病变等 ) ,计算各组线粒体病变率。结果 :与治疗前比较 ,新风胶囊组及雷公藤组治疗后右后足跖肿胀度显著降低 (P <0 0 5 ) ;与模型对照组比较 ,新风胶囊组和雷公藤组治疗后模型大鼠关节滑膜细胞线粒体的病变率显著降低 (P <0 0 5 ) ;新风胶囊组脾脏淋巴细胞线粒体病变率显著降低 (P <0 0 5 ) ,而雷公藤组脾脏淋巴细胞线粒病变率差异无显著性 (P >0 0 5 )。与雷公藤组比较 ,新风胶囊组治疗后滑膜细胞及脾脏淋巴细胞线粒体病变率显著降低 (P <0 0 5 )。结论 :新风胶囊与雷公藤均能降低佐剂性关节炎大鼠病变关节的肿胀度 ,新风胶囊改善佐剂性关节炎大鼠滑膜和脾脏的超微结构病变的作用优于雷公藤 。

人巨细胞病毒先天性中枢神经系统感染小鼠模型的建立

将人巨细胞病毒 (HCMV)接种至 8～ 12周龄Balb/c雌雄小鼠腹腔后 ,交配。待雌鼠临产时剖腹取出胎鼠脑双侧大脑皮层 ,进行病毒分离、病理学检测及用地高辛标记的HCMV寡核苷酸探针对大脑皮层细胞压印片进行原位分子杂交检测。病理学研究结果证实 ,鼠脑为侵袭性脑膜脑炎性病理改变 ,并在神经细胞内发现病毒特征性的大的核内嗜碱性包涵体 ;原位杂交结果显示 ,病毒核酸存在于受染神经细胞及神经胶质细胞核内及胞浆内 ;在鼠脑组织上清液中分离出HCMV。且感染组雌鼠血清特异性IgM抗体阳性率为73 9% ,IgG抗体阳性率为 95 7% ;而对照组雌鼠阳性率分别为 4 2 %和 12 5 %。两组间差异高度显著 (P <0 0 1)。感染组雌鼠所生子鼠死胎率及出生后一周内病死率均明显高于正常对照组 (P <0 0 1)。证明 :该病毒能侵袭Balb/c小鼠 ,并通过胎盘感染其子代的中枢神经系统 (CNS)。这种模拟人类HCMV先天性CNS感染的小鼠模型的建立所显示的许多相似的感染和病理过程 。

所谓肺硬化性血管瘤的临床病理及超微结构观察

目的 探讨所谓肺硬化性血管瘤 (S SHL)临床病理形态特征和组织来源。方法 对 8例S SHL进行组织学观察及免疫组化检测 ,并对其中 2例进行电镜观察。结果 肿瘤由立方细胞及多角形细胞组成。立方细胞表达Sp B、TTF 1、CK和EMA ,不表达Vim。多角形细胞表达TTF 1和Vim ,部分表达EMA、NSE、Syn、CgA和ACTH ,不表达Sp B和CK。两种细胞均不表达MC、CD34、FⅧRAg、CEA和SMA。超微结构特征是立方细胞部分胞质内可见板层小体 ,多角形细胞部分胞质内可见大量线粒体及粗面内质网 ,少数胞质内见神经分泌颗粒及板层小体。结论 S SHL的立方细胞来源于肺泡Ⅱ型细胞 ,多角形细胞可能起源于肺呼吸道上皮多潜能干细胞。病理诊断依赖于组织学、免疫组化和电镜观察。免疫组化在该病的鉴别诊断中有重要价值。

链脲佐菌素糖尿病大鼠下颌下腺超微结构观察

目的 观察链脲佐菌素(STZ)糖尿病大鼠下颌下腺超微结构变化。方法 SD雄性大鼠18只,随机分为对照组、实验组及治疗组,用STZ复制糖尿病动物模型,饲养12周后测体重和血糖,取材制片应用透射电镜观察其超微结构变化。结果 与对照组体重[ ( 367 .33±26. 73 )g]和血糖[ (6 .49±0 .79 ) mmol/L]比较:实验组体重[ ( 156. 50±10 .13)g]减轻、血糖[ (27 .79±9 .28)mmol/L]升高,有显著性差异(P<0 .01);治疗组体重[ (354 .67±31 .94)g]、血糖[ (8. 75±2 .56)mmol/L]无显著性差异(P>0 .05)。与对照组比较,实验组下颌下腺电镜下主要变化为为:细胞核固缩,染色质致密;线粒体肿胀或空泡变性、嵴断裂;粗面内质网囊状扩张,断裂成短棒状,脱颗粒等。治疗组无明显改变。结论 糖尿病可导致下颌下腺组织出现一系列超微病理改变,为进一步探讨糖尿病发生机制提供了形态学依据。

新风胶囊对佐剂性关节炎大鼠脾脏及胃黏膜细胞超微结构作用的实验研究

目的 :观察新风胶囊对佐剂性关节炎大鼠的治疗作用及对脾脏淋巴细胞和胃黏膜细胞超微结构的影响。方法 :将 6 0只大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、新风胶囊组和雷公藤组 ,每组 15只。制备完全佐剂并分别向除正常对照组以外其余动物的右后足跖皮内注射 0 .1ml致炎 ;电镜观察脾脏淋巴细胞及胃黏膜细胞超微结构变化 (包括线粒体肿胀、空泡变、嵴突病变等 ) ,计算各组线粒体病变率。结果 :与给药前相比 ,新风胶囊组给药后模型大鼠体重显著增加 (P<0 .0 5 ) ,而雷公藤组体重无显著变化 (P>0 .0 5 )。与模型组相比 ,新风胶囊组脾脏淋巴细胞及胃黏膜细胞线粒体病变率显著降低 (P均 <0 .0 5 ) ,而雷公藤组脾脏淋巴细胞线粒体病变率无显著改善 (P均 >0 .0 5 ) ,胃黏膜细胞线粒体病变率显著提高 (P均 <0 .0 5 )。与雷公藤组相比 ,新风胶囊组给药后脾脏淋巴细胞及胃黏膜细胞线粒体病变率均显著降低 (P均 <0 .0 5 )。结论 :新风胶囊能增加佐剂性关节炎大鼠体重 ,其改善模型大鼠脾脏及胃黏膜细胞的超微结构病变的作用优于雷公藤。新风胶囊的作用机制可能与恢复和维持脾脏正常结构 ,改善免疫调节功能和微循环 ,保护胃黏膜 ,进而改善模型大鼠的整体状况有关。

吡格列酮对糖尿病大鼠肾组织podocalyxin表达的影响

目的观察不同剂量盐酸吡格列酮(PIO)对STZ诱导的糖尿病大鼠的肾脏保护作用及肾小球Podocalyxin(PCX)表达的影响方法链脲佐菌素(STZ)65 mg.kg-1腹腔注射后建立糖尿病大鼠模型后随机分为4组,分别为模型组(DM组,n=8)和不同剂量盐酸吡格列酮组(DR1、DR2、DR3组,PIO分别:10、20和30 mg.kg-1.d-1,各组n=8),并设正常对照组(NC组,n=8)。于0周及8周末测尿白蛋白(UAlb),尿视黄醇结合蛋白(URBP),尿沉渣PCX(UPCX)和尿肌酐(UCr)。每周监测血糖,8周末取血检测HbA1c,留取左肾观察病理变化,免疫组化及RT-PCR检测肾组织PCX蛋白及mRNA水平。结果①各组糖尿病大鼠各时间点血糖及8周末HbA1c明显高于NC组(均P<0.01),各糖尿病组间差异无统计学意义;②8周末DR1、DR2和DR3组UACR、URCR、肾脏肥大指数(KI)、基底膜厚度(GBMT)、足突融合率(FPFR)均明显低于DM组(均P<0.05),且DR2组和DR3组低于DR1组(均P<0.05);DR2组及DR3组UPCR明显低于DM组(P<0.01),DR1组轻度降低但差异无统计学意义;各PIO组肾组织PCX蛋白及mRNA水平明显高于DM组(P<0.01),且DR2组和DR3组PCX蛋白表达高于DR1组(P<0.05);③8周末,各糖尿病组大鼠Scr、BUN、TG、LDL-C均高于NC组,HDL-C低于NC组,各PIO组BUN、TG均明显低于模型组(P<0.05),DR2及DR3组HDL-C水平高于模型组(P<0.05)。④UPCR与UACR和KI呈正相关(r=0.86,r=0.833,P<0.01)。结论吡格列酮可减轻糖尿病大鼠肾脏损伤,该作用可能部分与其增加肾小球足细胞PCX蛋白和mRNA表达,抑制PCX随尿排泄有关,这一作用具有一定的剂量依赖性。

肺炎性假瘤及球形肺结核细胞增殖研究

目的了解肺炎性假瘤及球形肺结核是否存在细胞增殖异常。方法用流式细胞仪对9例患者(其中5例肺炎性假瘤、4例球形肺结核病)痰液细胞DNA含量进行分析,并与痰细胞学检查、手术及经皮肺活检组织P53、PCNA、Ki67免疫组化分析结果作比较。结果以最后病理诊断为标准,肺炎性假瘤及球形肺结核患者异倍体检出率分别为40%(2/5)与50%(2/4),其相应的病变组织切片PCNA、Ki67免疫组化染色也阳性,但P53免疫组化染色阴性。结论部分炎性假瘤及结核球存在细胞增殖异常。痰细胞DNA含量分析是发现增殖异常的有效辅助方法,可能有利于肺癌的早期诊断。

新风胶囊对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞及胸腺淋巴细胞超微结构作用的实验研究

目的 :观察新风胶囊对佐剂性关节炎大鼠治疗作用及对滑膜细胞、胸腺淋巴细胞超微结构的作用。方法 :将 6 0只大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、新风胶囊组和雷公藤组 ,每组 15只 ,制备完全佐剂并分别向除正常对照组以外的其余动物右后足跖皮内注射 0 .1m l致炎。电镜观察滑膜细胞、胸腺淋巴细胞超微结构变化 (包括线粒体肿胀、空泡变、嵴突病变等 ) ,并计算各组滑膜细胞和胸腺淋巴细胞线粒体的病变率。结果 :新风胶囊组及雷公藤组治疗后鼠右后足跖肿胀度显著低于治疗前 (P均 <0 .0 5 ) ,与模型组相比 ,新风胶囊组和雷公藤组治疗后关节滑膜细胞线粒体的病变率均显著降低 (P均 <0 .0 5 ) ;新风胶囊组胸腺淋巴细胞线粒体病变率显著降低 (P<0 .0 5 ) ,而雷公藤组胸腺细胞线粒体病变率无显著差异 (P>0 .0 5 )。治疗后新风胶囊组滑膜细胞及胸腺淋巴细胞线粒体病变率均显著低于雷公藤组 (P均 <0 .0 5 )。结论 :新风胶囊与雷公藤一样能降低佐剂性关节炎大鼠病变关节的肿胀度 ,新风胶囊改善佐剂性关节炎滑膜病变和对胸腺的保护作用优于雷公藤 ,这可能是其治疗作用的形态学基础。

胰腺实性-假乳头状肿瘤的超微结构研究

目的探讨胰腺实性-假乳头状肿瘤(SPTP)的超微病理特征、鉴别诊断及组织起源。方法对3例SPTP进行了电镜观察。结果电镜观察见肿瘤细胞大小形态较一致,核圆形或卵圆形,异型不明显,可见核沟,核分裂象罕见.瘤细胞有丰富的线粒体及粗面内质网,可见到神经分泌颗粒,酶原样颗粒及特征性的环状板层体。结论SPTP可能起源于胰腺原始多潜能干细胞,诊断上须与胰腺其它良恶性肿瘤相鉴别.

新风胶囊对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞凋亡的影响

目的观察新风胶囊对佐剂性关节炎(adjuvantarthritis,AA)大鼠滑膜细胞凋亡的影响。方法以弗氏完全佐剂复制出大鼠AA模型,50只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、甲氨喋呤(MTX)对照组、雷公藤多甙(TPT)对照组和新风胶囊(XFC)治疗组,各组10只。分别采用电子显微镜技术、免疫组化法及流式细胞术检测了各组大鼠滑膜细胞凋亡情况。结果电镜观察显示,新风胶囊组滑膜细胞核染色质呈凝块状,边聚呈月芽状,胞浆内及胞膜外可见凋亡小体;免疫组化法观察显示,与模型组比较,XFC组FasL的表达显著增加,bcl2表达显著减少(P<0.05);与MTX组、TPT组比较,XFC组上述指标变化差异均无显著意义(P>0.05)。流式细胞术观察表明,XFC组滑膜细胞凋亡率显著高于模型组、TPT及MTX组(P<0.05)。结论新风胶囊通过促进滑膜细胞凋亡,抑制滑膜增生,从而消除关节滑膜肿胀,降低关节炎指数。

脾气虚证蛋白质代谢动态变化的临床与实验研究

临床研究表明，５０例脾气虚证患者的木糖吸收率、血清总蛋白、白蛋白、血清游离氨基酸总量（ＦＡＡ总量）、必需氨基酸（必需ＡＡ）及支链氨基酸（支链ＡＡ）含量显著低于健康对照组（Ｐ＜０．０５）；随着木糖吸收率的降低，脾气虚患者的上述指标也逐渐降低，并与木糖吸收率呈直线正相关（Ｐ＜０．０５）。动物实验表明，随着脾气虚大鼠造模时间的延长，其肝细胞线粒体的肿胀、基质变淡、空泡变、嵴断裂及排列紊乱等病变逐渐加重，同时空肠肌细胞线粒体也有类似变化。提示脾气虚证蛋白质的变化是一个渐进过程，随着其营养物质吸收障碍的逐渐加重，血清氨基酸含量逐渐降低，肝细胞线粒体的病变逐渐显著，肝脏合成蛋白质的原料不足及能力逐渐下降。

辛伐他汀对糖尿病大鼠尿蛋白排泄的影响

目的观察辛伐他汀对糖尿病大鼠尿蛋白排泄的影响,以了解其对糖尿病肾损害的保护作用。方法建立糖尿病大鼠模型,分为正常对照(A组)、糖尿病组(B组)、辛伐他汀治疗组(C组)。检测各组第2,4,8周血糖、尿视黄醇结合蛋白(RBP)、白蛋白(ALB)排泄率。结果第2,4,8周,B,C组尿ALB、RBP排泄率均高于A组(P<0.01),并随病程的延长不断增高,C组较B组有明显减少(P<0.01)。结论辛伐他汀对糖尿病大鼠肾小球和肾小管-间质损害有保护作用。