可用于蜜蜂抗逆育种的候选分子标记研究进展

在自然生境与人工养殖环境中,蜜蜂均面临着多重外界胁迫,包括生物胁迫与非生物胁迫。其中非生物胁迫种类繁多、复杂多变,主要包括温度、重金属、农药、氧化损伤等。随着中华蜜蜂抗逆生物学的深入研究,尤其是对中华蜜蜂抵抗非生物胁迫的主要分子进行了功能研究后,筛选出了可用于中华蜜蜂抗逆性能提高的关键(基因)分子,这些分子可以作为西方蜜蜂抗逆育种的候选分子标记。本文综述了蜜蜂用于抵抗温度、重金属、农药、氧化损伤等因素的关键抗逆分子,并讨论了这些分子在蜜蜂抗逆育种中的应用价值,以期为后续抗逆蜂种选育提供可参考的分子标记。

外源供给硬脂酸对工蜂10-羟基-2-癸烯酸合成的影响

本研究旨在探讨饲粮中添加硬脂酸对工蜂10-羟基-2-癸烯酸(10⁃HDA)合成的影响,为高品质蜂王浆的生产提供技术指导。选取群势相近的浙江浆蜂10群,随机分成2组,对照组和硬脂酸组,每个组5群。试验期间,对照组饲喂基础饲粮,硬脂酸组在基础饲粮中添加2%的硬脂酸。整个试验期为75 d。结果表明:1)与对照组相比,外源供给2%的硬脂酸显著降低了工蜂的总采食量和粉料采食量(P<0.05),显著降低了第24天蜂群群势(P<0.05),但对各时间点(第12天、第24天和第36天)蜂群封盖子数量没有显著影响(P>0.05)。2)与对照组相比,外源供给2%的硬脂酸显著提高了蜂王浆中10⁃HDA的含量(P<0.05),但对蜂王浆产量没有显著影响(P>0.05);外源供给2%的硬脂酸显著增加了9和18日龄工蜂头部10⁃HDA含量(P<0.05)。3)与对照组相比,外源供给2%的硬脂酸显著提高了18日龄工蜂上颚腺中10⁃HDA合成相关基因脂肪酸合成酶(FAS)、细胞色素P4506AS8(CYP6AS8)、酰基辅酶A氧化酶1(ACOX1)、酰基辅酶A氧化酶3(ACOX3)、肉碱棕榈酰转移酶1(CPT1)、电子转移黄素蛋白β肽(ETF⁃β)和蜂王浆主蛋白1(mrjp1)的表达(P<0.05),同时显著增加了18日龄工蜂血淋巴和9日龄工蜂中肠中三酰甘油的含量(P<0.05)。由此可见,外源供给硬脂酸有助于促进工蜂上颚腺对10⁃HDA的生物合成,提高蜂王浆中10⁃HDA含量。

纳米硒对肉鸡组织硒含量和谷胱甘肽过氧化物酶活性的影响

本试验采用2×6因子完全随机设计,研究了纳米硒和亚硒酸钠2种硒源对肉鸡组织硒含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的影响。岭南黄公母混合雏780羽按饲养试验要求分为13组,每组4个重复,每个重复15羽。将纳米硒和亚硒酸钠2种硒源分别以0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、1.0mg/kg6个硒水平添加到基础日粮中,配制成12种试验日粮,基础日粮作对照。结果显示:(1)亚硒酸钠添加浓度在0.2～0.4mg/kg硒添加水平范围内肉鸡生长性能和GSH-Px活性处于高峰平台,1.0mg/kg硒添加水平肉鸡生长性能和GSH-Px活性显著低于0.2～0.4mg/kg硒添加水平。纳米硒添加浓度在1.0mg/kg肉鸡生长性能和GSH-Px活性仍然保持在高峰平台。(2)硒源添加浓度在0.1～0.3mg/kg时,亚硒酸钠和纳米硒对肉鸡生长性能的影响无显著差异(P>0.05);硒源添加浓度在0.4～1.0mg/kg时,纳米硒组肉鸡生长性能显著高于亚硒酸钠组(P<0.05)。(3)硒源添加浓度在0.1～0.4mg/kg时,两种硒源对GSH-Px活性的影响无显著差异(P>0.05);在0.5和1.0mg/kg硒添加水平上,纳米硒组GSH-Px活性显著高于亚硒酸钠组(P<0.05)。(4)不加硒的空白组全血和组织硒含量显著低于硒添加组。在同一硒添加水平上,纳米硒组和亚硒酸钠组肉鸡全血硒浓度差异不显著,但是,组织硒含量却受硒源的影响。硒源添加?

纳米硒对肉鸡肝脏谷胱甘肽过氧化物酶和脱碘酶Ⅰ活性的影响

以亚硒酸钠为对照,研究了纳米硒对肉鸡肝脏谷胱甘肽过氧化物酶和脱碘酶Ⅰ活性的影响.健康Avian商品代公母混合雏1485羽按饲养试验要求分为11组,每组3个重复,每个重复45羽.将纳米硒和亚硒酸钠2种硒源分别以0.10、0.20、0.30、0.40、0.50 mg/kg 5个硒水平添加到基础日粮中,配制成10种试验日粮,并以基础日粮作对照.结果显示:亚硒酸钠添加浓度在0～0.20 mg/kg,肉鸡生长性能和GSH-Px活性随着硒添加浓度的增加而提高;在0.20～0.40 mg/kg硒添加水平范围内处于高峰平台;0.50 mg/kg硒添加水平肉鸡生长性能和GSH-Px活性显著低于0.20～0.40 mg/kg硒添加水平(P＜0.05).纳米硒添加浓度在0.50 mg/kg,肉鸡生长性能和GSH-Px活性仍然保持在高峰平台.硒源添加浓度在0.10～0.40 mg/kg时,亚硒酸钠和纳米硒对肉鸡生长性能和GSH-Px活性的影响无显著差异(P＞0.05);硒源添加浓度在0.50 mg/kg时,纳米硒组肉鸡生长性能和GSH-Px活性显著高于亚硒酸钠组(P＜0.05).基础日粮组肝脏脱碘酶Ⅰ活性显著低于各硒源的各硒添加水平(P＜0.05),硒源和硒添加水平对脱碘酶Ⅰ活性没有显著影响(P＞0.05).上述结果提示,纳米硒的Weinberg剂量-效应的最适剂量范围宽于亚硒酸钠.

硒蛋白的基因表达与调控

硒蛋白是微量元素硒以硒代半胱氯酸(SeC)形式进入多肽链的蛋白质。SeC的遗传密码是UGA。在原核细胞中,4种基因产物SELA、SELB、SELC和SELD参与了硒蛋白的合成过程。真核生物硒蛋白mRNA3’-UTR的硒代半胱氨酸插入序列(SECIS)是真核细胞UGA密码编码SeC的顺式作用元件。动物的硒营养状态不影响硒蛋白基因的转录,但影响硒蛋白mRNA的稳定性。饲料硒水平与含硒酶活性呈正相关。

肉雏鸡肝细胞谷胱甘肽过氧化物酶mRNA表达产物的RT-PCR检测

细胞谷胱甘肽过氧化物酶 (cGPX)是动物体内一种重要的抗氧化酶。建立了利用RT PCR并以 β 肌动蛋白 (β Actin)为内参照定量分析cGPXmRNA表达的方法。提取肉鸡肝总RNA ,经反转录和PCR扩增 ,PCR产物的电泳条带于VDS摄像系统扫描灰度。寻求PCR线性扩增范围 ,确定RT PCR的最佳循环次数和模板量。通过计算cGPXPCR产物与 β 肌动蛋白PCR产物的灰度之比 ,即可得出cGPXmRNA的相对含量。

反转录聚合酶链式反应定量分析Ⅰ型脱碘酶的mRNA

Ⅰ型脱碘酶 (IDⅠ )是一种含硒酶 ,它在甲状腺激素代谢中起重要作用。本实验建立了利用RT PCR并以 β 肌动蛋白 (β Actin)为内参照定量分析IDⅠmRNA表达的方法。提取肉鸡肝脏总RNA ,经反转录和PCR扩增 ,PCR产物的电泳条带于VDS摄象系统扫描灰度。寻求PCR线性扩增范围 ,确定RT PCR的最佳循环次数和模板量。通过计算IDⅠPCR产物与β ActinPCR产物的灰度之比 ,即可得出IDⅠmRNA的相对含量。

新疆土鸡的外貌特征、经济生产性能和选育改良状况

我国西部地方鸡的品种资源丰富。新疆土鸡主要包括两个品种-吐鲁番斗鸡和拜城油鸡，它们的遗传特性、外貌特性和生产性能明显。

蜂群精细化饲养技术的内涵

养蜂业是生态大农业的重要组成部分，对于农作物和果树授粉、获得优质蜂产品、蜂农脱贫致富作用重大。改革开放以来，中国蜂业发展迅速，目前蜂群总数已达700万群，是名副其实的世界第一养蜂大国。但在生产模式上仍处于传统养蜂阶段，生产方式落后，导致养蜂规模小、效益低、质量差。我国养蜂业需要向产业化、规模化和现代化水平迈进。未来，养蜂从业者的技术水平将直接影响其生产效率和经济效益。

蜜蜂为油菜授粉的增产效果及蜂群管理技术

按照公益性行业专项“不同蜜蜂生产区抗逆增产技术体系研究与示范”2009年度要求，项目组在山东青州市实施蜜蜂为油菜授粉的增产效果研究。

对蜜蜂饲料质量的几点认识

近年来，影响大众健康的食品安全问题时有发生，如瘦肉精、苏丹红、三聚氰胺等事件。人们发现，这些食品安全问题的根源在饲料，而企图获取不当利益的动机是导致这些事件的原罪。然而，与蜂产品质量安全密切相关的蜜蜂饲料质量问题尚未引起业内人士的关注。随着养蜂生产水平的提高，养蜂者使用蜜蜂饲料增多。从“瘦肉精”等事件中汲取教训，

山东蜂业的现状及发展对策

改革开放以来,山东蜂业取得了辉煌的成就,蜂产品年产量及出口量大幅度提高,已成为我国重要的蜜蜂产业省份。山东具有得天独厚的发展养蜂业的资源优势,同时在生产、加工、产品质量控制、蜜蜂授粉等方面也存在很多不足。要实现山东蜂业的健康发展,必须加强对蜂业发展重要性的认识,保护蜜粉源资源和蜜蜂种质资源,提高广大蜂农的养蜂技术,严格蜂产品的生产规程,建设一批蜂产品安全与标准化生产基地。本文就山东蜂业的现状进行了深入的分析,并提出了相应的发展对策。

立足当前 着眼长远——我国蜂饲料发展现状与前景

蜂饲料问题成业界关注焦点自然状态下,蜜蜂采集自然界中的花粉、花蜜、无机盐和水,以满足其维持正常生理活动、生长发育、繁殖和蜂产品生产的需要。因此,花粉和蜂蜜是蜜蜂的天然饲料。当外界缺乏蜜粉源,蜂场对蜂花粉、蜂蜜贮备不足,蜂巢内缺乏蜜粉时,需要配制蜜蜂人工饲料予以解决,一般而言的蜜蜂饲料是指蜜蜂人工饲料。蜜蜂的饲料问题越来越成为养蜂业关注的焦点,原因在于,对国内大部分蜂场来说。

蜜蜂属内蜂种的分类、地理分布、形态特征和生物学特性

中国已明确记录的蜜蜂属有 6个种 :小蜜蜂 (Apisflorea)、黑小蜜蜂 (Apisandreniformis)、大蜜蜂(Apisdorata)、黑大蜜蜂 (Apislaboriosa)、东方蜜蜂 (Apiscerana)和西方蜜蜂 (Apismellifera)。小蜜蜂、黑小蜜蜂、大蜜蜂和黑大蜜蜂几乎完全分布在亚洲国家。东方蜜蜂按地理分布可分为南亚类群、海岛类群和东亚类群。西方蜜蜂分布在除南极以外的各大洲。

肉鸡肝脏cGPX和β-Actin基因片断的克隆及鉴定

细胞谷胱甘肽过氧化物酶 ( c GPX)是动物体内一种重要的抗氧化酶。根据 Gen Bank上网文中鸡肝脏 c GPX基因和看家基因—— β- Actin基因的 EST序列 ,分别设计引物 ,提取艾维茵肉鸡肝脏的总 RNA,在同一个反应体系中对上述的基因片断进行 RT- PCR,扩增目的片断 ,并重组克隆测序 ,分别得到 30 8bp、471 bp的核苷酸序列。经同源性比较 ,这 2条序列与 Gen Bank上网文中肉鸡肝脏 c GPX和β- Actin的 EST序列基本一致。

嗜酸乳杆菌和两歧双歧杆菌体外粘附Caco-2细胞及其对病原菌粘附性能的影响

以Caco-2细胞作为体外模式,观察嗜酸乳杆菌、两歧双歧杆菌、大肠杆菌K88和猪霍乱沙门氏菌对Caco-2细胞的粘附特性,并探讨嗜酸乳杆菌和两歧双歧杆菌的抗粘附作用。结果表明,所试4种细菌菌株均表现出很强的粘附Caco-2细胞的特性;粘附抑制试验表明,无论在排斥试验、竞争试验还是置换试验,嗜酸乳杆菌或两歧双歧杆菌均能明显抑制大肠杆菌K88和猪霍乱沙门氏菌的粘附;杀菌试验表明,嗜酸乳杆菌或两歧双歧杆菌上清液均能显著抑制病原菌的生长,但上清液用胰蛋白酶、蛋白酶K、乳酸脱氢酶处理后,杀菌作用明显降低,表明杀菌作用是乳酸和蛋白质样物质共同作用的结果。

中华蜜蜂和意大利蜜蜂耐寒性能差异比较

【目的】研究中华蜜蜂(Apis cerana cerana,简称中蜂)和意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica,简称意蜂)体内抗寒系统的组成,为探究中蜂和意蜂耐寒性能的差异提供理论依据。【方法】试验选取室外相同环境条件越冬的中蜂和意蜂各5群,于2015年12月20日每群随机选取蜜蜂立即测定两者的过冷却点、冰点,比较其耐寒性能差异。然后分别测定蜂体游离水、结合水、脂肪、糖原和蛋白质含量以及海藻糖酶的活性。利用高效液相色谱测定血淋巴中山梨醇、海藻糖、甘露醇的含量。在海藻糖的生物合成通路中确定4个重要调控基因,选择β-action和β-肌动蛋白分别作为中蜂和意蜂的内参基因,采用实时荧光定量PCR检测中蜂和意蜂海藻糖4个相关调控基因在越冬期时m RNA相对表达量的差异。【结果】越冬期中蜂和意蜂过冷却点差异显著,中蜂的过冷却点显著低于意蜂(P<0.05),但二者冰点没有显著性差异(P>0.05);越冬期中蜂和意蜂蜂体含水量存在显著差异,中蜂体内游离水含量显著低于意蜂(P<0.05),而结合水含量显著高于意蜂(P<0.05);越冬中期蜂体脂肪含量在两蜂种间差异不显著(P>0.05);中蜂和意蜂蜂体和血淋巴蛋白质含量差异不显著(P>0.05);意蜂在越冬期时体内糖原含量明显低于中蜂,并且差异显著(P<0.05);中蜂血淋巴中甘露醇、山梨醇含量接近于意蜂的两倍,海藻糖含量也相对高于意蜂,差异显著(P<0.05);中蜂蜂体和血淋巴的海藻糖酶活性均显著低于意蜂(P>0.05);以中蜂为对照组,实时荧光定量PCR检测意蜂的海藻糖酶基因(Tre-2)和尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因(UGP)表达量明显高于中蜂(P<0.05);而基因Tre-1表达情况相反;海藻糖合成酶基因(TPS)表达量在中蜂和意蜂体内无显著差异(P>0.05)。【结论】与意蜂相比,中蜂能够通过降低体内游离水含量,提高糖原和小分子糖含量,调节海藻糖酶活性和相关基因表达等方式降低体内过冷却点,提高自身耐寒性能。

意大利蜜蜂生长发育适宜蛋白供给水平及其对幼虫抗氧化活性的影响

【目的】探究意大利蜜蜂生长发育的适宜蛋白供给水平及蛋白水平对幼虫抗氧化活性的影响。【方法】选用健康无病的本地意大利蜜蜂30群,随机分为6组(每组5个重复,每个重复1群蜂)进行对比试验。其中1组饲喂油菜花粉,为对照组;其它5组分别饲喂人工配制的蛋白水平为15%、20%、25%、30%和35%的试验日粮作为试验组。【结果】在试验期间,日粮蛋白水平对蜂群群势变化无显著影响(P>0.05);蜂卵孵化率和幼虫化蛹率均表现为蛋白水平35%组显著高于15%组(P<0.05);幼虫体蛋白含量以蛋白水平30%组最高,显著高于对照组、15%组和20%组(P<0.05);随日粮蛋白水平的升高,幼虫虫体总超氧化物歧化酶活性未表现出显著差异(P>0.05),但虫体内丙二醛含量随之显著降低(P<0.05)。【结论】日粮蛋白水平在15%—35%时,蜂群群势未受到显著的影响;日粮蛋白水平为30%—35%时,蜂卵孵化率、幼虫化蛹率和机体抗氧化活性达到最佳。

不同越冬饲料对蜜蜂中肠消化酶活性、组织发育状态以及抗氧化酶基因表达的影响

本试验旨在研究不同越冬饲料对蜜蜂中肠消化酶活性、组织发育状态以及抗氧化酶基因表达的影响,以便为广大蜂农选择越冬饲料提供参考。在2015年10月底选取群势相当的本地意大利蜜蜂(Apis mellifera L.)越冬蜂群(群内无储备越冬饲料脾)9群(5框蜂/群),随机分为3个试验组(3群/组),从11月2号开始分别以蜂蜜(蜂蜜组)、果葡糖浆(果葡糖浆组)和白砂糖水(白砂糖∶水=2∶1,蔗糖组)为越冬饲料进行饲喂,饲喂至11月下旬蜂群进入越冬期。整个试验期为2015年10月底至2016年3月初。分别于越冬前(11月初)、越冬中期(1月初)和越冬后(3月初)采集蜜蜂中肠,测定中肠消化酶(淀粉酶、蔗糖酶和蛋白酶)活性,在越冬中期采集蜜蜂中肠用于中肠组织发育状态和抗氧化酶基因[超氧化物歧化酶1(Sod1)、超氧化物歧化酶2(Sod2)和过氧化氢酶(CAT)]相对表达量等指标的检测。结果表明:在越冬中期,果葡糖浆组和蜂蜜组的蜜蜂中肠内淀粉酶活性显著高于蔗糖组(P<0.05)。在越冬中期和越冬后,饲喂不同越冬饲料的蜜蜂中肠内蔗糖酶活性差异不显著(P>0.05)。在越冬中期,果葡糖浆组的蜜蜂中肠内蛋白酶活性显著高于蔗糖组和蜂蜜组(P<0.05)。蜂蜜组和蔗糖组的蜜蜂中肠肠壁厚度极显著大于果葡糖浆组(P<0.01),且蜂蜜组和蔗糖组的蜜蜂中肠隐窝深度也极显著大于果葡糖浆组(P<0.01)。在越冬中期,蔗糖组的蜜蜂中肠Sod1基因的相对表达量显著高于蜂蜜组和果葡糖浆组(P<0.05)。由此得出,蜂蜜能够提高越冬蜂中肠消化酶活性,蜂蜜和白砂糖有利于越冬蜂中肠组织的发育,而且白砂糖能够提高越冬蜂中肠抗氧化酶基因的表达。因此,蜂蜜和白砂糖比果葡糖浆更适合作为蜜蜂的越冬饲料。