Ni^(2+)与EGCG相互作用对人牙龈成纤维细胞的生物学效应

目的分析表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)、Ni2+及其相互作用对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblast cells,HGF)的生物学效应。方法用MTT法检测HGF的存活率,运用彗星电泳检测细胞的DNA损伤情况,使用流式细胞仪法检测HGF周期变化。结果 Ni2+可呈时间依赖性抑制HGF的生长,造成细胞DNA损伤,并且可使细胞周期阻滞于S期,诱导细胞凋亡。高浓度的EGCG(>200μmol/L)可明显抑制HGF生长,使细胞的DNA损伤。Ni2+与EGCG相互作用后增加了对HGF的抑制(P<0.01),DNA的损伤及凋亡细胞也明显增加(P<0.05)。结论 Ni2+和EGCG相互作用后使Ni2+对HGF的抑制作用增强,加剧HGF的DNA损伤和细胞周期阻滞,并明显增加细胞凋亡。

口腔临床实践教学与全科医生培养有机结合初探

实践教学是口腔医学高等教育中必不可少的教学环节之一,随着社会对人才要求的不断提高,同济大学口腔医学院对此阶段人才培养模式进行了适时的改革。学院确定了以人为本的指导思想,以培养能力型、创新型人才为目的,注重培养口腔全科医师,构建完善的实践教学体系和内容,加强实践前培训,结合各类创新实践活动,完善考评机制。实践教学阶段人才培养模式的改变符合现代口腔医学教育发展的总趋势。

PLGA/PCL/nHA生物支架复合兔BMSCs体外培养的实验研究

目的:研究新型复合支架聚乳酸-聚乙醇酸/聚己内酯/纳米羟基磷灰石(PLGA/PCL/nHA)的生物相容性,探讨其作为细胞培养材料和骨组织工程支架的可行性。方法:将兔骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)接种于PLGA/PCL/nHA复合支架上,体外共同培养后,MTT法检测BMSCs增殖活性,电镜下观察PLGA/PCL/nHA复合支架材料表面和孔隙内细胞附着情况。结果:BMSCs在PLGA/PCL/nHA复合支架材料上生长良好。PLGA/PCL/nHA材料表面和孔隙内均有细胞附着,细胞已伸展成梭形或多角形,伸出伪足黏附于材料上。结论:新型PLGA/PCL/nHA复合支架材料生物相容性好,是一种良好的组织工程支架材料,可作为种子细胞的载体应用于骨组织工程中。

发挥网络正能量推进大学生思想政治教育工作

在"微"信息时代和网络飞速发展的大环境下,学校传统的思想政治教育方式受到挑战。在新时代背景下顺应潮流,巧妙运用各种网络工具,用好网络这把"双刃剑",可发挥网络的正能量,对学生进行思想政治教育。种类繁多的网络手段,有利于跟学生建立更紧密的联系,及时了解学生思想动向和需求,增强学生活动的宣传力度和影响力。网络思想政治教育工作中特别需要注意树立正确导向,传递正能量,帮助学生辨明是非、去伪存真,帮助其抵制错误思潮,减少网络负面信息对其的不良影响。同时,网络思想政治教育工作仍需要丰富多彩的线下活动来支持。

静电纺丝取向纳米纤维作为组织工程生物支架的优势与特征

背景:组织工程技术依赖生物材料支架作为组织修复及再生的支撑结构。在这些生物支架中,静电纺丝纤维支架因其能够模拟细胞外基质天然结构等优点被广泛应用于再生医学。目的:综述目前静电纺丝取向纳米纤维在组织工程领域的应用。方法:由第一作者检索PubMed数据库2010年1月至2020年3月收录的相关文献,英文检索词为"electrospinning;aligned nanofibers;tissue engineering;regenerative medicine;bioactive materials",检索CNKI中国期刊全文数据库及万方数据库2010年1月至2020年3月收录的相关文献,关键词为"静电纺丝;取向纤维;有序纤维;组织工程;组织再生",最终纳入67篇文献进行归纳总结。结果与结论:静电纺丝是一种简便有效的纳米材料制备技术,近年来学者们通过静电纺丝技术将多种具有良好生物相容性及生物降解性的天然材料或聚酯材料制备成具有不同结构的电纺纳米纤维支架,并广泛应用于组织工程及再生医学等领域。其中,受天然细胞外基质高度定向特征启发而设计的静电纺丝取向纳米纤维支架,具有高度一致的纤维排列方向,可通过接触指导促进细胞黏附、迁移,而与细胞或生长因子的结合可进一步促进细胞的增殖、分化,最终实现组织再生,在神经、心肌、肌腱、骨组织再生及伤口愈合等领域中展现了其巨大的应用潜能及广阔的的应用前景。

口腔医学硕士专业学位研究生培养模式改革初探

本文主要结合同济大学口腔医学院作为上海首批试行口腔医学硕士专业学位与住院医师规范化培训相结合的学校之一,尝试探索"5+3"专业硕士学位培养新体系的经验。探讨建立学院特色的双轨合一的专业硕士学位培养方案,制定相关的学习课程体系、实践考核体系,明确学位授予标准。从而完善管理过程中的责权关系,加强专业学位研究生的临床实践能力,与职业准入制度并轨,以真正实现"职业"为导向的硕士专业学位研究生培养目标。

水凝胶仿生构建干细胞微环境应用于骨组织修复

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)具有自我复制和多向分化潜能的特点,水凝胶被广泛用于负载MSCs通过细胞治疗和组织工程修复各类口腔疾病,同时被用于仿生构建MSCs微环境,作为研究干细胞分化调控机制的工具,促进定向调控干细胞分化培养体系的发展。MSCs生存在一个复杂的微环境中,其生命活动受到微环境信号的调控,通过构建水凝胶载体模仿MSCs微环境,根据不同应用可以在一定程度上调控MSCs的分化潜能:本综述概括了目前关于利用水凝胶仿生设计MSCs微环境的研究进展,总结了用于负载MSCs水凝胶的材料性能、材料设计及其在骨组织修复中的应用。

巨噬细胞功能多样性与骨再生

骨再生是骨创伤愈合和种植体骨整合的核心环节,越来越多的研究表明,骨再生与骨免疫微环境密切相关。巨噬细胞作为骨免疫的重要组成部分之一,在骨再生的级联反应启动和骨形成阶段都发挥着重要作用,是骨再生与骨免疫之间的桥梁。全面认识巨噬细胞在骨再生过程中的功能多样性,有助于以巨噬细胞为切入点实施免疫干预,为骨组织工程提供免疫调控的新策略。

间充质干细胞膜包被的仿生纳米载体的构建及其对巨噬细胞极化基因表达影响的研究

目的:构建间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)膜包被的仿生纳米载体,负载姜黄素,探究其对巨噬细胞极化基因表达的影响。方法:利用脂质体挤压器将干细胞膜囊泡与载有姜黄素的聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly(lactic-co-glycolic),PLGA]纳米粒结合,构建MSCs膜包被的仿生纳米载体。应用透射电镜表征形貌。体外考察其稳定性和药物释放规律。将材料与RAW264.7巨噬细胞共培养,探究材料的细胞毒性及巨噬细胞极化相关基因的表达水平。结果:成功构建MSCs膜包被的仿生纳米载体,电镜下见均匀核-壳球形结构。粒径由包裹前(183.2±0.8)nm转变为(204.2±3.7)nm。体外稳定性良好,24 h累积药物释放55.37%。实验组M2型巨噬细胞相关基因IL-10、Arg1、CD206表达升高,M1型巨噬细胞相关基因iNOS、IL-1β降低。结论:本实验成功构建干细胞膜包被的仿生纳米载体,能有效地促进M2型巨噬细胞相关基因表达。

非编码RNA在颞下颌关节炎中的研究进展

颞下颌关节炎(temporomandibular joint osteoarthritis,TMJOA)是一种临床常见疾病,但发病机制尚不明确且缺乏有效的治疗手段,给患者带来很大困扰。因此,探究TMJOA的发病机制,寻找有效的治疗方法具有重要意义。近年来的研究表明,非编码RNA(noncoding RNA,ncRNA)参与调控TMJOA的发生、发展,在其诊断和治疗方面具有巨大潜力,因此有望成为新的诊断标志物和治疗靶标。本文将对ncRNA在TMJOA中的研究进展作一综述。

Dnmt3b对髁突纤维软骨干细胞多向分化调控作用的实验研究

目的:探究DNA甲基转移酶3b(DNA methyltransferase 3b enzyme,Dnmt3b)对大鼠髁突纤维软骨干细胞(fibrocartilage stem cells,FCSCs)成脂、成骨、成软骨向分化能力的影响。方法:体外分离培养大鼠髁突FCSCs,构建Dnmt3b过表达慢病毒,感染FCSCs建立过表达Dnmt3b的FCSCs细胞模型,并对其进行成脂、成骨、成软骨诱导培养,检测Dnmt3b过表达对大鼠髁突FCSCs成脂、成骨、成软骨相关基因表达的影响。结果:大鼠髁突纤维软骨干细胞具有间充质干细胞特性。与对照组相比,Dnmt3b过表达组成脂相关基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,Ppar-γ)的表达显著降低,成骨相关基因Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的表达显著升高,成软骨相关基因SRY相关转录因子9(SRY-related high mobility group-box gene 9,Sox9)、聚集蛋白聚糖(aggrecan,ACAN)的表达显著升高。结论:Dnmt3b能促进大鼠髁突纤维软骨干细胞成软骨向分化和成骨向分化,抑制其成脂向分化。

LincRNA-EPS对RANKL和LPS诱导RAW264.7细胞破骨分化影响的实验研究

目的:探究长链非编码RNA-EPS(long non-coding RNA-EPS,lincRNA-EPS)对核因子κB受体活化因子配体(receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL)和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导RAW264.7细胞破骨分化的影响。方法:构建过表达lincRNA-EPS的RAW264.7细胞株和阴性对照株,然后用RANKL诱导法和LPS诱导法(RANKL预刺激后行LPS诱导)同时进行破骨分化诱导,通过抗酒石酸酸性磷酸酶染色(tartrate resistant acid phosphatase staining,TRAP staining)观察产生破骨细胞数量和形态的差异,鬼笔环肽染色评估所产生破骨细胞功能的差异,实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测诱导后破骨相关基因mRNA表达量的差异。结果:成功构建过表达lincRNA-EPS的RAW264.7细胞株和阴性对照株;不论是RANKL法诱导还是LPS法诱导,lincRNA-EPS过表达株和阴性对照株的细胞增殖情况均无显著差异(P>0.05);LPS法诱导下,TRAP染色显示lincRNA-EPS过表达株分化出的破骨细胞数量显著少于阴性对照株(P<0.05),鬼笔环肽染色显示lincRNA-EPS过表达株产生的F-肌动蛋白环体积显著小于阴性对照株,RT-q PCR显示linc RNA-EPS过表达株的破骨相关基因TRAP、CTSK、DC-STAMP、ATP6v0d2 mRNA表达均显著低于阴性对照株(P<0.05);但在RANKL法诱导下,二者各项表达均无显著差异(P>0.05)。结论:lincRNA-EPS的过表达对LPS诱导的破骨分化有明显的抑制作用,而且对诱导出的破骨细胞功能也起到负向调节作用,但lincRNA-EPS过表达对RANKL诱导的破骨分化及产生的破骨细胞的功能无显著影响。

TDP-43对LPS刺激下小鼠牙龈成纤维细胞影响的实验研究

目的:探究TARDNA结合蛋白-43(TARDNA binding protein-43,TDP-43)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的炎症微环境中小鼠牙龈成纤维细胞(mouse gingival fibroblasts cells,MGFs)的影响。方法:分离培养野生型C57BL/6J小鼠的牙龈成纤维细胞。设置不同浓度及处理时间的LPS刺激,通过实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)技术检测相关炎症因子的mRNA表达量,筛选出最佳处理条件。对细胞进行免疫荧光染色,观察炎症微环境下MGFs中TDP-43的变化。使用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染技术敲低MGFs中的TDP-43,并测定转染效率。设置3个实验组:阴性对照组(NC组)、LPS诱导对照组(NL组)和TDP-43敲低+LPS诱导组(SL组)。利用RT-qPCR技术检测部分炎症因子、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)、黏附相关因子mRNA的表达情况。应用蛋白质印迹法(western blotting)检测部分炎症因子、黏附相关因子蛋白表达情况。使用天狼星红染色法探究细胞内胶原沉积情况。结果:最佳LPS刺激的浓度为100 ng/mL,时间为6 h;在无LPS刺激的状态下,MGFs中的TDP-43基本在细胞核内,LPS刺激后,TDP-43出现在细胞核和细胞质中;成功使用siRNA转染MGFs构建敲低TDP-43的细胞模型,转染效率接近50%;在LPS刺激下,TDP-43敲低的实验组(SL组)与对照实验组(NL组)相比,炎症因子、基质金属蛋白酶、黏附相关因子mRNA的表达量出现下调(P<0.05),且部分黏附相关蛋白及炎症因子蛋白的表达量也显著下调;在胶原沉积方面,SL组和NL组相较于NC组都有减少(P<0.05),但NL组和SL组差异不大,无统计学意义(P>0.05)。结论:当LPS诱导MGFs处于炎症微环境时,TDP-43出现由核内向核外移动的趋势;且TDP-43对LPS诱导的MGFs炎症微环境下炎症因子、黏附相关因子及基质金属蛋白酶表达起正向调控作用,对胶原沉积的影响不明显。

NLRP3炎性小体调控慢性牙周炎的研究进展

核苷酸结合寡聚化结构域(nucleotide-binding oligomerization domain,NOD)样受体家族含pyrin结构域蛋白3(nod-like receptor family pyrin domain-containing protein 3,NLRP3)炎性小体是一类位于细胞质内的多蛋白复合物,可介导多种炎症性疾病。牙周致病菌可通过活化NLRP3炎性小体,调控牙周组织的慢性炎症性反应。本文对慢性牙周炎(chronic periodontitis,CP)常见病原菌活化NLRP3炎性小体的机制进行综述,旨在为深入探索CP的发病机制提供新的思路,指导临床预防和治疗慢性牙周病。

大孔结构水凝胶支架的研究进展

水凝胶作为一种组织工程修复材料,具有良好的生物相容性、可降解性及可塑性,由于缺乏合适的孔隙特征,限制了凝胶内外细胞的增殖、迁移及血管再生,严重影响组织修复效果,因而水凝胶大孔结构的制备成为研究热点。本文就孔隙特征对支架生物学行为的具体影响及近年来水凝胶大孔结构的制备方法作一综述。

LncRNA在牙周膜干细胞成骨分化中的作用

来源于牙相关组织的干细胞是口腔范围内特有的干细胞,对牙槽骨丢失后的再生或修复及牙槽骨的改建等具有重要意义。长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)被发现参与牙相关组织干细胞的成骨向分化。本文就lncRNA在牙相关组织来源干细胞成骨分化过程中发挥的作用、调控的靶点及具体机制的最新研究进展进行综述。

铸造合金全冠戴用后颊黏膜上皮细胞DNA损伤的研究

目的研究3种铸造合金全冠戴用后颊黏膜上皮细胞DNA的损伤情况。方法给狗分别进行58%金合金、不含Be元素的NiCr合金、含Be元素的NiCr合金铸造全冠修复,建立实验动物模型。采用VG-X7型电感耦合等离子体质谱仪和IRISIntrepid型电感耦合等离子体原子发射光谱仪检测戴冠前、戴冠2周、1月、2月及3月时颊黏膜上皮细胞中金属离子的种类和质量浓度,同时应用彗星电泳方法检测颊黏膜上皮细胞DNA的损伤情况。结果58%金合金全冠戴用后,在颊黏膜上皮细胞中金属离子质量浓度变化不明显;戴冠2周时彗星数目显著增加,而后又恢复到戴冠前水平。NiCr合金全冠戴用后,颊黏膜上皮细胞中Ni、Cr、Be离子质量浓度以及彗星数目均随着戴冠时间的延长而逐渐升高,其中含Be元素组的彗星数目显著高于不含Be元素组,而后者彗星数目又明显高于58%金合金组。颊黏膜上皮细胞中的Ni、Cr、Be离子质量浓度与彗星数目呈正相关。结论金合金全冠戴用后没有引起颊黏膜上皮细胞DNA的损伤,而NiCr合金全冠,尤其含Be元素者,戴用后将引起颊黏膜上皮细胞DNA发生明显损伤。

年轻小鼠咀嚼刺激长期改变对焦虑和认知的影响

建立长期增加或减少年轻小鼠切牙的咀嚼刺激模型.通过形态学的观察,研究小鼠下颌骨和咬肌的变化以及大脑皮层和海马的厚度改变;通过行为学实验(旷场实验、高架十字迷宫、新异物体识别和Morris水迷宫实验)观察小鼠认知能力和焦虑情绪的变化;通过高效液相色谱(HPLC)检测小鼠皮层、海马中4种单胺类神经递质(去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)、多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT))的变化,以探讨小鼠焦虑情绪改变的机理;通过荧光实时定量PCR检测小鼠皮层和海马与认知紧密相关的4种基因(BDNF、Synapsin I、NR2B和CREB)的mRNA表达,以研究小鼠认知能力改变的机理.形态学结果显示:各组小鼠下颌骨和咬肌纤维的形态没有影响,各组小鼠皮层和海马的厚度也没有差异.行为学实验结果显示:咀嚼增加组小鼠焦虑倾向低于对照组和咀嚼减少组,各组小鼠短期记忆能力没有统计学差异,咀嚼增加组小鼠空间认知能力优于咀嚼减少组.高效液相色谱结果显示,咀嚼减少组小鼠与咀嚼增加组和对照组相比,去甲肾上腺素在皮层中明显升高(P<0.05).mRNA检测结果显示,咀嚼减少组小鼠4种与认知相关基因的表达量与咀嚼增加组相比都明显下调(P<0.05).上述结果提示,切牙咀嚼刺激的长期增加可以提高小鼠的自主运动能力,降低焦虑程度,提高空间认知能力,上调海马中认知相关基因的表达.切牙咀嚼刺激的长期减少,会降低小鼠的自主运动能力,下调认知相关的基因表达,增加大脑皮层中去甲肾上腺素的含量.

PCNA和Bcl-2蛋白在牙龈组织中的表达

给实验动物狗分别行金合金、不含Be的镍铬合金、含Be的镍铬合金全冠修复,建立实验动物模型.采用ICP-MS(电感耦合等离子体质谱仪)检测戴冠前后牙龈组织中金属离子的质量分数,同时应用免疫组化EnVision二步法检测PCNA(增殖细胞核抗原)、Bcl-2(B细胞白血病/淋巴瘤基因2)蛋白在牙龈组织中的表达.结果表明,镍铬合金全冠戴用后,牙龈组织PCNA,Bcl-2蛋白表达明显,而金合金全冠戴用后表达不明显.PCNA蛋白表达率与Ni,Cr,Si及Be离子质量分数正相关,而Bcl-2蛋白表达率与离子质量分数无明显的相关性.

铸造合金全冠戴用后对外周静脉血淋巴细胞凋亡的影响

目的研究三种常用铸造合金全冠戴用后对外周静脉血淋巴细胞凋亡的影响。方法给狗分别进行58%金合金、不含Be的NiCr合金、含Be的NiCr合金铸造全冠修复,建立实验动物模型。采用ICP-MS检测戴冠前、戴冠2周、1月、2月及3月时外周静脉血中金属离子的种类和浓度,同时应用流式细胞仪检测外周静脉血中淋巴细胞凋亡的情况。结果58%金合金全冠戴用后,外周静脉血中金属离子浓度变化不明显;淋巴细胞凋亡率没有明显变化。NiCr合金全冠戴用后,外周静脉血中Ni、Cr离子浓度以及淋巴细胞凋亡率均随着戴冠时间的延长而逐渐升高,其中戴冠3月与戴冠2月之间无明显差异(P>0.05)。含Be组的淋巴细胞凋亡率均显著高于不含Be组,不含Be组又明显高于58%金合金组;NiCr合金全冠戴用后,Ni、Cr离子浓度的升高与淋巴细胞凋亡率呈正相关。结论NiCr合金全冠(尤其含Be者)戴用后外周静脉血中淋巴细胞凋亡明显增加,而金合金全冠戴用后淋巴细胞凋亡无明显变化。