黑胫病菌诱导的烟草SSH文库构建及其分析

黑胫病是危害严重的世界性烟草主要病害之一,探究烟草对黑胫病的抗病机制,可以为该病的综合防治提供理论依据。本研究以烟草黑胫病抗性品种革新3号为材料,利用黑胫病0号生理小种诱导其水平抗性,分别在接种后0.5、1、3、6、10和16d取样,通过抑制差减杂交技术(SSH)构建cDNA文库,获得了960个阳性克隆。利用反向Northern斑点杂交技术对其中240个阳性克隆进行杂交筛选,筛选出57个表达差异明显的基因,序列拼接后获得33条高质量EST,测序及其比对分析表明,革新3号对烟草黑胫病抗性相关基因主要涉及抗病防卫、光合作用、信号传导和能量代谢等方面。进一步基因功能分析显示,病程相关PR1b蛋白、半胱氨酸蛋白、延伸因子1-α、α-微管蛋白、细胞色素P450、精胺合成酶、水通道蛋白、过氧化物酶体膜蛋白、甘氨酸延伸因子等可能参与了烟草与黑胫病菌非亲和互作过程。

不同类型高产小麦植株、籽粒可溶性糖含量与其干物质积累的关系

为了研究小麦育种的高产途径,此试验以大穗型(01-35),中间型(62008,4133-2)和多穗型(02-48)高产小麦品种为实验材料,在大田条件下,研究了小麦植株和籽粒可溶性糖含量变化及干物质积累动态。结果表明:不同类型的品种植株、籽粒可溶性糖含量变化与其地上部分及籽粒干物质积累速率和积累总量有密切关系。就群体而言,多穗型品种地上部分干物质积累量最多,产量也最高,中间型次之,大穗型最低。大穗型品种具有较强的营养物质外运能力,其千粒重最高,多穗型次之,中间型最低。充分协调源库流的关系,选育出大穗型和多穗型相结合的、综合农艺性状更佳的品种,将实现小麦高产、优质、高效的育种目标,从而更好地服务于大田生产。

双切口双钢板固定治疗Schatzker Ⅴ、Ⅵ型胫骨平台骨折

目的研究双切口双钢板内固定治疗SchatzkerⅤ、Ⅵ型胫骨平台骨折的临床效果。方法自2005年9月至2009年12月采用双切口双钢板内固定治疗SchatzkerⅤ、Ⅵ型胫骨平台骨折16例,对患者年龄、致伤原因、合并损伤、手术时机等进行综合分析,术后功能评价采用R asm ussen膝关节功能评分标准进行评价。结果术后16例患者均获得随访,时间4~47个月,平均18个月,骨折均获骨性愈合。根据R asm ussen膝关节功能评分法进行综合评分,优9例,良4例,可1例,差2例。结论采用双切口双钢板内固定治疗SchatzkerⅤ、Ⅵ型胫骨平台骨折,固定坚强,并发症少,效果满意。

烟草黑胫病菌0号生理小种不同条件下培养特性的研究

研究了烟草黑胫病菌0号生理小种的若干培养性状,为进一步展开与之相关的研究和综合防治提供理论基础。用培养基、光照、菌龄、诱导剂和诱导时间等不同因素研究了对烟草黑胫病菌0号生理小种的生长速度、产孢量和游动孢子释放量等方面的影响。结果表明,燕麦培养基较适于其生长和产生孢子囊,光照限制其生长;在本实验周期内,培养21 d的菌丝较适宜诱导,0.1%KNO3溶液浸泡菌丝有助于孢子囊的产生;经26℃培养72 h后,突降12℃处理0.5 h,结合1%葡萄糖溶液可促使孢子囊释放游动孢子,并延长后者的活动时间。

神经生长因子透过血脑屏障的研究进展

神经生长因子(NGF)是神经系统最重要的生物活性物质,它能维持神经系统的发育并参与神经损伤再生和功能修复。现已初步用于临床治疗脑、脊髓损伤和老年性痴呆等疾病。然而,NGF的临床应用有两大难题:一是给药途径问题,NGF作为蛋白质在消化道被迅速消化,且为大分子多肽,不能透过血脑屏障;二是控制释放问题,NGF生物活性半衰期较短,在水溶液中活性丧失快,易受多种因素影响。因此,文章主要探讨NGF透过血脑屏障的方法。

跟骨钢板内固定治疗跟骨关节内骨折

目的:评价跟骨钢板内固定治疗跟骨关节内骨折的临床效果。方法:从2004年12月至2009年12月采用跟骨钢板结合植骨治疗跟骨关节内骨折56例,观察效果。结果:术后1例切口部分裂开,2例切口边缘皮肤坏死,均经换药后切口完全愈合,所有病例获5-36个月随访,参考美国足踝骨科协会的足部评分标准评分,优(90-100分)25例,良(75-89分)27例,可(50-74分)4例,优良率92.8%。结论:跟骨钢板内固定结合自体髂骨或陶瓷骨治疗跟骨关节内骨折,是一种积极有效的治疗方法。

经小切口钢板内固定治疗胫骨骨折

目的:经小切口直接复位钢板内固定治疗胫骨骨折并观察疗效[1]。方法:选择7例胫骨骨折病例,经胫骨骨折断端小切口直接复位,在胫骨内侧骨折两端建立隧道,钢板经此安放于胫骨内侧,在钉眼处另作小切口螺钉固定。结果:经随访所有病例切口为一期愈合,骨折均为临床愈合。结论:经小切口直接复位钢板内固定,是一种治疗胫骨骨折的微创方法。

早期康复介入对膝关节损伤治疗效果的影响研究

目的:针对膝关节损伤患者实施早期康复介入,分析与研究应用效果。方法:选取病例时间:2016年1月-2018年12月,在上述时间段内选取30例膝关节损伤患者,根据治疗顺序将30例患者进行平均分组,对照组15例在治疗过程中采取一般护理,观察组15例在治疗中实施早期康复介入,比较对治疗效果的影响。结果:观察组膝关节功能评分比对照组高,差异明显,P<0.05;观察组疼痛评分比对照组低,差异明显,P<0.05。结论:针对膝关节损伤患者,在临床治疗中实施早期康复介入,可以促进患者膝关节功能恢复,减轻疼痛,值得在膝关节损伤患者中推广与应用。

Effect of NGF on c-fos mRNA Expression in Spinal Neuron after Spinal Cord Injury

Objective: To expound the mechanism of nerve growth factor (NGF) to protectspinal cord against injury. Methods: Forty-five rats with 10 g X 2. 5 cm impact T_8 spinal cordinjury (SCI) were divided into 3 groups. The experimental animals received 60 g NGF purified frombovine seminal plasma instantly, 1, 2, 4 h after in jury and an equal volume of normal saline wasgiven to the control group at the same time. The c-fos mRNA levels were detected by in situhybridization. Results: The results showed no evident c-fos expression in normal control group. Thec-fos expression increased markedly in damaged neurons. The peak value of c-fos mRNA arose at 1 h,and c-fos levels in NGF group reduced evidently. Conclusion: NGF could inhibit c-fos expression. Itmay serve as one of the action mechanisms of NGF to protect spinal cord against injury.

分析不同方法治疗复杂胫骨平台骨折的临床疗效

目的:探讨不同方法治疗复杂胫骨平台骨折的临床疗效。方法:2016年11月-2019年6月收治复杂胫骨平台骨折患者46例,随机分为两组各23例。试验组实施双切口双钢板内固定治疗;对照组实施单侧钢板内固定治疗。比较两组治疗效果。结果:治疗后试验组临床总有效率、膝关节功能和并发症发生率均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:复杂胫骨平台骨折患者实施双切口双钢板内固定治疗价值显著,既可改善膝关节功能,又可降低并发症发生率。

MADS-box基因控制植物成花的分子机理

植物花器官的发育和开花是植物生殖发育中最重要的过程,植物在长期的进化过程中产生了春化(低温)途径、自主途径、光周期途径以及不依赖于光温环境条件的赤霉素信号途径来适应多变的环境和调控植物开花过程。本文综述了模式植物拟南芥中由LEAFY(LFY)、CONSTANS(CO)、FLOWERING LOCUSC(FLC)、FLOW ERING LOCUS T(FT)和SUPPRESSOR OF OVEREXPRESSION OF CO1(SOC1)等基因构成的双子叶植物响应光温条件变化的开花调控网络;以及大麦、小麦中由VERNALIZATION1(VRN1)、VRN2、ODD-SOC2(OS2)和拟南芥CO、FT同源基因构成的禾本科植物开花调控网络。其中最重要的是转录调控因子MADS-box基因FLC、SOC1、VRN1和OS2,并发现组蛋白的乙酰化/脱乙酰化,赖氨酸的甲基化/脱甲基化在调控FLC、VRN1染色质活性状态及基因表达,从而产生开花控制的机理。这些研究发现将有助于对具有重要经济价值的单双子叶植物,通过生物技术手段改良其品种特性以应对非生物逆境,特别是低温胁迫的指导。

湖北省烟草黑胫病菌生理小种研究初报

在湖北省襄樊、恩施等主要烟区采集烟草黑胫病病株样本111个,分离纯化出30个烟草黑胫病菌株。采用游动孢子悬浮液注射接种鉴别寄主和TTZ(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)颜色反应两种方法鉴定其生理小种类型。结果表明,供试的30个菌株在TTZ培养基中的反应皆为红色,有24个菌株在鉴别寄主反应中对L8和NC1071有较强致病力,而对N.nesophila无致病力,应为1号生理小种,占供试菌系的80%,为湖北省优势生理小种;其他6个菌株中有4个菌株对NC1071有较强致病力,但对L8致病力较弱,有1个菌株对L8和NC1071致病力较弱;1个菌株对NC1071致病力较弱,但对L8有较强致病力;6个菌株对N.nesophila无致病力,是否为2号生理小种还是其他致病型,尚待进一步研究确定。

生长肥育猪日粮铜添加水平与组织铜残留量动态关系初探

采用54头杂交猪(杜×大×约)研究大剂量日粮铜添加水平对组织铜含量的影响,建立日粮铜添加水平与组织铜残留量之间的动态模型,探讨保证猪肉及其副产品食用安全性的最适铜添加量。试验采用单因子设计,分别设0、100、200、300、400mg/kg的铜添加水平,试验从20kg开始,100kg结束。结果表明:添加100～400mg/kg的铜不同程度地增加了组织器官中铜的残留量,肝脏和肾脏中铜含量随饲粮添加水平的增加呈二次曲线变化规律。肝脏铜残留量(y,单位为mg/kg)与日粮铜添加水平(x,单位为mg/kg)之间的回归方程为:80kg体重时,y=5.4697-0.0814x+0.0009x2(R2=0.930,P=0.07);100kg体重时,y=11.3963-0.2920x+0.0022x2(R2=0.814,P=0.036)。肾脏铜残留量(y,单位为mg/kg)与日粮铜添加水平(x,单位为mg/kg)之间的回归方程为:y=8.7583-0.0043x+0.0002x2(R2=0.975,P=0.025)。在80kg屠宰时,为了保证肝脏中的铜含量不超过10mg/kg,饲粮铜添加水平不应高于129mg/kg。在100kg屠宰时,为了保证肝脏或肾脏中的铜含量不超过10mg/kg,饲粮铜添加水平不应高于128或90mg/kg。

烟草抗马铃薯Y病毒病相关基因NtPsaN的克隆及表达分析

【目的】从高抗PVY烟草品种VAM中克隆抗病相关基因,分析该基因的序列特征、进化关系和表达特性,研究其在烟草抗PVY防御反应中的作用,为培育抗PVY烟草新品种奠定基础。【方法】利用SSH结合cDNA芯片筛选出来的病害诱导特异表达基因片段,通过RACE技术克隆烟草抗病相关基因;生物信息学分析该基因保守结构域以及序列特征;采用MEGA4.0软件构建系统进化树;利用实时荧光定量RT-PCR技术研究该基因的表达特性。【结果】克隆了1个烟草抗病相关基因,命名为NtPsaN,该基因具有PsaN基因家族保守结构域,OFR长度507bp,编码168个氨基酸;构建了PsaN亚基系统进化树;实时荧光定量RT-PCR结果显示接毒之后该基因表达与不接毒对照相比有明显上调趋势。【结论】克隆得到一个烟草PVY抗病相关基因NtPsaN,其表达受PVY侵染诱导,该基因可能在烟草抵御PVY病害侵染过程中起重要作用。

添加高铜对生长肥育猪组织铜残留量及病理学变化影响的研究

选用60头杂交猪（杜×长×约）研究日粮铜添加水平对生长肥育猪组织铜残留量和病理学变化的影响。试验采用单因子设计，分别设0、100、200、300、400mgCu趣饲粮的添加水平，试验从20kg开始，100kg结束。结果表明：添加100-400mg/kg的铜不同程度地增加了组织中铜的残留量，试验猪肝脏和肾脏中的铜含量随着饲粮铜添加水平的增加极显著的增加，呈二次曲线的变化规律，肝脏铜含量（y1，mg/kg）和肾脏中铜的含量（Y2，mg/kg）与饲粮铜添加水平（x，mg/kg）之间的回归方程分别为：y1=11．3963—0．2920x＋0．0022x0（R^2=0．814，P=0．036）；t2=8．7583—0．0043x＋0．0002x0（R^2=0．975，P=0．025）。根据回归方程可知，为了保证肝脏或肾脏中铜的含量不超过10mg/kg，饲粮铜添加水平应不高于127．76或90．27mg/kg。饲粮铜添加水平与组织器官铜浓度之间相关关系依次为：肝脏〉肾脏〉脾脏〉心脏。添加100--400mg/kg的铜，对肝脏、肾脏、心脏和脾脏造成了不同程度的病理性损伤，主要表现为不同程度的细胞变性、炎性细胞浸润和毛细血管出血。

烟草MADS-box家族基因保守片段的克隆与序列分析

MADS-box家族基因在植物的生长发育过程中具有重要功能。在烟草生产中出现的早花现象与MADS-box家族基因相关,为了能从烟草中克隆出与开花时间相关的基因,根据不同植物MADS-box家族基因的保守区序列,设计简并引物,采用RT-PCR技术从烟草品种NC82茎尖中成功分离出27条cDNA片段,长度在122～146 bp之间。序列分析表明,其中有16条具有MADS_MEF2类保守结构域,其推导的氨基酸序列与拟南芥等MADS-box家族基因具有同源性,相似性平均能达到76%,并具有15个保守的氨基酸位点,其中7个位点参与蛋白与DNA的相互作用,4个位点具有蛋白二聚化功能。系统发育分析结果表明,这些保守片段分别和拟南芥9个不同的MADS-box家族基因亚类最近似,其中许多亚家族与成花相关,说明NC82中存在具有调控开花的MADS-box家族基因表达,并可能与NC82低温敏感,易早花特性相关。

锁定加压接骨板治疗骨折的疗效及并发症研究

目的探讨对骨折患者采用锁定加压接骨板进行治疗后获得临床疗效以及并发症。方法将该院2017年8月—2020年2月收治的64例骨折患者数字奇偶法分组;治疗组(32例):采用锁定加压接骨板方法展开骨折疾病治疗;对照组(32例):采用常规固定术展开骨折疾病治疗。就组间骨折优良率以及并发症(旋肱血管受损、腋神经受损以及切口感染)比例展开对比。结果治疗组骨折患者骨折优良率(78.13%)高于对照组(37.50%),差异有统计学意义(χ2=10.827,P<0.05);两组骨折患者并发症类型主要集中于旋肱血管受损、腋神经受损以及切口感染,治疗组骨折患者总并发症比例(0.00%)低于对照组(28.13%),差异有统计学意义(χ2=10.473,P<0.05)。结论锁定加压接骨板方法的有效运用,可实现骨折患者骨折优良率的提升以及总并发症(旋肱血管受损、腋神经受损以及切口感染)比例的降低,最终实现骨折患者有效预后。

使用带袢纽扣钢板治疗TossyⅢ型肩锁关节脱位

目的探讨采用带袢纽扣钢板重建喙锁韧带治疗肩锁关节脱位的临床疗效。方法自2010年10月至2011年10月,我科采用带袢纽扣钢板技术重建喙锁韧带治疗14例肩锁关节脱位患者,男11例,女3例,年龄25～67岁,平均50.1岁,均为TossyⅢ型。利用Karlsson评价标准进行术后评估。结果所有病例均获得随访,时间4～14个月,平均9.8个月,参照Karlsson评价标准进行疗效评价,优9例,良5例,无再脱位及其他并发症。结论应用带袢纽扣钢板治疗TossyⅢ型肩锁关节脱位近期疗效满意,复位固定牢固,术后功能恢复好。

生长肥育猪日粮铜添加水平与生产性能动态关系的研究

采用54头杂交猪(杜×长×约)研究日粮铜添加水平对生产性能的影响,建立日粮铜添加水平与生产性能之间的动态模型,探讨促生长的最适铜添加量。试验采用单因子设计,分别设0、100、200、300、400mg/kg的铜添加水平,试验从20kg开始,100kg结束。结果表明:在20～100kg的生长肥育猪日粮中添加100～300mg/kg的铜,都可不同程度的起到改善生产性能的作用。与对照组相比,试猪全期ADG提高7.67%～10.59%,F/G降低4.58%～11.76%(P>0.05)。ADG(y1,单位g)和F/G(y2)与铜添加水平(x,单位mg/kg)的动态关系回归方程分别为:y1=737.21+0.9343x-0.0025x2(R2=0.900,P=0.100);y2=3.1063-0.0036x+8.7×10-6x2(R2=0.795,P=0.205)。根据回归方程可知,在试猪20～35kg、35～80kg、80～100kg和20～100kg各阶段,当铜添加水平分别为223、269、147和186mg/kg时,ADG最高,分别为910、808、803和825g。当铜添加水平分别为300、311、158和206mg/kg时,F/G最优,分别为1.86、2.79、3.28和2.73。

烟草叶片蛋白质组双向电泳实验体系的建立

选用干旱敏感型栽培烟草品种中烟100旺长后期的叶片和感黑胫病栽培烟草品种小黄金1025苗期的叶片作为实验材料,总蛋白质提取分别采用稍加改进的TCA/丙酮法和由蛋白质分级提取、酚抽提及丙酮洗涤相结合的方法。对中烟100旺长后期烟草叶片采用的总蛋白质TCA/丙酮提取方法进行了优化、对其使用的IPG胶条pH范围做了初步筛选,并在此研究基础上,对采用第二种提取方法获得的小黄金1025苗期烟草叶片总蛋白质样品进行了不同上样量对双向电泳结果影响的比较实验。初步建立起适合烟草叶片蛋白质组研究的双向电泳实验体系。