miR-669a-5p通过AMPK/PGC1α信号通路改善心力衰竭小鼠心肌细胞能量代谢

目的探讨主动脉弓缩窄(transverse aortic constriction,TAC)诱导的小鼠衰竭心肌中miR-669a-5p的表达变化,并进一步研究miR-669a-5p对心力衰竭小鼠的作用及可能机制。方法将24只小鼠按随机数字表法分为假手术组(Sham组,n=8)和手术组(n=16,建立TAC心力衰竭模型)。TAC术后第4周将手术组随机分为模型组(TAC组,n=8)及miR-669a-5p agomir组(Agomir组,n=8),Sham组、TAC组及Agomir组连续4周尾静脉分别注射生理盐水、agomir阴性对照试剂及agomir试剂,2次/周。第8周行超声心动图评估各组小鼠心功能;HE、天狼星红及WGA免疫荧光染色观察小鼠心肌组织病理学变化。RT-qPCR检测小鼠心肌组织miR-669a-5p及氧化磷酸化相关基因(ND1、ND2、NDUFA4、ATP5O)的表达。ATP检测试剂盒检测各组心肌组织ATP浓度。Western blot检测心肌组织p-AMPK、AMPK、PGC-1α蛋白表达水平变化。结果与Sham组比较,TAC组小鼠心肌miR-669a-5p表达显著减少(P<0.05)。超声检测结果显示:Agomir组小鼠心脏射血能力、收缩与舒张功能较TAC组明显改善(P<0.05)。组织切片染色显示:与TAC组比较,Agomir组可见心肌细胞排列紊乱、心肌纤维化及心肌细胞横截面积等有明显改善(P<0.05)。与TAC组比较,Agomir组ATP水平较TAC组明显升高(P<0.05),且ND1、ND2、NDUFA4、ATP5O基因相对表达量均显著升高(P<0.05)。Agomir组小鼠心肌组织p-AMPK/AMPK、PGC1α蛋白水平表达较TAC组显著增加(P<0.05)。结论miR-669a-5p可以显著改善主动脉弓缩窄诱导的心力衰竭小鼠心功能及心室重构,其机制可能是通过调控AMPK/PGC1α信号通路进而改善小鼠心肌细胞能量代谢。

早发型子痫前期并发未足月胎膜早破孕妇的阴道菌群分布及其对妊娠结局的影响

目的探讨早发型子痫前期(PE)并发未足月胎膜早破(PPROM)孕妇的阴道菌群分布情况及不同阴道菌群分布对妊娠结局的影响。方法选取2019年1月至2022年1月该院收治的早发型PE孕妇120例为研究对象,将其中67例并发PPROM的孕妇作为观察组,53例未并发PPROM的孕妇作为对照组。比较两组孕妇的阴道菌群分布情况,并分析不同阴道菌群分布的早发型PE并发PPROM孕妇的妊娠结局。结果优势菌方面,观察组的乳杆菌占比低于对照组,革兰阳性杆菌、革兰阴性杆菌、革兰阳性球菌占比高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。致病菌方面,观察组的溶血葡萄糖球菌、阴沟肠杆菌占比高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。阴道菌群密集度方面,观察组的Ⅱ、Ⅲ级占比低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。阴道菌群多样性方面,观察组的Ⅱ、Ⅲ级占比低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组的阴道微生态系统失调率为80.60%,高于对照组的45.28%,差异有统计学意义(χ^(2)=81.340,P<0.001)。与对照组比较,观察组治疗后血压偏高、24 h尿量偏低、24 h尿蛋白偏高、血小板偏高、凝血酶原时间和活化部分凝血活酶时间延长(均P<0.05)。观察组胎儿生长受限10例、胎儿宫内窘迫8例、新生儿窒息4例,对照组胎儿生长受限3例、胎儿宫内窘迫1例、新生儿窒息0例,观察组围生儿并发症发生率为32.84%,明显高于对照组的7.55%(P<0.05)。在67例早发型PE并发PPROM孕妇中,有54例菌群失调(菌群失调组),13例菌群正常(菌群正常组)。菌群失调组不良妊娠结局发生率为81.48%,高于菌群正常组的46.15%(χ^(2)=5.089,P=0.024)。与菌群正常组比较,菌群失调组新生儿出生体重明显降低(t=2.196,P=0.032),住院时间明显延长(t=7.463,P<0.001)。结论早发型PE并发PPROM孕妇的阴道菌群分布失调,容易导致不良妊娠结局。在临床中,需重视阴道菌群的变化并及时干预,以降低不良妊娠结局的风险。

miR-208b-3p通过抑制线粒体基因表达加重心力衰竭小鼠能量代谢障碍

目的探究miR-208b-3p对主动脉弓缩窄(transverse aortic constriction,TAC)诱导的心力衰竭小鼠能量代谢的作用及机制。方法将24只小鼠按照随机数字表法分为假手术组(Sham组,n=6)和手术组(n=18)。手术组采用TAC建立心力衰竭模型;假手术组采用TAC相同手术方式,但不结扎主动脉弓。于TAC术后第2周再随机分为Antagomir组(n=6)、Antagomir-NC组(n=6)及TAC组(n=6),Antagomir组、Antagomir-NC组尾静脉分别注射miR-208b-3p antagomir(800μg)及miR-208b-3p antagomir阴性对照(800μg)试剂,每周2次,连续4周。术后第6周行超声心动图评估各组小鼠心功能。HE染色及天狼星红染色观察小鼠心肌组织病理学形态。ATP检测试剂盒检测各组小鼠心肌组织ATP水平。RT-qPCR检测小鼠心肌组织miR-208b-3p、线粒体基因(ND1、ND2、ND3、ND4、ND4L、ND5、ND6、CO1、CO2、CO3、CYTB、ATP6、ATP8)及POLRMT、12SrRNA的表达。双荧光素酶报告基因实验检测miR-208b-3p与潜在靶基因POLRMT的相互结合作用。Western blot检测心肌组织POLRMT及ND1、CO2、CYTB、ATP8蛋白表达水平。结果与Sham组相比,TAC组小鼠心肌miR-208b-3p表达显著增加(P<0.05)。超声检测结果显示,Antagomir组小鼠心脏的射血分数、收缩与舒张功能较TAC组明显改善(P<0.05)。组织切片染色提示,Antagomir组小鼠的心肌细胞肥大、排列紊乱、心肌间质炎细胞浸润等有明显改善(P<0.05)。与TAC组相比,Antagomir组ATP水平明显升高(P<0.05);POLRMT及线粒体基因转录产物(12SrRNA和13个线粒体基因编码多肽)表达量均显著升高(P<0.05),但SDHA、SDHB无变化。双荧光素酶报告基因实验显示miR-208b-3p与POLRMT的CDS区有结合作用。Antagomir组小鼠心肌组织POLRMT、ND1、CO2、CYTB、ATP8蛋白水平表达较TAC组显著增加(P<0.05)。结论miR-208b-3p可通过靶向POLRMT抑制线粒体基因的表达,加剧线粒体能量代谢障碍,并加重心力衰竭小鼠心功能不全及心室重塑。

肝癌细胞疫苗对荷瘤小鼠脾淋巴细胞IFN-γ生成及肿瘤浸润淋巴细胞的影响

目的探讨高强度聚焦超声(HIFU)制备肿瘤疫苗对小鼠抗同源肿瘤免疫力的影响。方法以HIFU辐照或高温水浴灭活H22细胞制成HIFU瘤苗和高温瘤苗。将雌性BALB/c小鼠108只,随机分为HIFU瘤苗、高温瘤苗、生理盐水组,分别皮下注射HIFU瘤苗、高温瘤苗、生理盐水,之后接种H22细胞,观测荷瘤小鼠肿瘤体积及生存期。ELSIA检测免疫后荷瘤小鼠脾淋巴细胞在同源肿瘤再刺激下IFN-γ的生成。免疫组化检测小鼠肿瘤浸润T淋巴细胞。结果 HIFU瘤苗免疫使小鼠肿瘤生长被抑制,脾淋巴细胞IFN-γ生成增加,且较高温瘤苗组更显著(P<0.05)。瘤苗增加了肿瘤中CD4+和CD8+细胞浸润的程度。结论 HIFU瘤苗提高了实验动物的抗肿瘤免疫力,表现为增高的淋巴细胞IFN-γ生成和肿瘤内淋巴细胞浸润。

柴胡皂苷-d对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和转移的抑制作用

目的探讨柴胡皂苷-d对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和转移的作用及机制。方法经不同浓度柴胡皂苷-d处理MDA-MB-231细胞后,CCK-8法检测细胞活性,平板克隆实验检测细胞增殖能力;设定最低柴胡皂苷-d作用浓度的MDAMB-231细胞为实验组,不加任何处理的MDA-MB-231细胞为空白对照组,通过3D细胞培养实验、细胞划痕实验、transwell实验检测柴胡皂苷-d对细胞迁移和侵袭的影响;流式细胞实验检测其对细胞周期和凋亡的影响;最后通过实时荧光定量PCR、Western印迹法探讨其对细胞增殖和转移的作用机制。结果柴胡皂苷-d能呈时间及浓度依赖性抑制MDA-MB-231的细胞活性和增殖能力;柴胡皂苷-d 40μmol/L处理后MDA-MB-231细胞形态发生了明显的上皮性改变,实验组MDA-MB-231细胞的伤口愈合能力、迁移能力和侵袭能力受到明显抑制(P<0.01);流式细胞实验发现,与对照组相比,柴胡皂苷-d 40μmol/L处理后MDA-MB-231细胞阻滞于G1期,细胞凋亡率明显升高;实验组细胞Bcl-2、波形蛋白(vimentin)和N-钙黏蛋白(cadherin)的mRNA和蛋白表达下调(P<0.01),而P21、P27和E-钙黏蛋白mRNA和蛋白质表达上调(P<0.01)。结论柴胡皂苷-d有可能作为潜在的抗肿瘤药物用于抑制乳腺癌细胞增殖和转移。

孕中期血清学检测联合超声NT筛查在唐氏综合征诊断中的应用价值

目的分析在孕中期唐氏综合征(DS)检查中应用血清学指标联合超声检测胎儿颈项透明层(NT)的临床价值。方法选取本院2018年1月至2020年6月的就诊的17338例孕妇作为研究对象。入选孕妇在孕早期开展超声波检测NT,在孕中期进行母体血清甲胎蛋白(AFP)、游离人绒毛膜促性腺素亚基(freeβ-HCG)和游离雌三醇(uE3)的检测。运用风险评估软件分析孕中期血清学检测联合超声NT筛查在同一个体孕妇中对唐氏综合征诊断效能的影响。结果在17388例孕妇中,孕中期血清学检测出DS高危患者792例,确诊22例,患病率为0.13%,初筛阳性率为4.57%。孕中期的血清学检测检出率为63.64%,血清学联合NT筛查对DS检出率为81.82%,二者差异具有统计学意义(χ^(2)=6.23,P=0.03)。联合筛查的灵敏度和特异性均高于血清检测。结论孕中期血清学检测联合超声NT筛查对诊断DS具有较高的灵敏度和特异性,可以更加准确地预测孕妇的不良妊娠发生率,具有良好的临床应用价值。

关子人体腰椎间盘生物力学的实验研究

本实验对人体腰椎间盘在静态非破坏性轴向压缩载荷、复合载荷(包括静态非破坏性轴向压缩合并右前弯曲加载和左前弯曲加载)和疲劳载荷下的力学性质作了初步研究。每一试件包括椎间盘及与其相邻的两椎体,利用万能材料试验机进行加载。复合加载是通过自行设计的一套卡具实现的,其上固定的十个传感器可测出椎间盘的轴向载荷、轴向位移与横向位移。考虑到椎间盘具有明显的粘弹性性质,故采用微机进行数据采集与处理。试验前后均进行X线检查。疲劳试验后的试件沿矢状面、额状面、横断面切片,脱去有机间质,于显微镜下观察了骨小梁的微观形态。根据所得结果讨论了椎间盘的力学性质与退变的关系,疲劳产生的骨小梁微观骨折与纤维环损伤。这些结果为椎间盘突出的X线所见与腰疼病因提供了某些力学理论依据。

5-氮胞苷诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的实验研究

目的 :比较 5 -氮胞苷 ( 5 -azacytidine ,5 -aza)于不同浓度、不同孵育时间对骨髓间充质干细胞 (mesenchymalstemcells,MSC)向心肌样细胞分化的影响 ;观察诱导后不同时间点心肌标志物的表达情况。方法 :体外分离培养Wistar大鼠MSC ,传代纯化后进行诱导实验。浓度分组 (C1-C4 ) :分别以 3、5、10、2 0 μmol/L5 -aza处理 2 4h ,之后更换新鲜培养基继续培养。时间分组 (T1-T5 ) :以 10 μmol/L分别孵育 6h、12h、2 4h、4 8h、72h ,之后更换新鲜培养基继续培养。各组均于首次加药 4周后行免疫细胞化学染色检测。RT -PCR检测 10 μmol/L5 -aza处理后 2、4、8周细胞GATA4mRNA、cTnTmRNA的表达情况。结果 :经 5 -aza诱导处理后 4周 ,C1-C4组Desmin及α -SarcomericActin染色阳性率各组比较均无统计学差异 (P >0 .0 5 ) ;而T1-T5各组其阳性率比较存在统计学差异 (P <0 .0 1)。RT -PCR显示 ,诱导后 2周 ,GATA4mRNA开始表达 ,持续至 8周 ;cTnTmRNA在诱导后 2周无表达、4周时弱表达 ,8周时更为显著。结论 :成年人鼠MSC在适当浓度 5 -aza处理后可以向心肌样细胞分化 ,在 3μmol/L～ 2 0 μmol/L范围内 ,5 -aza浓度的变化对MSC的分化率影响较小 ;在 4 8h内 ,适当延长 5 -aza的孵育时间可能增加MSC向心肌样细胞的转?

关联规则分类的数据流挖掘方法在水电机组故障诊断的应用

引进一种数据流关联规则分类法(AC-DS),并应用该方法对UCI机器学习库中标准数据集进行分类验证,验证结果表明该方法准确且有效。然后将该方法应用到水电机组故障的诊断分类中,证明该方法的分类精度随着测试样本的增加而增加。该方法对现场不同类型机组故障分类有一定意义。

pEGFP/hVEGF121融合蛋白真核表达载体的构建及在骨髓间质干细胞中的表达

目的:构建携带人血管内皮细胞生长因子121及绿色荧光蛋白报告基因的融合蛋白真核表达质粒并检测其在骨髓间质干细胞(MSC)中的表达。方法:采用PCR技术,以pCD/hVEGF121质粒为模板扩增VEGF121基因全长,采用PCR产物的粘端克隆法,将VEGF121定向克隆入pEGFP-C1的多克隆位点,构建pEGFP/hVEGF121重组质粒,酶切、PCR及序列分析鉴定,脂质体介导转染体外培养的MSC,荧光显微镜及免疫细胞化学染色检测EGFP/VEGF融合蛋白的表达。结果:PCR、酶切及测序证实目的基因VEGF121正确连接至pEGFP-C1的多克隆位点,pEGFP/hVEGF121重组质粒转染MSC后,荧光显微镜及免疫细胞化学检测EGFP/VEGF蛋白在MSC中存在表达。结论:成功构建了携带人VEGF121及EGFP报告基因的融合蛋白真核表达质粒,并在MSC中获得表达,为进一步研究VEGF基因治疗缺血性心血管疾病及MSC的分化奠定了实验基础。

在心肌细胞/MSCs共培养体系中MSCs出现心肌分化表型

目的:观察MSCs在心肌细胞/MSCs共培养体系中向心肌细胞的分化情况。方法:体外分离培养大鼠心肌细胞,然后将传代后大鼠MSCs与心肌细胞混合培养,建立心肌细胞/MSCs共培养体系,同时以心肌细胞培养上清液及成纤维细胞培养上清液为诱导因素作对照。培养1周后行免疫细胞化学染色,鉴定MSCs中心肌特异性cTnT蛋白的表达。结果:在心肌细胞/MSCs共培养体系中,MSCs与心肌细胞交织成网状,部分MSCs出现cTnT的表达,而对照组MSCs未检出cTnT的表达。结论:体外模拟的心肌环境可以诱导MSCs向心肌细胞分化并表达心肌细胞特异性标志物,诱导MSCs向心肌分化的分子信号可能是心肌细胞膜蛋白。

可溶性鸟苷酸环化酶–维利西呱用于心力衰竭的机制

维利西呱(Vericiguat)是第一个被批准用于治疗射血分数降低的有症状慢性心力衰竭(HFrEF)成人的口服可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)刺激剂。心力衰竭仍然是老年人的高患病率高死亡率疾病,给卫生保健系统带来了重大的经济负担。现目前心力衰竭一线治疗包括β受体阻滞剂、血管紧张素转换酶抑制剂(ACEi)、血管紧张素受体阻滞剂(ARBs)、盐皮质激素受体拮抗剂(MRA)等。有最新研究表明可溶性鸟苷酸环化酶刺激剂维利西呱能通过修饰一氧化氮-sGC-环磷酸鸟苷(sCG)级联反应进而改善心力衰竭(或射血分数减低)患者预后。为了提高临床医生对维利西呱在心力衰竭治疗中的认识,促进维利西呱在心力衰竭治疗中的实际应用,本文就维利西呱缓解心力衰竭的机制进行综述。

连续小波变换VLSI实现综述

小波变换是信号处理、图像压缩和模式识别等诸多领域中一个非常有效的数学分析工具。然而,实时小波变换计算量大,需要专用硬件来实现。连续小波变换的VLSI实现在处理速度、功耗及适用频率范围方面都具有较明显的优势,且实现方法灵活。本文对近年来有关该领域的研究情况作了综合评述,讨论了其中存在的问题,并指出了今后的若干发展方向,特别是瞬时缩展电路技术是实现低电压低功耗小波变换芯片的重要途经之一。

连续小波变换VLSI实现的研究进展

小波变换已广泛地应用于信号处理中 .然而 ,实时小波变换计算量大 ,需要专用硬件来实现 .连续小波变换的 VLSI实现在处理速度、功耗及适用频率范围方面都具有较明显的优势 ,且实现方法灵活 ,但这个领域却鲜有人涉猎 .本文对近年来有关该领域的研究情况作了综合评述 ,讨论了其中存在的几个问题 。

冠心病诊治过程中C反应蛋白、血胆红素与血脂联合检测的作用

选择2011年10月-2012年12月我院收治并确诊为CHD的146例患者为研究组,并选择同期146例无心血管疾病者为对照组,对两组患者的C反应蛋白（CRP）、总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、间接胆红素（IBIL）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）等浓度进行对比。结果与对照组相比,研究组患者的CRP、TBIL、DBIL、IBIL、TC、TG、HDL-C、LDL-C等的浓度明显要高,差异具有显著性（P〈0.05）。C反应蛋白、血胆红素及血脂联合检测有助于冠心病的检测,并可以对其危险性进行评估及判断预后。

原煤中汞分布赋存规律的测定与分析

在屯兰选煤厂原煤筛分浮沉试验的基础上,对各粒度级和各密度级煤中的汞含量进行测试,分析汞在煤中的赋存规律,建立了煤中汞含量与密度和灰分的数学模型。结果表明:对该选煤厂,原煤中汞含量随密度的增大而增加;随粒度增大也增加,但略有起伏;汞含量与灰分的相关性大,且变化趋势与密度相似。

孕早期血清FABP4水平与妊娠期糖尿病和早产风险的关系研究

目的:探讨孕早期血清脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(FABP4)水平与妊娠期糖尿病(GDM)发展和早产风险之间的关系,为预测GDM及早产发生风险提供依据。方法:选取2021年1~8月在保定市第二医院产科进行常规产检及分娩的601例孕产妇作为研究对象。采用酶联免疫吸附法检测孕早期(<孕13周)血清FABP4水平。相关性分析采用Spearman相关系数法。采用二元Logistic回归模型分析孕早期血清FABP4水平与患者妊娠期糖尿病及早产风险的关系。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估孕早期血清FABP4水平对妊娠期糖尿病及早产风险的预测价值。结果:GDM组血清FABP4水平均高于非GDM组(P<0.05);早产组血清FABP4水平也高于足月组(P<0.05)。经Spearman法分析,血清FABP4水平和Fins(r_(s)=0.115,P=0.005)、C-反应蛋白(CRP)(r_(s)=0.179,P<0.001)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)(r_(s)=-0.113,P=0.006)呈弱相关关系。校正可能的干扰因素后,多因素分析显示,孕早期血清FABP4水平是妊娠期糖尿病和早产的危险因素(P<0.05)。血清FABP4水平对妊娠期糖尿病和早产风险的ROC曲线下面积分别为0.778(95%CI:0.740~0.815)、0.721(95%CI:0.681~0.761)。结论:孕早期血清FABP4水平对预测GDM及早产发生风险具有一定应用价值,可作为重要的生物标志物。

医学研究生导师胜任力评价指标体系的构建

目的构建较为理想的医学研究生导师胜任力评价指标体系,为建设高素质的医学研究生导师队伍提供理论依据。方法采用小组讨论法初步建立医学研究生导师胜任力评价指标体系,后通过德尔菲(Delphi)法进行2轮专家咨询,构建最终的指标体系,采用层次分析(AHP)法计算各个指标权重。结果 6个一级指标的权重分别为身心素质0.232 2,教学动机0.057 6,知识技能水平0.184 1,工作品质0.145 9,科研能力0.303 0,教学水平0.077 1。权重指数由高到低的二级指标排序前3位的是良好学术道德和严谨学术规范;熟知学科专业理论及熟练应用医疗器械,掌握专业操作技能,能专业地单独分析医学检查报告;强烈的团队意识,能够很好地带领学生开展各种学习交流、学术讨论、技能培训等。结论在建设医学研究生导师队伍的工作中,不能只提高导师的科研能力和知识技能水平,还需要提高导师的身心素质、工作品质、教学能力以及纯化导师的教学动机,只有这样才能建立一个高综合素质的导师团队。

经冠状静脉窦冷冻消融左侧心外膜旁道一例

1例女性室上性心动过速患者,心内电生理检查诊断为左侧旁道,先后以普通射频及冷盐水灌注大头在左室心内膜面标测,靶点均不理想且多次试放电无效,考虑心外膜旁道,在冠状静脉窦(CS)内标测到较好靶点,以5 W试放电但患者痛感明显,遂换用冷冻消融大头于CS内靶点冷冻消融成功。