自由基引发的软骨细胞异常基质异常矿化异常——大骨节病病理化学过程初探

本文研究了自由基和黄腐酸对软骨细胞的损伤效应。结果表明自由基和黄腐酸可引起软骨细胞损伤。这种损伤的软骨细胞分泌异常基质,在异常基质中,羟基磷灰石的矿化异常,并在此基础上,提出了一个大骨节病的病理化学过程。

外源性层粘连蛋白对腹水型肝癌细胞内微丝组装和细胞游动的作用

本文研究外源性层粘连蛋白与癌细胞膜上受体结合调节胞内肌动蛋白微丝组装与改变细胞游动之间的关系,以及影响膜上层粘连蛋白受体的侧向扩散运动及膜脂分子流动性变化之间的关系.用各种荧光技术,如荧光显微米,荧光漂白恢复技术和荧光流式细胞术得到了明显的证据.层粘连蛋白与肝癌细胞膜有结合,使分散的腹水肝癌细胞粘连聚集,并膜下周动蛋白微丝增加,当把癌细胞分开则细胞从原位游动很大距离.如不分离粘连的细胞可减少其脱落和转移.层粘连蛋白与受体结合则受体的侧向扩散系数减小,膜脂流动性降低,使膜上分子运动受影响,对癌的生长不利.

激光微束诱导pSV－β质粒导入Hela细胞的研究

本文报道了用一套Ｎｄ：ＹＡＧ紫外激光微束系统研究基因转移。我们以ｐＳＶ－β质粒（β─半乳糖苷酶基因）作为报道基因，利用紫外激光微束将其导入Ｈｅｌａ细胞中，通过组织化学染色检测到质粒在Ｈｅｌａ细胞中获得表达，在最佳的激光辎照条件下，Ｈｅｌａ细胞的导入表达成功率在８０％以上。本工作是国内首次报道激光微束诱导外源基因进入动物细胞中并获得表达，为激光微束技术在动、植物细胞高效率导入外源ＤＮＡ的研究中摸索到一套经验，也将有力地促进这一技术在细胞工程方面的应用。

钆离子对巨噬细胞和癌细胞生长过程的影响——微量量热法研究

探讨Gd3+对大鼠和小鼠腹水巨噬细胞、小鼠腹水肝癌H2 2 细胞和人肝癌细胞BEL 740 2的生长过程的影响。方法 :用LKB 2 2 77量热活性检测仪测定 37℃时细胞在加和不加Gd3 +的介质中的产热过程的差异。结果 :1.0× 10 -4 mol·L-1Gd3+对 4种细胞的代谢开始都有明显促进 ,70min时达到产热高峰。虽然总热效应都有增加 ,但是癌细胞增加的比值明显小于巨噬细胞的。结论 :本实验中 ,在初始时Gd3 +可以促进 4种细胞的产热 ,从热效应曲线变化推测Gd3 +离子可能在后期使癌细胞损伤 ,活性降低。

付里叶变换红外光谱研究短杆菌肽A及其在脂双层中加Na~＋前后的构象变化

用ＦＴＩＲ光谱研究了短杆菌肽Ａ（ＧＡ）在固态，组装入ＤＰＰＣ脂持体，以及Ｎａ＋结合状态的构象变化。固态时酰胺Ⅰ带峰位于１６３ｃｍ－１左右，且在１６８５ｃｍ－１处有一肩峰；酰胺Ⅱ带位于１５３０ｃｍ１左右，整个分子为反平行的β螺旋结构，为非通道构象。当ＧＡ组装入脂质体后，酰胺Ⅰ带仍位于１６３３ｃｍ－１，但１６８５ｃｍ－１的肩峰消失，酰胺Ⅱ带移至１５５０ｃｍ－１，分子间氢键转变为分子内氢键，二聚体从原来的双股螺旋变为头－头相连的单股螺旋，是ＧＡ的膜内通道构象。Ｎａ＋的结合并不改变ＧＡ的骨架结构，但通过对酰胺Ⅰ带的拟合分析发现：加Ｎａ＋后位于１６４４ｃｍ－１的无规结构含量减少１０％，而有序结构增加，提示部分无视结构可能有一种“门”的作用：当无离子通过时为“关闭”状态，当与离子结合后即“打开”，这样通过构象的改变来实现其通道功能。

凝集素及其受体相互作用对人红细胞变形性的影响

研究红细胞变形性,无论在理论研究还是临床实践中均具重要意义。它对于认识不同因素如外界物质、细胞膜及骨架、不同病理状态等对细胞结构及功能的影响有一定帮助,也为深入研究不同因素对细胞作用的机制及某些疾病的诊断提供线索和依据。

伴刀豆蛋白A与巨噬细胞膜上受体结合后对微丝组装的影响

本文采用流式细胞术(FCM)和荧光显微术研究ConA与巨噬细胞膜上受体结合后细胞骨架微丝组装的变化,实验证明ConA与膜受体结合后巨噬细胞内微丝含量增多,并且与ConA的浓度有关。荧光显微镜下还可见细胞面积增大。本实验成功地用流式细胞术定量研究活细胞内细胞骨架的变化情况。

麦胚凝集素作用下膜血型糖蛋白A构象变化研究

为进一步验证麦胚凝集素作用下膜血型糖蛋白Ａ空间构象的变化，本文用傅里叶变换红外技术，定量测定了麦胚凝集素作用下，溶液血型糖蛋白Ａ和脂蛋白体膜血型糖蛋白Ａ的二级结构的改变，发现麦胚凝集素结合于血型糖蛋白Ａ导致血型糖蛋白Ａα—螺旋减少，β—结构增加，麦胚凝集素的抑制剂Ｎ—乙酰葡萄糖胺对麦胚凝集素诱导的血型糖蛋白Ａ二级结构的改变有抑制作用。本文同时用扫描隧道显微术直接观察了麦胚凝集素结合前后膜血型糖蛋白Ａ分子形态的变化。

石英粉尘对人红细胞膜的损伤及柠檬酸铝的抗损伤作用研究——V、对膜蛋白构象的影响

本研究用圆二色技术测定石英粉尘对人红细胞膜蛋白构象的影响以及柠檬酸铝拮抗石英影响的效应.结果显示,石英引起膜蛋白构象改变较为迅速;对膜蛋白构象的影响(α-螺旋量减少)存在着剂量效应关系.柠檬酸铝可以有效地减轻石英对红细胞膜蛋白构象的影响.

傅里叶变换红外技术研究Cl^-通过红细胞膜带Ⅲ蛋白时的构象变化

用傅里叶变换红外光谱技术研究Ｃｌ-通过完整红细胞、红细胞血影、重组带Ⅲ蛋白脂质体三种体系中的膜带Ⅲ蛋白时的二级结构变化。结果证明：Ｃｌ^-通过膜带Ⅲ蛋白，导致其ａ-螺旋增加，β-结构减少，以扫描隧道显微术直接观察到Ｃｌ^-通过前后、膜带Ⅲ蛋白的分子形态有改变。

巨噬细胞膜变形性与细胞骨架微丝关系的研究

以巨噬细胞的圆形因子和面积作为细胞膜变形性指标,研究细胞膜变形性与膜下微丝的关系。结果表明,ConA能使细胞膜变形性增大,同时加入细胞松弛素B则膜变形性下降。本实验将图像分析技术和多元统计软件包结合,为定量研究活细胞行为的一个成功尝试。

人红细胞膜血型糖蛋白A的提纯及扫描隧道显微镜观察

以氯仿-甲醇选择性抽提法提纯人红细胞膜血型糖蛋白A,用扫描隧道显微镜直接观察其在水溶液中的分子形貌。

顺铂与细胞膜的相互作用

寻找抗癌药物的工作一直受到以DNA为仅有的靶分子这一传统思路所限。所以虽然对数以百计的铂络合物进行了寻找低毒抗癌络合物的筛选,终未得到突出的结果。可是却出现了愈来愈多的证据表明细胞中存在有DNA以外的一些靶分子。为解释金属-细胞相互作用,我们提出了一个多靶分子模型。据此可把药理和毒理作用当做细胞对进攻离子的应答的两个方面。实际上,已知Pt(Ⅱ)化合物易与生物分子的向核性基团结合,特别是易与硫原子形成强Pt—S键。这些反应可能与铂化合物的抗癌活性和毒性有关。在肿瘤发生发展中的某些关键酶,如二氢喋啶还原酶及二氧叶酸还原酶等,都可被顺铂所抑制。

石英粉尘对人红细胞膜的损伤及柠檬酸铝的抗损伤研究

本研究利用激光多普勒动电学分析技术测定了石英粉尘在与人红细胞膜作用后其表面带电性质发生改变的情况。结果发现,石英表面与红细胞膜作用后其表面电动电位(zeta电位)发生变化,表面的负电荷减少。当柠檬酸铝与石英粉尘作用后,铝可以中和石英表面的负电荷。人血清白蛋白和卵磷脂也可以减少石英表面的负电荷。

生物物理技术在膜毒理学研究中的应用

随着对生物膜在细胞生理活动中所担负作用认识的日益深化,研究毒物对生物膜的作用,由此而产生的膜毒理学(membrane toxicology),引起了毒理学家的极大关注。这是毒理学发展的又一崭新分支。目前,随着膜分子生物学特别是生物物理技术的广泛应用,大大地促进了膜毒理学的发展。迄今,膜毒理学已包括研究毒物对膜生物物理性质、生物化学性质以及膜成份和形态结构的影响等许多方面。本文拟从这几方面。

显微红外研究巨噬细胞膜电融合后膜蛋白二级结构的变化

首次尝试了将显微傅里叶变换红外光谱术应用于研究电融合后细胞膜蛋白质二级结构的变化，发现脉冲电场作用于细胞具有穿透效应，施加电脉冲后，整个细胞的蛋白质体系能量增加，表明电脉冲对蛋白质的二级结构影响很大；同时，还发现用唾液酸苷酶和蛋白酶Ｐｒｏｎａｓｅ分别处理巨噬细胞膜表面后，膜上蛋白质二级结构无序化程度增加，用酶适度处理的细胞将更易发生电融合。

伴刀豆球蛋白A与巨噬细胞膜上受体作用下膜变形性及细胞吞噬能力变化

本文采用图像分析、相差显微、生物活性测定等技术,研究ConA与巨噬细胞膜受体结合后对细胞行为与功能的影响. ConA与受体结合后巨噬细胞膜面积增大、变形性和吞噬能力增强、细胞产热量增加,表明细胞膜结构与功能发生变化.本实验是将图像分析技术用来研究相对图像采集速度要慢得多的活细胞特性的一次成功尝试.

层粘连蛋白与膜受体结合下膜受体构象与膜脂有序性的研究

配体蛋白与细胞膜受体蛋白结合后,可引起膜受体的构象与膜脂的有序性变化.本文研究外源性层粘连蛋白与腹水肝癌细胞膜受体结合后膜热量变化,膜序参数改变和膜电荷及细胞迁移率的变更.就膜蛋白构象与膜脂有序性以及膜电荷等方面改变的生理意义与层粘连蛋白抗癌细胞脱落转移寻找理论关系.本文应用微量量热法、顺磁共振和细胞电泳等技术,得知层粘连蛋白与癌细胞膜作用后细胞膜有放热效应,膜流动性增大,细胞电泳动变慢.癌细胞膜的这些变化对于限制癌的恶性生长与脱落均起重要作用.

扫描隧道显微术研究脂双层表面结构

扫描隧道显微术可用于研究生命物质表面结构,为人类认识生物物质的微观世界打开一条新途径.本文探讨国产扫描隧道显微镜直接观测脂双层膜表面分子的排布,以线扫描像和灰度扫描像显示出脂双层膜上磷脂头部的排列.

Investigation on the Antitumor Activity of Organotin Compound

Changes in the surface structure of cell membrane and the contents of membrane pro- teins and nuclear DNA of human gastric cancer (BGC-823) cells treated with organotin compound (Et_2SnCl_2phen) were studied with a scanning electron microscope (SEM),a scanning tunneling,micro- scope (STM),and a cytofluorophotometer.It was found that Et_2SnCl_2Phen not only inhibited the cell growth but also remarkably changed the surface structure of the membrane of cancer cells.The surface of Et_2SnCl_2phen treated cancer cells was relatively smooth and showed fewer microvilli under SEM. STM images showed an uneven and loose distribution of the surface of the cell.In comparison with the untreated cancer cells,there was an evident decrease in the content of membrane proteins and nuclear DNA in Et_2SnCl_2phen treated cells.