地特胰岛素高分子蛋白质定性和定量分析

目的:探索和建立地特胰岛素高分子蛋白质的定性和定量分析测定方法。方法:采用Tricine SDS-PAGE凝胶电泳有效地分离地特胰岛素中的高分子蛋白质组分,确定高分子蛋白质的主要组成形式;采用分子排阻色谱法分离地特胰岛素单体以及高分子蛋白质,并对高分子蛋白质进行准确定量。结果:确定了地特胰岛素中高分子蛋白质的主要形式为二聚体和寡聚体,建立的分子排阻色谱法可准确地测定地特胰岛素中高分子蛋白质的含量,并考察了高分子蛋白质产生的主要因素以及国内外产品的高分子蛋白质含量。结论:建立的方法可快速有效地对地特胰岛素高分子蛋白质进行定性和定量分析,可作为地特胰岛素的质量研究和质控分析方法。

聚乙二醇(PEG)化尿酸氧化酶中游离PEG的含量测定

目的：比较并建立PEG化尿酸氧化酶中游离PEG的测定方法。方法：采用反相高效液相色谱-蒸发光散射检测器（ELSD）联用法和SDS—PAGE碘染的方法。RP—I-IPLC法的色谱柱为C。柱（4．6mm×250mm，5μm）；流动相A为0．1％（v／v）的三氟乙酸-水，流动相B为0．1％（v／v）的三氟乙酸-乙腈，梯度洗脱；流速为1．0mL·man～；柱温30℃；SDS—PAGE碘染采用氯化钡固定，碘-碘化钾染色。结果：RP—HPLC法中，PEG的检测灵敏度为0．2μg，PEG在1～6μ范围内呈良好的二项式回归关系（R^2=0．9993）。低、中、高3个浓度的加样回收率分别为96．2％、97．4％、96．8％。SDS—PAGE碘染法灵敏度为0．1μg。结论：建立的高效液相色谱一蒸发光散射检测器联用法与SDS—PAGE碘染法均可对游离PEG进行测定。前者测定结果准确，重复性好，可用于PEG的精确定量分析，后者操作简单，不需要特殊仪器。但只可用于限度检查。

重组人生长激素水针剂与冻干剂对去垂体大鼠的药效和生物活性比对研究

目的:评价一个新生物类似药重组人生长激素(rhGH)水针剂的体内生物活性和促动物机体生长的功效,并与参照药即已上市的rhGH冻干粉针剂比较其相似性。方法:生物活性测定按中国药典2010年版二部附录生长激素生物测定法即去除脑垂体大鼠体重增重法进行;功效试验以去除脑垂体大鼠GH缺乏为动物模型,比对研究rhGH水针剂与rhGH国家标准品和参照药(粉针剂)在促动物生长指标方面的差异。结果:试验结果证明rhGH水针剂与参照药rhGH冻干粉针剂生物活性相似。与模型组相比,rhGH水针剂与粉针剂各剂量组体重、尾长、胫骨骨骺板宽度、肝脏重量等生长指标均有显著增加(P<0.05),并有量效关系,2种剂型间差异无显著性意义(P>0.05)。结论:经比对试验研究,证明某企业的rhGH水针剂与参照药在药效和生物活性方面具有相似性。