脂肪干细胞基质胶在糖尿病创面治疗中的研究进展

随着糖尿病发病率的增加,由慢性持续性高血糖所引起的难愈性创面长期困扰着糖尿病患者。脂肪细胞外基质/基质血管组分凝胶(SVF-gel)中因含有高度浓缩的细胞外基质和基质血管组分(SVF),在为细胞及细胞因子功能的发挥提供最适微环境的同时,具有促进创面血管新生、抑制炎症反应和刺激上皮细胞增殖分化等功能,最终达到修复难愈性创面的目的。文章主要就SVF胶的制备、成分以及在糖尿病创面治疗中的机制和应用进行综述。

软骨细胞与骨髓基质细胞共培养体外构建软骨的初步研究

目的 探讨不同浓度软骨细胞提供的软骨微环境诱导骨髓基质干细胞(BMSC)体外构建软骨的可行性。方法 将体外分别培养扩增的猪BMSC与耳软骨细胞按不同比例混合(9:1,8:2),均以5.0×107/mL的细胞终浓度接种于聚羟基乙酸/聚乳酸(PGA/PLA)支架作为共培养组,以相同终浓度的单纯软骨细胞和单纯BMSC分别接种作为阳性及阴性对照,以20％上述浓度的单纯软骨细胞接种作为低软骨细胞浓度对照。各标本于体外培养4周时取材,通过大体观察、组织学以及免疫组化等方法对新生软骨进行初步评价。结果 各组细胞均与材料粘附良好。8:2共培养组及阳性对照组在体外培养4周时,外观已类似软骨组织并基本保持了材料的大小和形状,组织学显示有较连续的成熟软骨形成,免疫组化也均显示有大量Ⅱ型胶原分泌。9:1共培养组在培养过程中稍有缩小和变形,组织学上仅在培养物的边缘可见到连续的软骨样组织。阴性对照组明显皱缩变形,组织学未见成熟软骨陷窝。低软骨细胞浓度组复合物明显变薄,只在局部形成了不连续的软骨组织,新生软骨量明显少于共培养各组及阳性对照组。结论软骨细胞能够提供软骨微环境诱导BMSC成软骨分化并形成软骨,20％浓度的软骨细胞已能够达到良好的诱导效果。

软骨细胞与骨髓基质细胞共培养裸鼠体内构建软骨组织的实验研究

目的:探讨软骨细胞在裸鼠体内促进骨髓基质细胞(BMSCs)向软骨分化并形成软骨组织的可行性。方法:从SD大鼠中分别分离出BMSC和软骨细胞进行体外培养。收集软骨细胞培养上清液,作为BMSCs诱导液从第2代开始进行诱导分化,7天后取出标本,免疫组织化学检测软骨特异性Ⅱ型胶原表达,RT-PCR检测Ⅱ型胶原和aggrecan的mRNA表达。SD大鼠BMSCs与软骨细胞按一定比例(7:3)混匀,取5.0×107个混合细胞/ml的各组细胞悬液接种至壳聚糖生物材料,体外培养一周后植入裸鼠皮下,相同数量的单纯软骨细胞或BMSCs同样方法植入,分别作为阳性对照及阴性对照,1.5×107个软骨细胞同样植入作为低浓度软骨细胞对照。各组均8周后取材检测。结果:经诱导后的大鼠BMSCs的Ⅱ型胶原免疫组化检测阳性,RT-PCR检测Ⅱ型胶原和aggrecanmRNA呈阳性表达;混合细胞组及阳性对照组均形成了成熟的软骨,组织学可见成熟软骨陷窝、异染基质及Ⅱ型胶原表达;BMSCs组仅形成了纤维性组织;低浓度软骨细胞组在局部形成了少量软骨。结论:软骨细胞能在一定程度上提供软骨形成的微环境,诱导BMSCs在裸鼠体内向软骨组织分化并形成软骨组织。

软骨组织工程种子细胞的医学伦理分析

软骨组织工程作为一项新兴技术成为治疗软骨缺损的新途径,本文通过探讨软骨组织工程学研究与临床应用的医学伦理学问题。从组织工程学研究的各种不同的种子细胞来源方面阐述其各自存在的伦理学问题及其对策。从而阐明在进行软骨组织工程种子细胞研究的同时,必须充分考虑相关的伦理学问题,遵循伦理原则,使软骨组织工程不仅在技术上可行,在伦理学上也是可行的。

ERK阻滞剂PD98059对去分化软骨细胞逆分化的影响

目的探讨胞外调节蛋白激酶(ERK)阻制剂PD98059促使去分化软骨细胞逆分化的作用,为解决软骨组织工程种子细胞来源问题提供依据。方法将猪耳廓软骨细胞体外扩增至第5代,实验组加入PD98059(20mmol/L)含10%胎牛血清的F12培养液培养,每3天换液1次,未加PD98059培养为对照组。培养7天后,观察细胞阻断后单层与三维培养细胞表型变化,RT-PCR法检测两组Ⅱ型胶原、蛋白聚糖(Aggrecan)和Sox9基因表达。将经过三维环境培养的细胞植入裸鼠皮下后于第6周、8周组织学检测软骨组织形成情况。结果实验组老化软骨细胞形态与阳性对照组相比无明显变化。Ⅱ型胶原、Aggrecan、Sox9 mRNA均表达阳性。特殊染色显示裸鼠体内6周、8周均有软骨组织形成,Ⅱ型胶原免疫组织化学检测示6周、8周基质中Ⅱ型胶原表达均为阳性,对照组则未见阳性表达。结论 PD98059可部分逆转软骨细胞老化,可作为一种解决软骨组织工程种子细胞问题的新方法。

小学高年级习作教学研究

对学生来说,在学习语文知识的过程中,必须要听说读写能力全面发展,不管哪个环节出现问题,都会对学生的素质造成一定的影响。习作能力是学生语文综合素质的重要组成部分,因此在语文教学实践中,教师应该充分重视学生的习作思维发展训练,从而达到理想的教学目标。近年来,教师已经意识到了培养小学生习作能力的重要性,并且也在教学实践中采取了一定的教学形式,但是效果并不明显。

基于GSM模块的远程控制和报警系统

介绍了一种基于GSM/GPRS网络的无线远程控制和报警系统,详细阐述了系统的组成结构和软硬件设计。该系统采用GSM/GPRS模块发送接收短消息和彩信,从而实现对家居安全状况的远程监控。选用多种传感器采集家居信息,通过无线收发模块传递到主控制器,运用信息融合技术,获得可靠的报警信息。业主接到报警信息后,回复短信可以控制和处理现场情况,达到保证家居安全和防盗的目的。

酱油电渗析液用于酱油制曲的研究

将酱油电渗析脱盐过程中分离得到的酱油电渗析液(SSEB)作为浸润黄豆的介质应用于酱油制曲。测定成曲及酱醪的理化指标、挥发性风味物质等,并对成曲及酱醪的微生物构成进行分析。结果表明,控制SSEB制曲过程中黄豆盐分含量为3%(湿质量),在此条件下培养得到的曲料中菌落总数降低且酵母菌数不会受到显著影响,成曲中性蛋白酶活力为(941±18)U。样品在制曲及发酵阶段均显现出了更大的微生物多样性,成曲中优势细菌为葡萄球菌属(Staphylococcus);发酵后期酱醪优势细菌为四联球菌属(Tetragenococcus)与葡萄球菌属(Staphylococcus),真菌菌群以米勒酵母属(Millerozyma)与结合酵母属(Zygosaccharomyces)为主。SSEB制曲的酱油氨基酸氮含量均达到0.8 g/100 mL以上,总酸含量降低了22.50%,挥发性风味物质中高级醇以及酸类物质含量相对较高,感官方面呈现出了令人愉悦的豉香与醇香,有效降低了非有益菌繁殖所带来的异杂味。研究表明,以SSEB进行制曲可促进发酵有益菌建立菌群优势,对酱油风味改善的同时具有维护发酵稳态与酱油生物安全性的潜力。

TGF-β_1、IGF-I和地塞米松诱导BMSCs体外构建组织工程化软骨

目的 探讨体外联合应用TGF-β1、IGF-Ⅰ及地塞米松诱导骨髓基质干细胞(BMSCs)体外构建组织工程化软骨的可行性。方法 抽取8周龄猪股骨骨髓,应用贴壁法分选单个核细胞,体外培养扩增后获得BMSCs,收集第2代细胞,以5×107/cm3的密度接种到聚羟基乙酸(PGA)制成的圆柱形三维支架材料上,7 d后联合应用TGF-β1、IGF-Ⅰ及地塞米松进行诱导和体外培养,未诱导组作为平行对照。4周和8周分别取材进行大体观察、组织学、组织化学及免疫组织化学检测。结果 体外诱导培养4周后,形成的细胞材料复合物表面光滑,质地柔韧,保持原大小形状;组织学显示有较为明显软骨陷窝,并分布有Ⅱ型胶原及聚合蛋白多糖(GAG);8周时外观灰白色,较坚硬,软骨陷窝更为明显,并连接成片,Ⅱ型胶原染色呈强阳性,有更多甲苯胺蓝异染的软骨特异性基质成分。对照组细胞材料复合物逐渐收缩,8周时直径仅约2 mm大小,组织学检测无软骨陷窝结构,Ⅱ型胶原免疫组化结果阴性。结论TGF-β1、IGF-Ⅰ及地塞米松可以体外诱导BMSCs在三维支架上形成组织工程化软骨。

眼轮匝肌蒂颞区皮瓣修复眼睑缺损

目的:探讨以眼轮匝肌为蒂的颞区皮瓣修复眼睑缺损的临床应用。方法:根据对耳颞部颞浅动脉系统与额部及眼眶区周围血管系统之间的交通吻合情况的解剖学研究结果,应用以眼轮匝肌为蒂的颞区皮瓣修复眼睑缺损12例。结果:12例眼睑缺损修复均取得了满意的效果,未出现并发症。结论:眼轮匝肌蒂颞区皮瓣修复眼睑缺损比局部或皮下蒂组织瓣易于移转,修复后外形满意且供区隐蔽,是修复眼睑缺损的良好选择。

数学课堂教学中运用多媒体信息技术的思考

在小学数学课堂中怎样运用多媒体信息技术，提高课堂教学效率，是我们必须思考的一个问题。能把数学课堂的表现形式更加形象化、多样化、视觉化，有利于充分揭示数学概念的形成与发展，数学思维的过程和实质，展示数学思维的形成过程，使数学课堂教学收到事半功倍的效果，真正成为农村学校教学创设了一个新的教与学的平台。

信息技术环境下的数学教学模式及其应用探究

在教学过程中．为了达到既定的教学目标，教师运用单一的教学模式是不能适应素质教育发展的需要的．学生其自主性、积极性、探究性、创造性受到了很大程度的抑制．甚至遭到扼杀，教师应运用多种教学模式，加以灵活合理运用，才能有利于学生创新精神和实践能力的培养。在数学教学活动中．应结合数学学科的特点去建构信息技术环境下的符合教学结构要求的新型教学模式，培养学生的综合素质。本文结合自己多年的数学教学实践，就信息技术环境下数学教学模式进行了一些有效探究。

软骨细胞上清液诱导BMSC向软骨细胞转化的实验研究

目的:体外定向诱导大鼠骨髓基质干细胞(BMSC)向软骨细胞表型转化,并对诱导进行鉴定。方法:从SD大鼠中分别分离出BMSC和软骨细胞进行体外培养。收集软骨细胞培养上清液,作为BMSC诱导液从第2代开始进行诱导分化。7d后取出标本,甲苯胺蓝染色和Masson染色检测软骨基质的分泌,免疫组织化学检测软骨特异性Ⅱ型胶原表达,RT-PCR检测Ⅱ型胶原和aggrecan的mRNA表达。结果:镜下见细胞形态由梭形向多边多角形转化。甲苯胺蓝染色和Mas-son染色阳性,Ⅱ型胶原免疫组化检测阳性,RT-PCR检测Ⅱ型胶原和aggrecan mRNA呈阳性表达。结论:软骨细胞上清液可诱导BMSC向软骨细胞转化。

应用GFP标记技术示踪裸鼠体内组织工程化骨的形成

目的 应用绿色荧光蛋白(GFP)标记技术,观察组织工程化骨体内形成过程中种子细胞的变化与转归。方法 用GFP重组逆转录病毒载体(GFP-RV)转染犬骨髓基质干细胞(BMSCs),将其接种于β-磷酸三钙(β-TCP),形成细胞一材料复合物,移植于裸鼠皮下。术后8周,HE染色观察组织结构,碱性磷酸酶(AKP)染色和骨钙素(OCN)免疫组化检测功能蛋白,激光共聚焦显微镜下对GFP进行示踪观察。结果 8周后,大体可见组织工程化新骨形成,组织学示新生骨小梁围绕材料孔隙生成,AKP染色和OCN免疫组化结果阳性,并可见新生组织内有呈绿色的GFP标记细胞,β-TCP部分降解。结论组织工程化骨组织学结构与松质骨小梁类似。新生组织表达GFP,证实组织工程化骨组织的形成来源于供体细胞。

易性癖诊治前后的几点思考

探讨易性病的病因、诊断和治疗方法以及由此引发的一些社会问题。近年来易性病患者的就诊数量不断增多,如何正确处理该类患者,不仅是医学问题,而且牵涉法律和伦理方面的很多问题。正确认识易性病,实施正确而完善的治疗措施,将对治疗病患,维持社会稳定具有重要的意义。

唇腭裂患儿常见的心理行为问题及对策

唇腭裂是最常见的口腔颌面部先天性发育畸形。手术修复早已在世界各个国家普遍展开,但患者在形态功能以及心理行为等各方面存在的问题不是单一的学科可以解决的。随着医学模式的转变,以及行为医学和发展心理学等学科的进展,患者在临床治疗工作中的心理和行为问题越来越受到重视。本文将对常见的心理行为问题及其相关对策进行探讨。

跨血管区反流耳颞部皮瓣应用解剖学

目的：明确耳颞部颞浅动脉系统与额部及眼眶区周围血管系统之间的交通吻合情况，为临床跨血管区反流耳颞部岛状皮瓣的应用提供解剖学基础。方法：15具福尔马林保存的成人尸体头面部进行肉眼解剖；5具新鲜成人头部标本制作血管铸型，观察颞浅动脉额支与眶上及滑车上动脉的相互交通吻合状况以及颞浅动脉分支与眼轮匝肌营养血管之间的吻合情况。结果：眶上及滑车上动脉和颞浅动脉额支走行基本恒定，且三者存在众多吻合，吻合支集中区域为上界距眶上缘（4．9±o．4）cm，下界为眶上缘水平，上界内侧距离前正中线（1．o±o．2）CITI，外侧距离前正中线（4．5±0．4）CITI；下界内侧距离前正中线（1．4：k0．2）cm，外侧（2．3±0．5）cm；颞浅动脉分支一颧眶动脉以3种分支类型与面动脉的终末支一内眦动脉在眼轮匝肌内形成稳定的交通吻合。结论：颞浅动脉额支与滑车上动脉存在吻合支集中区域；眶上动脉与颞浅动脉额支在眉外侧存在位置恒定吻合点。以眼轮匝肌为蒂的颞区皮瓣实际上是以颧眶动脉远端和眼睑动脉弓为蒂的跨区反流轴型皮瓣。

软骨细胞诱导骨髓基质细胞构建软骨的体内外比较

目的应用软骨细胞诱导骨髓基质细胞(Bone Marrow Stromal Cells,BMSCs)体外构建软骨,比较其体内植入前后软骨相关生物学特性的差异,探讨共培养构建软骨临床应用的可行性。方法体外分别培养扩增猪关节软骨细胞和BMSCs,两者按2∶8比例混合(软骨细胞∶BMSC),以5.0×107/ml的细胞终浓度接种于聚乳酸包埋的聚羟基乙酸支架,体外培养8周后部分标本植入裸鼠皮下,再经体内8周后取材。通过大体观察、糖胺聚糖含量(GAG)测定、生物力学测试、组织学,以及免疫组化等方法对体内植入前后标本的软骨相关生物学特性进行比较。结果体外培养8周时,所有标本均形成了软骨样组织,但质地较软,组织结构相对较为松散。体内植入8周后,共培养构建软骨能维持良好的软骨外观,而且GAG含量及弹性模量均明显高于体外标本(p<0.01),组织学及免疫组化显示体内标本的组织结构致密,基质及Ⅱ型胶原显色程度均明显强于体外标本。结论软骨细胞诱导BMSCs构建的软骨在体内皮下环境中能维持良好的软骨特性,而且植入体内后能继续向成熟软骨发育。

骨形态发生蛋白2/7异源二聚体的研究进展

骨形态发生蛋白2/7(BMP2/7)异源二聚体,较其同源二聚体具有更强的诱导成骨潜能,是目前组织工程骨研究的重要分支之一。本文介绍了异源二聚体BMP2/7诱导成骨的相关实验,比较其与同源二聚体生物活性的差异,并对相关机制进行综述。

老鹳草酶解法提取工艺优化

[目的]优化老鹳草酶解法提取工艺.[方法]以鞣质含量为指标,通过正交设计试验进行优选.[结果]确定最佳提取工艺条件为纤维素酶用量为10U/g,酶解温度为60℃,酶解时间为60min.[结论]优化的提取工艺简单、稳定且提取率高.