子宫内膜癌γ-synuclein表达和血清CA_(125)水平及与临床病理特征关系的研究

目的:研究乳腺癌基因1(γ-synuclein)表达和血清癌抗原125(CA125)水平及与子宫内膜癌临床病理特征的关系,探讨其在子宫内膜癌发生发展中的作用及对病情评估的意义。方法:采用免疫组化SP法检测50例子宫内膜样腺癌(子宫内膜癌组)、14例子宫内膜不典型增生(子宫内膜不典型增生组)、12例正常子宫内膜(对照组)组织中γ-synuclein的表达,用化学发光免疫分析法检测患者血清CA125的水平。结果:γ-synuclein阳性表达在子宫内膜癌组、子宫内膜不典型增生组及对照组间比较,差异有高度统计学意义(χ2=10.379,P<0.01),其中,γ-synuclein在子宫内膜癌组及子宫内膜不典型增生组中的阳性表达均显著高于对照组(P均<0.01)。在子宫内膜癌组γ-synuclein表达与临床分期、肌层浸润深度有关(P<0.05,P<0.01)。子宫内膜癌组血清CA125水平阳性率显著高于对照组及子宫内膜不典型增生组(χ2=7.040,P<0.01)。γ-sy-nuclein、血清CA125之间无相关性(r=0.201,P>0.05)。结论:γ-synuclein的表达与子宫内膜癌发生发展及侵袭有关,可能作为预后指标;血清CA125水平可能预示子宫内膜癌的恶性程度。

原发性输卵管癌46例分析

目的 :研究原发性输卵管癌的临床特点 ,提高临床医生对原发性输卵管癌的认识。方法 :分析 4 6例原发性输卵管癌的发病情况及临床病理特点。结果 :1980～ 1998年 18年间共收治原发性输卵管癌 2 1例 ,而 1999～ 2 0 0 2年 4年间共收治 2 5例 ,1999年后早中期病例较 1999年前明显增多。 4 6例中术前误诊 4 2例 ,误诊率达 91 3%。结论 :原发性输卵管癌发病率有逐渐增高的趋势 ,误诊率高。

RNA干涉宫颈癌细胞抑制HPV16 E6基因表达对FHIT基因表达的影响

目的:研究HPV16 E6基因被RNA干涉抑制后FHIT基因表达的变化,探讨两者在宫颈癌组织中的相关性。方法:合成针对HPV16 E6基因的特异性si RNA,脂质体介导转染宫颈癌CaSki细胞,RT-PCR测定转染前后HPV16E6、FHIT基因mRNA表达;Western blot和流式细胞仪检测转染前后HPV16E6、FHIT蛋白表达情况。结果:将HPV16 E6 si RNA转染CaSki细胞后48h,HPV16E6mRNA表达水平较转染前降低了80.3%,P<0.01;FHIT mRNA的表达水平较转染前升高了41.7%,P<0.01。转染前后HPV16E6蛋白表达水平分别为26.7±3.3和8.2±1.1,t=14.224,P=0.005;FHIT蛋白表达水平分别为73.5±5.6和109.9±5.1,t=22.018,P=0.002。结论:抑制HPV16 E6基因的表达可使宫颈癌组织中FHIT基因的表达增加。

宫颈癌及其癌前病变组织中HPV16 E6、HPV16 E7蛋白的表达及其意义

目的探讨宫颈癌及其癌前病变组织中HPV16 E6、E7蛋白的表达及其意义.方法采用免疫组化SP法对15例正常宫颈、25例宫颈上皮内瘤变(CIN)以及61例浸润性宫颈癌组织进行了HPV16 E6、HPV16 E7蛋白表达的检测.结果在正常宫颈、CINⅠ～Ⅱ、CINⅢ及浸润性宫颈癌中,HPV16 E6蛋白的阳性表达率分别为0(0/15)、7.14%(1/14)、36.36%(4/11)、59.02%(36/61);CINⅢ和浸润性宫颈癌中HPV16 E6蛋白阳性表达率明显高于正常宫颈组织和CIN Ⅰ～Ⅱ(P＜0.05);在高、中、低分化宫颈癌中,HPV16E6蛋白阳性表达率分别为45.45%(5/11)、77.78%(14/18)、53.13%(17/32);HPV16E6蛋白在不同分化程度的宫颈癌组织中的阳性表达率有显著性差异(P＜0.05),但HPV16E6蛋白表达与宫颈癌组织分化程度无明显相关性(γs=0.123),HPV16 E6蛋白阳性表达率与宫颈癌临床分期和淋巴结转移无关(P＞0.05).HPV16 E7蛋白在正常宫颈上皮、CINⅠ～Ⅱ、CINⅢ及浸润性宫颈癌组织中的阳性表达率分别为20.00%(3/15)、42.86%(6/14)、63.64%(7/11)、57.38%(35/61),HPV16E7蛋白在不同宫颈组织中的阳性表达率无明显差异(P=0.05);HPV16 E7蛋白的表达与宫颈癌临床分期、淋巴结转移和组织分化均无关(P＞0.05).结论HPV16 E6蛋白的检测有可能作为宫颈癌前病变转归的指标.

FHIT蛋白和p21蛋白在外阴尖锐湿疣、外阴上皮内瘤变中的表达

目的：探讨FHIT和p21蛋白在外阴尖锐湿疣（Vulvar condyloma acuminatum,VCA）、外阴上皮内瘤变（Vulvar intraepi thelial neoplasia,VIN）及正常外阴组织中的表达情况。方法：采用免疫组化（SP）法检测51例VCA,39例VIN及20例正常外阴组织中的脆性组氨酸三联体基因（Fagile histidine triad,FHIT）,p21的表达。结果：FHIT在VCA组和VINI-Ⅱ,VINⅢ中的阳性率明显低于正常组（P=0.0001）;FHIT在VCA组和VINⅢ组阳性率无统计学意义（P=0.592）;p21在正常外阴、VIN和VCA组中阳性率差异有统计学意义（P=0.0001）;p21在正常外阴、VIN阳性率无统计学意义（P=0.793）,而在VIN和VCA中差异有统计学意义（P=0.0001）。结论：（1）FHIT和p21基因异常表达与VCA和VIN的发生发展有关。（2）FHIT基因异常是外阴癌变过程中的早期事件。

两株宫颈癌细胞株中HPV_(16)E_6/E_7蛋白的表达

目的 :探索及检测宫颈癌细胞株 Caski、 Si Ha细胞内 HPV1 6 (16型人乳头瘤病毒 ) E6 /E7蛋白含量 ,筛选宫颈癌基因治疗研究的合适细胞株。方法 :用间接免疫荧光染色及流式细胞术检测 Caski、 Si Ha宫颈癌细胞株中 HPV1 6 E6 、 HPV1 6E7蛋白含量 (荧光强度值 )。结果 :Caski细胞中 HPV1 6 E6 、 HPV1 6 E7蛋白含量分别为 :2 0 .72± 6 .35、 5 6 .80± 4 .30 ;Si Ha细胞中 HPV1 6 E6 、E7蛋白含量分别为 :1.77± 0 .75、 4 9.2 7± 8.0 6。 2细胞株间 HPV1 6 E7蛋白表达量无明显差异 (P>0 .0 5 )。结论 :Caski、Si Ha宫颈癌细胞株中 HPV1 6 E6 、E7蛋白的表达是不平行的。Caski细胞适用于以 HPV1 6 E6 ,HPV1 6 E7蛋白为观察对象的研究 ,Si Ha细胞可用于 HPV1 6 E7蛋白的研究 ,但不适宜用于以 HPV1 6 E6 蛋白为观察对象的研究。

三联脆组基因在外阴癌和外阴尖锐湿疣中的表达

目的:探讨三联脆组(FHIT)基因在外阴癌和外阴尖锐湿疣中的表达及其意义。方法:应用免疫组化SP法检测30例外阴鳞癌、30例外阴尖锐湿疠、15例正常外阴皮肤组织中FHIT蛋白的表达情况。结果:FHIT蛋白在正常外阴上皮、外阴尖锐湿疣、外阴鳞癌中的阳性表达率分别为100%。(15/15)、53.33%(16/30)和20%(6/30),外阴尖锐湿疣和外阴鳞癌中FHIT蛋白的阳性表达率较正常外阴上皮明显降低(P<0.05),外阴鳞癌中FHIT蛋白的低表达与外阴癌的组织分化和临床分期均无关系(P>0.05)。结论:1.FHIT基因异常表达与外阴鳞癌的发生发展有关。2.外阴尖锐湿疣可能是外阴鳞癌的前期病变。

外阴鳞癌组织中HPV检测及FHIT基因杂合性缺失、微卫星不稳定性观察

目的观察外阴鳞癌(VSCC)组织中HPV感染情况及脆性组氨酸三联体(FHIT)基因的杂合性缺失(LOH)、微卫星不稳定性(MSI),并探讨其意义。方法选取VSCC组织24例、外阴尖锐湿疣(VCA)42例、正常外阴组织20例,用PCR法检测上述组织中的HPV6、11、16、18、31、33亚型,用PCR-单链构像多态性分析(PCR-SSCP)法检测FHIT基因D3S1300位点的LOH和MSI。结果在正常外阴、VCA、VSCC组织中低危型HPV(HPV6/11)阳性分别为2、38、21例,高危型HPV(HPV16/18/31/33)阳性分别为0、13、10例;VCA、VSCC组织与正常外阴组织比较,P均<0.05。在正常外阴、VCA、VSCC组织中,FHIT基因D3S1300位点上LOH、MSI阳性分别为0、9、13例,VSCC与VCA、正常外阴组织比较,P均<0.05。VSCC组织中HR-HPV感染与FHIT基因D3S1300位点LOH/MSI相关(r=0.438,P<0.05)。结论 VSCC组织中存在较高的低危型、高危型HPV复合感染及FHIT基因LOH和(或)MSI;二者在VSCC的发生发展中发挥重要作用。

宫颈癌及其癌前病变组织中HPV16E6蛋白的表达及意义

目的:探讨宫颈癌及其癌前病变组织中16型人乳头瘤病毒(HPV16)E6蛋白的表达及其意义。方法:用免疫组化SP法对15例正常宫颈组织、14例低级别宫颈上皮内瘤变(LCIN)、11例高级别宫颈上皮内瘤变(HCIN)以及61例浸润性宫颈癌标本进行了HPV16E6蛋白表达的检测。结果:HPV16E6蛋白在正常宫颈上皮、CIN～、CIN及浸润性宫颈鳞癌中的阳性表达率分别为0(0/15)、7.14%(1/14)、36.36%(4/11)、59.02%(36/61)。高级别CIN和浸润性宫颈癌中HPV16E6蛋白阳性率明显高于正常宫颈组织和低级别CIN(P<0.05),HPV16E6蛋白表达与宫颈癌临床分期、组织分化和淋巴结转移无关(P>0.05)。结论:HPV16E6蛋白的检测可能可作为宫颈癌前病变转归的指标。

三联脆组基因在外阴尖锐湿疣中的表达

目的:探讨三联脆组(FHIT)基因在外阴尖锐湿疣中的表达。方法:应用免疫组化SP法检测30例外阴尖锐湿疣、15例正常外阴皮肤组织中FHIT蛋白的表达情况。结果:外阴尖锐湿疣中FHIT蛋白的阳性表达率[53.33%(16/30)]较正常外阴上皮中FHIT蛋白的阳性表达率[100%(15/15)]明显降低(P<0.05)。结论:FHIT异常表达与外阴尖锐湿疣的发生发展有关。

子宫内膜癌中人类乳腺癌易感基因1微卫星不稳定性及其与临床病理的关系

目的:研究人类乳腺癌易感基因1(BRCA1)在子宫内膜癌中微卫星不稳定性(MSI)发生情况及其与临床病理特征的关系。方法:采用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)法和DNA序列分析法,分别对77例子宫内膜组织BRCA1基因2个位点进行MSI测定。结果:子宫内膜癌、子宫内膜不典型增生、正常子宫内膜组MSI阳性率分别为34.69%(17/49)、10%(2/20)、7.14%(2/28),差异有统计学意义(χ2=11.208,P=0.004)。BRCA1 MSI阳性率与病理分级和临床分期有关,而与肌层浸润深度、淋巴结转移、组织病理类型无关。BRCA1 MSI与BRCA1蛋白表达水平呈负相关(P=0.000)。结论:BRCA1基因MSI可能是子宫内膜癌的发生发展以及BRCA1蛋白表达减少的原因之一,与子宫内膜癌病理分级和临床分期有关。

RNA干涉抑制宫颈癌HPV16E6基因的研究

目的采用RNA干涉(RNAI)技术干扰宫颈癌HPV16E6基因转录,通过体外和体内实验了解其特异性抑制HPV16E6基因的效率。方法设计合成针对HPV16E6的小干扰RNA(SIRNA),借脂质体转染宫颈癌CASKI细胞,通过测定转染后不同时间点的细胞凋亡率、HPV16E6MRNA及蛋白表达变化了解基因抑制的效率。体内实验中建立子宫颈癌荷瘤裸鼠模型,将E6SIRNA直接注入瘤体,观察肿瘤体积的变化,肿瘤切片HPV16E6免疫组化染色,观察肿瘤坏死和细胞的凋亡。结果HPV16E6SIRNA转染细胞后24H、48H、5D和9D时凋亡率分别为7.7%、11.8%、37.4%和12.6%。RT-PCR显示转染后24H、48H、5D和9D HPV16E6MRNA量减少了77%、83%、59%和41%。WESTERN BLOT显示转染后的HPV16E6蛋白表达在24H、48H、5D明显减少,9D时有所恢复;流式细胞仪HPV16E6蛋白定量测定结果显示,转染后24H、48H、5D和9D蛋白表达抑制率分别为79.7%、80.4%、71.3%和57.4%。体内实验瘤内注射HPV16E6SIRNA明显抑制肿瘤的生长,HPV16E6蛋白表达明显受抑,肿瘤组织坏死和细胞凋亡增加,重复给药较单次给药效果更好。结论体内和体外实验均表明RNA干涉HPV16E6基因的效果具有特异性和高效性。

腹腔镜手术与机体免疫功能研究进展

腹腔镜手术因其具有住院时间短,恢复快,疼痛程度轻的特点,已迅速在临床各科获得了广泛的应用,随腹腔镜技术的发展,对腹腔镜术后机体免疫功能的变化进行了大量研究。复习有关文献,对近年腹腔镜手术与机体免疫功能领域中细胞、体液免疫,气腹影响等的研究进展作一综述,探讨腹腔镜手术对机体的影响。

Syndecan-1和E-cadherin在子宫内膜癌组织中的表达及其意义

目的:探讨Syndecan-1和E-cadherin两种蛋白在子宫内膜癌中的表达及意义。方法:应用免疫组织化学二步法染色技术,检测51例子宫内膜癌,28例不典型增生及20例正常子宫内膜组织中Syndecan-1和E-cadherin的表达。结果:Syndecan-1和E-cadherin在子宫内膜癌、不典型增生内膜和正常子宫内膜组织的强阳性表达率分别为5.00%、25.00%、56.86%和80.00%、64.29%、37.24%,两者在3组子宫内膜组织的强阳性表达率比较差异有统计学意义(P<0.01)。Syndecan-1的高表达与子宫内膜癌的组织学分级、有无肌层浸润和临床分期有关(P<0.05)。E-cadherin的低表达与子宫内膜癌的有无肌层浸润、临床分期和有无淋巴结转移有关(P<0.05)。子宫内膜癌中Syndecan-1与E-cadherin的表达呈负相关(rs=-0.196,P<0.05)。结论:Syndecan-1的表达上调和E-cadherin的表达下调可能在子宫内膜癌的侵袭转移中起着重要作用,联合检测Syn-decan-1与E-cadherin可帮助评估子宫内膜癌的预后。

沙利度胺联合达那唑对子宫内膜异位症裸鼠异位组织血管生成及血管内皮生长因子的影响

目的探讨沙利度胺联合达那唑对子宫内膜异位症裸鼠异位组织血管生成及血管内皮生长因子(VEGF)的影响。方法选择40只成功建立子宫内膜异位症模型的裸鼠,随机分为模型对照、沙利度胺组、达那唑组及联合用药组,每组10只,分别给予生理盐水、沙利度胺30 mg/(kg·d)、达那唑1.0 mg/(kg·d)、沙利度胺30 mg/(kg·d)联合达那唑1.0 mg/(kg·d)腹腔注射,给药4周后处死,通过Ⅷ因子标记异位子宫内膜血管,检测异位内膜组织中微血管密度(MVD),链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶法测定异位内膜VEGF蛋白的表达情况。结果对照组、达那唑组、沙利度胺组和联合用药组的MVD依次降低(P<0.05),分别为(21.3±1.5)个、(16±3.4)个、(12.2±1.1)个和(6.8±1.1)个。对照组、达那唑组、沙利度胺组和联合用药组VEGF蛋白的表达水平也依次降低(P<0.05)。结论沙利度胺和达那唑可抑制裸鼠异位内膜的MVD以及VEGF的表达,从而抑制异位内膜组织的血管生成,两者合用时作用更明显。

FHIT蛋白和p21蛋白在外阴癌和外阴尖锐湿疣中表达的研究

目的:探讨脆性组氨酸三联体基因(FHIT)和p21蛋白在外阴癌、外阴尖锐湿疣及正常外阴组织中的表达及其意义。方法:采用免疫组化(SP)法检测49例外阴鳞癌,51例外阴尖锐湿疣及20例正常外阴组织中的FHIT、p21的表达。结果:FHIT蛋白、p21蛋白在外阴鳞癌组织和外阴尖锐湿疣组织中表达的阳性率明显低于正常组织(P<0.0167);FHIT蛋白、p21蛋白在外阴鳞癌组织和外阴尖锐湿疣组织中表达的阳性率差异无统计学意义(P>0.0167)。外阴鳞癌中FHIT和p21蛋白的异常表达与外阴鳞癌的组织分化及有无淋巴结转移均无关(P>0.05)。FHIT蛋白与p21蛋白的表达没有相关性(P>0.05)。结论:①FHIT基因和p21基因异常表达与外阴鳞癌和外阴尖锐湿疣的发生发展有关,部分外阴尖锐湿疣有可能是外阴癌的前期病变;②FHIT基因在外阴癌发生发展中所起的作用可能与p21基因没有关系。