老虎感染猫传染性鼻-结膜炎病毒的研究

用猫肾传代细胞从发病虎的病料中分到了一株杯状病毒粒子样病毒。该病毒大小为 35～ 39nm、无囊膜、在胞浆中病毒前体呈晶格状排列 ,抗乙醚、不能被 5 IUDR所抑制 ,能被来源于标准疫苗的猫传染性鼻 结膜炎病毒 (或杯状病毒Felinecalicivirus ,FCV)抗血清所中和 ,人工感染猫出现典型的FCV感染症状。RT PCR能扩增出与设计值相符的电泳带 ,PCR产物直接测序结果与Genebank发表的FCV序列比较 ,具有较高的同源性。系统鉴定证明所分离的这株病毒为FCV强毒株 ,从老虎中分到FCV在世界上尚属首次报道。

犬腺病毒纤突蛋白基因功能区的比较分析

根据GenBank中已发表的CAV纤突基因序列 ,设计合成 4对 8条引物 ,用已建立的PCR方法 ,对犬 2型腺病毒沈阳分离株第 5代强毒经蚀斑克隆驯化的第 6 0代毒弱毒 (SY_V6 0 )和犬 1型腺病毒长春犬株 (CCC_V6 )的纤突基因进行了扩增 ,PCR产物经纯化后进行基因序列测定 ,测定结果经拼接后得到一个由 16 32和 16 2 9个核苷酸组成的纤突蛋白全基因序列 ,分别编码 5 43和 5 42个氨基酸。犬 2型腺病毒 (SY_V6 0 )与犬 1型腺病毒 (CCC_V6 )的纤突基因的同源性达到 80 .48%。犬 2型腺病毒(SY_V6 0 )与犬 1型腺病毒 (CCC_V6 )纤突基因的同源性达到 80 .48% ;根据犬的腺病毒与人 2型腺病毒纤突蛋白的序列同源性比较结果 ,推测了犬腺病毒纤突蛋白的尾 (tail)、轴 (shaft,)、结 (knob)三个功能区的氨基酸序列 ,2个型之间的尾区同源性为 76 .9% ;轴区同源性为 78.5 9% ;其结区同源性为 83.2 4% ,而同型毒株之间结和尾区同源性较高 。

鸭冠状病毒肠炎免疫试验

人工感染鸭冠状病毒的鸭在痊愈后的一段时间内能抵抗强毒再次感染，对鸭场调查表明：得病后痊愈的鸭很少有再次发病的。用鸭胚上传代培养的第５代病毒，经灭活加佐剂制成灭活苗对鸭进行免疫试验，大部分鸭有一定的免疫效果；对我们已传代至７５代的鸭胚传代毒，经口服、肌注两种途径免疫鸭，有较好的免疫效果；用康复鸭的血清对２０日龄的鸭实施被动免疫，未能保护鸭抵抗强毒的攻击；康复鸭产蛋孵出的雏鸭缺乏抵抗强毒攻击的母源抗体。

用聚合酶链反应检测犬传染性肝炎的研究

应用聚合酶链反应 (PCR)对人工感染犬传染性肝炎病毒 (ICHV)的犬进行定期尿检 ,并以血凝和血凝抑制试验及病毒分离进行比较。结果证明 ,用PCR方法可以快速检出排毒的犬 。

犬Ⅱ型腺病毒的分离鉴定

在做犬腺病毒分子流行病学调查的过程中，从送检的犬粪便中分离出多株犬腺病毒，并对其中１ 株进行了系统鉴定。经形态学、理化学、血清学交叉中和试验、动物感染试验与分子生物学鉴定，证明为１ 株犬传染性喉气管炎病毒的强毒，即犬Ⅱ型腺病毒。

ELISA双抗体夹心法诊断犬冠状病毒肠炎

将电镜检查犬冠状病毒阳性的病犬粪便，经ＰＥＧ沉淀、蔗糖线性梯度超速离心，用提纯的抗原免疫豚鼠制备抗血清，经饱和硫酸铵粗提、ＱＡＥ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ－Ａ５０层析柱纯化提取ＩｇＧ。将提纯的ＩｇＧ与辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记，建立了诊断犬冠状病毒的ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法。对收集的４５份粪便样品进行检测，并以电镜检查作为旁证，证明该法具有特异、敏感的特点，可在４小时内报告结果。

某犬场犬型钩端螺旋体的分离与鉴定

目的:对疑为钩端螺旋体病的军犬病科进行致病性钩端螺旋体分离和鉴定,为钩端螺旋体病的诊断提供理论依据。方法:对病犬进行解剖观察,用犬尿液接种柯索夫培养基进行钩体的分离,然后对分离到的钩体进行菌型鉴定并用钩体外膜蛋白基因引物进行PCR检测。结果:从尿液中分离到1株钩体,经鉴定为犬群犬型,PCR扩增结果为阳性。结论:从病犬中分离到1株犬型致病钩体。

应用ELISA双抗体夹心法诊断鸭冠状病毒性肠炎的研究

将电镜检查鸭冠状病毒阳性的病鸭肠管及粪便,经PEG沉淀及蔗糖线性梯度超速离心提纯抗原。用其免疫豚鼠制备抗血清,经饱和硫酸铵粗提,再经QAE-ScphadcxA50离子柱纯化提取IgG。纯化IgG与辣根过氧化物酶(HRP)用过碘酸钠法进行标记,制备酶标抗体,建立ELISA了双抗体夹心法,以诊断鸭冠状病毒性肠炎抗原,对发病鸭及回归试验、人工感染试验中收集的55份粪便样品,用本试验检测,并用电镜检查作为对照,证明该法具有特异、敏感、快速、简便之优点,解决了仅靠电镜检查的局限性。

犬腺病毒SY-45株不同大小蚀斑特性研究

应用蚀斑方法将 SY- 4 5毒株经过 3次蚀斑纯化直到蚀斑大小相对稳定。从不同大小的蚀斑中挑选出三种蚀斑 ,大斑直径约 3mm (简称 LP)、中斑约 2 mm(简称 MP)、小斑约 1 mm(简称 SP)。分别在 MDCK细胞上增殖并进行了三种不同大小斑毒对犬的毒力、免疫原性和在 MDCK细胞上产毒量比较 ,以筛选最佳的疫苗株 ,试验结果表明用不同大小蚀斑病毒大剂量人工感染易感犬后 ,所有的试验犬临床症状和病理解剖学和病理组织学表现均正常 ;对挑选的 4窝 CAV HI抗体效价小于等于 1 :2的健康幼犬进行免疫试验 ,测定血清的中和抗体效价和血凝抑制抗体效价 ,结果表明 :大斑毒的免疫原性要稍高于中斑毒 ,而明显高于小斑毒 ;不同大小蚀斑毒在 MDCK细胞上产毒量差异很大 ,大斑毒可达 1 0 7TCID50 / m L、小斑毒达 1 0 6 TCID50 /ml、小斑毒达 1 0 4 .5TCID50 / m L。综合所有试验结果表明 :大斑毒株具有产毒量高、安全性好、免疫原性强的优点 ,是较为理想的疫苗株。

鸭冠状病毒性肠炎的免疫电镜诊断

对经聚乙二醇(PEG)粗提后蔗糖密度梯度离心提纯的粪便中的鸭冠状病毒(D CV),用试验感染鸭高免血清进行反应,然后对反应产生的抗原—抗体复合物以磷钨酸负染,用电镜观察。此改进的免疫电镜技术,检测方法简单、快速、特异性强,是目前诊断D CV肠炎的有效方法。

犬传染性肝炎病毒的血凝抑制抗体和中和抗体的关系

犬传染性肝炎病毒（Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ ｃａｎｉｎｅ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ ｖｉｒｕｓ，ＩＣＨＶ）能诱导动物机体产生中和（Ｓｅｒｕｍ ｎｅｕｔｒｏｌｉｚａｔｉｏｎ，ＳＮ）抗体与血凝抑制（Ｈｅｍａｇｇｌｕｔｉｎａｔｉｏｎ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ，ＨＩ）抗体，本研究对８份ＩＣＨＶ免疫的犬血清同时进行了其ＳＮ抗体和ＨＩ抗体的检测，结果表明ＳＮ抗体和ＨＩ抗体具有正比线性关系ＳＮ≈８×ＨＩ，并绘制了标准曲线。由于血凝和ＨＩ试验不需应用活的试验宿主系统，而且可在３ ｈ内获得结果，操作经济简便，因此可通过测定ＨＩ抗体的效价来推算出ＳＮ抗体效价。

犬2型腺病毒毒株纤突蛋白基因的比较分析

根据 Gen Bank中犬腺病毒 (canine adenovirus,CAV)纤突基因序列 ,设计合成 2对引物。用 PCR方法 ,对犬 2型腺病毒沈阳分离株 (CAV- 2 SY株 )第 5代强毒 (SY- V5 )、经蚀斑克隆驯化的第 6 0代毒弱毒 (SY- V6 0 )、SY- V6 0在易感犬体上传 5代的回收毒 (SY- CP5 )、美国疫苗毒 (U S- V2 0 )等 4个毒株的纤突基因进行了扩增 ,PCR产物经纯化后进行基因序列测定 ,测序结果经拼接后得到了 1个由 16 2 9个核苷酸组成的纤突蛋白全基因序列 ,编码 5 43个氨基酸。犬2型腺病毒与 Gen Bank中的标准的 CAV- 2强毒株 (Toronto A2 6 / 6 1)纤突蛋白基因序列的比较结果表明 :CAV- 2 SY株强毒株与 Toronto A2 6 / 6 1株相同 ;SY- V6 0株与 SY- CP5相同 ;与驯化前的 SY- V5相比 ,在 1134位发生碱基颠换 ,编码的氨基酸由原来的天冬酰氨 (N)变为赖氨酸 (K) ,并导致 N- X- S/ T潜在糖基化位点发生改变 ,US- V2 0该部位也发生同样的突变 ,本试验测定和比较的 CAV- 2强毒株有 5个潜在的 N-联糖基化位点 ,弱毒株仅有 4个位点 ;U S- V2 0与 Toronto A2 6 / 6 1差异较大 ,有 11个碱基发生变化 ,导致 8个氨基酸的变异。

不同型犬腺病毒纤突蛋白基因序列的比较分析

根据已发表的ＣＡＶ纤突基因序列，用ＰＣＲ方法，对４个ＣＡＶ－２毒 株和４个ＣＡＶ－１毒株的纤突基因进行了扩增和测序，测定的核苷酸序列经推导得到分别编 码５４３和５４２个氨基酸的ＣＡＶ纤突蛋白全序列。测定的ＣＡＶ－２比较表明：我国流行的ＣＡＶ－２ ＳＹ 强毒株与国外标准强毒株Ｔｏｒｏｎｔｏ Ａ２６／６１株相同，其驯化致弱的毒株与驯化前相比在１１３４位 发生碱基颠换。测定的ＣＡＶ－１比较表明：我国流行的ＣＡＶ－１株与标准强毒ＲＩ２６１株差异相对 较大，而国内ＣＡＶ－１毒株互相之间相对差别较小。ＣＡＶ－２与ＣＡＶ－１纤突基因的同源性为８０．４８％。

犬2型腺病毒SY株的致弱驯化

作者对分离和系统鉴定的一株犬传染性喉气管炎病毒 (犬 2型腺病毒 ) SY(沈阳 )株 ,用犬肾传代细胞 MDCK进行了致弱驯化 ,每驯化 1 5代做一次初步的犬的安全性试验 ,用大剂量不同代次病毒对易感犬进行人工感染试验 ,每天观察犬的临床症状及白细胞总数 ,并于接毒后的第 5 d安乐死 ,作病理解剖学和病理组织学检查。易感犬的感染试验结果表明 ,SY株在犬肾细胞上传 1 5代时对犬的致病力已降低 ,3 0代时对犬已不引起发烧、精神沉郁和厌食等症状 ,仅引起轻度的鼻炎、中度的咽炎 ,剖检肺表现正常 ,仅见支气管淋巴结肿大 ,45代时无临床症状 ,剖检除扁桃体肿大外没有见到其它症状 ,6 0代毒已完全失去致病力 ,未见任何临床症状及病理变化。

蛇毒主要成分研究进展

世界上有蛇类3000余种,其中毒蛇约650种,对人体有致命危险的毒蛇有300种.我国已发现有蛇210（有书记载有220）种,隶属9个科53属,目前已知毒蛇100（有书记载有60）多种（包括海蛇科剧毒蛇及游蛇蛇科的后毒牙类毒蛇数十种冤.对人类危害较大的毒蛇有20种,常见的有9种陆生毒蛇、两种海蛇.眼镜蛇中毒致死率为25%,蝰科为2%,响尾蛇科为2.3%.

犬疱疹病毒病的诊疗

犬疱疹病毒病的诊疗范泉水齐桂凤王度林李江１）李国荣唐安建陆明昌兰建强路年生（成都军区后勤部军事医学研究所６５０２２４）犬疱疹病毒是引起幼龄犬的一种败血性传染病，成年犬的感染仅呈现自限性生殖系统局部病变，并很快趋向自愈，但对于２周龄幼犬却常引起急性死亡...

血凝和血凝抑制试验诊断犬细小病毒性肠炎

对犬细小病毒性肠炎的诊断，国外有不少报道和评价［１～９］，常用的血凝（ＨＡ）和血凝抑制（ＨＩ）试验较为简便。一般说ＨＡ用于检测抗原，ＨＩ检测抗体。缺点是粪便样品的ＨＡ阳性检出率低，血清样品的ＨＩ阳性标准不统一，难以用于临床诊断［１０～１３］。自１９８...

云南黑熊腺病毒脑炎病原的分离与鉴定

用犬肾传代细胞(MDCK)从死亡的云南幼黑熊脏器中分离到一株腺病毒,经细胞感染和动物感染试验、红细胞凝集试验、电镜形态观察、血清学交叉中和试验及理化特性鉴定,确定该毒株为犬I型腺病毒,又叫传染性犬肝炎病毒,暂定名为BA—1株。

犬疱疹病毒灭活苗的免疫试验

用分离的犬疱疹病毒ＭＤＣＫ细胞培养物，加福尔马林灭活后制成灭活苗，对怀孕３０天的母犬以６天的间隔作４次免疫，所生仔犬可获保护。用分离的强毒对怀孕５０天的母犬实验感染，其仔犬也受到保护。当母犬血清中抗犬疱疹病毒的中和抗体２×以上时，其所生仔犬可通过被动免疫获得对犬疱疹病毒的抵抗力。给生后１～２日龄的仔犬注射２～６ｍｌ免疫血清，可使仔犬获得免疫。

犬疱疹病毒的分离鉴定

犬疱疹病毒引起１周龄以下仔犬严重和高死亡的疾病，用犬肾传代细胞ＭＤＣＫ，从濒死发病犬的肾脏器官分离获得一株疱疹病毒，经鉴定为犬疱疹病毒。培养液观察病毒大小为１４０ｎｍ有囊膜病毒，核酸型为ＤＮＡ，对乙醚敏感，对热抵抗力弱，５６℃经４分钟灭活，ｐＨ４．５时３０分钟失去感染力，用分离毒接种７日龄的幼犬引起典型的疱疹病毒感染症状，并从人工感染试验的幼犬回收到病毒。