肢体恶性骨肿瘤的微波高温原位灭活保肢术

[目的]探讨肢体恶性骨肿瘤的微波高温原位灭活保肢术的临床效果。[方法]将荷瘤骨段与正常组织分离后原位热灭活,经过灭活骨段的加固措施,使其能够承重,且保留了临近的自然关节。[结果]经本术式治疗的309例肢体肿瘤结果:3年以上存活率为60.2%,对多数病人而言,保留了功能甚为满意的肢体,近期并发症及远期并发症均较文献报告低。[结论]原位灭活保肢术是一种可靠、有效和简化的术式,肿瘤学和功能学效果均令人鼓舞。

骨盆恶性或高度侵袭性骨肿瘤微波高温灭活保肢术

[目的]有相当比例的原发或继发恶性骨肿瘤发生在骨盆部位,目前常用的外科治疗方法是荷瘤盆骨的切除及恢复骨盆连续性的重建。该手术创伤大,局部复发率高,术后功能差,是骨科医生公认的极具挑战性的难题。[方法]本文介绍一种全新的外科术式:将荷瘤盆骨从正常组织中分离,将微波天线均匀地插入瘤块内,输入电磁能量,通过热凝固达到杀灭瘤细胞的目的,勿需特殊的重建措施(不包括植骨等加固措施)。[结果]从1994年5月到2005年12月,152例骨盆恶性肿瘤患者接受了上述疗法,IB期病人中48例得到良好的局部和全身控制,61例IIB期患者,19例死于肿瘤播散,42例经过术后3～11年的观察,未发生远隔转移或局部复发,24例骨盆转移癌患者,11例于术后6个月～3年内死亡,13例病人在观察期1～7年内尚存活,无肿瘤存在迹象。在存活病人中,多数获得美容学和功能学上均可接受的肢体。[结论]该方法被证明为一种行之有效的途径,极大地简化了手术,改进了肿瘤学预后,明显改善了患肢的功能。

插入式微波天线阵列诱导高温原位灭活治疗肢体恶性或侵袭性骨肿瘤

评价插入式微波天线阵列诱导高温原位灭活治疗肢体恶性或侵袭性骨肿瘤保肢手术的临床应用．方法：应用插入式微波天线阵列诱导高温原位灭活治疗肢体恶性或侵袭性骨肿瘤19o例．从手术技术、肿瘤学、关节功能、并发症等方面全面综合评价此方法的临床应用效果．结果：恶性骨肿瘤134例，术后平均随访47mo，因远隔脏器转移死亡者32例，另有3例虽有肺部转移，但经转移病灶切除后现仍无瘤存活；存活率为74．2％；IO2例存活者中肢体关节功能优者72例，良者14例．骨巨细胞瘤56例，术后平均随访49mo，l例死于肺转移；3例局部复发，经行瘤段截除大段异体骨移植后治愈；35例关节功能属优，21例为良．结论：插入式微波天线阵列诱导高温原位灭活治疗骨肿瘤技术是一种创新的、有效安全的、临床效果显著的、治疗肢体恶性或侵袭性骨肿瘤的新手段，值得继续应用、改进和评价这一治疗体系．

骨盆环区域骨肿瘤的外科治疗

评价半骨盆截除术、内半骨盆切除体外灭活再植或单纯旷置术、插入式微波天线阵列诱导高温原位灭活水治疗骨盆部骨肿瘤；部分切除术及前后联合入路局部刮除并辅助以局部单纯放疗或（和）置管持续灌注化疗术治疗舱骨肿瘤的效果．探讨骨盆环区域骨肿瘤的各种外科治疗方法的优缺点，以便更有效地治疗该部位肿瘤．方法：7a中外科治疗骨盆环区域各类良、恶性骨肿瘤146例，其中应用半骨盆截除术治疗晚期骨盆骨肿瘤44例；内半骨盆切除体外灭活再植或单纯旷置术治疗骨盆部骨肿瘤Ic例；插入式微波天线阵列诱导高温原位灭活术治疗骨盆部骨肿瘤42例；部分切除术及前后联合入路局部刮除术后局部单纯放疗或（和）置管持续灌注化疗术治疗各类船骨肿瘤SO例．平均随访3a以上，从肿瘤学、肢体关节功能学、并发症等方面综合评价上述各种外科治疗方法的代、缺点．结果：44例半骨盆截除患者仅存活16例．仅有少数年轻患者术后可佩带假肢行走，但步态极差；内半骨盆截除后体外灭活再植或旷置水1o例患者中，复发1例；死亡2侧；感染3例；肢体关节功能优良率为4o％．应用插入式微波天线阵列诱导高温原位灭活治疗骨盆骨肿瘤42例；8例局部复发，其中5例死亡．其余34例中肢体关节功能25例为优。9例尚可．2例感染，1例坐骨神经热损伤．

矫形器在骨科临床康复领域中的应用进展

矫形器作为一种以减轻骨骼肌肉系统的功能障碍为目的的体外支撑装置,广泛应用于矫正或治疗各种肢体疾患。现重点介绍矫形器的功能、结构,应用的重要性及各种骨科常用的矫形器。

骨骼肌肉系统肿瘤的治疗原则和相关研究现状

与常见的癌症（如肺癌、胃癌、肝癌等）相比，肉瘤的发生率远为低下．一个骨科医生，如果不是工作在设有骨肿瘤专科的医院中，很难积累起足够的处理恶性骨肿瘤的经验．作者简要地讨论了治疗良恶性骨肿瘤的一些重要的原则，包括保肢手术方法、辅助疗法、活检及转诊缺席的建立等．

原发性骶骨肿瘤的外科治疗

１９８５年至今，作者对２４例原发性骶骨肿瘤实施了手术治疗，其中骶骨大部切除７例；扩大范围半骨盆切除３例；肿瘤刮切术１４例。随访１～６年，６例恶性肿瘤死于远隔部位转移，１例脊索瘤软组织复发．本文介绍了骶骨肿瘤的诊断、手术方法及预后等。特别介绍了腹－腹股沟切口及前后联合入路在骶骨手术中的用途。作者认为：腹－腹股沟切口较常规下腹直切口显露盆骶部结构更清楚；前后同时入路显露肿瘤的方法具有出血少、保护重要神经、显露清楚等优点。

微波消融治疗骨肿瘤

消融（ablation）在医学上是指通过物理、化学方法（微波、液氮、射线或不可逆电穿孔等）去除某部分生物组织或杀死肿瘤细胞。1975年,国际高温肿瘤学大会在华盛顿召开,自此,消融在全世界范围内被成功应用于肝癌、肺癌、肾癌和骨癌等肿瘤的治疗。本文就微波消融治疗骨肿瘤的相关基础与临床研究进行探讨,同时介绍了唐都医院在该领域的研究成果和成熟经验。

成骨肉瘤细胞SOSP-9607中miRNA的克隆与验证

背景与目的:microRNA(miRNA)是一类非编码蛋白,并参与转录后调节的单链小分子RNA(约20～25个碱基),对基因表达具有重要调控作用,与肿瘤的发生存在着密切的关系。本研究拟克隆成骨肉瘤细胞系SOSP-9607中miRNA,并对部分功能性基因进行验证。方法:以SOSP-9607细胞作为实验对象,分离提取细胞内小片段RNA(≤200nt),多聚腺苷酸化和5′连接子连接后,通过RT-PCR进行反转录和扩增,克隆到pCR4-TOPO载体上得到大约109bpDNA片段,测序后经过生物信息学分析确定miRNA的表达情况。根据当前miRNA的研究现状,在克隆到的miRNA中选取部分功能性miRNA和新发现miRNA,合成相应探针后与从SOSP-9607细胞、HeLa细胞和成骨肉瘤组织中分离出的小片段RNA进行Northern印迹验证。结果:克隆测序后得到182个克隆体,经生物信息学分析发现有47个miRNA(25种),其中含有23种已知的miRNA和2种Nature杂志上预测的miRNA(miR-165和miR-166)。选取的三条实体瘤相关的miRNA(miR-21、miR-20a、miR-17-5p)以及两条预测的miRNA进行Northern印迹验证,miR-21、miR-20a、miR-17-5p在SOSP-9607细胞和成骨肉瘤组织中均表达,预测的miR-165和miR-166在SOSP-9607细胞和成骨肉瘤组织中亦均表达,但miR-166在HeLa细胞中没有表达。结论:克隆了SOSP-9607细胞中的miRNA,并验证了部分功能性miRNA的表达,提示miRNA与肿瘤发生可能有密切的关系。

磷酸钙/纤维蛋白胶复合支架材料的结构及力学性能分析

用可吸收磷酸钙骨水泥和纤维蛋白胶按一定比例体外构建复合支架材料，通过XRD、SEM、抗压实验和空隙率测试等方法对其结构及力学性能进行分析。结果发现：由于加入纤维蛋白胶，复合支架材料在一定程度上延长了磷酸钙骨水泥的初凝时间，但并不影响磷酸钙骨水泥的终凝时间；同时，加入纤维蛋白胶改变了骨水泥固化体的微观结构，提高了骨水泥的抗压强度，其最大抗压强度达到14MPa，弹性模量在96．64～269．39MPa之间，空隙率为38．8％。与在同样条件下制备的磷酸钙骨水泥比较，复合支架材料的抗压强度增强了55．6％，而空隙率仅仅下降了6．9％；XRD分析显示，复合支架材料并不影响磷酸钙骨水泥的最终的转化，其结晶结构仍是羟基磷灰石结构，是更好的骨组织工程支架材料。

完整瘤组织块原位移植法建立人成骨肉瘤转移模型

目的：建立人成骨肉瘤裸鼠转移模型。方法：采用完整瘤组织块原位移植法获得裸鼠自发性肺转移模型，并对转移模型进行影像学检查、组织学检查及 PCR同源性分析。 结果： 建立裸鼠体内人成骨肉瘤转移模型，其自发性肺转移率达到 100％，肝转移率达 30％。影像学检查及组织学检查均与人成骨肉瘤临床情况相似， PCR同源性分析证实裸鼠肺部转移灶为人成骨肉瘤细胞。结论：裸鼠体内人成骨肉瘤自发性转移模型模拟了临床发病过程，对人成骨肉瘤的治疗、局部肿瘤的生长及转移机制的研究提供了更为理想的模型。

复合骨形成蛋白骨修复材料的生物相容性研究

目的 :近年来脱钙骨基质颗粒复合骨水泥已用于修复微波诱导高温原位灭活骨肿瘤性骨缺损 ,在此基础上再复合骨形成蛋白可提高其成骨诱导活性。为推广临床应用 ,本文拟对其生物相容性进行研究。方法 :制备脱钙骨基质颗粒 ,提取牛骨形成蛋白 ,与骨水泥按不同质量比复合后植入小白鼠腹腔内行急性、亚急性毒性试验 ,植入小白鼠后腿股部肌肉内行肌肉刺激试验 ,体外行溶血、凝血试验和骨内埋入试验。结果 :急性毒性试验动物无死亡 ,亚急性毒性试验术前、术后动物体重、红细胞、白细胞和血红蛋白无统计学差别 (t检验 ,P >0 .0 5 ) ,对肌肉无刺激 ,体外对溶血、凝血功能无影响 ,植入骨内无不良反应 ,6个月即可与宿主骨形成“生物铆定”。结论 :该复合材料生物相容性好 ,易塑形 ,具有很强的成骨诱导活性 ,能满足修复不同部位。

微波高温处理的人皮质骨生物力学性质的研究

目的 :明确微波高温处理的人皮质骨生物力学性质的变化 ,为预防微波介入式高温治疗的骨肿瘤患者病理骨折提供理论依据。方法 :微波高温加热人皮质骨 ,制备力学试样。进行静态拉伸、静态压缩试验。测定强度极限、断裂功 ,延伸率。结果 :微波高温处理 80℃ ,持续 30min ,皮质骨密度下降 5 .5 1%。在加载应变率为 0 .8～1.6× 10 -4s-1条件下 ,进行静力学试验。微波高温处理人皮质骨静拉伸强度无明显下降 ,压缩强度比正常皮质骨提高约 2 3%。显微硬度比正常湿润皮质骨提高 4 6 %。延伸率下降 4 3.2 % ,断裂功下降。结论 :微波高温损害了皮质骨的韧塑性 ,使骨组织脆性增加 ,易突发断裂。

长骨骨巨细胞瘤相关复发原因分析

目的 :分析长骨骨巨细胞瘤相关复发因素 ,为其临床治疗及降低复发率提供参考依据。方法 :分析 2 1例长骨复发性骨巨细胞瘤一般资料、影像学检查资料、首次手术方式、肿瘤所在部位、病理骨折与否、Jaffe’s病理分级、Campan icci’s放射线分级等 ,总结相关的复发因素。结果 :本组 41例肿瘤中复发者 2 1例。 2 1例中Jaffe’s病理诊断与首次比较 ,17例无变化 ;按Campanicci’s放射诊断标准 ,首次 19例为Ⅱ、Ⅲ级。 12例位于胫骨近端 ;11例首次术前即伴局部病理性骨折 ,占 5 2 .4%。所有病例均被施予单纯瘤内刮除术 ,7例肿瘤残腔经烧灼等辅助处理。结论 :长骨骨巨细胞瘤复发相关因素复杂多样 ,肿瘤复发与Jaffe’s病理分级无明显相关 ;但Campanicci’s分级越高 ,则复发率越高 ;局部病理性骨折是导致复发的重要原因 ;单纯瘤内刮除术可致较高比例的肿瘤复发 ,而相关的烧灼瘤壁等辅助治疗措施 ,不能替代彻底的肿瘤切除术。

骨形态发生蛋白复合材料修复兔皮质骨缺损

目的通过磷酸钙骨水泥(CPC)复合同种异体脱钙骨基质颗粒(DBM)及骨形态发生蛋白(bBMP)修复皮质骨缺损,探讨其对骨缺损的修复情况。方法在兔前肢桡骨制作长1cm的骨缺损,填充CPC与复合bBMP异体同种的DBM的复合物,应用大体标本观察、X线摄片、组织学观测、印度墨汁灌注等方法观察其对骨缺损的修复情况,对侧以单纯的CPC做对照。结果第2周开始复合材料组有血管长入,第4周X线片上显示可见、骨痂形成,12周后,复合材料与两端的骨质愈合良好,局部板层骨致密,哈夫氏系统排列整齐。结论磷酸钙骨水泥复合bBMP及同种异体脱钙骨颗粒修复、皮质骨缺损有较好的效果。

牛煅烧骨颗粒复合骨水泥的生物力学性能评定

目的 分析不同质量比的牛煅烧骨颗粒复合骨水泥结构特征及生物力学性能。方法 把提取过 bBMP的牛骨颗粒制成煅烧骨，以不同的质量比与骨水泥混合制成复合材料，测定其生物力学性能与电镜下结构。结果 复合材料呈均匀混合分布并多点状结合，其中存在较多的裂隙；含牛煅烧骨颗粒质量比为 500mg/g的复合材料的生物力学性能最为适宜。结论 牛煅烧骨颗粒复合骨水泥后具有新骨长入的通道，含煅烧骨质量比为 500mg/g的复合材料生物力学性能良好，能作为支架材料修复骨缺损。

靶向survivin的siRNA对骨肉瘤细胞MG63的抑制作用

目的:探讨针对人survivin基因的siRNA对骨肉瘤细胞MG63的体内外抑制作用。方法:合成survivin基因的RNA干涉(RNA interferance,RNAi)特异性片段,构建survivin特异性的RNA干涉载体pSiS,转染MG63细胞,G418筛选稳定转染的细胞系。细胞计数检测细胞生长情况;Western blotting检测细胞中survivin蛋白表达的变化;通过Annexin V法染色和流式细胞术检测细胞凋亡;观察裸鼠皮下MG63移植瘤的形成。结果:成功构建了survivin基因siRNA真核表达载体pSiS,获得了稳定转染的细胞MG63/pSiS。与MG63、MG63/pSi(空质粒对照细胞)相比,MG63/pSiS细胞生长曲线十分平缓,差异有统计学意义(P<0.01);Western blotting显示,MG63/pSiS细胞中survivin蛋白表达减少,细胞凋亡率增加(P<0.01)。MG63/pSiS移植瘤形成明显受到抑制。结论:Survivin特异性siRNA可明显促进骨肉瘤细胞MG63的凋亡,抑制该肿瘤细胞体外生长和体内移植成瘤。

人转化生长因子β_1及骨形成蛋白7基因共表达载体的构建及对骨髓基质干细胞的定向诱导作用

目的构建人转化生长因子1β(transform ing grow th factor1β,TGF-1β)及骨形成蛋白7(bonem orphogenetic prote in 7,BM P-7)基因共表达腺病毒真核表达载体,并观察感染骨髓基质干细胞(m arrow strom a l stemce lls,M SC s)后目的基因的表达和对细胞生物学行为的影响。方法以复制缺陷的腺病毒A dE asy为基因载体,制备携带TGF-1β及BM P-7基因的高滴度腺病毒液感染人M SC s,通过免疫细胞化学、原位杂交、RT-PCR及己糖醛酸水平检测等方法鉴定外源基因的表达,分析外源性基因共表达对M SC s定向软骨分化的调控机制。结果腺病毒感染72 h后,TGF-1β和BM P-7免疫细胞化学染色可见大部份M SC s胞浆内均出现棕黄色粗颗粒,通过原位杂交检测出Ⅱ型胶原蛋白基因mRNA,感染10 d后细胞培养液中己糖醛酸含量为68.03±3.34μg/m l与感染前的53.20±3.70μg/m l明显升高有统计学意义(P<0.01)。结论成功构建了人TGF-1β及BM P-7共表达基因腺病毒表达载体,证实其在M SC s中的表达和具有向软骨细胞定向分化的诱导作用,为软骨缺损修复的局部基因治疗奠定实验基础。

骨水泥颗粒促进肿瘤坏死因子α诱导的破骨细胞形成及其骨吸收作用

目的:验证骨水泥颗粒对肿瘤坏死因子α(TNFα)诱导的破骨细胞形成及其生物学活性的影响。方法:体外培养外周血单核细胞,对照组加入TNFα和白细胞介素-1α(IL-1α)及巨噬细胞克隆集落刺激因子(M-CSF),实验组并分别加入含有或不含有硫酸钙的骨水泥(PMMA±BaSO4)颗粒。对培养终末细胞作组织化学染色检测破骨细胞标志物抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的表达,并以象牙磨片上虫蚀样骨吸收陷窝的形成为指标检测破骨细胞的生物学活性;并比较各实验组中TRAP阳性多核细胞(multinucleatedcells,MNCs)及虫蚀样骨吸收陷窝形成时间的早晚。结果:各组TRAP阳性MNCs的数量无明显差异;PMMA±BaSO4组象牙磨片上骨吸收陷窝的面积均较对照组大,差异具有显著性(P<0.01);并且PMMA±BaSO4组TRAP阳性的MNCs及虫蚀样骨吸收陷窝的形成均较对照组早。结论:PMMA±BaSO4颗粒能够促进TNFα诱导的破骨细胞分化提早发生并促进其骨吸收活性。

壳聚糖对自制磷酸钙骨水泥性能的影响

目的:了解壳聚糖对自制磷酸钙骨水泥(CPC)物理性能、超微结构及生物相容性的影响.方法:分别以50g/L乳酸壳聚糖和1mol/L磷酸氢二钠为液相制备CPC试样,通过防水试验、测定初步凝结时间、抗压强度;扫描电镜观察凝固体超微形态;大鼠肌肉植入及骨髓基质干细胞表面种植试验比较两者差异.结果:复合壳聚糖的CPC在水中更稳定,混合后即刻投入生理盐水3min内不散开;平均初步凝结时间8.38min,对照组23.68min;平均抗压强度6.52MPa;对照组2.08MPa.扫描电镜发现凝固体表面为颗粒状及片状晶体,实验组晶体互相连接,孔隙较对照组少.植入肌袋1wk有轻微炎症反应,4wk后反应减退,12wk后实验组材料变软,对照组外形基本未变.肌肉无坏死.电镜下细胞可在水泥盘上贴附、生长,实验组可见的细胞数较多.结论:CPC-壳聚糖复合物在潮湿条件下更稳定,固化时间缩短,抗压强度提高,生物相容性更好.