枸杞叶黄酮泡腾片的配方优化及抗氧化活性研究

该研究优化枸杞叶黄酮泡腾片配方,并测评其质量及抗氧化能力,为枸杞叶的功能性开发和利用提供指导。以枸杞叶黄酮提取物为原料,半干式压片法制备枸杞叶黄酮泡腾片。以感官评分为指标,通过单因素、Plackett-Burman和Box-Behnken试验,优化泡腾片配方。通过测定枸杞叶黄酮泡腾片片重、硬度、崩解时间、发泡量、pH值、黄酮含量以及DPPH自由基、ABTS阳离子自由基、羟自由基(·OH)清除能力和铁还原能力,评价其质量与抗氧化能力。枸杞叶黄酮泡腾片最佳配方为:枸杞叶黄酮提取物6%(质量分数,下同)、聚乙烯吡咯烷酮1%、麦芽糊精25%、硬脂酸镁1.5%、甜菊糖苷0.9%、淀粉9%、微晶纤维素1.5%、崩解剂55.1%,m(柠檬酸)∶m(NaHCO3)为1∶0.6。最佳配方下制得枸杞叶黄酮泡腾片平均片重(408±11)mg,硬度(46.7±0.51)N,崩解时间(217.8±2.07)s,发泡量(5.01±0.49)mL,pH值4.80±0.004,黄酮含量(47.93±0.05)mg/g。枸杞叶黄酮泡腾片对DPPH自由基、ABTS阳离子自由基、·OH的半数清除率分别为0.77、2.01、1.10 mg/mL。质量浓度为5 mg/mL时,枸杞叶黄酮泡腾片对铁还原能力是维生素C的28.85%。枸杞叶黄酮泡腾片工艺稳定可行,具有较好的抗氧化性。

枸杞叶黄酮对HepG2细胞脂质代谢的影响及作用机制

目的:以正常培养和油酸诱导培养的HepG2细胞为模型,探讨枸杞叶黄酮(Lycium barbarum leaves flavonoids,LBLF)对HepG2细胞脂质积累的影响。方法:实验划分为空白组、模型组、阳性对照组以及LBLF低、中、高剂量组。通过油红O染色判断各组别的脂滴聚集情况,并测定各组别脂质水平、氧化应激指标,最后通过实时聚合酶链式反应和Western blot检测脂质生成相关关键基因mRNA水平和蛋白水平的表达情况。结果:LBLF可减少油酸诱导的HepG2细胞内甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇以及丙二醛和活性氧的水平,提升高密度脂蛋白胆固醇、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽、过氧化氢酶水平。同时,Western blot结果显示LBLF干预能上调磷酸化AMP活化蛋白激酶(phosphorylated adenosine 5’-monophosphate (AMP)-activated protein kinase,p-AMPK)/AMPK水平,下调甾醇调节元件结合蛋白-1c(sterol regulatory element-binding protein 1c,SREBP-1c)、过氧化物酶体增殖物活化受体γ(peroxisome?proliferator-activated?receptor?γ,PPARγ)、CCAAT增强子结合蛋白α(CCAAT enhancer binding proteinalpha,CEBPα)蛋白的表达;实时聚合酶链式反应结果表明,LBLF干预能下调ACC、FAS、SREBP-1c、SCD-1、PPARγ、CEBPα等基因的表达。结论:枸杞叶黄酮可通过调节脂质生成和氧化相关基因的表达水平,部分缓解由油酸诱导的HepG2细胞脂质代谢紊乱。

枸杞叶多糖结构表征及体外抗氧化与酶活抑制活性评价

采用碱提醇沉法提取枸杞叶多糖(LBLP),通过离子色谱法和高效凝胶渗透色谱法检测LBLP的单糖组成及分子质量分布。采用紫外光谱、红外光谱及X射线衍射等方法进行LBLP结构表征,并通过体外自由基清除试验和酶活抑制试验评价其抗氧化和糖脂代谢调控活性。结果表明,LBLP的总糖含量为(65.78±0.85)%,蛋白含量为(12.25±0.25)%,糖醛酸含量为(19.26±0.14)%,为蛋白复合酸性多糖。LBLP由8种单糖组成,物质的量比为:n_(阿拉伯糖)∶n_(半乳糖)∶n_(鼠李糖)∶n_(葡萄糖)∶n_(木糖)∶n_(古罗糖醛酸)∶n_(半乳糖醛酸酸)∶n_(盐酸氨基葡萄糖)=427∶293∶86∶73∶42∶40∶31∶8,其中阿拉伯糖含量最高。LBLP主要含有2种不同分子质量分布的多糖组分,其中含量最多的组分其重均分子质量(Mw)为(67380±288)ku。紫外光谱显示枸杞叶提取物含有蛋白吸收峰,表明其是一种蛋白复合多糖,与蛋白质含量测定结果一致。由红外光谱图可知,LBLP具有多糖特征吸收峰,且含有吡喃糖苷。在抗氧化试验中,LBLP对2,2-联氮-双-3-乙基苯并噻唑-6-磺酸阳离子(ABTS^(+))、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼阳离子(DPPH^(+))、超氧阴离子和羟自由基均具有较好的清除效果,当LBLP质量浓度为5 mg/mL时,对DPPH^(+)和超氧阴离子的清除率均达90%。酶活性抑制试验中,LBLP对α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶、胰蛋白酶和胰脂肪酶的活性均有较好的抑制能力并具有量效关系,半抑制质量浓度(IC_(50))分别为(23.80±0.17),(9.53±0.39),(23.36±0.81)mg/mL和(16.03±0.59)mg/mL。本研究可为枸杞叶多糖在抗氧化、降血糖和降血脂相关功能食品的开发提供理论依据。

枸杞叶蛋白提取物的特性表征与生物活性评价

为了探究枸杞叶蛋白提取物的特性表征与生物活性,采用碱提酸沉法提取枸杞叶蛋白提取物,通过持水性(water holding capacity,WA)、持油性(oil-holding property,FA)、热稳定性(thermal stability,TM)、溶解性(solubility,PS)、起泡性(froth capability,FC)、乳化性(emulsification capability,EC)等指标和十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)、扫描电镜(scanning electron microscopy,SEM)、紫外可见光谱(ultraviolet-visible spectra,UV)、傅里叶变换红外光谱(Fourier Transform infrared spectroscopy,FT-IR)、X射线衍射(X-ray Diffraction,XRD)的方法及体外自由基清除试验和酶抑制试验对枸杞叶蛋白提取物的理化性质、功能特性、结构表征及生物活性进行分析。结果表明,枸杞叶蛋白提取物总氨基酸含量达344.00±10.49 mg/100 g,分子量在40~55 kDa,WA和FA分别为2.70、3.43 g/g,变性温度为85.73℃,随pH的升高,枸杞叶蛋白提取物溶液的PS、FC、EC、起泡稳定性(froth stability,FS)均呈现先下降后上升的趋势,而乳化稳定性(emulsion stability,ES)正好相反。枸杞叶蛋白提取物表面有紧密连接的小孔且呈大小不均一的块状,在270 nm附近有特征吸收峰,出现酰胺A、B、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ带,具有完整的三螺旋结构。枸杞叶蛋白提取物浓度为10 mg/mL时对超氧阴离子、羟基自由基的清除率分别为37.73%、35.38%,对α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶的IC50分别为9.88、21.09 mg/mL。综上所述,枸杞叶蛋白提取物的特性和结构稳定,有一定的体外抗氧化能力并能抑制与血糖代谢相关酶的活性。本试验为枸杞叶蛋白提取物的开发利用和深加工提供理论依据。

宁夏不同产地枸杞叶生物碱组成与活性差异

以宁夏3个产地(银川、中宁、固原)“宁杞菜1号”枸杞叶为材料,基于植物广泛靶向代谢组技术研究其生物碱组成和体外抗氧化活性差异。结果表明,3个产地样品的生物碱提取物均具有体外抗氧化活性。其中,对ABTS+的清除能力,中宁(35.4%)>银川(29.6%)>固原(28.9%);对超氧阴离子清除能力,银川(84.8%)>固原(83.9%)>中宁(82.1%);总还原能力中宁(0.46)>固原(0.45)>银川(0.41)。3个产地共检出12类162种生物碱代谢物,在差异倍数≥2或≤0.5,P<0.05,VIP≥1的筛选条件下,银川和固原比较组中显著变化的生物碱差异代谢物有53种(其中上调21种,下调32种),中宁和固原比较组中显著变化的差异代谢物有25种(其中上调16种,下调9种),银川和固原比较组中显著变化的差异代谢物有59种(其中上调31种,下调28种)。3个产地同时比较,筛选出差异显著的生物碱代谢物有5种(二氢咖啡酰腐胺、泛酰巯基乙胺、枸杞素D、对乙酰氨基酚、3,4-二甲氧基苯甲酰胺),KEGG数据库通路富集分析发现5种差异显著生物碱代谢物主要分布在4条代谢途径中,分别为代谢途径、次生代谢产物的生物合成、碳青霉烯生物合成、泛酸盐和辅酶A生物合成途径。本研究为宁夏不同产地“宁杞菜1号”枸杞叶的营养物质挖掘提供理论基础。

低GI枸杞杂粮代餐粉的体外消化特性

为探究低血糖生成指数(Glycemic index,GI)枸杞杂粮代餐粉的体外消化特性,本研究对各原料粉及代餐粉的基本组分、吸水率及吸水膨胀率、淀粉组分、淀粉水解率及估计血糖生成指数(Estimate Glycemic index,eGI)值进行测定与分析,并通过体外模拟胃肠消化方法对比分析了各原料粉及代餐粉中蛋白质水解率、总酚含量、黄酮含量及抗氧化活性的变化。结果表明,代餐粉中脂肪和粗纤维含量相较于各原料粉处于偏低水平。各原料粉及代餐粉的高温吸水率为常温吸水率的2倍左右,其中代餐粉吸水率最低(常温条件下吸水率为0.27%±0.05%,高温条件下吸水率为0.59%±0.05%)。代餐粉中快速消化淀粉含量(40.4%±0.003%)及eGI值(23.4)相较于各原料粉均达到最低,而慢消化淀粉和抗性淀粉含量均相对较高。体外模拟胃肠消化实验中,各原料粉及代餐粉蛋白质水解率均逐渐升高且水解主要以胃部为主,其中代餐粉蛋白水解率相对较高;总酚含量在胃肠消化期间均呈上升趋势且代餐粉在消化结束时含量达到最高(7.26 mg/g)。黄酮含量在模拟胃消化过程中明显增加,而在模拟肠消化中含量下降。DPPH自由基和ABTS+自由基清除率在模拟胃消化过程中随时间延长显著(P<0.05)上升,而在模拟肠消化过程中随时间延长呈先上升后降低趋势,但整体变化幅度较为平缓。综上所述,枸杞杂粮代餐粉适合作为低GI原料或产品且具有良好的抗氧化能力,对于杂粮制品的开发具有一定指导的意义。

高氧应激结合1-甲基环丙烯处理对鲜食枸杞低温贮藏品质的影响

为研究高氧应激和1-甲基环丙烯(1-Methylcyclopropene,1-MCP)单独处理以及二者复合处理对鲜枸杞在(0±1)℃和相对湿度93%±3%环境下的贮藏保鲜效果。以‘宁杞7号’为试验材料,设置了50%O_(2)处理30min、0.6μL/L1-MCP熏蒸处理24h及二者的复合处理,以不作任何处理的样品为对照,测定腐烂率、失重率、色泽、呼吸速率、乙烯释放量、过氧化物酶(POD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性和超氧化物歧化酶(SOD)活性等指标的变化。结果表明,与对照相比,高氧应激结合1-MCP处理有效延缓了枸杞果实腐烂率、失重率、可溶性果胶(SP)含量和多聚半乳糖醛酸酶(PG)活性的上升;减缓了硬度、咀嚼性以及原果胶(PP)含量的下降;提高了CAT、POD和SOD活性;降低了呼吸速率和乙烯释放量峰值并使峰值出现的时间推迟了5d。高氧应激结合1-MCP处理有效减缓低温贮藏鲜枸杞果实营养品质的下降并提高抗氧化酶活性,为枸杞的保鲜和延长货架期提供新的理论依据。

枸杞叶黄酮微胶囊的制备及消化稳定性与生物活性评价

本文以明胶和羧甲基纤维素钠(CMC)为壁材制备了枸杞叶黄酮微胶囊(M-LBLF),并对其稳定性和生物活性进行了探究。通过响应面试验优化M-LBLF制备工艺,采用扫描电镜(SEM)、傅里叶红外光谱(FTIR)、X-射线衍射(XRD)、热重分析和体外模拟消化等方法检测产物稳定性,通过自由基清除和酶活抑制实验评价产物生物活性。结果表明,M-LBLF的最佳制备工艺条件为芯壁比1:3.86,壁材浓度1.15%,搅拌温度45℃,包埋率为84.21%;SEM观察显示,微胶囊颗粒大部分表面光滑,囊壁的结构保持完整,壁材也无破裂痕迹;FTIR检测显示枸杞叶黄酮(LBLF)中1594 cm^(-1)处C=O发生偏移,推测与LBLF与CMC发生静电相互作用有关。XRD光谱显示,微胶囊化使非晶体结构部分转变为晶态,导致M-LBLF和LBLF的衍射峰强度上有细微的变化;热重分析发现微胶囊化改善了LBLF的高温分解,起到保护作用。体外模拟消化和抗氧化活性实验表明,微胶囊化提高了LBLF稳定性,可在消化过程中保留较好的抗氧化活性。此外,通过多元线性回归拟合方程得到微胶囊对胰脂酶的半抑制质量浓度(IC_(50))为2.2004±0.03 mg/mL,对α-淀粉酶半抑制质量浓度(IC_(50))为2.188±0.02 mg/mL,说明M-LBLF能够抑制胰脂肪酶活性和α-淀粉酶活性,提示其具有潜在的调节糖脂代谢活性,本实验为枸杞叶黄酮类提取物的稳定性提高及其相关营养健康产品开发提供了研究基础。

1-MCP浓度对枸杞在低温贮藏期间品质的影响

为研究不同浓度1-甲基环丙烯(1-methylcyclopropene,1-MCP)对枸杞贮藏期间的影响,采用0.2、0.6、1.0μL/L 1-MCP处理枸杞并贮藏在(0±1)℃,对“宁杞7号”的贮藏品质和生理指标进行测定。结果表明,1-MCP处理均可降低枸杞的呼吸速率和乙烯的释放量,减缓硬度、可溶性固形物和维生素C含量的下降,维持枸杞良好的色泽、抑制丙二醛含量的增加和相对电导率的上升,在一定程度上维持枸杞原有的风味,而其中0.6μL/L 1-MCP处理的枸杞效果最佳。综上,0.6μL/L 1-MCP处理的枸杞在低温条件下可以更好地延缓枸杞果实品质的劣变,延长枸杞果实的贮藏期,起到更好的保鲜作用。

超声波辅助双水相法提取枸杞叶黄酮及其胰脂肪酶抑制活性

[目的]开发一种安全、无毒且高效的枸杞叶黄酮类化合物提取方法。[方法]采用超声波辅助双水相法实现高得率、绿色的枸杞叶黄酮类化合物提取,并评价产物活性。通过单因素和Plackett-Burman(PB)试验考察各因素对黄酮提取效果的影响,选取聚乙二醇(PEG400)使用量、硫酸铵使用量、料液比3个因素通过响应面中心组合试验设计优化提取条件;通过胰脂肪酶活性抑制试验评价提取物活性。[结果]超声波辅助双水相法提取枸杞叶黄酮最佳工艺条件为:聚乙二醇PEG相对分子质量400,PEG质量分数28%、硫酸铵质量分数16%、超声功率250 W,超声处理时间40 min、超声处理温度40℃、料液比1∶30 (g/g),该条件下所提取的枸杞叶黄酮提取物的总黄酮含量为(486.30±3.29) mg/g,其对胰脂肪酶活性具有显著抑制作用,半数抑制质量浓度(IC50)为1.06 mg/mL。[结论]最优提取条件下,超声波辅助双水相法所提取的枸杞叶黄酮得率高、溶剂残留低,该方法所得枸杞叶黄酮对胰脂肪酶具有良好的抑制作用。

基于蛋白组学分析不同产地枸杞黄酮类化合物的差异

目的:从蛋白质组学的角度解析不同产地“宁杞1号”枸杞黄酮类化合物的差异。方法:以宁夏、青海和甘肃成熟期“宁杞1号”枸杞果实为研究对象,利用串联质谱标签(TMT)结合液相色谱-串联质谱联用(LC-MS/MS)技术,探究不同产地枸杞的蛋白差异。结果:3个比较组共鉴定出716个差异表达蛋白(DEPs),KEGG通路富集共发现4条与黄酮类化合物相关的代谢途径,其中苯丙烷生物合成途径在3个比较组中均被显著富集(P<0.05),表明苯丙烷生物合成途径在枸杞黄酮合成中可能做出较大贡献。筛选出24个与黄酮合成相关的关键差异表达蛋白,发现苯丙氨酸解氨酶(PAL)、肉桂酸4-羟化酶(C4H)、查尔酮异构酶(CHI)、查尔酮合酶(CHS)等可能是宁夏、青海和甘肃枸杞黄酮类化合物生物合成的重要DEPs。结论:从蛋白质层面鉴定出与枸杞黄酮类化合物生物合成相关的差异蛋白,初步推测枸杞黄酮类化合物合成代谢通路,为探究不同产地枸杞黄酮生物合成差异奠定基础。

枸杞叶黄酮提取物的组成及初步结构表征

本文采用高温乙醇回流法得到一种枸杞叶黄酮提取物,经硝酸铝-亚硝酸钠比色法测定该提取物的总黄酮含量为347.00 mg/g。采用紫外-可见光谱(UV-Vis)和傅里叶变换红外光谱(FT-IR)对其进行初步结构表征,发现枸杞叶黄酮提取物的UV-Vis谱图中含有A-环苯甲酰和B-环肉桂酰系统的特征吸收峰,其FT-IR谱图也显示有C=C、羟基、酚羟基、甲氧基以及甲基等多种特征官能团的振动吸收峰,具有黄酮类化合物的典型结构。通过高效液相色谱(HPLC)测定枸杞叶黄酮提取物中各黄酮类化合物的组成与含量,得出该提取物含有芦丁、绿原酸、槲皮素、咖啡酸、对香豆酸、山奈酚6种黄酮类化合物,含量分别为100.74、0.31、23.59、42.83、2.94、0.08 mg/g,表明提取物是一种富含芦丁、绿原酸和槲皮素的天然黄酮类物质,在天然食品添加剂和功能食品原料等方面具有开发利用价值。

红枣核总黄酮的提取工艺及抗氧化活性研究

采用Box-Behnken Design(BBD)开展响应面试验,研究料液比、乙醇浓度、浸提温度、浸提时间和提取级数五因素及其互作效应对红枣核总黄酮提取率的影响,确定红枣核总黄酮的最佳提取工艺条件为:料液比1∶70(g/m L),乙醇浓度40%,浸提温度80℃,浸提时间4 h,提取级数3次,在此条件下黄酮提取率为16.64 mg/g。此外,以BHT和VC为阳性对照评价了提取物的抗氧化活性,结果表明在一定浓度范围内红枣核总黄酮对超氧阴离子自由基、羟基自由基、DPPH自由基、亚硝基离子自由基、ABTS自由基的最高清除率分别达到53%、85%、71%、68%、91%,总还原能力分别为BHT和VC的35%和36%,表明所提取的红枣核黄酮具有较强的体外抗氧化活性。

产业结构高度化水平的定量测定

产业结构是随着经济发展、技术进步、市场需求等的变化需要发生相应变化的动态结构.在经济迅猛发展的今天,由于经济系统本身的复杂性,我们需要用科学的分析方法来分析产业结构的合理性,而研究产业结构高度化水平是分析产业结构合理性的前提,也是进一步探索产业结构优化的基础性工作.本文主要通过分析中国90年代以来三次产业产值构成情况,应用数学方法对产业结构高度化水平进行定量的粗略测算,进而为产业结构高度化水平横向和纵向评价提供依据.

微波辅助法提取枸杞叶黄酮的工艺研究

本文以枸杞叶为原料,黄酮得率为指标,研究微波辅助提取枸杞叶总黄酮的最佳提取工艺条件。依次考察料液比、乙醇浓度、微波时间、预浸时间以及提取级数对黄酮得率的影响,在此基础上采用响应面分析法建立枸杞叶总黄酮提取参数的回归模型,并优化提取条件。结果得出,微波辅助提取枸杞叶总黄酮的最佳工艺条件为:料液比1∶70,乙醇浓度70%,预浸时间60min,微波时间7min,提取级数3次,在此条件下黄酮得率为23.76%。

枸杞叶黄酮类化合物体外清除自由基作用研究

采用有机溶剂浸提法(70%乙醇)提取枸杞叶中的黄酮类化合物,然后以枸杞叶黄酮提取物为研究对象,以Vc和BHT为阳性对照,通过自由基清除实验体外评价产物的抗氧化活性。结果表明:枸杞叶黄酮提取物中黄酮类化合物的含量为277.7mg/g。枸杞叶黄酮提取物对超氧阴离子自由基、羟基自由基、DPPH^+、亚硝基自由基、ABTS+具有显著的清除能力,其最大清除率分别为62%,84%,80%,34%,78%,对Fe^(3+)的还原能力达到Vc和BHT还原能力的50%。结论:所提取的枸杞叶黄酮类化合物具有较高的体外抗氧化活性,可为枸杞叶黄酮类化合物资源的开发利用提供依据。

不同澄清剂对枸杞酒的澄清效果及非生物稳定性的影响

研究了皂土、明胶和壳聚糖对枸杞酒的澄清效果以及非生物稳定性的影响。试验结果显示,除明胶的澄清效果不明显外,皂土和壳聚糖均显示了良好的澄清效果,且澄清速度较快。其中,以4%的壳聚糖澄清效果最佳,枸杞酒透光率可达91.83%,色泽清亮。比较三者的降酚和降蛋白效果,皂土的降酚效果最佳,降酚率可达93.48%;而壳聚糖的降蛋白效果最佳,降蛋白率可达80.48%。此外,分别以4%的壳聚糖和0.2%的皂土作澄清剂,枸杞酒的蛋白质、酒石酸氢钾、铁、铜以及氧化稳定性试验结果均呈阴性,表明皂土和壳聚糖在一定程度上都起到了增强枸杞酒非生物稳定性的作用。

龙须菜酸性多糖的非特异性免疫调节活性研究

本文从体外和体内两方面研究了龙须菜酸性多糖(GLSPs)对小鼠非特异性免疫的调节作用。结果显示,GLSPs在体外能够增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬作用且呈剂量依赖性,但是对小鼠脾NK细胞的杀伤活性未见显著影响;将GLSPs分别以200mg/kg·d和600mg/kg·d连续灌胃管理小鼠14 d,GLSPs能够显著提高小鼠脾NK细胞的杀伤活性,其中最大杀伤率近90%;能够增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬作用且与多糖剂量正相关,同时使小鼠白细胞和淋巴细胞略有增加但较空白组小鼠无显著差异,表明GLSPs对非特异性免疫具有显著的调节作用。

基于自组织理论的旅游产业结构协调发展研究

旅游产业结构是一个不断发展的动态系统结构,旅游产业各部门的协调发展对地区旅游业的健康发展具有重大意义。文章将自组织理论引入到旅游产业结构研究中,分析了旅游产业结构系统的自组织性,构建以实现产业结构协调发展为目标的旅游产业自组织理论,探讨实现旅游产业结构自组织的途径,最终目标是建立以旅游业的食、住、行、游、购、娱等部门组成的耗散结构,进而实现旅游产业结构协调发展。

山西古建筑的旅游价值与开发前景

古建筑是山西历史文物古迹中最重要的组成部分,也是山西旅游资源的最大优势。从旅游学的角度对山西古建筑资源特点及其价值优势进行总体概括,剖析了古建筑旅游资源开发中所存在的问题,探讨了山西古建筑旅游的发展模式,以期更好的实现山西古建筑的旅游价值。