两种IgM抗体检测方法诊断儿童肺炎支原体感染的比较研究

目的探讨酶联免疫吸附试验IgM抗体(enzyme-linked immunosorbent assay immunoglobulin M,ELISA-IgM)和胶体金-IgM抗体检测方法诊断儿童肺炎支原体(mycoplasma pneumonia,MP)感染的应用价值。方法选取2019年6月28日至12月31日首都儿科研究所附属儿童医院呼吸科住院治疗的社区获得性肺炎患儿550例,采用ELISA-IgM抗体和胶体金-IgM抗体检测方法检测患儿MP,比较两种方法的一致性、在不同年龄段患儿的MP阳性率及准确度。结果550例患儿中,胶体金-IgM抗体检测方法的MP阳性率高于ELISA-IgM(61.8%比52.0%),差异有统计学意义(P<0.01);两种方法的总一致率为83.3%,Kappa值为0.662(P<0.01);不同年龄组两种方法MP阳性率的分布差异均有统计学意义(P<0.01)。550例患儿中有355例MP确诊患儿,不同年龄组两种方法MP阳性率的分布差异均无统计学意义(P>0.05);MP确诊患儿的平均病程为(8.30±3.43)d,不同病程两种方法MP阳性率的分布差异均有统计学意义(P<0.01);发病5~<8 d和8~<10 d时,胶体金-IgM抗体检测方法的MP阳性率均高于ELISA-IgM(78.4%比57.7%,95.7%比86.1%),差异均有统计学意义(P<0.05)。胶体金-IgM抗体检测方法的灵敏度、阴性预测值和约登指数高于ELISA-IgM(0.88比0.75,0.79比0.67,0.73比0.66),特异性和阳性预测值低于ELISA-IgM(0.85比0.91,0.91比0.94)。结论两种IgM抗体检测方法对于诊断儿童MP感染都有较高的应用价值,且一致性较好。对于病程早期的患儿,胶体金-IgM抗体检测方法的敏感性明显优于ELISA-IgM抗体检测方法。

胶体金法和被动颗粒凝集法在儿童肺炎支原体感染检测中的应用比较

目的比较胶体金法和被动颗粒凝集法检测肺炎支原体(MP)感染的符合率,探讨儿童中应用被动颗粒凝集法辅助临床诊断MP近期或现症感染的总抗体滴度阈值。方法选取2019年1-7月于该院呼吸科住院治疗的临床诊断为MP呼吸道感染患儿265例。使用被动颗粒凝集法检测265例患儿血清MP总抗体滴度,采用胶体金法检测血清MP-IgM,并对检测结果进行统计学分析。结果以患儿血清MP总抗体滴度≥1∶160作为MP近期或现症感染的诊断标准,两种方法的总符合率为81.89%,差异无统计学意义(P=0.193);若以总抗体滴度≥1∶80作为MP近期或现症感染的诊断标准,两种方法的总符合率为85.66%,差异有统计学意义(P=0.034)。总抗体滴度1∶80和1∶160组中MP-IgM阳性率分别为70.83%和71.70%,差异无统计学意义(P=0.938)。结论在儿童感染MP后,随着血清中MP总抗体滴度增加,MP-IgM阳性率增高;血清MP总抗体滴度≥1∶160和胶体金法血清MP-IgM阳性作为MP近期或现症感染的诊断标准,均可为临床提供可靠且一致性好的诊断依据。

我国网络交易平台商标侵权避风港规则的引入

随着互联网商务的快速发展,商标作为企业重要的知识产权贸易竞争对象,遭到他人侵权的可能性大大提高。目前出现在网络领域的商标侵权案件已经越来越严重,由此造成的损害和影响也在不断地蔓延和扩展。分析了目前中国网络交易平台中商标侵权的现状,并纵向比较了我国《著作权法》和《侵权责任法》中网络侵权"避风港"原则的具体规定和适用,并且对于如何进一步构建商标侵权领域的"避风港规则":即确立事前审查义务,确立网络服务提供者合理补救措施,建议建立权利人的"通知"和"反通知"程序等进行了讨论。

同位素稀释液相色谱串联质谱法测定血清甲状腺素

目的建立同位素稀释液相色谱串联质谱法（ID—LC／MS／MS）测定血清甲状腺素的候选参考方法。方法实验性基础研究。重量法准确地称取血清或校准溶液，稀释器加入^13C6-甲状腺素，混合，除去蛋白后经过阳离子交换固相萃取柱，收集洗脱液氮气吹干，复溶后用LC／MS／MS测定甲状腺素和内标。用7种混合血清评价方法的精密度；以其中一种血清为样本，分别向样本中加入原样本浓度50％、100％和200％的标准物质评价方法的加样回收率；分别以信噪比（S／N）〉3和（S／N）〉10作为标准，评价方法的检测限和定量限。分析德国临床化学会参考物质CRM21201和CRM21202，评价方法的正确度。结果血清甲状腺素测定的批内CV和总CV分别为0．64％（0．35％～0．89％）和0．83％（0．57％-1．37％）。加样回收率为99．6％～100．7％。检测限和定量限分别为0．12和0．41nmol／L。分析CRM21201和CRM21202，测定结果与认定值的平均偏差为-0．30％（范围-0．13％～0．73％）。结论建立了ID-LC／MS／MS测定血清甲状腺素的方法，方法取样量少，测定结果正确、精密，可望作为血清甲状腺素测定的参考方法。

肺炎支原体抗体滴度和RNA检测在儿童肺炎支原体肺炎诊疗中的应用价值

目的:评价肺炎支原体抗体滴度和RNA病原检测在儿童肺炎支原体(Mp)肺炎诊断和治疗过程中的应用价值。方法:采用观察性研究,收集2019年6至11月首都儿科研究所附属儿童医院呼吸内科因社区获得性肺炎住院的患者433例,采用颗粒凝集法检测肺炎支原体抗体滴度,采用RNA实时荧光恒温扩增技术(SAT)测定Mp-RNA,明确支原体肺炎(Mpp)感染和诊疗情况。两种方法阳性率的比较及3种因素(年龄、病程天数、大环内酯类用药)对方法阳性率的影响分析,采用χ^2检验。结果:433例肺炎患者中Mpp组303例,非Mpp组128例,Mpp组抗体滴度阳性率(≥1∶160)79.5%(241/303),Mp-RNA阳性率77.2%(234/303),两种方法诊断价值一致。SAT方法检测Mp-RNA敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为77.2%(234/303),96.1%(123/128),97.9%(234/239),64.1%(123/192)。抗体滴度阳性率(≥1∶160)在长病程组显著高于短病程组(χ^2=93.227,P<0.01),滴度1∶160的天数为(5.89±1.72)d。Mp-RNA阳性率在短病程组显著高于长病程组(χ^2=20.103,P<0.01)。SAT方法检测Mp-RNA可用于治疗效果监测,Mp-RNA阳性患者出院转阴率34.2%(26/76),拷贝数下降率82.9%(63/76)。结论:两种检测方法各有优劣,抗体滴度检测需要正确把握时间窗并做动态监测,SAT检测Mp-RNA应在病程早期、未使用抗菌药物时进行。两种检测方法的联合应用可取长补短、加强优势,为Mpp临床确诊、正规治疗提供有价值的实验室依据。

血常规及4种炎性标志物在儿童下呼吸道感染疾病中的应用

目的评估血常规在不同感染类型中的表达差异, 以及4种炎症指标C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PT)、铁蛋白(SF)、和乳酸脱氢酶(LDH)在细菌性和支原体性肺炎中的诊断价值及在重症病例的预警价值。方法收集2018年5月至2019年12月于首都儿科研究所附属儿童医院呼吸内科就诊患儿共627例, 包括细菌性肺炎176例;支原体性肺炎275例, 病毒性感染176例;正常对照180例;其中支原体肺炎组根据灌洗液RNA结果阴阳性分为轻症组(151例)和重症组(124例)。所有患者入院首日完成血常规检测, 细菌组和支原体组患者完成4种炎症指标的测定。不同感染组间血常规结果的差异, 以及各炎症指标在细菌组和支原体轻症、重症组间的差异采用Kruskal-Wallis检验分析, 利用ROC曲线分析各炎症指标在不同感染组之间的预测价值。结果血常规结果白细胞计数、中性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞百分比在细菌性肺炎、支原体性肺炎、病毒性感染和正常对照组间的差异均有统计学意义(P<0.05)。4种炎症指标在细菌组、支原体轻症和重症组的差异均有统计学意义(P<0.05)。采用ROC曲线分析CRP、PCT、LDH、SF和白细胞计数5个指标在支原体轻症组和重症组的诊断价值, 除白细胞外, 其余指标P<0.05[CRP:曲线下面积(AUC)0.799;PCT:AUC 0.579;LDH:AUC 0.651;SF:AUC 0.854]。其中CRP和SF的AUC值较高, 诊断临界点处的敏感度和特异度均较高, 诊断价值较大(CRP:诊断临界点 12.55 mg/L, 敏感度0.719, 特异度0.755;SF:诊断临界点 176.02 μg/L, 敏感度0.765, 特异度0.960)。采用ROC曲线分析PCT、白细胞和中性粒细胞百分比对细菌感染和支原体感染的诊断价值, P值均<0.05(PCT:AUC 0.658;白细胞:AUC 0.804;中性粒细胞:AUC 0.630)。白细胞计数是最优的鉴别指标(诊断临界点 9.585×10^(9)/L, 敏感度0.778, 特异度0.698), PCT在诊断临界点0.55 μg/L处的敏感度较高, 但特异度稍低(诊断临界点 0.55 μg/L, 敏感度0.862, 特异度0.366)。结论 PCT和白细胞计数可作为鉴别细菌和支原体感染的优选炎症指标, CRP、LDH、PCT和SF均可作为评估支原体重症感染的预警指标。

儿童肺炎支原体呼吸道感染实验室诊断中国专家共识

肺炎支原体(Mycoplasma pneumonia,Mp)是一种常见的病原微生物,主要引起人类呼吸道感染,尤其以儿童和青年为主。Mp感染广泛存在于世界各地,平时散在性发病,每隔3~7年出现一次地区流行,每次流行持续1~2年。自2012年全球多地区发生Mp暴发流行,除2015年中国外,日本、英国报道的感染病例也出现显著升高。