三氧化二砷与硼替佐米联合应用对多发性骨髓瘤KM3细胞凋亡的作用及其机制研究(英文)

本研究探讨硼替佐米(Bor)单用及与三氧化二砷(As2O3)联合应用对多发性骨髓瘤(MM)细胞株KM3细胞凋亡的影响及其相关机制。采用MTT法检测Bor单用及与As2O3联合应用对KM3细胞增殖的抑制作用,计算其IC50值。采用AnnexinⅤ-FITC凋亡试剂盒检测各药物组KM3细胞早期及晚期凋亡率,流式细胞术测定各药物组KM3细胞跨膜电位的变化。采用RT-PCR检测各药物组KM3细胞Caspase-3、Bim、Bcl-xL mRNA水平的变化。结果表明,Bor联合As2O3对KM3细胞生长抑制明显高于Bor单用,处理72 h作用最明显〔(27.64±0.81)%vs(21.67±2.20)%,P<0.05〕。联合用药组KM3细胞早期凋亡率及晚期凋亡率均较Bor单药组明显增多,前者在作用48 h时效果最明显〔(53.20±3.70)%vs(35.40±2.58)%,P<0.01〕,后者在作用72 h时效果最明显〔(63.96±2.97)%vs(54.08±3.76)%,P<0.01〕。联合用药组KM3细胞线粒体跨膜电位较Bor单药组明显下降,作用48 h时下降最明显。与Bor单药组比较,联合用药组KM3细胞Caspase-3 mRNA、Bim mRNA均升高,Bcl-xLmRNA下降。结论:在体外As2O3可增强Bor对KM3细胞增殖的抑制,增加KM3细胞的凋亡,并且可能通过抑制Bcl-xL mRNA表达,诱导Caspase-3和BIM mRNA表达的途径增强凋亡作用。

非高发地区地中海贫血孕妇临床特点分析

目的:探索非高发地区地中海贫血孕妇的特点,减少中间型及重型地中海贫血患儿的出生。方法:回顾性分析宁波市第一医院2015年3月至2016年4月诊断的235例地中海贫血孕妇,采用XN-9000全自动血细胞分析仪进行血常规检测,采用HYDRASYS血红蛋白电泳仪进行血红蛋白电泳检测,利用荧光PCR熔解曲线法检测常见的3种缺失型和3种非缺失型α型地中海贫血以及21种突变的β型地中海贫血。结果:235例地中海贫血孕妇中β地中海贫血占大多数,其次为α地中海贫血和复合型地中海贫血。大多数孕妇处于轻度贫血状态,表现为小细胞性贫血,但合并缺铁性贫血(IDA)者少见。二胎孕妇比例明显升高,α地中海贫血和β地中海贫血中比例接近1/3,复合型地中海贫血中占75%。血红蛋白电泳中出现HbF的多见于β地中海贫血,且在本籍孕妇中多见。血红蛋白异构体易见于α型地中海贫血孕妇,且均为非本籍孕妇。α型地中海贫血孕妇中无论本籍孕妇还是非本籍孕妇均以--sea基因型最多,β型地中海贫血孕妇中,本籍孕妇及父母一方为本籍孕妇均以IVS-II-654基因型最多,占55.38%,而非本籍孕妇中以CD41-42、IVS-II-654和CD17这3种基因型最多,占30%。结论:地中海贫血孕妇在非高发地区并不少见,并且有自身独有的特点,需引起重视。对该类孕妇配偶需进行地中海贫血基因检测,及时对高危胎儿行进一步遗传学检查,避免中间型及重型地中海贫血胎儿出生。

环孢素A对THP-1细胞的增敏作用及与多药耐药相关蛋白-1的关系

目的:观察环孢素A(CsA)处理急性单核细胞白血病细胞株THP-1后对柔红霉素(DNR)的耐药性及与多药耐药相关蛋白-1(MRP1)表达的关系,探讨CsA对THP-1细胞的化疗增敏作用及相关机制。方法:噻唑蓝(MTT)法、荧光分光光度法、共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)法分别检测CsA处理前后50% THP-1细胞生长受抑的DNR浓度(IC50)、THP-1细胞内DNR含量及分布的变化。免疫细胞化学法、Western blot法检测CsA处理前后THP-1细胞MRP1蛋白表达量的变化。结果:CsA处理后THP-1细胞的IC50明显下降(1.5364±0.1751 vs 0.5588±0.0547,P<0.01),细胞内DNR含量明显增加(21.40±1.71 vs 131.96±16.45,P<0.01),且胞浆内分布更加均匀;同时MRP1蛋白表达量增高(0.2665±0.0042 vs 0.3169±0.0062,P<0.01)。结论:CsA可增加THP-1细胞对DNR的敏感性,降低其耐药性,并提示CsA对THP-1细胞耐药性的改变不是通过降低其MRP1蛋白表达量来实现的。

环孢素A对THP-1细胞多药耐药相关蛋白-1表达的影响

目的:观察环孢素A(Cyclosporin A,CsA)处理后急性单核细胞白血病细胞株THP-1多药耐药相关蛋白-1(Multidrug resistance associated protein-1,MRP1)表达量和活性的变化,探讨CsA逆转MRP1的相关机制及THP-1细胞对柔红霉素(Daunorubicin,DNR)的增敏作用。方法:免疫细胞化学法和Western blot法检测CsA处理后THP-1细胞MRP1表达量的改变,噻唑蓝(MTT)法、荧光分光光度法、共聚焦激光扫描显微镜(Confocal laser scanning microscopy,CLSM)法分别检测CsA处理后50%THP-1细胞生长受抑的DNR浓度(IC50)、THP-1细胞内DNR含量及分布。结果:CsA处理组较对照组MRP1表达量定性、定量检测均增加(P<0.05);IC50明显下降(0.558 4±0.067 0与1.499 7±0.233 8,P<0.01),细胞内DNR含量明显增加(126.500 0±14.781 5与20.900 0±2.497 5,P<0.01),分布更加均匀。结论:CsA增加MRP1的表达量,但降低其活性。

苦参碱对U937细胞周期调控蛋白的影响

目的:观察苦参碱对U937细胞内周期调控蛋白的影响。方法:采用四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞生长受抑情况,流式细胞仪检测细胞周期分布,免疫细胞化学法及Western blot检测cyclin E、cyclin A蛋白表达。结果:MTT检测显示苦参碱能显著抑制U937细胞增殖,其抑制作用呈时间和剂量依赖性;U937细胞受阻于S期,苦参碱作用后细胞内cyclin E及cyclin A表达显著下调。结论:苦参碱能减少细胞内cyclin E及cyclin A蛋白的表达,从而抑制U937细胞增殖。

苦参碱诱导U937细胞分化及其相关机制

目的:观察苦参碱对U937细胞诱导分化作用,并探讨其可能作用机制.方法:采用流式细胞仪检测细胞周期分布;硝基四氮唑蓝(NBT)还原实验、CD11b,CD14表面抗原的表达及细胞形态学检测细胞分化;Western Blot检测p21Waf1/Cip1的蛋白表达.结果:苦参碱作用U937细胞后,细胞周期分析提示发生S期阻滞;NBT阳性细胞率明显增高(P<0.05),CD11b表达增加(P<0.05);细胞内p21Waf1/Cip1表达增高(P<0.05).结论:苦参碱能诱导U937细胞分化,其机制可能与细胞周期调控蛋白p21Waf1/Cip1表达的改变有关.

大蒜素诱导THP-1细胞凋亡的作用及机制

目的:探讨大蒜素对急性单核细胞白血病细胞株THP-1凋亡及凋亡基因Fas/FasL表达的影响。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定大蒜素对THP-1细胞增殖抑制率;AO/EB染色观察细胞凋亡形态;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术(FCM)检测凋亡率的变化;FCM检测细胞凋亡率和细胞周期分布;免疫细胞化学法和Western blot观察细胞Fas、FasL蛋白表达。结果:MTT显示大蒜素能抑制THP-1细胞增殖,呈时间-剂量依赖性,72h中效浓度(IC50)为12.8mg/L。Annexin V-FITC/PI检测凋亡率随大蒜素浓度增加而增加。6.4、12.8mg/L大蒜素作用THP-1细胞72h后,FCM检测G0/G1期细胞比率明显上升,而S期比率明显下降,均出现凋亡峰,凋亡率分别为(22.93±2.93)%和(36.73±2.88)%,呈剂量依赖性,与对照组比较有显著差异(P<0.01)。在荧光显微镜下可区分早、晚期凋亡细胞、活细胞和坏死细胞。免疫组化显示大蒜素作用后Fas/FasL蛋白上调,主要分布在细胞浆和细胞膜。Western blot结果显示Fas/FasL蛋白表达量随大蒜素浓度的升高而增加,呈剂量依赖性。0、6.4、12.8mg/L大蒜素分别作用后Fas蛋白表达水平(相对灰度值)分别为0.2874±0.009,0.427±0.008和0.597±0.011;FasL蛋白表达水平分别为0.212±0.014,0.299±0.028和0.409±0.027;差别均有显著性意义(P<0.01)。结论:大蒜素可诱导THP-1细胞发生凋亡,诱导凋亡的机制可能部分与其上调Fas及FasL表达有关。

苦参碱对U937细胞及人脐静脉血管内皮细胞增殖的影响

目的：观察苦参碱（Matrine，Mat）对U937细胞及人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）增殖的影响。方法：采用体外培养技术，通过细胞形态、MTT实验、细胞周期测定观察Mat对U937细胞及HUVECs增殖的影响。结果：Mat（0．2～0．5mg／mL）作用24h后对U937细胞均有增殖抑制作用（P〈0．05或P〈0．01），在该浓度范围内呈剂量和时间依赖性，其作用U937细胞48h的半数抑制浓度（IC50）约为0．4mg／mL，有效作用时间为1d；Mat（0．1～0．5mg／mL）作用24、48、72h后对HUVECs增殖无明显抑制作用，亦无剂量和时间依赖性（P〉0．05）；Mat（0．2～0．5mg／mL）作用U937细胞48h后，S期细胞比例增加，细胞发生S期阻滞（P〈0．05或P〈0．01）；Mat（0．1～0．5mg／mL）作用HUVECs 48h后，对细胞周期无明显影响（P〉0．05）。结论：一定浓度Mat对U937细胞具有增殖抑制作用，呈时间-剂量依赖关系。Mat在一定浓度和时间下不能抑制HUVECs增殖，对其细胞周期亦无明显影响。

汽车冲撞试验实时数据采集与分析系统

提高安全带等汽车设备的安全性和可靠性是非常重要的,这些产品在出厂之前需要经过严格的测试,因此本文开发了一种测试这些产品的汽车冲撞试验实时数据采集与分析系统。系统的硬件主要由松下公司的PLCFP1-PLC-40和美国康泰公司的DAQ1602数据采集卡、CM4016信号处理器等组成。上位机的系统管理、控制、数据处理与分析的软件主要采用VB进行开发的。实验表明该测试系统具有测试准确、安全可靠、操作方便等特点,适合进一步地推广应用。

基于OS-LSSVMR内模控制的温室环境控制方法的研究

由于温室环境的复杂性,传统的控制方法很难对其进行有效的控制。基于OS-LSSVMR内模控制具有模型简单、鲁棒性好等特点,将其应用于温室环境的控制具有重要的意义。温室环境的OS-LSSVMR内模制控制方法,针对温室环境不易精确建模和不确定性的特点,构造温室环境输入输出的样本数据,采用OS-LSSVMR建立温室环境的正逆模型,用逆模型作为控制器,正模型预测输出,将预测误差作为控制的反馈,在模型偏离实际系统的情况下在线进行调整。通过三种SVM温室环境内模控制的仿真,说明了温室环境的OS-LSSVMR内模制控制效果较好,适合进一步在温室环境控制中推广应用。

浅谈地空通信VHF干扰的防范和治理

二战以后民航一直沿用VHF调幅波的这种调制方式来指挥飞机,当时这种方式具有通信距离长、通信质量好的优点。但随着社会的发展,大量电子器件的普遍使用,各地区广播电台如雨后春笋般涌现,各地暴露出VHF调幅波抗干扰能力差,受地形影响严重等缺点。通过分析民航VHF波段的特点,和地空通信调幅波的特点,来分析干扰的类型,针对各种干扰,提出在现有民航工作模式下适当的解决办法。

容灾备份系统技术分析及原理研究

随着越来越多的系统采用数据库形式存储基本数据,数据的安全存储问题是业务系统设计问题的一个重要组成部分。该文介绍了容灾技术的主要分类和工作原理,并对每种容灾备份系统的技术原理进行了探讨。

高动态环境下C/A码的捕获策略

在GPS中需要用到伪随机码对导航电文进行扩频。如果GPS接收机想要获得导航电文,首先要对接收信号进行解扩,而对伪随机码的捕获又是解扩的关键。民用GPS接收机所要捕获的伪随机码是C/A码,减少对伪随机码的捕获时间是C/A码接收机的一个重要性能指标。在高动态环境下,需要对C/A码的相位和多普勒频移进行二维搜索。提出了一种高动态环境下的C/A码捕获方案,通过理论分析和仿真,证明了该方案有效地缩短了伪随机码的捕获时间,提高了接收机的实时性。

313例浙江省宁波地区携带地中海贫血基因患者基因类型特点分析

目的了解宁波地区携带地中海贫血基因患者的基因型分布特点。方法收集2015年3月至2016年4月宁波市第一医院诊断为携带地中海贫血基因患者的病例资料,回顾性分析患者的血常规检测、血红蛋白(Hb)电泳、基因检测结果,以及不同基因类型患者的性别、籍贯分布。结果313例携带地中海贫血基因患者中,女性289例,男性24例,年龄中位数为29岁,范围为出生后1 d^57岁。患者中携带α型地中海贫血基因75例,β型地中海贫血基因230例,α、β复合型地中海贫血基因8例,Hb平均值均在100 g/L左右,平均红细胞体积均< 80 fl。α型地中海贫血易出现异常Hb。β型地中海贫血Hb电泳阳性率高达81.74%(188/230)。女性患者人数占有绝对优势,大多数患者因妊娠产检发现贫血而就诊。祖籍为宁波市或者父母一方祖籍为宁波市患者接近50%,宁波籍α型地中海贫血20例,基因类型以--sea多见,占70.00%(14/20);宁波籍β型地中海贫血82例,基因类型以IVS-Ⅱ-654多见,占54.88%(45/82);宁波籍α、β复合型地中海贫血2例,基因类型分别为αCS/IVS-Ⅱ-654、-α3.7/CD41-42。结论宁波地区地中海贫血女性发病高于男性,携带β型地中海贫血基因检出率高于α型,β型地中海贫血基因类型中以IVS-Ⅱ-654多见。

血液系统疾病造血干细胞移植术后并发植入综合征诊疗分析

目的探讨血液系统疾病造血干细胞移植术后并发植入综合征(ES)的诊断及治疗方案。方法 2016-01-01—2018-12-31宁波市第一医院共完成154例血液系统疾病的造血干细胞移植,按植入综合征S诊断标准,术后出现确诊植入综合征14例,可疑植入综合征13例。回顾性分析植入综合征的发生与性别、基础疾病、移植方式的关系,以及植入综合征发生时间、持续时间、临床表现、治疗方案及转归。结果白血病患者较其他血液系统病种易发生植入综合征,异基因造血干细胞移植术较自体移植术易发生植入综合征,植入综合征的发生与性别无关。确诊植入综合征患者植入时间:+10 d^+246 d(二次供者干细胞输注后+34 d),持续时间3~11 d,临床表现以发热+皮疹+肝功能或肾功能异常者最多。可疑植入综合征患者植入发生时间:+13 d^+33 d,持续时间3~9 d,临床表现可有发热、恶心呕吐等。无论是确诊或怀疑ES,立即停用重组人粒细胞集落刺激因子(G-CSF),给予糖皮质激素治疗,较重者辅以补充白蛋白、羟乙基淀粉扩容及改善毛细血管通透性,加以利尿对症治疗,27例患者均治疗好转。结论重视移植后病人发热、皮疹、肝肾功异常等临床表现,及早诊断植入综合征。及时停用G-CSF并给予以糖皮质激素为基础的治疗方案可改善植入综合征预后。

急性白血病异基因造血干细胞移植术后并发心肌肥厚二例并文献复习

目前临床治愈急性白血病(除急性早幼粒细胞白血病外)的方法只有异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)。随着化疗方案的完善和allo-HSCT技术的进步,可行allo-HSCT的患者逐年增多,远期生存率明显升高。但allo-HSCT风险较大,移植相关死亡率高,主要与移植后并发症有关。目前对于allo-HSCT后移植物抗宿主病(graft-versus-host disease,GVHD)和肺部感染等常见并发症已有成熟的治疗方案,但对移植后并发心脏病变的研究较少[1]。2016年宁波市第一医院血液科发现2例急性白血病行allo-HSCT后并发心肌肥厚受者,现总结其诊疗经验,并结合相关文献对其可能的发生机制进行探讨。