基于miRNA21-5p调控TGF-β1/Smads信号通路探讨苓桂气化方抗射血分数保留心力衰竭心肌纤维化的机制

目的基于miRNA21-5p调控转化生长因子-β1(transforming growth factor beta 1,TGF-β1)/Smads信号通路探讨苓桂气化方抗射血分数保留心力衰竭(heart failure with preserved ejection fraction,HFpEF)心肌纤维化的机制。方法40只4周龄自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)平均分为HFpEF组、沙库巴曲缬沙坦组(LCZ696,0.018 g·kg^(-1))、苓桂气化方低剂量组(LGQH-L,3.87 g·kg^(-1))和苓桂气化方高剂量组(LGQH-H,7.74 g·kg^(-1)),给予高脂、高盐及高糖饮食16周及腹腔注射链脲霉素溶液8周建立HFpEF大鼠模型。10只威斯塔京都(Wistar Kyoto,WKY)大鼠和10只SHR大鼠作为对照组,以普通饲料喂养至实验结束。造模成功后,WKY、SHR和HFpEF组给予等剂量生理盐水,其他3组按照预先规定的干预措施,每天灌胃1次,持续6周。干预结束后,行超声心动图测量左心室(left ventricle,LV)前壁厚度(LV end-diastolic anterior wall thickness,LVAWd)、LV后壁厚度(LV end-diastolic posterior wall thickness,LVPWd)、LV舒张末内径(LV end-diastolic internal diameter,LVIDd)、LV射血分数(LV ejection fraction,LVEF)、LV舒张早期二尖瓣流入峰值速度(E)、舒张晚期二尖瓣流入峰值速度(A)和LV舒张早期二尖瓣环运动速度(e'),并计算E/A和E/e';酶联免疫吸附试验检测血清心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP)、B型利钠肽(B-type brain natriuretic peptide,BNP)及半乳糖凝集素3(Galectin-3,Gal-3);病理切片进行苏木精伊红及马松染色观察心肌肥厚及纤维化,并计算LV室壁厚度(LV wall thickness,LVWT)、胶原体积分数(collagen volume fraction,CVF)及血管周围纤维化比率(perivascular fibrosis ratio,PFR);实时定量聚合酶链反应检测LV心肌miRNA21-5p及TGF-β1/Smads信号通路相关mRNA表达;蛋白印迹检测LV心肌TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白表达。结果与对照组比较,HFpEF组的LVAWd、LVPWd、LVIDd、E/A、E/e'、ANP、BNP、Gal-3、LVWT、CVF和PFR显著升高(P<0.05或P<0.01);LV心肌miR-NA21-5,α-SMA、CollⅠ、CollⅢ、TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA表达和α-SMA、CollⅠ、CollⅢ、TGF-β1、P-Smad2/3蛋白表达显著上调(P<0.05或P<0.01);Smad7 mRNA及蛋白表达显著下调(P<0.05或P<0.01)。与HFpEF组比较,苓桂气化方呈剂量依赖性减少LVAWd、LVPWd、LVIDd、E/A、E/e'、ANP、BNP、Gal-3、LVWT、CVF和PFR(P<0.05或P<0.01);下调miRNA21-5p,α-SMA、CollⅠ、CollⅢ、TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA表达和α-SMA、CollⅠ、GF-β1、P-Smad2/3蛋白表达(P<0.05或P<0.01);上调Smad7 mRNA及蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。结论苓桂气化方可能通过靶向miRNA21-5p调控TGF-β1/Smads信号通路抑制心肌纤维化,从而减轻HFpEF大鼠LV重塑和舒张功能障碍,是治疗HFpEF的有效中药复方。

射血分数保留心力衰竭研究评述

射血分数保留心力衰竭(heart failure with preserved ejection fraction,HFpEF)是目前心血管领域研究的热点和难点。本文对近20年、尤其是近10年HFpEF相关重要的、具有里程碑式的研究进展进行系统梳理,包括病名的演变、核心发病机制的深入阐释、诊断方法和标准的推陈出新、分类分期分级的更新、治疗的困境和曙光、预后与转归的再认识等。通过对HFpEF过去、现在和未来发展中的重点和难点进行述评,以期为致力于HFpEF研究的同行提供精要简练的参考,为中医药防治HFpEF提供一些启发与思考,推动中西医结合在HFpEF防治中的主体地位。

探讨基于核心指标集构建中医特色的射血分数保留心力衰竭1+N模式疗效评价体系

核心指标集是就某一特定研究领域达成的所有临床研究都应该测量和报告的最少的临床结局,核心指标集可以提高临床疗效评价的规范性和可比性,是循证医学发展的必然、是中医药临床疗效评价的重要抓手、是推动中医药疗效评价与国际接轨的关键。如何运用核心指标集实现临床疗效国际化、标准化的同时,又能遵循中医诊疗特点体现自身优势是中医临床疗效评价的难点。针对这一难点,项目组创新性地提出了1+N模式的射血分数保留心衰(heart failure with preserved ejection fraction, HFpEF)疗效评价体系,即通用的核心指标集“1”+个性化指标集“N”,以满足循证医学和中医学疗效评价的双重需求。本文初探HFpEF疗效评价构建模式,主张在规范化基础上体现多样化和个性化的研究目的需求。结合HFpEF临床疗效评价的现状,综合业内专家意见,探讨了HFpEF 1+N模式疗效评价构建中核心指标集“1”的取舍以及“N”体系的构建思路,以期最大程度的形成符合中医药特色的临床评价体系新范式,推动中医药国际化进程。

从“微饮”立论射血分数保留的心力衰竭早期防治思想

射血分数保留的心力衰竭(heart failure with preserved ejection fraction, HFpEF)是目前心血管领域的治疗难点,防治前线前移对于减缓或逆转HFpEF发病进程至关重要。聚焦HFpEF早期的中医防治,是发挥中医治未病优势的关键。通过梳理仲景提出的“微饮”内涵和证治,结合HFpEF早期的发病机制,提出HFpEF早期以微饮内停上焦为主要病机,临证应以苓桂术甘汤为主祛饮通阳,以期阻断饮证进一步发展,截断HFpEF发展进程。从“微饮”立论HFpEF早期防治,可以防微杜渐,具有重要的临床意义。

苓桂剂类方方证分析与传承创新

苓桂剂类方是仲景基于水气病而设的,以茯苓、桂枝为主要配伍的一类组方。仲景经典的苓桂剂类方有7个,分别是苓桂术甘汤、苓桂枣甘汤、苓桂姜甘汤、苓桂味甘汤、五苓散、茯苓泽泻汤和防己茯苓汤。对苓桂剂的7个类方方证进行了系统梳理,从组方配伍、以方测证、方证对应、核心病机等方面进行了比较和分析,然后介绍了叶天士、刘渡舟和本研究团队对苓桂剂类方在传承中的丰富和发展。最后结合现代医学进展,总结了苓桂剂类方在临床的应用拓展与创新。传承是中医发展的基石,在传承中创新是中医赋予我们的使命,苓桂剂类方方证的传承是中医传承创新的典范。

中医药防治射血分数保留心力衰竭的研究范式思考

射血分数保留的心力衰竭(heart failure with preserved ejection fraction,HFpEF)发病率逐年递增,患病人数庞大,如何发挥中医药防治HFpEF优势、提升中医药防治HFpEF能力成为关键。针对HFpEF自身发病特点和目前存在的问题,本文对中医药防治HFpEF的研究范式进行了探讨:(1)建立HFpEF病名、诊断、疗效评价于一体的标准化体系,从顶层设计确保研究的可比性,促进中医药研究走向国际化;(2)立足于规模化群防群治,在病证结合思路指导下分疾病阶段、抓核心病机形成核心方进行序贯治疗,在规模化防治中总结和提升疗效;(3)多学科交叉合作,对不同亚型的HFpEF诊治方案和临床转归做出精准决策;(4)在健康中国战略思维指导下,着眼长期可持续性发展,从“以预防为主,防治结合,中西医并重”的治疗理念逐渐发展到“以健康为中心”的治未病理念,从治疗HFpEF到关注HFpEF患者,再到从全局关注全生命周期的健康逐步转变。

基于中西医病证结合的射血分数保留的心力衰竭阳虚、阴虚、痰浊证候诊断专家共识

证候的客观化和标准化是规范辨证论治、提高中医临床疗效的关键所在[1],是建立具有中医药特色和优势的疗效评价体系、使中医临床研究结果具有可比性和可重复性的前提[1-2],也是实现中医药现代化、走向国际化的必由之路[3-4]。射血分数保留的心力衰竭(Heart failure with preserved ejection fraction,HFpEF)是从传统心衰概念中独立出来的相对新的疾病诊断[5]。

射血分数保留心力衰竭中西医病证结合的分期诊断专家共识解读

心力衰竭(Heart failure,HF)是各种心血管疾病的终末期阶段,病程呈渐进性加重,早期诊治HF可以提高患者生存质量并减少医疗支出。为实现HF早期诊治,现代医学将HF分为不同时期,即A期、B期、C期和D期,并制定了相应临床指南。射血分数保留心力衰竭(Heart failure with preserved ejection fraction,HFpEF)是心力衰竭的一种类型,HFpEF早期防治缺乏充分证据支持。中医药在HFpEF的早期防治中具有潜力,但由于缺乏明确分期标准,临床研究发展受到限制。中国研究型医院学会中西医结合心血管病专家委员会、国家中医心血管病临床医学研究中心和中国中医药研究促进会青年医师分会发布了《射血分数保留心衰中西医病证结合的分期诊断专家共识》(以下简称《共识》),该共识基于文献调研和专家意见,以病为依托,注重证的发展规律和临床特征,提供了HFpEF分期诊断的指导框架,旨在探讨《共识》的制定动机和突出特点,以帮助各位同仁能更好地理解和运用《共识》,为实际临床工作提供指导和启示。

苓桂气化2号方对射血分数保留心力衰竭大鼠心脏结构和舒张功能的影响

目的观察苓桂气化2号方对射血分数保留心力衰竭(heart failure with preserved ejection fraction,HFpEF)大鼠心脏结构和舒张功能的影响。方法10只7周龄的威斯塔京都大鼠作为正常组,40只自发性高血压大鼠建立复合糖尿病、高血压、高血脂的HFpEF大鼠模型,造模期间死亡3只。造模成功后,所有造模成功的大鼠随机分为模型组(9只)、恩格列净组(10只)、低剂量组(9只)和高剂量组(9只)。正常组和模型组给予等量生理盐水,恩格列净组给予恩格列净1.8 mg/(kg·d),低、高剂量组分别给予苓桂气化2号方浸膏8.1 g/(kg·d)和16.2 g/(kg·d),持续4周。给药结束后,使用超声心动图测量每组大鼠的左室舒末内径(left ventricular end diastolic diameter,LVEDD)、左房内径(left atrial diameter,LAD)、右房内径(right atrial diameter,RAD)、室间隔厚度(interventricular septal thickness,IVST)、左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、等容舒张时间(isovolumic relaxation time,IVRT)、舒张早期二尖瓣血流速度(left ventricular early diastolic filling peak velocity,E)与二尖瓣环心肌运动速度(early diastolic lateral mitral annulus velocity,e′)的值。使用酶联免疫吸附法检测心钠素(atrial natriuretic peptide,ANP)和脑钠肽(B-type brain natriuretic peptide,BNP)水平。苏木精—伊红染色观察左房心肌组织病理变化,马松染色染色观察心肌组织纤维化。结果与正常组比较,模型组大鼠出现呼吸急促、食欲下降、易怒等情况,心脏超声检测显示LVEDD、LAD、RAD显著增大(P<0.01),IVST、E/e′、IVRT显著增加(P<0.01);血清ANP、BNP水平显著升高(P<0.01)。与模型组相比,各给药组大鼠精神佳、反应灵敏、纳食饮水相对较多,心脏超声相关参数显示LVEDD、LAD、RAD、IVST以及E/e′、IVRT均有明显改善(P<0.05);血清ANP、BNP水平均明显降低(P<0.05)。结论苓桂气化2号方可能通过减轻心肌肥厚及纤维化改善HFpEF大鼠的心脏重构和舒张功能障碍,是治疗HFpEF的潜在有效方剂。

基于NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路探讨苓桂气化方改善射血分数保留心力衰竭早期舒张功能的分子机制

目的观察苓桂气化方对射血分数保留心力衰竭(heart failure with preserved ejection fraction,HFpEF)早期模型大鼠心脏舒张功能的干预效应,基于核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)/胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-1(cysteine-containing aspartate-specific proteases-1,Caspase-1)/消皮素D(Gasdermin D,GSDMD)通路探讨其潜在的分子作用机制。方法40只自发性高血压大鼠高盐高脂高糖饮食联合腹腔注射链脲佐菌素溶液建立HFpEF早期大鼠模型,分为HFpEF组、恩格列净组(1.8 mg/kg)、苓桂气化方低剂量组(4.96 g/kg)、苓桂气化方高剂量组(9.92 g/kg),予相应药物灌胃;正常血压组、空白组予等剂量生理盐水灌胃,连续干预9周。采用超声心动图检测大鼠左心房内径(left atrial diameter,LAD)、舒张早期二尖瓣血流速度(left ventricular early diastolic filling peak velocity,E)与舒张晚期二尖瓣血流速度(atrial systolic left ventricular filling peak velocity,A)比值、左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF);酶联免疫吸附测定法检测血清心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP)含量;苏木精—伊红染色观察心肌组织病理变化;蛋白质印迹(Western Blot,WB)法检测NLRP3、Caspase-1、GSDMD和白介素1β(interleukin-1β,IL-1β)的表达。结果与正常血压组相比,HFpEF组LAD和E/A增加(P<0.05),LVEF无明显变化(P>0.05);血清ANP含量升高(P<0.05);病理观察显示心肌炎症浸润;WB结果示NLRP3、Caspase-1、GSDMD和IL-1β蛋白含量升高(P<0.05),表明建模成功。与HFpEF组比,恩格列净组和苓桂气化方低、高剂量组的LAD和E/A减小(P<0.05),血清ANP含量降低(P<0.05),病理观察显示心肌炎症浸润减轻,WB结果示恩格列净组NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β蛋白含量降低(P<0.05),苓桂气化方低剂量组NLRP3、IL-1β蛋白含量降低(P<0.05),苓桂气化方高剂量组NLRP3、GSDMD、IL-1β蛋白含量降低(P<0.05),其余蛋白含量有下降趋势。结论苓桂气化方能改善HFpEF早期模型大鼠心脏舒张功能,其机制可能与调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路、减轻心肌炎症浸润、抑制心房重构相关。

苓桂气化方治疗射血分数保留的心力衰竭早期的临床研究

目的评价苓桂气化方对射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)早期气化不利证见水饮内停患者运动耐量及心脏舒张功能的影响。方法采用随机数字表法将60例患者随机分为对照组和试验组各30例。对照组予西医常规治疗,试验组在此基础上予苓桂气化方颗粒,每次1袋,每日2次,口服。2组均治疗4周。比较2组治疗前后6min步行试验(6MWT)距离、堪萨斯城心肌病问卷(KCCQ)评分、中医症状积分、氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、运动负荷下左室舒张末期内径(LVEDD)、左心房内径(LAD)、室间隔厚度(IVST)、左室舒张早期充盈速度峰值(E)和心房收缩期左心室充盈速度峰值(A)。监测2组患者安全性指标。结果与本组治疗前比较,2组治疗后6MWT距离、KCCQ评分、中医症状积分及E、A值均明显改善(P<0.01),NT-proBNP、LVEDD、LAD、IVST差异无统计学意义(P>0.05)。2组治疗后比较,试验组6MWT距离、KCCQ评分、中医症状积分及E、A值均优于对照组(P<0.05,P<0.01),2组NT-proBNP、LVEDD、LAD、IVST差异均无统计学意义(P>0.05)。研究期间,2组均未发生不良反应及不良事件。结论苓桂气化方可改善HFpEF早期气化不利证见水饮内停患者的运动耐量和心脏舒张功能,抑制HFpEF早期心脏重构,延缓HFpEF发展进程。

二维斑点追踪成像技术评价苓桂气化方改善射血分数保留的心力衰竭早期患者左室心肌运动的临床研究

目的 应用二维斑点追踪超声成像技术评价苓桂气化方对射血分数保留的心力衰竭(heart failure with preserved ejection fraction, HFpEF)早期患者左室心肌运动的改善。方法 纳入明确诊断为HFpEF早期且中医辨证为气化不利证见水饮内停的患者60例,随机分为对照组和试验组。对照组给予西医对症治疗,试验组在西医治疗基础上加用苓桂气化方颗粒(每袋27.5 g)口服,每日2次,每次1袋,两组均治疗4周。治疗前后进行6分钟步行试验(6 min walking test, 6MWT)测试,并在步行试验结束后立即进行心脏功能相关指标检测:患者运动负荷状态下的常规心脏超声参数[左房内径(left atrial diameter, LAd)、室间隔厚度(interventricular septum thickness, IVS)、左室舒张末期内径(left ventricular end-diastolic diameter, LVEDd)、舒张早期二尖瓣口峰值流速(E)、组织多普勒二尖瓣环间隔侧及侧壁侧运动速度(e′)、计算平均E/e′],应用二维斑点追踪技术分别获取左室心内膜下层、心肌中层和心外膜下层整体纵向心肌应变(GLSendo、GLSmid、GLSepi),计算整体纵向应变跨壁阶差(△GLS=GLSendo-GLSepi)。结果 与治疗前比较,试验组6MWT、E、间隔侧e′、侧壁侧e′、GLSendo及△GLS有显著差异(P<0.01),GLSmid、GLSepi有统计学差异(P<0.05);对照组6MWT、E、间隔侧e′、侧壁侧e′、GLSendo有显著差异(P<0.01),GLSmid有统计学差异(P<0.05)。治疗4周后,与对照组比较,6MWT、E、间隔侧e′、GLSendo有统计学差异(P<0.05),△GLS有显著差异(P<0.01)。结论 苓桂气化方可以增加HFpEF早期患者6分钟步行距离,应用二维斑点追踪超声成像技术可以更敏感地检测HFpEF早期左室功能的改变,尤其是心内膜下心肌应变值的改变,揭示苓桂气化方是治疗HFpEF早期潜在的有效中药方剂,同时也表明二维斑点追踪超声成像技术是评价HFpEF早期心功能改善的可靠方法。

基于超声分层应变成像技术评价苓桂气化方改善射血分数保留心力衰竭早期大鼠心肌功能的研究

目的基于超声分层应变成像技术评价苓桂气化方改善射血分数保留心力衰竭(heart failure with preserved ejection fraction,HFpEF)早期大鼠心肌功能。方法40只SPF级SHR大鼠随机分为HFpEF模型组、恩格列净组、苓桂气化方低剂量组和苓桂气化方高剂量组,10只WKY大鼠为空白组。采用高盐高脂高糖饮食及腹腔注射链脲佐菌素建立HFpEF早期大鼠模型,各组予相应干预9周后测量左室舒张末期内径、左室舒张末期后壁厚度、舒张早期血液速度/舒张早期二尖瓣环间隔侧组织多普勒频谱、左室射血分数以及左室心内膜下心肌整体纵向应变、中层心肌整体纵向应变、心外膜下心肌整体纵向应变、心内膜下心肌整体圆周应变、中层心肌整体圆周应变和心外膜下心肌整体圆周应变。酶联免疫吸附法测定血清B型脑尿钠肽。马松染色观察心肌组织病理变化。结果与模型组比较,恩格列净组心内膜下心肌整体纵向应变、中层心肌整体纵向应变和心内膜下心肌整体圆周应变明显升高(P<0.05),苓桂气化方低剂量组心内膜下心肌整体纵向应变和中层心肌整体纵向应变明显改善(P<0.05),苓桂气化方高剂量组心内膜下心肌整体纵向应变、中层心肌整体纵向应变和中层心肌整体圆周应变明显提升(P<0.05)。苓桂气化方低剂量组和苓桂气化方高剂量组心肌细胞间隙变窄,胶原纤维沉积减少。结论苓桂气化方能提高HFpEF早期模型大鼠心内膜下心肌整体纵向应变、中层心肌整体纵向应变、中层心肌整体圆周应变,改善左室重构和收缩功能。超声分层应变成像技术可以无创、定量、敏感检测HFpEF早期大鼠左室壁心肌改变。

探析蛋白组学技术在射血分数保留心力衰竭中医科研中的应用前景

射血分数保留的心力衰竭(heart failure with preserved ejection fraction,HFpEF)是一种异质性综合征,发病率及死亡率逐年增加。HFpEF的病理机制尚未完全明确,可用的治疗方式有限。HFpEF在中医学属于“心水病”范畴,中医药防治该病具有独特的优势,相关研究正逐步开展。蛋白组学旨在从蛋白质水平揭示疾病进程的病理生理动态变化,已经广泛应用于HFpEF病理机制探索、生物标志物筛选及药物作用机制挖掘的研究。然而,其在HFpEF中医科研中的应用尚处于萌芽阶段。因此,本文探析蛋白质组学在促进HFpEF中医证候分型和分期客观化、中医药现代化及中医个体化治疗的应用前景,以期为中医药防治HFpEF提供新的思路。

基于网络药理学探讨健脾化浊汤精简方治疗血脂异常的作用机制

目的:基于网络药理学和分子对接方法探讨健脾化浊汤精简方治疗血脂异常的作用机制。方法:利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)筛选健脾化浊汤精简方的活性成分,利用成分靶点预测数据库(SwissTargetPrediction)、药物数据库(DrugBank)、中药分子机理的生物信息学分析工具(Batman-TCM)筛选复方成分靶点,利用治疗靶点数据库(TTD)等8个数据库和1个基因表达综合数据库(GEO)的Affymetrix基因芯片获得血脂异常的靶点,采用Cytoscape 3.2.1绘制“活性成分-治疗靶点”和“成分靶点-疾病靶点”网络,STRING网站构建蛋白质相互作用网络,使用R语言软件进行靶点基因本体论(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。最后利用iGEMDOCK进行分子对接验证。结果:筛选出健脾化浊汤精简方活性成分70个、治疗靶点109个,核心靶点包括胰岛素、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(Serine/Threonine Kinase 1,AKT1)、表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR)、前列腺素内过氧化物合酶2(Prostaglandin-Endoperoxide Synthase 2,PTGS2)、淀粉样前体蛋白(Amyloid Precursor Protein,APP)、雌激素受体1(Estrogen Receptor 1,ESR1)等。通过KEGG富集分析预测,健脾化浊汤精简方治疗血脂异常涉及的信号通路主要有磷脂酰肌醇3激酶(Phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路、过氧化物酶体增殖物激活受体(Peroxisome Proliferator-Activated Receptor,PPAR)信号通路、Rap1信号通路、胰岛素抵抗通路、缺氧诱导因子-1(Hypoxia Inducible Factorr 1,HIF-1)信号通路等。分子对接结果表明,健脾化浊汤精简方中主要活性成分与核心作用靶点具有较为稳定的结合活性。结论:通过对健脾化浊汤精简方治疗血脂异常的活性成分、关键靶点和相关通路的研究,认为健脾化浊汤精简方可能主要通过调节胰岛素分泌、改善胰岛素抵抗、调节脂蛋白代谢相关受体和酶、抑制胆固醇吸收等机制发挥调节血脂的作用,为未来药理学及临床研究提供了思路。

300例射血分数保留心力衰竭早期患者的中医证候分布规律研究

目的探讨射血分数保留心力衰竭(heart failure with preserved ejection fraction,HFpEF)早期中医证候分布规律。方法采集中国中医科学院西苑医院300例HFpEF早期患者的临床资料,统计描述患者性别、年龄、身体质量指数、基础疾病、左房内径、相对室壁厚度、E/A、E/e′;参考专家共识中气虚证、血瘀证、水饮证、阳虚证、痰浊证和阴虚证6种证候的诊断标准,对患者中医证候进行评定,不符合明确诊断标准的,则判定为相应的证候倾向。统计描述患者中医证候的分布情况和组合情况、证候倾向的分布情况和组合情况、主要中医证候与证候倾向的组合情况;采用卡方检验比较不同证候患者心脏结构和功能改变情况。结果(1)HFpEF早期患者中医证候以水饮证和痰浊证为主;(2)复合证候以水饮+痰浊二证候组合为主;(3)一些患者呈现出血瘀证和气虚证趋势;(4)水饮证患者相对室壁厚度增厚的频率更高(46.30%,P<0.05),痰浊证患者左房扩大的频率更高(71.10%,P<0.05)。结论HFpEF早期的核心病机为气化不利、水饮内停,基本证候分布以水饮证和痰浊证为主,有呈现血瘀和气虚的倾向。

基于PI3K/Akt/GSK3β信号通路探讨苓桂气化方治疗射血分数保留心力衰竭的机制

目的探讨苓桂气化方通过磷脂酰肌醇-3激酶(phosphoinositide-3 kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/糖原合酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3β,GSK3β)信号通路治疗射血分数保留心力衰竭(heart failure with preserved ejection fraction,HFpEF)的机制。方法将50只自发性高血压大鼠(spontaneous hypertensive rat,SHR)随机分为SHR组、HFpEF组、苓桂低组、苓桂高组和诺欣妥组,每组10只;另有10只WKY大鼠作为WKY组。采用喂食高盐高脂高糖饲料联合腹腔注射链脲佐菌素造模。造模后SHR组和WKY组给予生理盐水,其余组给予相应药物灌胃6周。分别于给药前后进行超声检测大鼠左心室前壁厚度(left ventricular anterior wall thickness,LVAWD)、左心室后壁厚度(left ventricular posterior wall thickness,LVPWD)、舒张末期左心室内径(left ventricular end diastolic internal diameter,LVEDD),以及左心房内径(left atrial diameter,LAD)和右心房内径(right atrial diameter,RAD)的左右径和前后径、左心室舒张早期充盈速度峰值(left ventricular early diastolic filling peak velocity,E)、心房收缩期左心室充盈速度峰值(atrial systolic left ventricular filling peak velocity,A)、舒张早期二尖瓣环血流速度峰值(early diastolic lateral mitral annulus velocity,e′)、E/A、E/e′、等容舒张时间(isovolumic relaxation time,IVRT)和左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF);ELISA法检测心钠素(atrial natriuretic peptide,ANP)、脑钠肽(B-type natriuretic peptide,BNP);HE、Masson染色观察大鼠心肌组织结构和形态变化;Western blot法检测PI3K/Akt/GSK3β信号通路相关蛋白(Akt、PI3K、磷酸化PI3K、GSK3β、磷酸化GSK3β)的表达。结果苓桂气化方改善了HFpEF大鼠的心脏结构和功能,与HFpEF组相比:(1)超声结果显示:诺欣妥组、苓桂低组、苓桂高组大鼠的LVEDD、LVAWD、LVPWD、LAD、RAD、E/A、E/e′、IVRT值均显著降低(P<0.01),e′值显著升高(P<0.01),苓桂高组的A值升高(P<0.05),各组LVEF和E均无显著差异(P>0.05)。(2)病理结果显示:各给药组大鼠心室腔较小,室壁变薄,纤维断裂较少,排列更为紧密。(3)ELISA结果显示:诺欣妥组、苓桂低组、苓桂高组BNP和ANP水平显著降低(P<0.01)。(4)Western blot结果显示:诺欣妥组的Akt、p-Akt、GSK3β蛋白表达上调(P<0.05或P<0.01),苓桂低组的p-Akt、GSK3β蛋白表达上调(P<0.05或P<0.01),苓桂高组的p-Akt蛋白表达上调(P<0.05)。结论苓桂气化方治疗HFpEF大鼠具有抑制心脏重构、改善心脏舒张功能、降低血清BNP、ANP的特点,该作用可能是通过PI3K/Akt/GSK3β信号通路来实现的。

复合因素诱导射血分数保留心力衰竭大鼠模型的建立及评价

目的 通过复合因素建立射血分数保留心力衰竭(HFpEF)大鼠模型,评估其特征,并探讨心肌应变参数与心肌肥厚及纤维化的相关性。方法 8只WKY大鼠和8只自发性高血压大鼠(SHR)作为对照组,给予普通饲料至实验结束。32只SHR大鼠平均分SHR+S组、SHR+F组、SHR+SF组及SHR+复合组,分别给予高盐饲料、高脂饲料、高盐-脂饲料、高盐-脂-糖饲料联合腹腔注射链脲霉素30周。造模结束后,测量心重/体重(HW/BW)、收缩压(SBP)及舒张压(DBP);行超声心动图测量左心室(LV)舒张末内径(LVIDd)、LV前壁厚度(LVAWd)、LV后壁厚度(LVPWd)、LV射血分数(LVEF)、等容舒张时间(IVRT)、LV舒张早期二尖瓣流入峰值速度(E)/二尖瓣环运动速度(e’);斑点追踪超声心动图测量全纵向应变(GLS)及应变率(GLSr)、全径向应变(GRS)及应变率(GRSr)、全周向应变(GCS)及应变率(GCSr);血清学检测甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、葡萄糖(GLU)及糖化血清蛋白(GSP),ELISA法检测血清B型利钠肽(BNP)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及半乳糖凝集素3(Gal-3);心肌进行苏木精-伊红(HE)及Masson染色观察心肌细胞及纤维化,并计算心肌细胞横截面面积(CSA)及胶原体积分数(CVF);此外,分析心肌应变参数和CSA及CVF的相关性。结果 与对照组比较,各模型组,尤其是SHR+复合组的HW/BW、SBP、DBP、血清指标(TC、TG、LDL-C、GLU、GSP、BNP、AngⅡ及Gal-3)和超声心动图参数(LVIDd、LVAWd、LVPWd、IVRT及E/e’)显著升高;斑点追踪超声心动图参数GLS、GLSr、GRS、GRSr、GCS及GCSr的绝对值显著下降;心肌组织HE及Masson染色提示明显心肌细胞肥大及纤维化,并且CSA及CVF显著增加(P<0.05)。相关性分析显示,GLSr、GCS及GCSr与CSA密切相关;GLS、GLSr和GCSr与CVF密切相关(P<0.01)。结论 本研究模拟高血压及糖脂代谢紊乱诱导的HFpEF大鼠模型在病因、临床表现及心肌病理改变上复刻了HFpEF的基本特征,可能是代谢综合征相关HFpEF的可靠动物模型。此外,心肌应变参数与心肌肥厚及纤维化密切相关,可能间接反应心肌细微病变和功能障碍。

300例射血分数保留心力衰竭患者的中医证候分布规律

目的基于射血分数保留心力衰竭(heart failure with preserved ejection fraction,HFpEF)基本证候要素的病证结合诊断标准分析HFpEF的证候特征及分布规律。方法纳入300例符合标准的HFpEF患者,收集证候诊断所需信息及相关临床资料,统计单个证素、证素组合的频数分布,并采用两步聚类法探讨主要证型的划分。结果(1)300例HFpEF患者单个证素的出现频率依次为:气虚(97.0%)、血瘀(92.7%)、水饮(79.7%)、痰浊(55.0%)、阴虚(44.7%)、阳虚(36.3%)。(2)同时具有4证素和5证素的患者最多,分别占39.0%和30.3%。(3)患者以虚实夹杂证(94.0%)为主,纯虚证(3.0%)和纯实证(3.0%)较少。(4)300例患者共出现15种证素组合,通过两步聚类可分为8类,每类患者均有气虚、血瘀。结论HFpEF的病机关键为气虚、血瘀、水饮,气虚是始动因素,气虚血瘀为基本证候,可分为气虚血瘀、气阴两虚血瘀、阳气亏虚血瘀和阴阳两虚血瘀4种证型。

附子药理作用机制及减毒增效技术的研究进展

附子具有回阳救逆、补火助阳、温经散寒等功效,但对心脏、肝脏等多系统具有毒性作用,如何在保证疗效的同时降低毒性值得探究。目前,对附子的药理研究主要集中在其强心、保护血管、抗肿瘤、抗炎镇痛及保护神经系统等方面,并在不断挖掘新的方向,如调节免疫及改善糖尿病等。作用机制主要为通过多成分、多靶点、多途径地调控相关信号通路、离子通道等,在生物体内发生细胞水平、组织水平和系统水平的改善。对附子的减毒增效的研究主要是在炮制方法的革新和药物配伍的作用机制等方面。随着科技发展,无胆炮制、微生物发酵技术等逐渐推广应用,不仅能在降低附子毒性的同时维持甚至提升附子的药理作用,还研发出某些疾病的专属性炮制品,对附子的毒理及配伍后药物成分研究也有了长足发展。本文对附子近年来的药理作用及减毒增效的研究进展进行综述,并总结阐述了现有研究的不足之处,以期更好地利用附子资源。