2型猪链球菌天津分离株的鉴定及其遗传特征分析

为了解天津市某猪场引起育肥猪神经症状的病原及其特性和遗传特征,本研究采集8份患病猪脑组织样品经细菌分离、形态学观察、gdh基因和cps2J基因的PCR扩增及序列分析,确定8份样品中的分离株均为同一2型猪链球菌(SS2),命名为TJS75。测定其生长曲线、并按照文献方法进行溶血性试验、黏附/侵入试验和对小鼠的致病性试验,分析该SS2分离株特性。结果显示,TJS75菌株经TSB培养6 h~15 h可达对数生长期,对绵羊血红细胞(RBC)具有崩解效果,可黏附并侵入PK-15细胞(黏附率和侵袭率分别为5.16%和7.90%),且感染TJS75株的BALB/c小鼠出现不同程度的行动迟缓、呼吸急促、精神萎靡和神经症状等,经测定其LD50为2.15×107cfu/mL。进一步采用高通量测序,并预测其毒力基因,分析该菌株的遗传特征,结果显示,TJS75菌株基因组全长2368195 bp,GC含量40.88%,含有2299个编码基因,其中有1822、1830和1077个基因分别注释于GO、COG和KEGG数据库,携带的16S r RNA基因序列与国内分离的SS强毒株98HAH33和05ZYH33的亲缘性较近,毒力基因的预测结果显示该菌株携带499种毒力相关基因(编码173种毒力相关因子),依据功能分类,这些毒力基因参与SS2的黏附和侵袭、溶血、促进铁转运、自溶酶的合成、降解胶原酶、唾液酸的合成等。本研究首次分离到携带MRP毒力因子的ST25型SS2,为深入开展SS2 TJS75株的致病机制研究提供了科学依据。

基于S-MCLSTM和DANN的滚动轴承剩余寿命预测方法

针对在不同工作条件和不同故障形式下,滚动轴承剩余寿命预测泛化能力差和精确度不高的问题,提出一种基于孪生多卷积长短时记忆网络(S-MCLSTM)和域对抗网络(DANN)的剩余寿命预测方法。首先针对不同的工作条件对退化过程的影响,提出基于S-MCLSTM的差异化特征提取器以提取一定时间间隔的两个样本之间的差异化特征。同时,进一步使用工作条件判别器与差异化特征提取器进行对抗训练,减少由于工作条件的原因产生的冗余特征。之后针对故障形式对退化过程的影响,设计了故障诊断器用于和差异化特征提取器对抗训练。最后,考虑到滚动轴承一般退化过程中,不同阶段的退化过程与特征之间的映射关系可能存在的差异,提出了阶段判别器,并在不同阶段应用不同的剩余寿命预测器进行预测。最终在西安交通大学XJTU-SY轴承数据集上的实验表明,该方法在多种工作条件和故障形式下都能较准确地预测剩余寿命,有较为广泛的应用前景。

贝莱斯芽孢杆菌对金霉素作用下肉鸡生长性能、肠道菌群及其耐药基因的影响研究

试验旨在研究在饲粮中添加贝莱斯芽孢杆菌H-7对金霉素作用下肉鸡生长性能、肠道菌群和耐药基因的影响。首先挑选体重相近,性别比例相同,健康状态良好的1日龄雏鸡360羽,分为4个试验组,每组6个重复,每个重复15只,分别饲喂含金霉素0、50、150、250 mg/kg的基础日粮,饲喂28 d,确定对肉鸡肠道菌群影响最大的金霉素剂量和作用。随后挑选1日龄雏鸡450羽,分为5个试验组,每组6个重复,每个重复15只。1~7日龄,前4组饲喂基含150 mg/kg金霉素的日粮,7~35日龄时,分别饲喂含0、10^(8)、10^(9) CFU/kg和10^(10) CFU/kg贝莱斯芽孢杆菌的日粮,同时以1~35日龄均饲喂基础日粮的为空白对照组。结果表明,肉鸡盲肠的菌群结构随着时间和金霉素剂量发生变化。尤其是在生命早期7日龄时,中剂量组(150 mg/kg)中有益菌属Bifidobacterium、Lactobacillus丰度显著降低(P<0.05),肠道常见条件致病菌Enterococcus、Enterobacter的丰度上升,且耐药基因(ARGs)丰度上升。金霉素作用7 d后,在饲粮中添加贝莱斯芽孢杆菌H-7可增加肉鸡体重,但对生长性能无显著影响(P>0.05)。显著增加21日龄肉鸡肠道中Firmicutes的相对丰度(P<0.05),降低Bacteroidetes和Proteobacteria的相对丰度,显著提高F/B值(P<0.05)。贝莱斯芽孢杆菌的添加促进Akkermansia、Ruminococcus、Blautia、Bacillus和Lactobacillus等有益菌属的富集,同时降低了四环素类耐药基因的丰度,有助于改善肉鸡肠道的健康水平。

PEDV、TGEV与PDCoV S蛋白表位基因三联疫苗的构建及其鉴定

[目的]构建一种同时预防猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)的三联表位疫苗,以预防上述病原导致的猪的相关疾病。[方法]本研究运用免疫信息学在线软件对3种猪肠道冠状病毒(SeCoVs)的S蛋白B、T细胞表位进行预测分析,构建新的表位肽段,命名为PPT,通过ExPASy、VaxiJen、TMHMM、SOPMA、SOLpro和AlphaFlod2等在线软件对PPT进行生物信息学分析,并利用C-IMMSIM在线软件对其免疫反应进行模拟。通过T2A将PPT与PEDV的COE序列、TGEV的SAD序列及PDCoV的CTD序列连接并构建至真核表达载体pEGFP-N1,经PCR和双酶切鉴定正确后,将获得的重组质粒转染HEK293A细胞,经DAPI染色、CCK8、RT-PCR及Western blotting试验验证重组质粒在体外表达情况。[结果]构建的表位蛋白PPT由17条表位肽段组成,经生物信息学软件分析,该蛋白为非跨膜蛋白,结构稳定,具有抗原性和可溶性,亲水性高,无过敏性。C-IMMSIM结果显示,PPT能引起机体树突状细胞(DC)增加,B、T细胞免疫反应,刺激免疫球蛋白IgG、IgM和细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)水平升高。重组质粒经PCR和双酶切鉴定结果显示,分别在3359、2375、1064、944、764和467 bp出现特异性目的条带,与预期相符;重组质粒转染HEK293A细胞后,可见绿色荧光;RT-PCR扩增分别在3359、2375、1064、944、764和467 bp处获得与目的基因大小相符的条带;CCK-8检测结果表明,重组质粒对细胞均无明显毒性作用;Western blotting检测结果显示,分别在31.7、16.1、37.9和27.5 ku处出现与目的蛋白分子质量大小一致的条带,重组质粒成功在HEK293A细胞中表达。[结论]本研究基于计算机软件分析设计的PPT表位蛋白成功构建三联疫苗,且在体外表达,为评价PEDV-TGEV-PDCoV三联表位疫苗的免疫效果提供依据。

东北地区奶牛乳房炎表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌的分子流行病学及耐药性研究

为调查表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌在东北地区的流行病学情况和耐药性,本研究对来自东北地区3个大型奶牛场采集的330份奶样进行葡萄球菌的分离、鉴定及其耐药表型的检测,并采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行分离株的亲缘性分析,对表皮葡萄球菌进行多位点序列分型(MLST),同时应用PCR扩增分离株中携带的相关耐药基因。研究结果表明,在330份奶样中共分离到表皮葡萄球菌32株(9.7%),腐生葡萄球菌34株(10.3%);PFGE分析共获得9种不同谱型的表皮葡萄球菌和11种不同谱型的腐生葡萄球菌。药敏试验结果显示,两种菌对青霉素(70%)、苯唑西林(60%)和林克霉素(55%)的耐药率较高,主要耐药基因为lnu(B)(40%)、erm(B)(30%)和mec A(25%)。本研究结果揭示了东北地区奶牛乳房炎病原菌表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌的耐药谱和流行情况,为临床合理用药及奶牛乳房炎的防控提供了实验依据。

《C语言程序设计》教学改革探索与实践

《C语言程序设计》是计算机专业及相关专业开设的计算机程序设计的重要课程,学生学习起来较为枯燥。转变教学理念,多媒体教学与网络化教学相结合、采用任务驱动的教学方法,设计、精选、改进典型性、趣味性例题,加强综合训练和课程设计等都是提高教学效果的有效手段。

高职《计算机组装与维修》课程教学浅谈

在高职《计算机组装与维修》教学中,我们注重“以学生为主体”和“以教师为主导”相结合,多媒体教学与网络化教学相结合、精选教材与编写课程讲义相结合,验证性实验实训与集中实训、社会实践相结合,形成性考核与期末考核相结合的方法,不断提高教学效果。

关于我校信息技术专业群建设的构想

本文主要介绍在我院快速发展，资金又比较紧张的情况下，如何从优势专业群建设入手，创建精品专业。灵活地创办新专业，提升学院的核心竞争力，走可持续发展之路。建设思路是“资源共享、重点突出、优势互补、灵活发展”。

《计算机文化基础》课程教学改革思考

近几年,高等学校《计算机文化基础》教学改革一直是计算机基础教育教学改革的热点。信息技术特别是网络技术的发展,社会对大学生信息素养的需求,使得我们必须根据现代教育思想和教学理论,在教学理念、课程内容、教学方法、实践教学、考核方式等方面不断地进行改革更新。

论计算机史的素质教育作用

本文介绍了计算机史对计算机教学的多方面作用，它不仅能够激发学生的学习兴趣，而且能够增强学生的爱国意识，形成科学的思想方法和研究方法、培养不断创新的科学精神和严谨的科学态度，是当前推行素质教育和创新教育所不可缺少的一个重要方面。

高校计算机基础教育改革初探

高校计算机基础教育正处于一个发展的关键时期。计算机基础教育的实施,要按不同的学科分类分层次进行。这三个层次是:计算机文化基础、计算机技术基础、计算机应用基础。当务之急是计算机文化基础教学改革。

IPv6发展现状与分析

随着软交换和IMS技术的发展与成熟,IPv6将成为未来网络技术的核心。在分析了IPv6的地址资源、移动IP、IP网的QoS及其安全问题,以及IPv6在全球、在中国应用及发展情况的基础上,对目前IPv6发展所存在的问题及其原因进行了深入探讨,提出了可行性的发展建议。

基于防水墙技术的企业信息安全研究

随着企业信息化的发展,信息安全显得越来越重要。从技术和管理方面,介绍了基于防水墙技术的信息安全策略与体系结构,探讨了如何保证内网安全的几种防水墙技术实施方案,提出了信息安全制度的建设重点。

应用模糊集理论及模式评价白洋淀富营养化

根据湖泊富营养化具有模糊性的特点，应用湖泊富营养化评价的模糊集理论与模式，确定富营养化指标综合权重矩阵及湖泊富营养化最优分级模式，对白洋淀１５个恻点进行评价。得出各出点的评价结果，并与其它评价方法作比较，结论比让贴切地反映了白洋淀的实际情况．这一评价方法具有简洁、准确、方便的特点．为白洋淀富营养化的综合防治报供了科学依据．

计算机系统维护专业教学模式改革探索

为进一步提高高职计算机系统维护专业的教学水平,办出特色、办成拳头专业,濮阳职业技术学院在专业教学理念、理论与实践教学、师资队伍建设、实验室及实训基地建设、考核方式等方面进行了配套改革。

《计算机网络》课程教学改革创新

《计算机网络》是高职院校计算机专业的核心课程。网络技术的掌握和掌握得如何,对计算机专业的学生毕业后能否很快适应社会需求是非常重要的。为了切实提高该课程的教学质量和教学效果,教育者要针对高职教育的要求和课程教学的特点,不断创新教学理念和教学模式,更新教学内容,改革实践性教学和考核方式。

《计算机网络》教学的思考与实践

在《计算机网络》教学中,我们采用多媒体教学与网络化教学相结合、精选教材与编写课程讲义相结合,验证性实验实训与集中实训、社会实践相结合,形成性考核与期末考核相结合的方法,激发学生的学习兴趣,提高教学效果。

论学科教师的职业规划教育作用

职业规划教育作为学校教育的重要内容，越来越受到高职院校的关注，它是一项着眼于大学生长远和全面发展的系统工程。但多数高职院校对职业规划教育关注多、措施少，讲座多、指导少，需求多、人手少，教育效果并不明显。加强职业规划教育，增强教育的针对性和实效性，仅靠专业教师及就业指导人员是不够的，它需要全体教师，特别是学科教师的共同努力。学科教师应该挖掘自己在职业规划教育方面的优势，提高职业规划教育的实效性。

大型工程科研信息化的实践与思考

如果说工程科研信息化是一个结果，不如说是一个过程，因为它不仅仅是工程科研的一种手段，其本身已经成为发展目标和路径。核电站具有投资大、周期长、技术难、接口多、管理协调复杂等特点，稍有疏忽，就会导致安全质量隐患或者工程延误，高技术、高难度构成了核电工程科研的特点。工程科研信息化对于改进工程管理、提高工作效率和质量、降低造价、积累信息财富、提高核电企业市场竞争力具有重要意义。云计算、大数据、物联网等新兴技术的发展，也为大型工程科研实现跨越时间、空间、物理障碍的资源共享与跨学科、跨单位协同工作提供了可能。

性能约束的P2P Web Cache模型

为提高网络浏览器缓存系统性能,降低用户等待时间,提出了一种基于性能约束的P2P Web Cache模型。理论分析和模拟测试表明,该模型能够减少连接时间和传输时间。