化疗后粒细胞缺乏与患者特异性危险因素的相关分析

目的探讨肿瘤患者化疗后粒细胞缺乏与患者特异性危险因素的相关性。方法采用单因素和多因素的分析方法,回顾性分析74例肿瘤患者化疗后粒细胞缺乏的发生情况及其可能的相关因素。结果在74例患者共计145次的化疗中.有55例患者82次出现粒细胞缺乏,发生率为56.6%,其中I-Ⅱ度49次(33.8%),Ⅲ-Ⅳ度33次(22.8%)。在首次化疗出现粒细胞缺乏的患者在以后的化疗中粒细胞缺乏的发生率高于其他患者(P<0.05),化疗期间食欲、肿瘤分期、年龄等因素与化疗后粒细胞缺乏明显相关(P<0.05);多因素回归分析显示食欲下降、肿瘤分期是Ⅲ-Ⅳ度粒细胞缺乏的危险因素,食欲下降是I-Ⅱ度粒细胞缺乏的危险因素。结论在肿瘤患者特异性的因素中,食欲下降、肿瘤分期、年龄等因素是肿瘤化疗后粒细胞缺乏的危险因素,尤其应当重视食欲下降对粒细胞缺乏的影响。

应用免疫磁珠法分离脐血CD_(34)^+造血细胞

目的：分离脐血CD细胞，以了解其造血增殖活性。方法：应用免疫磁珠法（Isolex50系统）分离脐血CD细胞，并对其实验方法进行了改进。结果：常规方法CD纯度较低，经过改进，脐血CD细胞由分离前的（1．39±0．76）％增加至（59．46±17．35）％，CD细胞富集倍数为（62．31±55．19）倍。分离后组分CFU－GM、BFU－E、CFU－Mix较分离前分别增加了（41．05±15．77）、（13．14±8.66）及（34．80±19．58）倍，而阴性组分所形成的集落显著减少。结论：免疫磁珠法可以有效地分离CD细胞，造血祖细胞集落大多来源于CD细胞。

脐血CD_(34)^+细胞免疫表型的分析

应用免疫磁珠法分离脐血CD细胞，以比较CD细胞亚群及各系相关抗原的变化。经过分离，CD细胞由1．47±0．77％升至57．39±16．17％，分离后CDCD细胞占CD细胞的比率为7．82±4．79％CD。细胞纯化同时可减少CD细胞达14．12±9．18倍，CD细胞减少16．42±21．47倍；B系（CD(19)）、巨核系（CD(41)）、NK系（CD(56)）各抗原表达率在CD细胞分离后均明显降低。结论：CD细胞纯化可明显减少CD细胞，应用纯化的CD细胞进行移植应加强支持治疗。

中性粒细胞缺乏伴发热的肿瘤患者经验性二线治疗

目的 评价在粒细胞缺乏伴发热的肿瘤患者中 ,联合应用左氧氟沙星和去甲万古霉素在二线经验性治疗中的价值。方法 从 1999年 1月～ 2 0 0 2年 12月 ,6 7例肿瘤患者总计 114次在化疗后出现粒细胞缺乏伴发热 ,并首选亚胺培南 /西司他丁治疗 ,如果发热持续 72 h,改用去甲万古霉素或去甲万古霉素加左氧氟沙星 ,第 5天开始加用氟康唑。结果 亚胺培南 /西司他丁治疗的有效率是 72 .8% ,有 2 3例患者 31次发热经初始治疗无效 ;在可评价的 2 6次发热中 ,15次使用去甲万古霉素治疗 ,11次使用左氧氟沙星和去甲万古霉素 ,有效率分别是 5 3.3%和 72 .7% ;有 18次培养出耐亚胺培南 /西司他丁的细菌 ,革兰阳性细菌占 72 .2 % ;呼吸道是常见感染病灶。结论联合应用左氧氟沙星、去甲万古霉素和氟康唑 ,适用于粒细胞缺乏伴发热的肿瘤患者的二线经验性治疗。

二甲基亚砜联合羟乙基淀粉的非程控降温法冻存脐血造血干细胞研究

为了探索有效低温保存脐血造血干 祖细胞的冷冻保护剂和技术 ,进行了二种方法试验。第一种方法联合使用二甲基亚砜 (DMSO)和羟乙基淀粉 (HES) (分子量 12 0 0 0 0 )作为冷冻保护剂并用非程控降温冷冻技术 ;第二种方法只使用DMSO作为冷冻保护剂并用程控降温仪冷冻技术保存脐血。对二种方法的效果进行比较。结果表明 :15份脐血冻存后细胞存活率、CFU GM回收率 ,无论在使用非程控降温的第一种方法和使用程控降温仪的第二种方法均无显著性差异。 183份脐血质量检测结果及 2 1例临床移植结果也显示两种方法无显著性差异。结论 :联合使用DMSO和HES作为冷冻保护剂并用非程控降温冷冻的方法对脐血造血干细胞有良好的保护作用 ,是一种简单易行、省时省力、适合于脐血造血干细胞库大批量冻存脐血的方法。

骨髓移植合并出血性膀胱炎

骨髓移植已有效地用于治疗各种白血病、再生障碍性贫血及其他恶性疾患。不同的预处理方案中,大剂量环磷酰胺均为不可缺少的免疫抑制剂。该药可产生多种并发症,其中最常见的是出血性膀胱炎。在未采用预防措施以前,其发病率可以高达68%。近些年来,尽管采用增加输液量、利尿等预防措施,其发病率仍高达30%。临床以血尿为主,同时可伴有尿痛、尿频、尿急、排尿不畅。本文拟就出血性膀胱炎的病因机制及防治综述如下。病因骨髓移植合并出血性膀胱炎的原因比较复杂,具体详见附表,主要有以下几点:

脐带血造血干细胞的采集、浓缩与低温冷冻保存

目的 :探讨脐带血造血干细胞库建立中的脐带血采集、分离、低温冻存的方法。方法 :自 1997年 7月至2 0 0 0年 7月已冻存经过HLA配型的脐带血 (cordblood ,CB) 3 74 4份。CB采自经检查符合要求的足月顺产或剖宫产新生儿 ,经 (citratephosphateadeninedextnse ,CPD A)抗凝 ,用密闭式血袋采集法采集。采集后置于室温保存 ,18h内处理。用羟乙基淀粉 (hydroxythylstarch ,HES)沉降后一次分离方法去除绝大多数红细胞及大部分血浆。采用以二甲亚砜 (dimethylsulfoxide ,DMSO)为主的冷冻保剂 ,冷冻保存CB。DMSO的终质量分数为 10 %。经序控降温后 ,置于 - 196℃液氮中保存。结果 :分析了 3 74 4份冻存CB ,平均采集量为 (93± 2 2 )ml(45～ 198ml)。浓缩后平均体积为 (3 8± 8)ml(3 0～ 60ml) ;浓缩前后有核细胞数 .浓缩前平均有核细胞数为 11.2× 10 8± 5 .3× 10 8(4.5× 10 8～ 4 5 .1× 10 8) ;采用HES沉降一次离心浓缩去除红细胞后的平均有核细胞数为 9.7× 10 8± 4 .6× 10 8(3 .1× 10 8～ 3 0 .5× 10 8) ;平均有核细胞回收率为 79%。质控检测 4 0份标本细胞活率为 88.2 % ,CFU GM回收率和CD3 4 +细胞计数分别为 97.6%和 86.4 %。结论 :本研究采用的CB采集、冻存及造血干细胞和病原生物检测的方法是安?

慢性髓细胞性白血病骨髓移植后细胞遗传学动态观察

本文报道12例慢性髓性白血病(CML)患者骨髓移植(BMT)后染色体系统的追踪概况。BMT后三种核型:1.完全供者细胞;2.正常供者/受者或供者/受者Ph(+);3.正常供者/受者/受者Ph(+)细胞。BMT后1例病人复发,染色体伴有附加异常+(18,21)、t(4;15)、b13q、15q^+、8q^+。附加异常为研究移植后细胞遗传学能否帮助新型染色体核型及与复发的关系有重要意义。

高陡岩质斜坡坡表实景模型构建与岩体结构面自动解译方法及平台研发

对于高陡岩质斜坡而言,三维实景建模精度较低且自动解译困难。提出一种基于无人机多角度贴近摄影测量技术的高精度三维实景模型构建方法,实现毫米级三维实景模型的构建,为后续结构面的精细解译提供数据支撑。同时,将突变理论运用到由实景模型生成的三维岩体结构面点云检测中,通过在尖点突变模型中判断点云物理信息是否处于突变状态,实现结构面的自动识别,简化了传统算法需要输入大量参数的过程。在此基础上,开发了岩体结构面自动解译(ARFD-RMS)平台,实现了岩体结构面识别与解译过程的自动化和可视化。利用上述方法,以西藏昌都地区色曲特大桥北岸高陡岩质斜坡为实验对象,构建出毫米级三维实景模型,识别并解译出斜坡中结构面明显出露区域的659条裂隙,并通过与人工罗盘测量的结构面数据对比,自动解译结果的误差在6°以内,验证了算法的准确性。此外,通过开源点云数据集测试了ARFD-RMS平台的适用性,结果表明该平台能胜任不同地区的结构面解译任务。

应用咽拭子培养监测肿瘤患者医院获得性肺炎致病性细菌的临床分析

目的 探讨咽拭子培养对监测肿瘤患者医院获得性肺炎致病性细菌的临床意义。方法 回顾性分析合并医院获得性肺炎的57例患者的病历资料,每例患者使用抗生素前均进行咽拭子培养及药敏试验。结果 有 57例患者71次诊断为医院获得性肺炎,共分离出79株致病性细菌;其中革兰阴性细菌70株占88 6%,革兰阳性细菌9株占11 4%;有16 例患者同期痰培养结果阳性,病原菌一致的有13例;抗生素使用符合咽拭子培养药敏实验结果与不符合药敏结果的患者治疗有效率分别为 75 9%、35 3%(P<0 01)。结论 咽拭子培养可以用于监测肿瘤患者医院获得性肺炎的致病性细菌。

白介素6对人Th17细胞的免疫调节作用

本研究旨在探讨白介素6(IL-6)对人Th17细胞的调节作用。应用免疫磁珠分离正常人CD4+T细胞并培养。实验分为2组,实验组(IL-6+):CD4+T细胞(1×106/ml)经重组人IL-6(20 ng/ml)刺激4天;对照组(IL-6-):不经IL-6刺激。应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清中IL-17蛋白水平,流式细胞术(FCM)检测Th17细胞数量。结果发现,与对照组相比,经IL-6刺激后的CD4+T细胞上清中IL-17蛋白水平明显升高(337.05±189.09 pg/ml vs 15.07±12.70 pg/ml)(p<0.05);进一步FCM发现,IL-6刺激组Th17细胞数量明显高于对照组[(4.05±0.30)%vs(2.81±0.44)]%,(p<0.01)。结论:IL-6促进人Th17细胞的增殖。

转化生长因子-β对人Th17细胞增殖的影响

目的探讨转化生长因子(TGF)-β对人Th17细胞的免疫调节作用。方法应用免疫磁珠分离正常人CD4+T细胞并随机分为观察组和对照组,均置于含5μg/ml植物凝集素和5 ng/ml人重组IL-2的IMDM培养基中,在此基础上观察组加入100 IU/ml TGF-β,均于37℃、5%CO2孵箱中培养4 d。采用ELISA法检测两组细胞上清中IL-17蛋白水平,流式细胞术检测CD4+T细胞内IL-17比例(Th17细胞数量)。结果观察组和对照组CD4+T细胞上清中IL-17蛋白水平分别为(6.11±9.20)、(15.07±12.70)pg/ml,观察组低于对照组(P=0.07);观察组和对照组Th17细胞数量分别为2.45%±0.62%、2.81%±0.44%,观察组明显低于对照组(P<0.05)。结论 TGF-β在体外能通过抑制人Th17细胞增殖而调节其免疫作用。

胚胎骨髓来源间充质干细胞对人Th17细胞的免疫调节

背景:众多研究表明间充质干细胞能发挥免疫调节功能,抑制T细胞增殖。目的:观察胚胎骨髓来源间充质干细胞对人Th17细胞的调节作用。方法:将人胚胎骨髓间充质干细胞与正常人外周血单个核细胞或CD4+T细胞以1∶10比例共培养4d,以单个核细胞或CD4+T细胞单独培养为对照。应用实时定量PCR检测细胞白细胞介素17mRNA表达,酶联免疫吸附试验检测细胞上清中白细胞介素17蛋白水平,流式细胞术检测Th17细胞数量。结果与结论:胚胎骨髓来源间充质干细胞与单个核细胞共培养组白细胞介素17mRNA表达水平明显高于单个核细胞组(P<0.01)。与此一致的是,胚胎骨髓来源间充质干细胞与单个核细胞或CD4+T细胞共培养组细胞上清中白细胞介素17蛋白水平明显高于单个核细胞组、CD4+T细胞组(P<0.05,P<0.01)。胚胎骨髓来源间充质干细胞与CD4+T细胞共培养组Th17细胞数量明显高于CD4+T细胞组(P<0.01),但胚胎骨髓来源间充质干细胞本身并不表达白细胞介素17。表明胚胎骨髓来源间充质干细胞可促进人Th17细胞增殖。

恶性肿瘤患者T细胞亚群变化及其与肿瘤分期的关系

目的了解恶性肿瘤患者的细胞免疫功能状况，为肿瘤治疗提供参考。方法用流式细胞仪分别对消化道肿瘤、女性生殖系统肿瘤、肺癌患者及健康对照者外周血总T（TT）、Th、Ts、Th／Ts和NK细胞进行检测，SPSS10．0软件进行统计分析。结果Th细胞在肺癌、女性生殖系统肿瘤以及消化道肿瘤患者中分别为（29．41±9．24）％、（34．62±10：27）％、（32．48±11．64）％，Th／Ts分别为0．93±0．39、1．10±0．49、1．16±0．52，均明显低于正常对照组（P〈0．05）。Ⅰ-Ⅱ期组及Ⅲ-Ⅳ期组肿瘤患者Th细胞分别为（37．77±9．13）％、（27．29±9．16）％，Ts细胞分别为（28．56±8．19）％、（37．90±11．89）％，2组经统计学检验差异有显著性（P〈0．05）。结论恶性肿瘤患者的细胞免疫功能处于抑制状态且其抑制程度与肿瘤分期相关。