不同产地苦瓜干抗氧化活性成分比较分析

测定10批苦瓜干所含的主要成分含量以及抗氧化活性,并采用傅里叶变换红外光谱法对苦瓜干进行红外光谱分析,为控制苦瓜干质量、保证其安全使用和后期开发利用提供理论支持。使用硝酸铝显色法、福林酚法和二硝基水杨酸法测定总黄酮、总酚和还原糖含量,并运用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除能力法及总抗氧化能力法测定苦瓜干的抗氧化活性。10批苦瓜干的成分含量有所不同,总黄酮、总酚、还原糖含量(w)最高,分别为1.84、5.24、9.00 mg·g^(-1);苦瓜干对DPPH+自由基均有清除作用,IC_(50)值最佳为3.42 mg·m L^(-1);苦瓜干的总抗氧化能力最高,为192.02μg·g^(-1)。苦瓜干粉末的红外光谱图的主要吸收峰均在3290、2920、1740、1610、1370、1230、1020 cm^(-1)附近。苦瓜干富含黄酮、总酚、还原糖成分,一维红外光谱和二阶导数光谱的结合可为苦瓜干的识别分析提供科学数据,有助于苦瓜干的整体质量控制以及有效成分定性分析。

‘唐半夏’无菌繁殖体系建立

以‘唐半夏’块茎为试材,采用组织培养的方法,研究了不同种类及浓度的植物生长调节剂对不定芽诱导、增殖、生根的影响以及电流刺激对不定芽增殖的影响,以期为‘唐半夏’无性快速繁殖体系的建立提供参考依据。结果表明:最适不定芽诱导培养基为MS+1.5 mg·^(L-1)6-BA+0.1 mg·L^(-1)NAA,平均每个外植体诱导的不定芽数最多(9.38个)且诱导率为93.75%;采用电流刺激不仅提高不定芽的增殖倍数,且对‘唐半夏’植株的生长产生明显的促进作用。特别是20 mA、5 min处理下,不定芽增殖倍数最大(13.31倍),组培苗生长健壮且出现生根的现象。最适生根诱导培养基为1/2 MS+0.2 mg·L^(-1)NAA,生根率为100%,生根数为23.75条。

傅里叶变换红外光谱技术对金银花中有效成分定量模型建立及含量测定

中药材“安全、稳定、有效、可靠”是中医药现代化发展的现实需求,针对中药材质量良莠不齐的实际情况探索快速、精准、无损新型含量测定方法是目前中药材质量控制领域亟待解决问题之一。金银花有效成分复杂、质量波动较大,利用傅里叶变换红外光谱技术对金银花有效成分进行高效、无损快速测定可能是推动其质量控制的有效措施。该研究将HPLC法与傅里叶变换红外光谱技术相结合,运用化学计量学方法,建立金银花有效成分的含量测定模型,以期为金银花的快速、精准含量测定提供新方法。利用傅里叶变换光谱仪采集了河南、河北、山东三个产地共64份金银花的红外光谱,使用高效液相色谱(HPLC)法同时测定金银花中绿原酸、当药苷、断氧化马钱子苷、木犀草苷、异绿原酸A、异绿原酸C六种有效成分的含量。使用TQ分析软件中多元散射校正(MSC)、标准正态变换(SNV)、偏最小二乘法(PLS)、逐步多元线性回归(SMLR)、一阶导数(1st)、二阶导数(2nd)及SG卷曲平滑和诺里斯导数滤波(ND)进行光谱处理建立模型。经过对河南、河北、山东共64份金银花样品的化学计量学分析,结果表明PLS+MSC+2nd Der+NS对绿原酸含量测定效果最好,相关系数为0.7549,平均绝对偏差为0.24%;PLS+MSC+1st Der+ND对当药苷的含量测定效果最好,相关系数为0.9369,平均绝对偏差为0.00%;PLS+MSC+1st Der+SG对断氧化马钱子苷含量测定效果最好,相关系数为0.9678,平均绝对偏差为-0.06%;PLS+MSC+1st Der+NS、PLS+MSC+1st Der+SG以及PLS+SNV+1st Der+SG对木犀草苷的含量测定效果最好,相关系数为0.8590,平均绝对偏差为0.01%;PLS+MSC+2nd Der+ND对异绿原酸A的含量测定效果最好,相关系数为0.9339,平均绝对偏差为0.11%;PLS+MSC+2nd Der+SG对异绿原酸C的含量测定效果最好,相关系数为0.8661,平均绝对偏差为0.01%。通过傅里叶变换光谱技术建立对金银花有效成分的定量模型可以实现对未知金银花有效成分的含量测定,该研究为金银花有效成分的快速、无损测定提供了新的方法依据,有助于推动中药材质量的稳定、可控。

中药材品质形成机制及调控研究进展

保证中药材质量安全、有效、稳定、可控是中药材产业健康发展的首要前提。近年来中药材需求量日趋增加,由于中药材品质受生态环境(外因)与遗传背景(内因)的综合影响,因此探究中药材品质形成机制对推动中药材质量稳定、可控具有重要的现实意义。该研究通过梳理近年来有关中药材品质形成及环境调控的文献,阐述中药材“道地性”成因、中药材品质形成机制及环境调控研究进展,初步探讨了中药材品质形成相关假说,借此诠释道地药材品质形成的科学内涵,以期为中药材规范化、生态化种植关键技术提升提供参考依据。

冬凌草体细胞胚诱导及其组织细胞学观察

为建立冬凌草(Isodon rubescens)体细胞胚发生体系,更好地发挥在中医药学中的价值,促进资源稳定和利用,以冬凌草叶片为外植体,脱分化形成胚性愈伤组织,进一步增殖,诱导发育出体细胞胚,结合石蜡切片技术对冬凌草胚性愈伤组织及各阶段体胚进行组织细胞学观察,并探讨激素对植株再生的影响。结果表明:在B5+1.0 mg·L^(-1)2,4-D培养基中,叶片可脱分化形成淡黄色、颗粒状的胚性愈伤组织;在MS+1.0 mg·L^(-1)2,4-D+0.2 mg·L^(-1)6-BA培养基中,胚性愈伤组织增殖效果最好,净增殖量最大可达2.81 g;在体胚诱导中,最佳培养基为MS+1.5 mg·L^(-1) TDZ+0.2 mg·L^(-1) NAA,诱导率最高为91.33%;在MS+0.5 mg·L^(-1)6-BA+0.5 mg·L^(-1) IBA培养基中,表面含体细胞胚的胚性愈伤组织可分化出小植株;在组织细胞学观察中,胚性愈伤组织呈淡黄色或黄白色颗粒状,细胞核大且明显,其内部观察到外起源和内起源2种体胚发生方式,后期可发育为球形胚、心形胚、鱼雷形胚、子叶形胚或成簇状胚结构,内含淀粉粒。该研究成功建立了冬凌草间接体胚发生体系,为优化冬凌草胚性愈伤组织的“质”与“量”奠定基础,也为其分子育种及体胚技术研究提供了理论依据。

石刁柏真伪的红外快速鉴别与总皂苷、总酚酸含量测定及抗氧化活性分析

使用傅里叶红外光谱法对石刁柏样品进行定性研究,并对石刁柏进行总皂苷、总酚酸、DPPH+清除率及抗氧化活性测定。结果显示14批石刁柏样品的红外图谱峰型一致,相似度系数均在98.7%以上,可断定均为正品石刁柏;证明红外光谱技术可快速鉴别石刁柏的真伪。14批石刁柏样品的总皂苷、总多酚含量稳定,最高分别为6.340 mg·g^(-1)、2.0450 mg·g^(-1);各批次石刁柏对DPPH+均有清除作用,最佳IC50为4.57mg·mL^(-1),代表石刁柏总抗氧化能力的Vc浓度最大为2.4110 mg·mL^(-1);对测定结果进行pearson相关性分析和聚类分析,可将14批石刁柏分为5类;总皂苷、总酚酸与石刁柏的总抗氧化能力密切相关,相关系数值具有非常显著的正相关性,石刁柏具有较好的抗氧化能力。本研究为控制石刁柏药材质量、保证其安全使用和后期开发利用提供理论支持。

北方枸杞化学成分及其α-葡萄糖苷酶抑制活性研究

目的:研究北方枸杞Lycium chinense var.potaninii果实的化学成分及其α-葡萄糖苷酶抑制活性。方法:运用大孔吸附树脂、硅胶、ODS反相硅胶以及制备高效液相等技术对北方枸杞干燥果实的95%乙醇提取物进行分离纯化,根据波谱学方法鉴定化合物结构,并对化合物进行α-葡萄糖苷酶抑制活性筛选。结果:从北方枸杞果实的乙酸乙酯部位中分离得到16个化合物,分别鉴定为:N-顺式阿魏酰基酪胺(1)、methyl-2-[2-formyl-5-(hydroxymethyl)-1H-pyrrol-1-yl]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoate(2)、菜豆酸(3)、2E,4Z-脱落酸(4)、催吐萝芙木醇(5)、(E)-3-(3,4,5-trimethoxyphenyl)acrylic acid(6)、阿魏酸甲酯(7)、阿魏酸(8)、3-甲氧基-4-羟基苯丙酸(9)、东莨菪内酯(10)、5-羟基麦芽酚(11)、对羟基苯乙酮(12)、反式对羟基肉桂酸(13)、香草乙酮(14)、香草醛(15)、β-谷甾醇(16)。结论:其中,化合物3~5为首次从枸杞属植物中分离得到,化合物1、2、6~16为首次从该植物中分离得到。化合物1对α-葡萄糖苷酶具有显著的抑制作用,其IC50为(24.25±1.12)μmol/L。

基于计算机视觉技术的连翘果实性状变化研究

目的:探究连翘果实发育与性状之间的关系,建立基于计算机视觉技术的连翘“辨状论质”方法。方法:采用Python库LabelMe对连翘显微横切图片进行标注,获取连翘果实显微横切各部位的面积占比。采用自制软件Lq_measure对连翘进行长度、宽度和单果面积的测量,同时称取连翘果皮(含隔膜)和种子的质量,并制作数据集。结果:连翘果实性状差异大,证实了计算机视觉技术筛选优质连翘具有工业化应用的前景,建立了一套以Lq_measure软件为基础的连翘性状研究实验操作流程,为连翘性状数据库的建立提供了基本方法,为基于连翘果型的中药“辨状论质”理论研究提供可靠技术支撑。结论:连翘种心性状可用于鉴别连翘的果实成熟度,连翘长宽比系数和连翘果皮重占比相关性为0.74,为以后的连翘质量控制提供了理论依据。

槐米的红外快速鉴别与总黄酮、总酚酸、还原糖含量测定

研究槐米内总成分含量,使用傅里叶红外光谱法对槐米样品进行定性研究;采用硝酸铝显色法、福林酚法、DNS对槐米进行总黄酮、总酚酸、还原糖进行测定。14批槐米的红外图谱的峰型一致,各批次槐米的一维红外光谱都存在表征酚酸类、黄酮类和糖类成分的特征吸收峰;在其二阶导数红外图谱,进一步确认黄酮类化合物的存在。含量测定发现其富含总黄酮、总多酚、还原糖。槐米富含酚酸、黄酮类、还原糖成分,一维红外光谱和二阶导数光谱的结合,可以为不同批次槐米的识别分析提供科学数据,有助于槐米的整体质量控制以及有效成分定性分析研究。本研究为后期开发利用槐米提供理论支持,也为控制槐米的药材质量,保证其安全使用提供参考。

中药学类专业分子生药学实验教学改革探讨

分子生药学是中药学类专业必修课程之一,实验教学是中药学类专业分子生药学课程教学的重要组成部分。随着科学技术的进步,实验手段也会随之发展。文章简明梳理了传统分子生药学在实验教学中的不足,从理论和实践的角度探讨了改革举措,提出创新实验教学模式和方法、丰富实验教学内容和手段、开放科研平台和增加实验教学课时、优化实验教学考核方法、合理配置教学师资力量等措施,为分子生药学实验教学质量的提高提供参考依据,以助益提高中药学类专业学生的综合素质和创新能力。

冬凌草药渣固体发酵工艺条件优化

为筛选出冬凌草药渣固体发酵工艺的最适条件,研究不同接种量、不同料液比、不同发酵时间、不同发酵温度处理下酵母菌、乳酸菌固体发酵工艺对冬凌草药渣中齐墩果酸、熊果酸、粗蛋白、粗纤维、粗脂肪、钙、粗灰分、赖氨酸含量变化的影响,并对其进行相关性和主成分分析。结果表明,酵母菌固体发酵最优条件:接种量6%、料液比1∶1.2、发酵时间3 d、发酵温度28℃。此条件下,粗蛋白、粗脂肪、钙、粗灰分、齐墩果酸、熊果酸含量分别相较于发酵前提高0.93%、23.08%、13.89%、19.74%、15.00%、16.22%,粗纤维含量相较于发酵前减少1.19%。齐墩果酸含量与熊果酸含量相关性达到0.86,呈极显著正相关,粗蛋白含量与钙、粗灰分、赖氨酸含量相关性分别达到0.95、0.97、0.90,呈极显著正相关。乳酸菌固体发酵最优条件:接种量6%、料液比1∶1.2、发酵时间6 d、发酵温度28℃。此条件下,粗蛋白、粗脂肪、钙、粗灰分、赖氨酸含量分别相较于发酵前提高33.02%、23.08%、74.07%、51.32%、21.21%,粗纤维含量相较于发酵前减少24.76%。粗蛋白含量与赖氨酸含量相关性达到0.77,呈极显著正相关。综上,酵母菌和乳酸菌固体发酵方法均可使冬凌草药渣的营养价值得到提高。

箭叶淫羊藿灰霉病的病原菌鉴定及药剂筛选

以河南省驻马店市箭叶淫羊藿规范化种植基地箭叶淫羊藿病株为试材,采用组织分离法分离纯化病原菌,利用致病性测定、形态学鉴定和基于ITS、PRB2、HSP60基因的联合系统发育分析对病原菌进行鉴定;采用含药平板法筛选针对病原菌的防治药剂,研究了箭叶淫羊藿灰霉病的病原菌菌种类型和精准有效的防治药剂,以期为箭叶淫羊藿灰霉病防治提供参考依据。结果表明:引起箭叶淫羊藿灰霉病的病原菌为灰葡萄孢菌属(Botrytis)的Botrytis cinerea;肟菌·戊唑醇、氟硅唑、腐霉利、嘧霉胺、咯菌腈对病原菌生长均有较强的抑制作用,其中肟菌·戊唑醇的EC_(50)值最小,对病原菌抑制效果最好。

新冠肺炎方中豫产药材的资源状况

为清晰了解豫产药材的资源现状,保证疫情下全民“有药可用”,并为豫产中药资源的合理配置及疫情下的河南中药材产业发展提供思路。通过对国家和26个省市自治区发布的新冠肺炎中医药诊疗方案中所推荐的中药材进行统计,发现其中豫产道地药材主要有25种,并对该25味豫产药材的资源现状、再生周期、商品药材来源、药用部位、产新时间等情况进行分析。统计结果表明新冠肺炎中医药诊疗方案中推荐频次较高的药材品种为连翘、金银花和半夏,提示药农应加大连翘、半夏等资源的人工栽培力度,避免盲目跟风扩大板蓝根等近年来高产药材的种植面积。该研究进一步表明中药产业的发展应根据产地的资源情况和全国中药材市场变化,适时调整中药材生产品种结构和种植面积,逐步实现河南中药资源的合理配置,由传统中药产业大省向现代中药产业强省的跨进。

基于红外光谱法对不同连作茬次地黄土壤光谱特征分析

连作障碍是中药材地黄种植过程中最大的难点,每茬收获后须隔8~10年后方可再种植,但连作障碍产生的机理尚不明确。提出一种基于傅里叶红外光谱技术(FTIR-ATR)和二维红外相关光谱(2D-IR)分析方法。采集正茬1年(YA-one)、重茬1年(YA-two)、10年前种植过(YA-ten)、空白(CK)4种地黄土壤样品的光谱,进行Norris滤噪平滑+二阶导数、二维相关光谱分析处理并提取特征光谱,分析土壤中化合物的指纹图谱。结果显示:不同连作茬次地黄土壤的峰形基本相似,红外光谱主要特征吸收峰在3621,3439,2932,2860,2513,1798,1636,1433,1029,887,783,695,546和469 cm^(-1)附近。与CK相比,YA-two的吸收强度最大,这些吸收峰表征酚酸中羟基—OH、羰基C=O、C—O、苯环的取代吸收等官能团,说明在重茬的地黄中,酚酸类物质积累。在2925和2857 cm^(-1)表征是糖苷类中饱和亚甲基—CH 2的反对称伸缩振动和对称伸缩振动,YA-two的吸收强度最小,YA-ten的吸收强度最大。说明重茬土壤中,糖苷类成分含量下降。不同连作茬次地黄土壤在920~1750,1490~1710和1500~1548 cm^(-1)中二维红外相关光谱,自动峰和交叉峰的位置、个数、以及强弱都不相同,清晰地表征出官能团的差异。结果表明采用傅里叶红外光谱和二维红外相关光谱能够实现土壤中有机化合物的快速检测,为研究地黄连作障碍研究提供理论依据。

药用植物栽培学课程教学新思路的探讨

药用植物栽培学是整个中药学教育体系中的源头,具有十分重要的作用。药用植物栽培的学习中常常缺乏中药思维和实践。为传承和发展中医药事业,培养适应行业需求的中医药创新实践型人才,作者尝试在课程教授过程中通过引导学生研读中医药古籍、案例带入式教学、线上线下模式、课外动手实践活动等方面,培养中药思维模式下的创新型实践人才。

傅里叶红外光谱结合HPLC对不同产地南葶苈子成分的含量测定

目的创建一种能够快速测定南葶苈子药材中芥子碱硫氰酸盐(sinapine thiocyanate,SH),槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-0-β-D-龙胆双糖苷(quercetin-3-O-beta-D-glucose-7-O-beta-D-gentiobioside,QGG),异鼠李素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(isorhamnetin-3-O-glucoside,IG),槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(quercetin3-O-β-D-glucopyranoside,QG)4种成分的方法。方法高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定南葶苈子样品中SH、QGG、IG、QG的含量,采用偏最小二乘法(partial least squares method,PLS)建立南葶苈子中SH、QGG、IG、QG的定量分析模型。结果所创建的QGG、QG、IG、SH的定量分析模型的内部交叉验证决定系数(R2)分别为0.9270、0.9266、0.8086、0.8289;校正均方差(root mean square error of calibration,RMSEC)分别为0.0100、0.00263、0.00313、0.111;验证均方差(root mean square error of prediction,RMSEP)分别为0.0139、0.00715、0.00395、0.0860。其中SH的特征光谱为9100~6100 cm-1;QGG的特征光谱为7300~5500 cm-1;IG的特征光谱为9500~6700 cm-1;QG的特征光谱为8200~5100 cm-1。结论利用傅里叶红外光谱建立的定量模型,能够对南葶苈子药材中QGG、QG、IG、SH的含量进行无损测定。此外通过近红外光谱PCA分析发现道地产地南葶苈子与非道地产地南葶苈子的差异较大,道地产地南葶苈子之间的差异较小。

基于ICP-MS及多元统计分析相结合的地黄酵素发酵前后无机元素特征

探讨地黄酵素制备前后无机元素的变化,分析发酵对地黄中无机元素的影响,为地黄酵素的制备开发提供数据支撑和理论依据。以四批不同来源的地黄为原料,利用乳酸菌和酵母菌发酵制备地黄酵素,采用微波消解-电感耦合等离子质谱(ICP-MS)法结合主成分分析、差异性分析和Pearson相关性分析等多元统计学方法对地黄酵素发酵前后样品中24种无机元素含量变化特征进行研究。结果表明,发酵对地黄原料中无机元素的种类没有影响,但对无机元素的含量影响较大,发酵前后24种无机元素的分类特征明显不同,其中发酵前后Na、P、Mn、Se、Sr和Cd 6种元素的含量差异在统计学上达到显著水平,而且地黄酵素发酵过程中各无机元素之间的代谢相互影响,其中Ca和Ti之间存在极显著的正相关关系,Pearson相关系数高达0.97;P和Mn,Ba和Pb存在显著的负相关关系,Pearson相关系数在-0.80以下。采用所建立的电感耦合等离子体质谱法测定中草药保健食品地黄酵素中的无机元素,并对地黄发酵制备地黄酵素前后的无机元素特征进行分析,可为地黄酵素在功能性食品添加剂方面的研究和地黄酵素的制备开发提供数据支撑,测定结果稳定可靠,能满足地黄酵素中24种无机元素含量的分析检测要求,也可为其他中草药功能性保健食品中无机元素的检测提供方法参考。

不同脱毒处理怀地黄对干旱胁迫的响应特性

以怀地黄的病毒苗、茎尖脱毒苗、“电”疗法脱毒苗为试材,采用不同浓度PEG 6000(0%、5%、10%、15%)模拟干旱胁迫的方法,研究了干旱胁迫对3种材料形态特征、叶绿素、叶片相对含水量、渗透调节物质及抗氧化酶活性的影响,以期为脱毒地黄在大田栽培上的应用推广提供参考依据。结果表明:PEG 6000胁迫下,3种材料生长明显受到抑制,生根天数延长,株高、生根数、根长、鲜质量均降低,但以“电”疗法获取的脱毒苗生长情况最好;随干旱胁迫程度增加,“电”疗法获取的脱毒苗叶绿素含量先下降后上升,茎尖培养的脱毒苗略微下降,而病毒苗则表现为下降、上升再下降的趋势;叶片相对含水量逐渐降低;而可溶性糖、可溶性蛋白质含量、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活性随胁迫程度加深则呈现出持续上升的趋势,以“电”疗法脱毒苗含量最高。综上可知,“电”疗法脱毒苗抗旱能力较强,可为地黄抗旱机制的研究及田间栽培提供示范参考作用。

不同栽培条件对箭叶淫羊藿移栽苗成活率、产量及质量的影响

以箭叶淫羊藿种子移栽苗为试材,采用不同用量有机底肥、不同株距、不同密度遮阳网、不同施加量复合肥(N∶P∶K=12∶20∶13)组成四因素三水平的正交栽培条件,统计各小区成活率、产量,测定折干率、浸出物、总灰分以及总黄酮、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C及淫羊藿苷含量,采用主成分分析法综合评价,研究了箭叶淫羊藿种子移栽苗在不同栽培条件下的成活率、产量及质量变化,以期为箭叶淫羊藿栽培技术规范的制定提供参考依据。结果表明:40 g·m^(-2)的复合肥,75%的遮阳网,4.5 kg·m^(-2)的有机肥,株距为20 cm为最佳组合,其成活率为63.23%,产量为32.5 g·m^(-2),总黄酮、淫羊藿苷、朝藿定A、B、C含量分别为9.35%、3.01%、0.20%、0.20%、9.09%。说明箭叶淫羊藿种苗移栽时应选择遮阴度高、株距较小、有机肥料较多量施加的栽培条件,该移栽条件下箭叶淫羊藿成活率较高,产量较高,质量较优异。

箭叶淫羊藿种子质量检验方法研究

参考《农作物种子检验规程》,对箭叶淫羊藿种子质量检验方法进行研究,为箭叶淫羊藿种子质量标准的制定提供参考依据。结果表明,箭叶淫羊藿种子存在明显形态休眠,采用外观形态法鉴定种子真实性;百粒法测定千粒重,千粒重为(3.080 3±0.040 8)g;高恒温(130±2)℃烘干1 h测定含水量,含水量为31.07%;用0.5%的TTC溶液在25℃下染色2 h测定生活力,生活力100%;种子沙床恒温4℃层积、200 mg/L GA_(3)处理80 d后,在光照12 h/d,15℃的沙床上进行发芽试验,16 d后发芽率为82.67%。