BDNF对星形胶质细胞的促增殖效应及其ERK信号转导机制

目的探讨BDNF对星形胶质细胞的促增殖作用及其ERK信号转导机制。方法用新生2~3d的SD大鼠,在无菌条件下取脑,制备细胞悬液,以GFAP免疫细胞化学方法鉴定星形胶质细胞的纯度。取纯化的第2代星形胶质细胞,将细胞分成BDNF组、BDNF加PD98059组和空白对照组,用MTT法检测各组细胞的活性,蛋白印迹检测p-ERK1/2。结果BDNF作用48h后,BDNF组、BDNF加PD98059组和空白对照组的A值分别为0.70±0.06、0.50±0.06、0.54±0.05,BDNF组与BDNF加PD98059组、空白对照组比较有显著性差异（P〈0.05）。BDNF组、BDNF加PD98059组p-ERK1的积分光密度（integrated optical density,IOD）与空白对照组的IOD比值分别为（291.22±44.01）%和（102.67±15.50）%（P〈0.05）;BDNF组、BDNF加PD98059组p-ERK2的IOD与空白对照组p-ERK2的IOD比值分别为（483.57±57.61）%与（123.25±19.83）%（P〈0.05）。结论BDNF可诱导星形胶质细胞增殖,促进ERK1/2的磷酸化,其作用可被PD98059所阻断。BDNF对星形胶质细胞的促增殖作用与ERK的信号转导通路有关。

外源性IL-18基因对C6胶质瘤细胞周期及相关基因表达的影响

目的:本研究拟从分子水平探讨IL-18基因转染对C6胶质瘤细胞周期及其相关基因表达的影响。方法:用流式细胞仪检测C6/IL-18细胞周期、细胞增殖指数的变化;以MTT法检测细胞的增殖活性及细胞抑制率,用RT-PCR、Western blot分析C6/IL-18细胞PCNAc、yclin D1c、yclin B1、p21 mRNA及蛋白的表达。结果:与C6/LXSN细胞及亲代C6细胞相比,C6/IL-18细胞周期有所改变,表现为G0/G1期细胞增多、G2/M期细胞减少,细胞增殖指数(PI)与细胞增殖活性降低。C6/IL-18细胞的PCNAc、yclin D1c、yclin B1 mRNA及蛋白表达降低,p21 mRNA及蛋白表达增高。结论:外源性IL-18基因表达可降低C6细胞的增殖活性,下调PCNA,cyclin D1,cyclin B1表达,上调p21基因表达,其作用机制有待进一步研究。

臂后侧手术入路的应用解剖

目的 :为臂后侧手术入路提供解剖学基础。方法 :在 2 0具尸体标本上对臂后侧手术入路有关的血管、神经进行解剖观察。结果 :桡神经在肱骨内上髁上方 (18.2± 0 .4)cm ,臂后中线鹰嘴上方 (13 .9± 1.3)cm ,肱骨外上髁上方 (8.4± 1.4)cm跨过肱骨后面。桡神经在桡神经沟以上发出肱三头肌长头支、肱三头肌内侧头—肘肌支、内侧头支和前臂后皮神经 ,在桡神经沟内发出肱三头肌外侧头支。肱三头肌内侧头—肘肌支走行于臂后中线的稍外侧 ,于臂后中线的稍内侧切开肱三头肌内侧头可避免损伤该神经。结论 :①肱骨后面中下部骨面宽阔而平坦 ,可放置各种类型的钢板 ;②肱骨下段后面无重要的血管、神经 ,手术较安全 ;③臂后侧手术入路适合于肱骨中下段骨折等手术处理。

IL-18基因转染对大鼠C6胶质瘤细胞生长特性的影响

探讨IL-18基因转染对大鼠C6胶质瘤细胞生长特性的影响。用MTT法和流式细胞术检测C6/IL-18细胞和C6细胞的增殖特性和细胞周期分布。免疫细胞化学检测C6/IL-18细胞和C6细胞的增殖细胞核抗原(PCNA)、波形蛋白表达。结果显示,与C6细胞相比C6/IL-18细胞的增殖能力降低,G0/G1期细胞增多而G2/M期细胞减少;PCNA、波形蛋白表达降低。研究表明,IL-18基因具有抑制C6胶质瘤细胞增殖、降低其恶性程度的作用。

外源性IL-18基因转染联合顺铂对胶质瘤C6细胞凋亡的诱导作用

目的研究外源性IL-18基因联合顺铂对胶质瘤C6细胞的凋亡诱导作用,为胶质瘤治疗提供新的途径。方法将IL-18基因及pLXSN病毒载体导入胶质瘤C6细胞,建立C6/IL-18及C6/pLXSN细胞;C6/IL-18、C6/pLX-SN及胶质瘤C6细胞均以RPMI1640培养基培养,经0.3、3、30、60、120μg/ml顺铂作用48h后,用酶标仪在490nm波长处测吸光度值,计算细胞抑制率;以顺铂的10倍血浆峰浓度作用(3μg/ml)细胞24h后,采用吖啶橙/溴乙啶(A//EB)双荧光染色法检测细胞凋亡率。结果 C6/IL-18细胞、C6/pLXSN细胞及亲代C6细胞经120、60、30、3、0.3μg/ml顺铂作用后的抑制率依次降低,C6/IL-18细胞抑制率明显高于C6/pLXSN和C6细胞(P均<0.05)。以30μg/ml顺铂作用后C6/IL-18细胞的凋亡率明显高于C6/pLXSN和C6细胞(P均<0.05)。结论外源性IL-18基因联合顺铂可明显增加对胶质瘤C6细胞的抑制作用,其相关机制有待进一步探讨。

TBL教学法在腹部局部解剖教学中的应用

2008年教育部、卫生部颁布了我国《本科医学教育标准一临床医学专业》。《本科医学教育标准》特别注重学生终身学习能力的培养，而终身学习能力的培养与学校的教育模式和教师的教学方法有关。培养学生的自主学习能力是培养终身学习能力的关键。我国目前的教育体制和方法不利于学生自主学习能力的培养，

pTAT-XIAP融合蛋白表达载体的构建

目的探索pTAT-XIAP融合蛋白表达载体的构建。方法在体外合成大鼠XIAP基因,将其插入pTAT-HA质粒,构建pTAT-XIAP融合蛋白表达载体,将pTAT-XIAP质粒转化至DH5α,培养筛选成功转化子,提取纯化质粒,电泳鉴定。结果pTAT-XIAP质粒在含氨苄青霉素的LB固体培养基上呈分散菌落生长,在无氨苄青霉素的LB固体培养基上成片生长,未经质粒转化的DH5α感受态细胞在含氨苄青霉素的LB固体培养基上未见菌落生长。电泳结果显示pTAT-XIAP质粒约4500bp,pTAT-HA质粒约3000bp,条带大小与质粒图谱一致。结论将大鼠XIAP基因插入PTAT-HA质粒,成功构建pTAT-XIAP融合蛋白表达载体。

大转子区筋膜骨膜血管分布及其临床意义

目的：为股方肌蒂大转子筋膜骨膜骨瓣移位术提供解剖学基础。方法：在３４侧下肢标本上对大转子区筋膜和骨膜的形态特点及其血供进行了解剖学观察。结果：大转子区筋膜较厚，分浅、深两层，与臀大肌筋膜和大转子骨膜通过疏松结缔组织相连。筋膜和骨膜的动脉来源为多源性，来自旋股内侧动脉深支、臀下动脉大转子支、第１穿动脉升支、旋股外侧动脉升支和横支。它们在大转子形成广泛的吻合。旋股内侧动脉深支管径为１．７±０．５ｍｍ，长３．３±０．７ｃｍ，其筋膜支和骨膜支是大转子的主要营养血管。臀下动脉大转子支管径１．４±０．５ｍｍ，长５．２±０．８ｃｍ，常与旋股内侧动脉深支吻合。结论：带筋膜血管的骨膜骨瓣比不带筋膜的骨膜骨瓣血供丰富。根据大转子区筋膜和骨膜的血管分布特点，可设计带筋膜血管的股方肌蒂大转子骨膜骨瓣。

外源性IL-18基因对C6胶质瘤细胞增殖及相关基因表达的影响

目的:研究IL-18基因转染对C6胶质瘤细胞增殖活性及相关基因表达的影响.方法:用流式细胞仪观察C6/IL-18细胞周期、增殖指数的变化;用RT-PCR,蛋白印迹、免疫细胞化学方法分析C6/IL-18细胞cyc lin D1,cyc lin B1,Bc l-2 mR-NA及蛋白的表达.结果:与亲代C6细胞相比,C6/IL-18细胞表现为G0/G1期细胞增多、G2/M期细胞减少,细胞增殖指数(PI)降低.C6/IL-18细胞的cyc lin D1和cyc lin B1,Bc l-2 mR-NA及蛋白表达降低.结论:外源性IL-18基因可降低C6细胞的增殖活性,其机制可能与Bcl-2,cyclin B1和cyclin D1表达下调有关.

自主学习模式在局部解剖学教学中的应用

为促进学生自学能力的培养,在局部解剖学教学过程中,我们通过建立网络辅助教学平台,构建考试综合评价体系,开放实验室,学生写作小论文及课堂讨论等方式在本科临床医学专业进行自主学习教学模式的探讨。实践证明此模式有利于学生主动获取知识、自学能力和创新能力的培养。

pTAT-XIAP重组表达载体的构建与酶切鉴定

目的探索pTAT-XIAP融合表达载体的构建方法。方法在体外合成大鼠XIAP基因,将其插入pTAT-HA质粒,构建pTAT-HA/XIAP融合表达载体,将pTAT-HA/XIAP质粒转化至DH5α感受态细胞,筛选培养转化成功的单克隆,NcoI/XhoI双酶切后琼脂糖电泳鉴定。结果转化pTAT-HA/XIAP质粒的DH5α在含氨苄青霉素的LB固体培养基上呈分散菌落生长。电泳结果显示重组pTAT-HA/XIAP质粒约4500bp,酶切后可观察到PTAT-HA质粒约3000bp,XIAP目的基因条带1494bp,pTAT空质粒约3000bp,条带大小与质粒图谱一致。结论将大鼠XIAP基因成功插入pTAT-HA质粒,构建pTAT-XIAP融合蛋白表达载体,提取的质粒可用于下游分子生物学实验。

ERK与TrkB在大鼠星形胶质细胞的表达(英文)

本文探讨了ERK（extraccllular signal-regulated kinase）和TrkB（tyrosine kinase receptor B）在星形胶质细胞的表达。生后2～3d的SD大鼠在无菌条件下取脑，以胰蛋白酶消化制备细胞悬液。用GFAP免疫细胞化学方法鉴定星形细胞，通过免疫细胞化学与蛋白印迹方法检测TrkB，ERKI和ERK2在星形胶质细胞的表达。结果显示，星形胶质细胞的纯度达95％以上，在星形胶质细胞的细胞质观察到ERK1免疫阳性染色；TrkB免疫阳性染色位于细胞膜、细胞质和细胞核。化学发光法检测后ERK1和ERK2两条蛋白条带清晰可见。以卜结果提示大鼠大腑皮质星形胶质细胞表达TrkB，ERK和ERK2，TrKB／ERK通路可能与星形胶质细胞增殖有关。

大鼠坐骨神经移植的形态及电生理研究

目的:探讨异体坐骨神经移植后神经纤维再生。方法:大鼠38只,在手术显微镜下将右侧坐骨神经切除1cm,然后将1cm异体或自体右侧坐骨神经移植于神经缺损处。术后2、4、8、12周进行形态学观察及神经电生理学检查。结果:术后4周再生神经纤维通过近侧吻合口进入移植神经,术后8周通过远侧吻合口进入受体坐骨神经。术后12周异体组与自体组再生神经纤维髓鞘的厚度、轴索的形状及神经电生理功能无明显差异。结论:免疫排斥反应后溃变的异体移植神经可作为桥梁和支架,使再生的神经纤维通过移植神经到达靶组织,在一定的程度上恢复其功能。

局部解剖学实践教学模式改革与实践

我国高等教育法规定高等教育的任务是培养具有创新精神和实践能力的高级专门人才。长期以来,我国受传统教育思想的束缚,在教学中注重知识的传授,而忽视创新能力和实践技能的培养。实践教学是培养学生创新能力的重要途径。必须引导学生进行主动实践,这是创新能力培养的关键。

pTAT-HA质粒载体在受体菌DH5α中的转化及鉴定

目的探索pTAT-HA质粒在受体菌DH5α中转化的方法。方法配制LB培养基,将pTAT-HA质粒转化至DH5α,培养筛选成功转化子,电泳鉴定。结果pTAT-HA质粒转化菌可在Amp+LB培养基中生长,电泳结果显示质粒大小准确无误(约3000bp)。结论pTAT-HA质粒转化成功,转化菌可冷冻保存质粒,提取的质粒可用于下游分子生物学实验。

大鼠坐骨神经缺损的神经移植对脊神经节的P物质阳性神经元的影响

目的 :研究大鼠坐骨神经缺损的神经移植对脊神经节的 P物质阳性神经元的影响。方法 :SD大鼠 15只 ,切除右侧坐骨神经 1cm,在手术显微镜下将异体或自体右侧坐骨神经 1cm移植于神经缺损处。对照组只切除右侧坐骨神经 1cm,不进行神经移植。术后 12周取两侧脊神经节 ,冰冻切片 ,免疫细胞化学染色显示 P物质 (SP) ,对 SP阳性神经元进行图像分析。结果 :SP阳性神经元为中、小型细胞 ,分散于大的脊神经节细胞中。手术侧与自身对照侧及神经移植组与对照组术侧阳性细胞的直径无显著差异。对照组术侧 SP阳性神经元体积积分光密度 (VIOD)值明显低于自身对照侧 ,自体组术侧 VIOD值与自身对照侧无显著性差异 ,异体组术侧 VIOD值比自身对照侧稍低。结论 :结果表明神经移植修复坐骨神经缺损对脊神经节SP阳性神经元的形态恢复无明显影响 ,但对其功能恢复有一定作用。

大鼠肾上腺交感神经节前神经元定位——HRP法研究

本实验用HRP逆行追踪法对大鼠肾上腺交感神经节前神经元进行了定位研究,并对中间外侧核4个亚核的性质及其与脑干、下丘脑的联系进行了讨论。其结果如下:实验组11只大鼠都有标记细胞,对照组2只大鼠均无标记细胞。标记细胞位于注射侧T_1—L_1脊髓节段,主要位于中胸段,以T_(10)节段最多。标记细胞主要集中于中间外侧核本部,占细胞总数的85.12％。细胞体以梭形为主,成群或单个排列。延髓无标记细胞。