从母猪白细胞检出猪瘟病毒

本研究应用RT-PCR对广西不同地区的老母猪白细胞172份、猪流产胎儿与死胎162份、新生仔猪33份和120份健康猪扁桃体进行猪瘟病毒检测。检出母猪白细胞阳性2份、流产胎儿与死胎阳性12份,健康猪扁桃体阳性1份和新生仔猪阳性3份。对其中1份母猪白细胞阳性材料、1份健康猪扁桃体阳性材料和4份流产胎儿材料进行猪瘟病毒E2基因的测序分析。结果显示,来自母猪白细胞的GXXJB1与HCLV、Shi-men株的核苷酸同源性分别为96.9%和94.0%,推导的氨基酸同源性分别为95.9%和94.2%;与其他的广西毒株的核苷酸同源性为81.1%～99.5%,推导的氨基酸同源性为89.6%～99.2%。根据遗传进化树分析,样品GXXJB1属于基因Ⅰ群。

猪瘟单克隆抗体的制备及ACI-ELISA检测猪瘟病毒的研究

本研究用猪瘟石门毒(CSFV-Shimen)免疫BALB/C小鼠,按常规单克隆抗体(McAb)技术方法制作,最终获得4株McAb,分别命名为AC9、CF8、DG5和EC9,4株McAb与基因工程CSFV E2蛋白反应结果表明:AC9、CF8和EC9是抗CSFv E2蛋白的McAb。用AC9和CF8McAb对CSFV进行抗原捕获间接ELISA试验(ACI-ELISA),通过一元McAb和二元McAb CAI-ELISA试验的比较,结果表明AC9与CF8两种McAb有协同作用,其捕获CSFV的能力比一元McAb显著提高。方阵试验结果表明:McAb和血清多抗(PcAb)的最佳工作稀释度分别为1:400和1:200。特异性试验和敏感性试验结果显示本法特异性强,敏感性高。最后用ACI-ELISA与PCR对30份病料的检测结果比较,表明ACI-ELISA与PCR检测结果相符。上述结果说明本研究所获得AC9和CF8可用作猪瘟诊断试剂盒的研制,是检测CSFV的有效方法。

广西猪瘟流行毒株生长特性的初步研究

本实验以来自广西梧州、博白和北海地区的3株猪瘟野毒和中国标准石门株病毒、疫苗毒为材料,研究其在宿主体内和体外PK-15细胞中增殖的基本特性和差异。结果显示,广西的一部分毒株很可能在毒力和生长特性上已经发生了一些变异。本实验用免疫酶实验检测PK-15细胞中的猪瘟病毒抗原,发现其主要存在于细胞的核膜以及内质网和高尔基体富集的区域。