目的观察并比较不同离心条件制得的富血小板纤维蛋白(PRF)的生长因子释放水平及对成纤维细胞增殖、迁移的作用。方法采用心脏采血法获得SD大鼠全血,分别以708 g 12 min、208 g 14 min、208 g 8 min三种离心程序获得富白细胞PRF(L-PRF)...目的观察并比较不同离心条件制得的富血小板纤维蛋白(PRF)的生长因子释放水平及对成纤维细胞增殖、迁移的作用。方法采用心脏采血法获得SD大鼠全血,分别以708 g 12 min、208 g 14 min、208 g 8 min三种离心程序获得富白细胞PRF(L-PRF)、高级PRF(A-PRF)、高级PRF+(A-PRF+),压制得到PRF膜片后,置于DMEM/F12培养基中,分别于1 h、6 h、1 d、3 d、5 d后收集培养基,采用ELISA法检测培养基中的血小板衍生生长因子(PDGF-AB)、转化生长因子β(TGF-β)、血管内皮生长因子(VEGF)。取SD大鼠背部皮肤分离、培养获得皮肤成纤维细胞,将细胞分为L-PRF组、A-PRF组、A-PRF+组、空白组,分别以L-PRF、A-PRF、A-PRF+条件培养基和10%FBS培养基培养,采用CCK-8细胞增殖实验检测细胞增殖能力、Transwell小室实验检测细胞迁移能力。结果制备5 d内A-PRF、A-PRF+培养基的PDGF-AB、TGF-β、VEGF总释放水平高于L-PRF培养基(P均<0.05)。A-PRF+组、A-PRF组、L-PRF组培养3、5 d时细胞增殖能力均高于空白组,且培养3 d时A-PRF+组、A-PRF组细胞增殖能力高于L-PRF组(P均<0.05)。L-PRF组、A-PRF组、A-PRF+组穿膜细胞数高于空白组,且A-PRF组、A-PRF+组穿膜细胞数高于L-PRF组(P均<0.05)。结论通过降低相对离心力制备得到的A-PRF+和A-PRF的生长因子释放性能、促进成纤维细胞增殖和迁移作用明显强于L-PRF,且适当缩短离心时间得到的A-PRF+作用更强。展开更多