BISAP评分、白细胞介素-6、降钙素原与重症急性胰腺炎预后的相关性研究

目的 分析急性胰腺炎严重程度床边指数(BISAP)评分、白细胞介素-6(IL-6)、降钙素原(PCT)与重症急性胰腺炎(SAP)预后的相关性。方法 选取2020年1月-2023年9月我院收治的86例SAP患者,根据预后情况分为死亡组(27例)、生存组(59例)。所有患者入院后均予以胃肠减压、禁食、抗感染等对症治疗及预防并发症治疗,并检测患者入院时的BISAP评分、血清IL-6、PCT水平。比较生存组、死亡组的BISAP评分、IL-6及PCT水平,分析SAP患者预后不良的危险因素,采用Pearson直线相关分析IL-6、PCT水平及BISAP评分与SAP预后的相关性。结果 死亡组的BISAP评分、血清IL-6、PCT水平高于生存组(P<0.05)。经Logistic回归分析显示,BISAP评分及血清IL-6、PCT水平较高是SAP患者预后不良的危险因素(OR>1,P<0.05)。Pearson直线相关分析显示,BISAP评分及血清IL-6、PCT水平与SAP患者预后不良呈正相关(r>0,P<0.05)。结论 SAP患者的BISAP评分及血清IL-6、PCT水平较高与预后不良密切相关。

STAT3通路调控miR-223抑制NLRP3表达对脓毒症炎症反应的影响及作用机制

目的:探讨STAT3通路调控miR-223抑制NLRP3表达对脓毒症炎症反应的影响及作用机制。方法:50只SD大鼠随机分为对照组、模型组、miR-NC组、miR-223组和miR-223抑制剂组,每组10只。观察各组大鼠肝、肺组织病理形态;检测各组大鼠肝、肺组织miR-223表达、血清炎症细胞因子表达、肝、肺组织STAT3、NLRP3蛋白表达。结果:与对照组相比,其余各组大鼠肝、肺组织结构均被破坏,miR-223组较优于模型组。模型组大鼠肝、肺组织miR-223表达降低(P<0.05)。与对照组相比,其余各组TNF-α、IL-1β、IL-6水平升高,IL-10水平降低。与模型组相比,miR-223组、miR-NC组TNF-α、IL-1β、IL-6水平降低,IL-10水平升高(P<0.05)。与对照组相比,其余各组大鼠肝、肺组织STAT3蛋白表达降低,NLRP3蛋白表达升高(P<0.05),与模型组相比,miR-NC组、miR-223组、miR-233抑制剂组STAT3表达升高,NLRP3蛋白表达降低(P<0.05);与miR-233组相比,miR-233抑制剂组STAT3蛋白表达升高,NLRP3蛋白表达降低(P<0.05)。结论:STAT3通路调控miR-223抑制NLRP3信号通路抑制脓毒症大鼠炎症反应。

宏基因组学测序技术在成人医院获得性肺炎中的临床应用专家共识

医院获得性肺炎主要是指包括细菌、真菌、病毒、原虫及支/衣原体等病原体在入院48 h后引发的各类肺实质炎症。对于不明病原体感染的医院获得性肺炎,宏基因组测序技术能够检测几乎所有病原体核酸,所以该技术尤为适用于病原检测。宏基因测序技术实验流程操作略显繁琐,分析流程复杂,检测结果冗长,因此对实验室操作人员及解读人员的素质要求颇高,对相关的质量控制也需要标准化。简述了该技术在医院获得性肺炎中的应用及关键环节的质量控制。

基于TGF-β/Smad2/3信号通路探讨鸢尾素对哮喘气道重塑的实验研究

目的探究鸢尾素(Irisin)对TGF-β1诱导的肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的调控及机制。方法体外培养人胚肺成纤维细胞HFL-1,用10 ng/mL TGF-β1诱导HFL-1细胞,同时用不同浓度(25、50、100、200)ng/mL的irisin干预细胞24 h、48 h和72 h。利用CCK8试剂盒检测细胞增殖率。随后,将细胞分为空白对照组(NC组)、TGF-β1组(10 ng/mL)、TGF-β1+irisin组(10 ng/mL TGF-β1和100 ng/mL irisin)。采用细胞划痕实验检测不同组细胞的迁移能力。通过免疫荧光法检测不同处理组细胞α-SMA蛋白的表达情况。Western blot法检测不同处理组细胞α-SMA、胶原蛋白I(collagen I)、Smad2、p-Smad2、Smad3、p-Smad3的蛋白表达水平。结果与NC组相比,TGF-β1能有效促进HFL-1细胞的增殖和迁移(P<0.05);与TGF-β1组相比,加入irisin进行干预后能有效抑制TGF-β1诱导的HFL-1细胞的增殖和迁移(P<0.01)。与NC组相比,TGF-β1能有效促进HFL-1细胞α-SMA、collagen I、p-Smad2、p-Smad3的蛋白表达(P<0.05);与TGF-β1组相比,加入irisin进行干预后能有效抑制TGF-β1诱导的HFL-1细胞α-SMA、collagen I、p-Smad2、p-Smad3的蛋白表达(P<0.05)。结论Irisin能够抑制TGF-β1诱导的HFL-1细胞增殖、迁移及向肌成纤维细胞转化,其发挥作用的机制可能与TGF-β/Smad2/3信号通路有关。

miR-181c靶向己糖激酶2抑制癌相关成纤维细胞的糖酵解

目的探讨mi R-181c在癌相关成纤维细胞(CAFs)糖酵解中的作用和机制。方法用组织贴壁法分离原代肺腺癌病人肺组织CAF及肺正常成纤维细胞(NFs)。用LipofectamineTM2000转染mi R-181c mimics,mi R-181c inhibitor,si RNA-HK2和HK2-vecto等;Q-PCR检测mi R-181家族表达水平;Western blotting检测己糖激酶2(HK2)蛋白表达;2-NBDG法检测细胞葡萄糖摄取率;DRY-CHEM FCD3500仪器检测细胞上清中乳酸生成;双荧光素酶报告基因系统检测HK2 m RNA表达。结果在细胞形态上CAFs与NFs无明显区别。与NFs组相比,CAFs组葡萄糖摄取、乳酸生成和HK2蛋白表达明显增加,而mi R-181家族表达明显减少(P<0.05)。在NFs转染inhibitor-181c后,其HK2蛋白表达、葡萄糖摄取和乳酸生成明显增加(P<0.05);相反,CAFs转染了mimics-181c后,其HK2蛋白表达、葡萄糖摄取和乳酸生成明显减少(P<0.05)。并且在敲低HK2细胞的CAFs中,mimics-181c不能减少葡萄糖摄取和乳酸生成;而mimics-181c可以减少过表达HK2对NFs葡萄糖摄取和乳酸生成的增强作用。结论 mir-181c可以通过抑制HK2的蛋白表达来抑制CAFs的糖酵解。

齐墩果酸对体外培养的人气道平滑肌细胞氧化应激损伤的保护作用

目的:研究齐墩果酸(OA)对过氧化氢(H2O2)诱导的体外培养的人气道平滑肌细胞(ASMC)氧化应激损伤的保护作用。方法:以体外培养的ASMC为标本,以不同浓度的OA干预,经H2O2诱导损伤后,采用LIVE/DEAD染色、MTT实验、流式细胞仪、超氧化物歧化酶(SOD)测试盒分别检测实验及对照组细胞活性、细胞增殖、活性氧(ROS)的表达和SOD的活性。结果:加入20μmol/L的OA后,细胞的生长受到抑制;随着OA干预浓度的增加,死亡细胞逐渐减少;经OA预处理后,不同OA浓度组的ROS表达明显减低,SOD活性明显增加。结论:一定浓度的OA干预ASMC后,能抑制H2O2诱导的细胞增殖,对其诱导的氧化应激损伤有保护作用,OA可能具有干预哮喘气道炎症及气道重塑的作用。

重组腺病毒介导的绿色荧光蛋白基因转染体外培养的人气道平滑肌的实验研究

目的:研究重组腺病毒载体介导的绿色荧光蛋白基因转染体外培养的人气道平滑肌(HASMCs)的方法。方法:用组织贴块原代培养传代至3～8代的HASMCs,重组绿色荧光蛋白基因的腺病毒载体(Ad-GFP)以不同的感染复数(multiplicity of infection,MOI)转染,荧光显微镜和流式细胞术检测其转染效率,CCK-8法检测其对细胞的毒性。结果:随着MOI增高,转染效率增高。MOI=100时Ad-GFP对HASMCs的感染效率可达(96±0.32)%,以感染后48h达高峰,持续7d仍有绿色荧光表达;转染后的细胞与未转染细胞相比,细胞毒性无统计学差异(P>0.05)。结论:重组腺病毒载体介导的绿色荧光蛋白基因Ad-GFP能高效转染HASMCs,转染后对细胞无毒性,是一种安全的基因载体。

肿瘤抑制基因PTEN对人气道平滑肌细胞迁移和增殖的影响

目的观察肿瘤抑制基因PTEN对人气道平滑肌细胞(HASMCs)迁移和增殖的影响机制。方法用重组PTEN腺病毒转染体外培养的HASMCs(Ad-PTEN组),并与携带绿色荧光蛋白(GFP)的腺病毒空载体(Ad-GFP组)和空白对照(MOCK)组对比,采用MTS测定细胞增殖、Transwell法观察细胞迁移、共聚焦显微镜观测细胞骨架的变化、免疫印迹法检测PTEN、p-Akt、Akt、p-FAK、FAK蛋白的表达。结果 Ad-PTEN组的吸光度(A)值和每单位面积迁移的细胞数显著低于Ad-GFP及MOCK组(均P<0.05),Ad-GFP和MOCK两对照组间差异无统计学意义(P>0.05),提示过表达PTEN基因能抑制HASMCs的增殖和迁移的作用。Ad-PTEN组细胞轮廓变细,伪足及应力纤维明显变少,而Ad-GFP、MOCK组细胞有少量短而细的应力纤维,很少丝状伪足形成。与AdGFP及MOCK组比较,Ad-PTEN组p-Akt表达水平和FAK蛋白的磷酸化水平显著下调(均P<0.05),Ad-GFP及MOCK两对照组间差异无统计学意义(P>0.05),说明过表达PTEN能下调Akt蛋白和FAK蛋白的磷酸化水平。结论过表达PTEN可能通过下调p-Akt及p-FAK的表达,抑制HASMCs的增殖和迁移,参与哮喘气道重塑的调控。

长春瑞滨联合顺铂治疗晚期非小细胞肺癌疗效观察

目的：观察长春瑞滨联合顺铂（NP方案）治疗晚期非小细胞肺癌（NSCLC）的疗效及毒副作用。方法：42例经病理或细胞学诊断为非小细胞肺癌患者，其中腺癌4例，鳞癌38例。TNM分期Ⅲ期23例，Ⅳ期19例。所有病例均为初治。采用国产长春瑞滨25mg／m^2，第1、8天静滴；顺铂（DDP）30mg／m^2第1～3天静滴，28d为一个周期。治疗至少2个周期后进行疗效和毒性反应评价。结果：完全缓解（CR）3例，部分缓解（PR）15例，稳定（SD）16例，进展（PD）8例，总有效率（CR＋PR）为42．9％。主要毒副反应为白细胞减少及胃肠道反应，其Ⅲ、Ⅳ度白细胞下降占11．9％，呕吐发生率为54．7％。结论：长春瑞滨联合顺铂（NP方案）治疗晚期NSCLC疗效确切，毒副反应可耐受。

重组MIF腺病毒载体的构建、包装与纯化及其意义

目的采用分子生物学技术构建人巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)基因腺病毒表达载体,检测AD-MIF腺病毒转染人气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cell,ASMC)后蛋白表达。方法用凝胶电泳、测序、Western blotting等方法鉴定MIF质粒。用PCR技术扩增MIF基因,构建MIF-EGFP基因载体,重组到p Ad腺病毒,转染HEK293细胞后扩增病毒,经3轮扩增后病毒达到合适的滴度,Western blotting检测到腺病毒感染的气道平滑肌细胞内MIF蛋白表达明显增高。结果凝胶电泳、测序和Western blotting检测MIF基因分子量、序列以及蛋白表达正确,并且成功构建MIF腺病毒,病毒浓度达2E+9PFU/ml。结论成功构建MIF腺病毒,为MIF基因治疗支气管哮喘提供了实验基础。

长春瑞滨联合顺铂治疗晚期非小细胞肺癌疗效观察

目的:观察长春瑞滨(盖诺)联合顺铂(NP方案)治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效及毒副作用。方法:42例经病理或细胞学诊断为非小细胞肺癌患者,采用国产长春瑞滨25mg/m2,第1、8天静滴;顺铂(DDP)60～80mg/m2,第1～3天静滴,28d为1个周期。结果:CR3例,PR15例,SD16例,PD8例,总有效率(CR+PR)为42.9%。主要毒副反应为白细胞减少及胃肠反应。结论:长春瑞滨联合顺铂治疗晚期NSCLC疗效确切,毒副反应可耐受。

支气管哮喘患者外周血、痰液中IL-33的含量及其相关性分析

目的检测支气管哮喘患者外周血和痰液中IL-33的含量,探讨其含量与患者症状、肺功能、血液和痰液中嗜酸性粒细胞数的关系。方法 ELISA法检测80例支气管哮喘患者及20例正常对照者外周血中IL-33的含量,对哮喘患者行24 h症状评分和肺功能测试,依据FEV1将支气管哮喘患者分为3组:FEV1≥80%为轻度哮喘组,60%≤FEV1<80%为中度哮喘组,FEV1<60%为重度哮喘组,并记录哮喘患者外周血中嗜酸性粒细胞数。ELISA法检测18例哮喘患者和8例正常对照者痰液中IL-33的含量,显微镜下计数其痰液中的嗜酸性粒细胞数。结果外周血IL-33水平在正常对照组和轻度哮喘组之间无明显差异[(26.62±3.04)pg/ml vs(30.26±5.23)pg/ml,P>0.05],但中、重度哮喘组的IL-33的水平要明显高正常对照组[(41.36±11.82)pg/ml vs(26.62±3.04)pg/ml,(84.10±20.17)pg/ml vs(26.62±3.04)pg/ml,P<0.05],且与患者夜间症状评分呈正相关(r=0.317,P<0.05),而与白天症状评分和外周血嗜酸性粒细胞数无明显相关(r=0.173,P>0.05,r=0.082,P>0.05),与患者FEV1和PEF均呈明显的负相关(r=-0.638,P<0.05;r=-0.552,P<0.05)。支气管哮喘患者诱导痰中IL-33的含量与痰液中嗜酸性粒细胞数目呈正相关(r=0.693,P<0.05)。结论血液中的IL-33可作为一种评价哮喘患者肺功能下降程度的指标,是哮喘患者病情恶化的促进因子。IL-33水平增高可能是诱导哮喘患者气道嗜酸性粒细胞浸润的原因之一。

尿NGAL、KIM-1、L-FABP水平在脓毒症急性肾损伤早期诊断中的临床意义

目的探讨尿NGAL、KIM-1、L-FABP水平在脓毒症急性肾损伤(AKI)早期诊断中的临床意义。方法前瞻性的收集综合ICU的脓毒症患者91例,其中38例合并AKI,通过检测患者尿NGAL、KIM-1、LFABP水平及血肌酐及尿素氮水平变化,对尿NGAL、KIM-1、L-FABP水平与血肌酐及尿素氮进行相关性分析,通过绘制受试者工作特征曲线(ROC),计算尿NGAL、KIM-1、L-FABP水平在早期诊断脓毒症合并AKI中的敏感性及特异性。结果观察组患者与对照组相比,尿NGAL、L-FABP水平在诊断前48 h即出现显著升高(P<0.05),尿KIM-1水平在在诊断前24 h即出现显著升高(P<0.05);尿NGAL、KIM-1、L-FABP水平与血肌酐、尿素氮呈正相关性;ROC曲线分析发现,诊断前24h,尿NGAL、L-FABP水平在诊断脓毒症合并AKI时具有较高的敏感性及特异性,诊断前0 h,尿KIM-1水平在诊断脓毒症合并AKI时具有较高的敏感性及特异性。结论尿NGAL、KIM-1、L-FABP水平均在脓毒症早期出现显著升高,可以作为脓毒症AKI早期诊断的指标。

ICU患者连续性肾脏替代治疗参数核查表的设计与应用

目的:设计ICU患者连续性肾脏替代(CRRT)治疗参数核查表并应用于临床。方法:通过查阅指南和文献,结合科室情况,设计ICU患者CRRT治疗参数核查表,将核查表应用于CRRT治疗参数的设定、调整和交接中,对比核查表使用前后护理操作和医务人员沟通情况。结果:ICU患者CRRT治疗参数核查表使护士上机时间缩短、参数执行准确率提高,医务人员间对CRRT治疗参数执行过程中沟通的满意度提高,此外不同时间段医务人员使用核查表的意愿提高。结论:将ICU患者CRRT治疗参数核查表应用于CRRT治疗参数的设定、调整和交接中,有利于规范CRRT治疗流程,提高护士工作效率和护理工作质量,有利于医务人员对CRRT治疗参数进行交接和核对,促进医务人员团结,保障患者安全。

IL-22对人气道细胞的作用

目的探讨IL-22对人气道上皮细胞、气道平滑肌细胞、气道成纤维细胞的生理学作用。方法用实时定量PCR检测气道上皮细胞、气道平滑肌细胞、气道成纤维细胞哮喘血清刺激前后IL-22R1 mRNA表达的变化。不同浓度的IL-22(10 ng/ml,100 ng/ml,1 000 ng/ml)刺激气道上皮细胞、气道平滑肌细胞和气道成纤维细胞后,用MTT法检测细胞的增殖,用流式细胞技术(FACS)检测细胞的凋亡和坏死。结果哮喘血清刺激后气道上皮细胞IL-22R1 mRNA表达降至正常对照组的9%,气道平滑肌细胞IL-22R1 mRNA表达升高至正常对照组的345倍,而气道成纤维细胞IL-22R1 mRNA表达无明显变化。高剂量(1 000 ng/ml)的IL-22刺激气道上皮细胞和气道成纤维细胞12、24 h可显著降低细胞增殖(P<0.05,P<0.01)。三种不同浓度的IL-22刺激气道上皮细胞24 h后均导致细胞凋亡显著下降(P<0.05),低浓度的IL-22(10 ng/ml)导致细胞坏死增加(P<0.01)。不同浓度的IL-22刺激气道平滑肌细胞后,细胞凋亡和坏死无显著性变化。中、高浓度IL-22(100 ng/ml,1 000 ng/ml)刺激气道成纤维细胞后,细胞坏死率显著下降(P<0.05)。结论 IL-22在支气管哮喘中对气道上皮的作用具有双重性,并与支气管哮喘的病程相关;而对气道平滑肌细胞的作用则可能与浓度及病程相关。支气管哮喘后续阶段,IL-22对气道成纤维细胞作用轻微。

经纤维支气管镜介入治疗呼吸系统疾病

近10年来，随着介入性肺病学在呼吸内科领域的发展，作为介入性肺病学的一个重要组成部分——经纤维支气管镜（纤支镜）的介入治疗已经成为呼吸系统疾病诊断和治疗的重要手段。本文将经纤支镜介入治疗呼吸系统疾病综述如下。

多目标联合超声在老年危重患者急性呼吸困难病因诊断中的应用

目的探讨肺-心-下腔静脉-下肢深静脉(LCIDV)多目标联合超声在老年危重患者急性呼吸困难的病因诊断中的应用价值。方法选因急性呼吸困难入住南昌大学第二附属医院重症医学科、年龄≥65岁的呼吸衰竭患者,在常规诊疗的同时应用LCIDV多目标联合超声初步判断病因,记录初步诊断时间、初始诊断准确率、对主要病因诊断的准确率。结果220例患者纳入本研究,平均年龄(75±7)岁,LCIDV多目标联合超声对病因的初步诊断时间(18±3)min,初始诊断准确率92.9%。对急性呼吸窘迫综合征诊断的敏感性88.2%、特异性98.5%,心源性肺水肿的敏感性94.4%、特异性93.2%,肺炎的敏感性91.6%、特异性92.9%,慢性阻塞性肺疾病的敏感性95.0%、特异性100%,胸腔积液的敏感性100%、特异性99.5%。结论对因急性呼吸困难入住ICU的老年呼吸衰竭患者,LCIDV多目标联合超声对病因的初步诊断所需时间较短,诊断准确率高,值得临床推广。

巨噬细胞迁移抑制因子通过活性氧介导的有氧糖酵解促进肺纤维化

目的探讨巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)在肺纤维发生发展的作用和机制。方法 20只小鼠被随机分为对照组和肺纤维化模型组,其中模型组气管内滴入博来霉素,30 d后检测肺组织中MIF的水平。用重组人MIF(rMIF)刺激人胚肺成纤维细胞(HLF)细胞,观察活性氧、有氧糖酵解和胶原生成的水平;用活性氧抑制剂、有氧糖酵解抑制剂后,观察rMIF对胶原生成的影响。结果小鼠肺纤维化肺组织和肺泡灌洗液中MIF水平较对照组显著升高(P<0.05)。rMIF可诱导活性氧、有氧糖酵解和胶原增加,并随着rMIF的浓度升高而增加(P<0.05)。抑制活性氧后,可抑制rMIF和过氧化氢诱导的有氧糖酵解和胶原增加;抑制有氧糖酵解后,可减少rMIF和活性氧诱导的胶原增加(P<0.05)。结论 rMIF参与肺纤维发生发展,其机制可能是通过活性氧上调成纤维细胞有氧糖酵解,促进胶原生成。

不同维持剂量右美托咪啶对机械通气患者心率和血压的影响

目的观察不同维持剂量右旋美托咪啶（DEX）对机械通气患者心率和血压的影响。方法机桷酽夺铝跨鞘啪患者，静脉；生射DEX负荷量1．0μg·kg^-1，之后随机分为三组，A组以（0．2～0．7）μg·kg^-1·h^-1。持续静脉泵人，B组以（0．7—1．2）μg·kg^-1·h^-1。持续静脉泵入，C组以（1．2～1．7）μg·kg^-1·h^-1。持续静脉泵入，观察镇静前、镇静后30min的心率（HR）、平均动脉压（MAP）的变化情况。结果A、B、C三组镇静后，HR较镇静前均有下降，差异有显著性，P〈0．05；MAP较镇静前虽有下降，差异无显著性，P〉0．05。结论增加DEX的维持剂量对患者循环功能无显著性影响。

致休克的无痛性主动脉夹层1例

主动脉夹层是心血管疾病的灾难性危重急症,死亡率高,近年来国内病例数有明显增加趋势。如不处理,2d内死亡率可高达50%,7d内60%-70%甚至91%死亡[1]。我们遇见1例,现报告如下：1病例报告患者,男,53岁。因突发头胀痛伴胸闷7h入院。患者无明显诱因突发头胀痛及肢体活动障碍,急至当地县医院行颅脑CT未见异常,急转至我院,过程中出现胸闷症状,程度中等,伴有低热,无咳嗽、咳痰、咯血,无胸腹痛、放射痛。