从“虚瘀劫肝”论原发性肝癌中医药防治思路

理论创新是中医药发展的源泉,在新理论指导下形成的新方药或新诊治方案是中医药临床防治重大疑难疾病的新突破口。正邪交争,正不胜邪是慢性疾病持续进展的内在驱力和一般特性,慢性肝病持续恶性进展囊括了:肝纤维、肝硬化、肝癌等逐步恶化的病理进程。其在遵循中医“正不胜邪”基本病机的基础也必须有其特殊性和指向性,也可理解为在慢性肝病持续进展的病理状态下将一般性的病机进行指向性和特征性的阐发。肝正虚主要是指维持正常肝再生修复的相关机制和途径异常或紊乱,肝邪胜则是指肝损伤因素持续存在及其下游触发的恶性肝再生状态进行性亢进;而“瘀”作为正邪交争过程中产生的最主要病理产物也在不断推动疾病的恶性发展。在此基础上,从“虚瘀劫肝”论肝癌的病理新认识及补虚(补肾生髓、健脾)祛瘀(疏肝、柔肝、化肝)阻断慢性肝病持续恶性进展以防治肝癌的基本思路,期望有益于疑难肝脏病症的临床防治。

基于PI3K/AKT/mTOR信号通路探讨大黄煎剂对轻微型肝性脑病大鼠脑组织炎症损伤的保护机制

目的 探讨大黄煎剂保留灌肠对轻微型肝性脑病(MHE)大鼠模型脑组织炎症损伤的改善作用及可能机制。方法 60只SD雄性大鼠按完全随机方法分为空白组(CON组,n=6)和慢性肝硬化造模组(n=54)。12周后慢性肝硬化造模成功并经Morris水迷宫测试确认符合MHE模型大鼠40只,采用完全随机方法分为模型组(MOD组,n=8)、乳果糖组(LT组,n=8)、大黄煎剂低剂量组(RD1组,n=8)、大黄煎剂中剂量组(RD2组,n=8)和大黄煎剂高剂量组(RD3组,n=8)。其中CON组和MOD组大鼠用生理盐水保留灌肠,2 mL/只,1次/d;LT组大鼠用乳果糖按22.5%剂量保留灌肠,2 mL/只,1次/d;RD1组、RD2组、RD3组大鼠分别用大黄煎剂按2.5、5.0、7.5 g/kg三种剂量保留灌肠,2 mL/只,1次/d。所有大鼠治疗10 d后,进行Morris水迷宫测试,分析大鼠的空间学习记忆能力。分析大鼠行为学状态;检测大鼠血清ALT、AST、IL-1β、IL-6、TNF-α和血氨水平;观察大鼠肝组织和脑组织病理学变化;检测大鼠脑组织磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的mRNA和蛋白表达水平。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 与MOD组比较,RD1组、RD2组和RD3组大鼠逃避潜伏期时间显著缩短(P值均<0.01),ALT、AST、IL-1β、IL-6、TNF-α和血氨水平明显降低(P值均<0.05),肝细胞、脑细胞变性、坏死和炎症程度减轻,脑组织PI3K、AKT、mTOR的mRNA和蛋白表达水平均降低(P值均<0.05),且RD3组治疗效果优于RD1组和RD2组。结论 大黄煎剂保留灌肠能够改善MHE大鼠认知功能及脑组织炎症损伤,其作用机制可能与调控PI3K/AKT/mTOR信号通路有关。

纤支镜替代胸腔镜对诊断原因不明胸水的护理配合

胸腔积液（胸水）系呼吸内科常见病,有相当部分病因诊断不明。本文旨在探讨应用纤维支气管镜（纤支镜）代替胸腔镜检查对胸水病因的护理配合。本科于2010年6月-2012年6月对40例诊断不明的胸腔积液采用纤支镜代替胸腔镜检查和治疗,取得满意效果,现将护理体会报告如下。1资料与方法1.1一般资料本组40例患者中,左侧胸腔积液17例,右侧23例。男28例,女12例,年龄17～75岁,

基于“湿毒瘀”病机理论探讨细胞焦亡在肝衰竭免疫炎症发病机制中的作用

肝衰竭(Liver Failure,LF)是临床急危重症之一,病死率高,严重危胁我国人民的健康,是目前亟待解决的医学难题。细胞焦亡是炎性小体介导的细胞程序性坏死,炎性小体激活半胱氨酸蛋白1(caspase-1)诱导肝细胞焦亡,释放大量促炎因子导致LF,其中炎症因子在LF发病中起重要作用。中医核心病机为“湿、毒、瘀”,细胞焦亡过程产生的炎性介质可视为中医“湿、毒、瘀”的微观体现。本文通过“湿毒瘀”病机理论探讨细胞焦亡在LF免疫炎症损伤中的作用,以期为中西医结合防治LF提供科学的理论依据和新思路。

长链非编码RNA癌症易感候选因子19在肿瘤中的研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)与恶性肿瘤已成为目前lncRNA研究领域最活跃的模块之一。癌症易感候选因子19(CASC19)是一种新发现的lncRNA,在多种肿瘤中发挥重要的调控作用,包括细胞增殖、迁移和侵袭以及细胞辐射耐受、疾病预后等。较高的CASC19水平与疾病的进展、预后及疗效等密切相关,可能是多种肿瘤的可靠生物标志物和潜在治疗靶点。因此,深入研究CASC19在不同肿瘤中的作用机制,可以为疾病的治疗提供新思路。

多酶共固新技术研究及应用

综述了酶与酶的共固定化，酶与微物细胞的共固定化及其在工业上和传感器方面的新应用。

典型病例结合PBL教学法在肝病科临床实习生教学中的应用以及体会

根据广西中医药大学第一附属医院开展PBL教学法的成果,总结自身多年的带教经验,运用典型病例结合PBL教学法进行带教,不断提高自身教学水平,激发学生的学习热情,鼓励学生进行理论联系临床问题独立思考以及自主学习,提高临床思维,培养学生独立解决问题能力,强化专业技能,重视医德医风,提高教学质量。

猪IGF-I基因SNP位点与生长性能的相关分析

【目的】分析猪胰岛素样生长因子I(IGF-I)基因SNP位点与生长性能的相关性,为后期猪的品种选育提供理论依据。【方法】采用PCR-RFLP对长白猪、环江香猪、广西巴马小型猪及长×巴F1代、F2代杂交猪的IGF-I基因SNP位点(rs322131043)进行分型,统计不同猪种该位点的基因型频率和等位基因频率,并分析长×巴F2代杂交猪的基因型频率与其生长性能的相关性。【结果】IGF-I基因SNP位点在广西巴马小型猪中以AA型为优势基因型,长白猪中以GG为优势基因型,其中A基因频率在广西巴马小型猪、环江香猪、长白猪3个品种中依次降低。不同基因型的长×巴F2代杂交猪中,基因杂合(AG)型猪的体重、体长、胸围、体高平均值在各日龄基本上都比基因纯合(AA/GG)型的低。【结论】猪IGF-I基因SNP位点与其生长性能密切相关,但该位点是否可应用于品种选育仍需进一步验证。

Wnt信号通路与肝再生的关系及其在肝脏疾病中的作用

Wnt信号通路在维持肝脏内稳态和肝脏再生过程中扮演重要角色,在成熟的健康肝脏中,Wnt信号通路大多是不活跃的,但在细胞更新或再生过程中,以及在某些病理条件、疾病、癌前状态和癌症中,Wnt信号通路被持续过度激活。持续的肝细胞损伤常常会导致慢性肝病,如肝纤维化、肝硬化及肝癌等。本文概述了Wnt信号通路的基本结构特点,详细分析了其在多种肝脏疾病病理进展所扮演的重要角色,希望为临床防治肝脏疾病提供新思路。

中西医结合防治HBV相关性肝衰竭的研究进展

慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染是一个重大的全球性健康问题。研究慢性乙型肝炎（CHB）的自然史，发现（CHB）发生自发性急性加重发生率高，有学者统计累积发病率每年10％～30％”。0。近年数据显示，每年约有30％的慢性HBV感染的10％患者会出现自发性疾病进展至HBV相关慢加急性肝衰竭（ACLF-HBV）。

大黄赤芍注射液对急性肝衰竭大鼠治疗作用及机制探讨

目的观察大黄赤芍注射液对肝衰竭大鼠炎症因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)]及抑制肝细胞凋亡因子[C-X3-C趋化因子配体1(CX3CL1)、B细胞淋巴瘤/白血病基因-2(BCL-2)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)]表达变化的影响。方法将2月龄大鼠随机分为空白组,造模阳性对照组,大黄赤芍注射液低、中、高剂量组及促肝细胞生长素组。除空白组外,其余各组采用D-氨基半乳糖(D-Gal)800 mg/kg,脂多糖(LPS)8μg/kg腹腔注射,制造急性肝衰竭模型。造模前3 d至实验结束大黄赤芍注射液低、中、高剂量组分别以大黄赤芍注射液低、中、高剂量[0.25、0.5、0.75 mL/(100 g·d)]尾静脉注射给药(1次/d);空白组及造模阳性对照组均予0.9%氯化钠注射液1 mL/(100 g·d);促肝细胞生长素组参照文献给予促肝细胞生长素10 mL/(kg·d)。造模48 h后处死大鼠取肝组织病理标本,HE染色后在光镜下观察肝组织的病理改变,采用qPCR、Western Blot技术验证不同组间的TNF-α、IL-6、CX3CL1、BCL-2、CyclinD1是否存在表达差异。结果药物干预组可缓解肝组织病理损伤,同时降低了TNF-α、IL-6表达量,提高了CX3CL1、BCL-2、CyclinD1表达量,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论大黄赤芍注射液对肝衰竭的疗效作用机制可能与减轻炎性反应、抗肝细胞凋亡、促进肝细胞再生相关。

黄芪甲苷抑制缺氧复氧心肌细胞损伤的机制

目的探讨黄芪甲苷(AS-Ⅳ)通过微小RNA-21(miR-21)靶向调控PTEN抑制缺氧/复氧(H/R)心肌细胞损伤的机制。方法体外培养大鼠心肌细胞(H9c2细胞),建立心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,利用慢病毒表达系统,在H9c2心肌细胞内过表达或干扰微小RNA-21(miR-21 mimic or miR-21 inhibitor),将细胞分为6个组:正常对照组、模型对照组(H/R)、H/R+miR-21 mimic组、H/R+miR-21 inhibitor组、H/R+miR-21 mimic+AS-Ⅳ组、H/R+miR-21 inhibitor+AS-Ⅳ组。除正常对照组外,其余各组置于三气培养箱中(1%O_(2)、94%N_(2)、5%CO_(2))孵育12 h缺氧处理后置于常规培养箱中培养复氧处理,H/R+miR-21 mimic+AS-Ⅳ组、H/R+miR-21 inhibitor+AS-Ⅳ组,造模同时,分别加入200μmol·L^(-1)的AS-Ⅳ作用于细胞72 h。用流式细胞技术检测细胞凋亡、实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-21和PTEN的表达,免疫荧光检测Bcl-2蛋白的表达,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测Caspase-3和Cyt-C的表达。结果与模型对照组比较,正常对照组、miR-21 mimic组miR-21的表达量增加,凋亡百分率、PTEN表达量明显降低、Caspase-3和Cyt-C的表达降低,Bcl-2的表达量降低(P<0.05或P<0.01);与miR-21 mimic组比较,H/R+miR-21 mimic+AS-Ⅳ组miR-21的表达量增加,凋亡百分率、PTEN表达量明显降低、Bcl-2的表达量、Caspase-3和Cyt-C的表达降低;与miR-21 inhibitor组比较,H/R+miR-21 inhibitor+AS-Ⅳ组miR-21的表达量增加,凋亡百分率、PTEN表达量明显减少,Caspase-3和Cyt-C的表达降低(P<0.05或P<0.01)。结论黄芪甲苷可保护损伤心肌细胞,其机制可能是上调miR-21的表达靶向调控PTEN,减少Caspase-3、Bcl-2、Cyt-C的释放,抑制心肌细胞凋亡,减少心肌细胞损伤。

强精煎介导PI3K/Akt/mTOR通路调控少精子症大鼠精子发生的实验研究

目的:探索强精煎通过介导PI3K/Akt/mTOR通路及其下游靶因子4EBP1、p70S6K,调控环磷酰胺(CTX)诱导的少精子症模型大鼠精子发生的作用机制。方法:将75只SD雄性大鼠随机分为空白对照组、模型组、mTOR通路抑制剂组(雷帕霉素组)、强精煎+雷帕霉素组和强精煎组,每组15只。采用腹腔注射CTX法诱导少精子症大鼠模型。连续药物干预38 d后,剪开各组大鼠腹腔摘取睾丸,采用免疫组化法检测PI3K/Akt/mTOR通路蛋白及其下游通路蛋白(4EBP1、p70S6 K)、细胞增殖标记蛋白Ki-67表达;采用RT-PCT法检测睾丸组织PI3K/Akt/mTOR基因及其下游靶基因(4EBP1、p70S6K)表达。结果:与空白对照组比较,模型组、雷帕霉素组睾丸组织PI3K、Akt、mTOR、4EBP1、p70S6 K、Ki-67蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),雷帕霉素组降低尤为明显。与模型组、雷帕霉素组相比,强精煎组睾丸组织PI3K、Akt、mTOR、4EBP1、p70S6K、Ki-67蛋白表达水平明显上调(P<0.05)。与空白对照组比较,模型组、雷帕霉素组睾丸组织PI3K、Akt、mTOR、4EBP1、p70S6K基因表达水平均显著降低(P<0.05)。强精煎组睾丸组织PI3K、Akt、mTOR、4EBP1、p70S6K基因表达水平明显上调(P<0.05)。结论:强精煎可能通过激活PI3K/Akt//mTOR/4EBP1/p70S6K蛋白/基因表达、激活Ki-67蛋白表达等多途径调控少精子症大鼠生精细胞的增殖,促进精子发生,提高精子数量。

中医药防治慢性乙型肝炎的研究进展

参考5年来中医药防治慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)的相关文献,了解中医药治疗CHB的临床疗效观察成果,对CHB的病因病机、辩证分型进行归纳,从阐述中西医结合抗病毒方案、专方经验研究、单方随症加减应用、中成药制剂推广治疗CHB的研究中了解治疗进展。

乙型肝炎重症化患者的中医体质及免疫学指标研究进展

从中医体质分类标准及影响体质分布的因素、乙型肝炎发生发展的机制、中医体质与免疫指标的相关性几方面进行综述,认为慢性乙型肝炎重症化患者中医体质分布受多种因素影响,慢性乙型肝炎重症化患者疾病发生、发展及演变主要是宿主、病毒作用的结果,且CD4^+、CD8^+水平在各中医体质类型中有明显差异。

基于JAK2/STAT3信号通路探讨温肺扶阳祛痰方对COPD大鼠气道炎症的作用机制

目的探讨温肺扶阳祛痰方通过JAK2/STAT3信号对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠的治疗作用及其机制研究。方法应用烟雾吸入联合气管内滴注LPS灌肺建立COPD大鼠模型,造模成功后将大鼠随机分COPD模型组,温肺扶阳祛痰方组(中药组)和盐酸氨溴索缓释胶囊组(西药组)。造模第5周开始连续2周予温肺扶阳祛痰方最佳给药剂量为12.6 g/(kg·d),盐酸氨溴索缓释胶囊10.4 mg/(kg·d)干预模型。造模、干预过程中观察大鼠死亡率、体质量及阳气虚症状变化;采用HE染色法比较各组大鼠肺组织的病理改变,qPCR、ELISA、Western Blot检测肺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、JAK2、STAT3的mRNA、蛋白表达。结果随疾病进展,与正常组、西药组、中药组相比较,COPD模型组死亡率增加,体质量下降,症状加重,病理切片可见支气管管腔、上皮及肺泡结构变形,上皮细胞明显脱落,肺泡壁变薄,黏膜下可见大量炎性细胞浸润。JAK2/STAT3信号通路中TNF-α、IL-6、JAK2、STAT3的mRNA和蛋白表达水平在COPD疾病模型中明显升高,与正常组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。温肺扶阳祛痰方、盐酸氨溴索缓释胶囊分别干预COPD大鼠,与模型组相比,中药组、西药组大鼠肺组织中的TNF-α、IL-6表达下降,进一步抑制JAK2活化,降低STAT3的mRNA表达(P<0.05)。结论温肺扶阳祛痰方通过抑制JAK2/STAT3通路促进排痰减少气道黏液滞留改善COPD炎症反应维持疾病稳定。

中医辨证论治肝性脑病研究进展

肝性脑病(HE)是严重肝病发病后期常见的严重并发症之一,其发病机理主要变现为氨代谢异常。临床表现以意识障碍、行为异常及昏迷为主。中医认为本病可归属于“肝厥”“昏厥”,其主要病因为湿、热、痰、瘀、毒、虚、风,发病机制为肝病日久,正气不足,湿、痰、瘀、热诸邪相互胶着,气机郁滞,日久化火生风,上扰清窍,元神失灵所致。病属本虚标实。本病发病前期以实证多见,中后期多为虚实夹杂。肝-肠-脑轴理论是HE病机分析的新理论,其认为HE的发病病位在肝、肠、脑。临床上应用肝肠轴理论认识治疗肝性脑病取得了非常好的疗效。文章从HE的病因病机、证候分型及治疗等方面阐述了中医学者对肝性脑病的认识,以便更好地运用中医药对其进行防治。

胆汁酸-法尼醇核受体R-肠道微生态轴在肝衰竭发生及肝再生中的作用机制

肝衰竭是常见的内科危重症,短时间内肝细胞大面积坏死而超过肝细胞再生能力导致该病病死率极高,促进有效肝再生是拮抗肝衰竭的关键。近年来发现胆汁酸、法尼醇核受体R、肠道微生态在肝衰竭和肝再生机制中发挥重要作用。现就胆汁酸、法尼醇核受体R、肠道微生态三者之间的相关性,及三者对肝衰竭和肝再生机制的作用方面进行综述,为临床肝衰竭的治疗提供新思路。

白花丹醌对人结肠腺癌Caco-2细胞凋亡、自噬及PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响

目的:探讨白花丹醌是否诱导人结肠腺癌Caco-2细胞凋亡和自噬及其对磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB/Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响。方法:体外培养Caco-2细胞,分别加入2.5、5、7.5、10、12.5和15μmol/L的白花丹醌作用12、24和36 h后,采用MTT比色法检测细胞活力的变化;将细胞分为对照组和白花丹醌处理组(处理浓度分别为5、10和15μmol/L),采用annexin V-FITC/PI双染及流式细胞术检测细胞凋亡情况;将微管相关蛋白1轻链3(LC3)双荧光标记腺病毒感染细胞后,观察白花丹醌对细胞自噬流的影响;使用间接免疫荧光法检测细胞内LC3的表达情况;透射电镜观察细胞及自噬体的形态;RT-qPCR和Western blot检测mTOR、PI3K和Akt以及细胞凋亡和自噬相关蛋白Bcl-2、cleaved caspase-3、剪切的多腺苷二磷酸核糖聚合酶1(cleaved PARP1)、LC3-Ⅱ/Ⅰ、beclin-1和p62的表达水平。结果:白花丹醌对Caco-2细胞活力有显著抑制作用(P<0.05);流式细胞术结果显示,处理组细胞凋亡率显著上升(P<0.05);荧光检测结果显示,细胞自噬流和LC3-Ⅱ表达水平升高;电镜下细胞呈典型的凋亡样形态,细胞质出现自噬体;RT-qPCR和Western blot检测结果显示白花丹醌可显著下调PI3K、Akt及mTOR的mRNA及蛋白表达水平(P<0.05),同时细胞内BECN1和Map1lc3b mRNA及cleaved caspase-3、cleaved PARP1、beclin-1、p62和LC3-Ⅱ蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论:白花丹醌可抑制结肠癌细胞活力,并诱导细胞凋亡与自噬,其机制可能与下调PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。