红景天苷联合顺铂对人胃癌HGC-27细胞生物学功能的抑制研究

目的:探讨红景天苷联合顺铂通过磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路对人胃癌HGC-27细胞的生物学功能的抑制作用及其机制。方法:选取人胃癌细胞株HGC-27,随机分为空白组、红景天苷组(40μmol/L红景天苷)、顺铂组(10μmol/L顺铂)、联合组(40μmol/L红景天苷+10μmol/L顺铂)。采用四甲基噻唑蓝(MTT)实验检测细胞活力,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,采用划痕实验检测细胞迁移率,采用Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,采用实时聚合酶链反应检测PI3K、Akt、mTOR mRNA表达情况,采用蛋白免疫印迹法检测PI3K、Akt、磷酸化Akt(phospho-Akt,p-Akt)、mTOR、磷酸化mTOR(phospho-mTOR,p-mTOR)、凋亡蛋白B细胞淋巴瘤因子-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-associated x protein,Bax)蛋白表达情况。结果:与空白组对比,红景天苷组、顺铂组和联合组HGC-27细胞活力,细胞迁移率,侵袭细胞数,PI3K、Akt、mTOR mRNA表达,PI3K、p-Akt、p-mTOR、Bcl-2蛋白表达水平降低;细胞凋亡率和Bax蛋白表达水平升高(P<0.05)。与红景天苷组和顺铂组对比,联合组HGC-27细胞活力,细胞迁移率,侵袭细胞数,PI3K、Akt、mTOR mRNA表达,PI3K、p-Akt、p-mTOR、Bcl-2蛋白表达水平降低;细胞凋亡率和Bax蛋白表达水平升高(P<0.05)。红景天苷组以上指标与顺铂组对比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:红景天苷对胃癌细胞HGC-27增殖、迁移和侵袭有一定的抑制作用,并能促进肿瘤细胞凋亡,联合顺铂可以提高疗效,可能是通过抑制Akt、mTOR蛋白磷酸化水平从而阻断PI3K/Akt/mTOR信号通路发挥抑制作用。

构建OGDH基因敲除型SD大鼠模型

目的构建酮戊二酸脱氢酶(OGDH)基因敲除SD大鼠模型。方法设计、构建TALEN重组子,用荧光素酶活性法筛选出最有效重组子,显微注射法将质粒打入受精卵后测序鉴定。对同一时间点的野生型和基因敲除型大鼠分别进行饮食习惯、活动状态、毛发颜色及质量检测,Western Blot检测两者肝组织OGDH蛋白表达。结果成功构建了靶向OGDH基因的TALEN质粒,并筛选了最有效的TALEN重组子(OGDH-T2),成功培育出杂合子18只,成功率为22.5%,未发现OGDH-KO8纯合子的出生。质量检测显示OGDH-KO8大鼠的质量明显高于野生型,且在第10周时最为显著,增幅率达50.2%(P<0.001),KO组大鼠的OGDH蛋白表达水平显著降低,下降率为50.6%(P<0.01)。结论利用TALEN技术成功构建了OGDH基因敲除型SD大鼠模型。

白介素24抗肿瘤作用机制的研究进展

黑色素瘤分化相关基因-7(MDA-7)/白介素24(IL24),是IL-10家族的成员之一,主要表达于人体脾脏、胸腺、外周血白细胞等免疫组织器官和正常黑色素细胞。IL24是一种独特的抑制肿瘤细胞因子,通过自分泌旁分泌方式调控,抑制肿瘤生长、侵袭转移及血管生成,诱导凋亡,可以选择性的杀伤多种肿瘤细胞,产生放化疗增敏效应,而不伤害正常细胞。但是目前对于其作用的具体机制尚不明确。

沉默GPC-3基因质粒构建及对HepG2细胞增殖的抑制作用

目的:构建磷脂酰肌醇蛋白多糖(glypican,GPC)-3 shRNA质粒,观察GPC-3活化干扰对肝癌(HepG2)细胞的抑制作用。方法:设计与合成多条针对GPC-3序列的shRNA,插入pGPU6/GFP/Neo载体,构建、转染HepG2细胞、筛选高效质粒,观察沉默GPC-3表达对肝癌细胞增殖的抑制作用与机制。结果:经BamHⅠ或PstⅠ酶切鉴定,证实插入pGPU6/GFP/Neo载体GPC-3 shRNA序列正确,成功构建GPC-3 shRNA干扰质粒。以脂质体介导,将GPC-3shRNA1～4分别转染HepG2细胞,shRNA1沉默GPC-3 mRNA最高效率达89.3%,可有效抑制HepG2细胞增殖,在72 h达71.1%;shRNA1干扰使HepG2细胞周期阻滞在G1期,促进癌细胞发生凋亡(65.6%)。结论:shRNA可有效干预肝癌细胞GPC-3基因转录,促进凋亡并抑制增殖,GPC-3可望成为肝癌基因治疗的靶目标。

循环血单核细胞GPC-3mRNA和甲胎蛋白对肝癌诊断与转移监测的潜在价值

目的分析肝癌患者外周血单核细胞中磷脂酰肌醇蛋白多糖(GPC)-3 mRNA表达及甲胎蛋白(AFP)对肝癌诊断与转移监测的价值。方法收集住院肝病患者外周血,分离单核细胞,制备总RNA,经逆转录合成GPC-3cDNA,以荧光定量PCR扩增并分析其对肝癌诊断与转移监测的价值。结果外周血单核细胞中GPC-3 mRNA阳性仅见肝癌患者,55例肝癌患者中39例阳性(70.9%);肝硬化、肝炎、转移性肝癌、非肝肿瘤患者及正常对照组中未检出阳性(χ2=26.773,P<0.001)。外周血单核细胞GPC-3 mRNA阳性表达与HBsAg阳性(χ2=14.601,P<0.001)、肝癌的TNM分期(χ2=15.252,P<0.001)、门静脉癌栓(χ2=45.658,P<0.001)及伴肝外转移显著相关(χ2=22.273,P<0.001),与瘤体直径、数目、AFP浓度及分化程度间无明显相关;与血AFP可互补诊断,提高肝癌诊断阳性率(90.9%)。结论循环血单核细胞GPC-3 mRNA分析,有助于肝癌诊断和肝外转移监测,对AFP阴性肝癌具互补诊断价值。

肝癌缺氧诱导因子-1 α异常表达与靶向干预的临床价值研究

目的：分析肝癌组织缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）表达特征及沉默HIF-1α对癌细胞增殖的影响.方法：以免疫组化法分析自身配对的肝癌及癌周组织中HIF-1α表达.HepG2细胞转染靶向HIF-1α的miRNA干扰质粒,RT-PCR、Western blot检测HIF-1α基因及蛋白水平变化;酶联免疫吸附法检测培养液血管内皮生长因子（VEGF）、血管生成素（ANG）-2表达;阿霉素预处理后,以Annexin V-FLUOS/PI双染法分析HepG2细胞凋亡率,并检测细胞周期改变.结果：肝癌及周围组织HIF-1α呈棕黄色颗粒状表达,定位于胞浆和胞核,其特征是癌旁组织全数表达高于癌灶组织（80.0%,χ2=22.35,P＜0.001）,癌灶组织HIF-1α表达与肿瘤大小相关.HepG2细胞转染靶向HIF-1α miRNA干扰质粒后72 h,HIF-1α在转录水平下降87%,蛋白水平下降56%;培养液中VEGF和ANG-2表达水平分别减少54%和36%;HepG2细胞凋亡率为（22.46±0.61）%,G1期和S期比率分别为（61.49±1.12）%和（22.40±0.58）%;联合阿霉素后HepG2细胞凋亡率为（36.99±0.88）%,G1期和S期比率分别为（65.68±0.91）%和（19.47±1.34）%.结论：肝癌组织HIF-1α过表达与肝癌发展相关,沉默HIF-1α可有效调控下游血管生成相关基因表达,抑制癌细胞增殖,改善化疗药物敏感性.

sICAM-1和GPC-3 mRNA对肝癌诊断与转移监测的临床价值

目的:定量分析肝病患者血可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)浓度和外周血单核细胞磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(GPC-3)mRNA,探讨对肝癌(HCC)诊断与预后的价值.方法:收集住院肝病患者外周血,分离单核细胞,制备总RNA,经逆转录合成GPC-3cDNA,以荧光定量PCR扩增;并以酶联免疫吸附法(ELISA)定量分析血ICAM-1水平.结果:肝病发展过程中血ICAM-1表达呈梯度增加,HCC患者血ICAM-1表达显著高于肝硬化(t=3.184,P=0.002)和慢性肝炎患者(t=3.962,P<0.001),与伴门脉癌栓(t=2.941,P=0.005)及肝外转移(t=3.282,P=0.002)明显相关,与患者年龄、性别、HBsAg阳性与否、AFP浓度及肿瘤大小间未见明显相关.GPC-3mRNA阳性仅见肝癌患者(70.9%);肝硬化、慢性肝炎患者及正常对照组中未检出(2=26.773,P<0.001).GPC-3mRNA阳性表达与HBsAg阳性(2=14.601,P<0.001)、肝癌TNM分期(2=17.732,P<0.001)、伴门脉癌栓及肝外转移(2=22.271,P<0.001)显著相关,与瘤体直径、数目、AFP浓度及分化程度未见明显相关;两者可互补诊断,提高诊断肝癌阳性率.结论:sICAM-1和GPC-3mRNA检测是肝癌诊断和转移监测的良好标志物,且对AFP阴性肝癌具有互补诊断价值.

磷脂酰肌醇蛋白多糖-3对肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨shRNA干预磷脂酰肌醇蛋白多糖(GPC)-3基因转录对肝癌细胞增殖和凋亡的影响。方法将GPC-3-shRNA插入pGPU6/GFP/Neo质粒,转染人肝癌HepG2细胞,以Western Blot和荧光定量PCR分别分析GPC-3蛋白和mRNA表达;以MTT法分析HepG2细胞增殖;以流式细胞术、Annexin-V-PE/7-AAD及细胞凋亡-DNA ladder等分析细胞周期及细胞凋亡率。结果 shRNA1转染HepG2细胞,GPC-3 mRNA沉默效率为89.3%,与GPC-3蛋白下调一致;以shRNA转染HepG2细胞,增殖抑制率为71.1%;细胞周期阻滞在G1期,细胞凋亡率达65.6%。结论资料显示shRNA干预GPC-3基因转录,可显著抑制肝癌细胞增殖,促进肝癌细胞凋亡。

miRNA干扰质粒的构建及其对肝癌HepG2细胞IGF-Ⅱ表达的抑制作用

目的:研究miRNA干扰质粒对胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)在肝细胞癌表达的抑制作用,探讨IGF-Ⅱ在肝细胞癌治疗中的价值.方法:以人IGF-Ⅱ基因序列设计并合成4条miRNA,将miRNA插入质粒构建pcDNATM6.2-GW/EmGFP miR1-4干扰载体;筛选、转染HepG2细胞,以荧光定量PCR分析靶向肝癌IGF-Ⅱ基因表达的干扰效果;以ELISA法比较转染前后IGF-Ⅱ蛋白表达水平.结果:测序证实,成功构建了真核IGF-Ⅱ干扰质粒MR-IGF-Ⅱ-1-4,将干扰质粒转染至HepG2细胞,镜下显示转染效率50%;经荧光定量PCR扩增,沉默IGF-Ⅱ基因表达效率MR-IGF-Ⅱ-1为33%、MR-IGF-Ⅱ-2为43%、MR-IGF-Ⅱ-3为0%、MR-IGF-Ⅱ-4为3%.将其中MR-IGF-Ⅱ-2转染至HepG2细胞,在转录和蛋白水平上对IGF-Ⅱ具有较高干扰效率,分别达43.0%和43.5%.结论:成功构建了人miRNA干扰质粒,他能有效抑制HepG2细胞IGF-Ⅱ的表达.

原发性肝癌早期诊断特异分子标志物的研究进展

原发性肝癌(primary hepatocarcinoma,PHC)预后极差,早期诊断和转移监测极为重要。肝癌组织合成和分泌多种肝癌相关的蛋白、同工酶、基因标志等。循环血中的PHC特异性标志有助于肝癌的早期诊断、转移监测和复发预测。本文述评了PHC特异性标志物的研究进展。

下调GPC-3基因转录对肝癌细胞侵袭及血管新生的抑制作用

目的:观察以短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)下调磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(glypican-3,GPC-3)基因转录,对抑制肝癌MHCC-97H细胞侵袭和血管新生的作用与机制.方法:将对GPC-3特异性shRNA转染肝癌MHCC-97H细胞,以荧光定量PCR和Western blot分析GPC-3 mRNA及蛋白表达;以5-ethynyl-2'-deoxyuridine(EdU)和Transwell法等评估细胞增殖、迁移和侵袭能力.结果:shRNA1转染MHCC-97H细胞,GPC-3在mRNA水平下降75.6%(t=15.473,P<0.001),蛋白表达同步下调;干预GPC-3基因转录,可抑制肝癌细胞增殖,细胞迁移与侵袭能力减低,与抗癌药物具协同作用;Wnt/β-catenin中β-catenin表达下调67.7%;Hedgehogs通路中脑胶质瘤相关癌基因1(glioma-associated oncogene 1,Gli1)表达上调53.3%;shRNA1转染72 h细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达下调54.2%(t=46.746,P<0.001).结论:shRNA下调GPC-3转录,经Wnt/β-catenin和Hh信号通路抑制癌细胞迁移、侵袭和血管新生,为肝癌基因治疗潜在的分子靶目标.

GPC-3特异性短发夹型RNA干预基因转录对肝癌细胞增殖与凋亡的影响

目的观察磷脂酰肌醇蛋白多糖(GPC)-3基因特异性短发夹型RNA(shRNA)对HepG2细胞增殖的抑制作用。方法设计、合成和筛选GPC-3特异的高抑制率shRNA并构建质粒;观察shRNA沉默GPC-3基因对肝癌细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响。结果成功构建了4种GPC-3 shRNA干扰质粒,以脂质体介导分别转染HepG2细胞后,筛选出的shRNA干扰质粒抑制率最高达89.3%;以该高效GPC-3 shRNA质粒转染HepG2细胞24h、48h和72h后,细胞增殖较对照组分别下降了33.2%、56.0%和71.1%(P<0.05),细胞多被阻滞在G1期;HepG2细胞凋亡率达65.6%,显著高于对照组(约为5%,P<0.05)。结论 GPC-3特异性的shRNA可有效降低HepG2细胞中GPC-3基因转录水平,抑制增殖并促进其凋亡。因此,GPC-3可望成为肝癌基因治疗的靶目标。

sICAM-1定量检测对肝细胞性肝癌诊断与预后的临床价值分析

目的:定量检测肝病患者外周血可溶性细胞间黏附分子-1(soluble intercellular adhesion molecule-1,sICAM-1)的表达水平,以分析血清sICAM-1浓度对肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)诊断及预后监测的临床价值。方法:收集74例肝病患者血清及健康对照血32份,以酶联免疫吸附法定量检测血清sICAM-1水平,分析其临床意义。结果:肝病发展过程中血清sICAM-1表达呈梯度增加,HCC患者血清sICAM-1表达显著高于肝硬化患者(P<0.05)和正常对照组(P<0.01);与有无门脉癌栓、肝外转移明显相关(P<0.05);与患者年龄、性别、HBsAg阳性与否、AFP浓度及肿瘤大小间差异无统计学意义(P>0.05)。经受试者工作曲线分析,血清sICAM-1面积为0.872,sICAM-1表达异常,有助于HCC的诊断。结论:sICAM-1过表达与HCC发生、发展相关,血清sICAM-1异常是HCC诊断和转移监测的良好标志物。

IGF-Ⅱ/IGF-ⅠR相关信号通路与肝细胞癌靶向治疗

胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor,IGF)-Ⅱ/IGFⅡ-ⅠR相关信号通路与肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)发生发展密切相关.IGF-Ⅱ活化可经IGF-ⅠR传递促有丝分裂信号,增加HCC变可能.近来研究显示靶向IGF-Ⅱ或IGF-ⅠR可明显抑制HCC细胞增殖.本文就IGF-Ⅱ和IGF-ⅠR信号通路在肝细胞癌变、转化过程中的作用及作为HCC基因治疗靶目标的研究进展进行了评述.

肝癌组织膜联蛋白A2异常表达及临床病理特征分析

目的:分析肝细胞性肝癌(HCC)组织中膜联蛋白A2(ANXA2)的异常表达及其临床病理学特征。方法:以自身配对法分别收集30例HCC患者经手术切除后的癌灶、癌旁和远癌组织,用免疫组化方法检测组织中ANXA2的表达,分析ANXA2表达的临床病理特征。结果:HCC的癌灶组织中ANXA2定位于细胞的胞膜和胞浆;癌旁组织中ANXA2主要定位于胞浆,而远癌组织中未见ANXA2明显表达。癌灶组织中ANXA2表达强度明显高于癌旁(Z=6.113,P<0.01)和远癌组织(Z=7.328,P<0.01),并且其表达水平与HBV感染和门静脉癌栓有关,而与患者年龄、性别、肿瘤大小、AFP浓度、肿瘤数目和分化程度间差异无统计学意义。结论:HCC组织中ANXA2过表达与HCC的进展有关,是肝癌诊断的有用分子标志物之一。

胃癌患者血清中高尔基体蛋白73、claudin-1的表达水平及其临床意义

目的探讨胃癌患者血清中高尔基体蛋白73、claudin-1表达水平及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测76例胃癌患者(胃癌组)和30例健康体检者(对照组)血清中的GP73、claudin-1水平,比较2组的血清GP73、claudin-1水平差异并经受试者工作特征(ROC)曲线评估血清GP73、claudin-1水平鉴别诊断胃癌的临床效能,分析血清GP73、claudin-1水平与胃癌临床病理特征和总生存期(overall survival,OS)、无进展生存期(progression-free survival,PFS)的关系。结果胃癌组血清GP73、claudin-1水平低于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析显示,对胃癌的诊断,GP73最佳截断值21.18μg/L,敏感度83.20%、特异度85.73%;claudin-1最佳截断值0.72 ng/ml,敏感度82.16%、特异度84.44%。依据血清GP73、claudin-1水平截断值分别分成高、低表达组,GP73高表达组、claudin-1高表达组与GP73低表达组、claudin-1低表达组在浸润深度、分化程度、肿瘤大小、组织学类型、TNM分期方面比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。生存分析显示,GP73低表达组总生存率(28.21%)低于GP73高表达组总生存率(59.46%)(P<0.05),GP73低表达组无进展生存率(20.51%)低于GP73高表达组无进展生存率(40.54%)(P<0.05);claudin-1低表达组总生存率(31.58%)低于claudin-1高表达组总生存率(57.89%)(P<0.05),claudin-1低表达组无进展生存率(21.05%)低于claudin-1高表达组无进展生存率(36.84%)(P<0.05)。结论胃癌患者血清GP73水平、claudin-1水平均明显下降,且均与恶性病理特征和不良预后有关,可作为潜在的鉴别诊断胃癌的血清肿瘤学指标。

旅游气候舒适性评价:模型优化与中国案例

气候变化背景下,旅游活动和旅游产业的气候敏感性进一步凸显,气候舒适性的旅游影响及其合理评价备受关注。然而,对于旅游这一非惯常环境下的特殊体验,基于通用模型的气候舒适性评价是不完备的,需要采用专门的旅游气候舒适性评价模型。文章通过多模型的梳理和比较,选择度假气候指数(holiday climate index,HCI),并从"要素阈值分等"与"体感评价分级"两方面对其调整,提出改良的度假气候指数(modified holiday climate index,MHCI)。进一步,基于1981—2010年间全国775个基本(基准)气象站点的日值气象数据,引入气候舒适期和气候舒适域指标,通过MHCI测算分析了我国旅游气候舒适期的空间格局和旅游气候舒适域的季节变化。结果表明:有别于一般气候舒适期,全国旅游气候舒适期整体上呈现为"北长南短"的空间格局,其中,夏季和冬季表现出较强的纬度地带性,地方旅游业发展可因地制宜给予利用;全国旅游气候舒适域面积的两个高峰值分别出现在5月中下旬和9月下旬—10月上旬,其中",五一"和"十一"类似,全国大部分地区的旅游气候舒适概率都在50%以上,恢复"五一"黄金周假期具有良好的气候环境基础。文章研究结果有助于理解旅游气候舒适性与一般气候舒适性的差异所在,并可为旅游业应对气候变化提供一定的科学基础。

气候变化背景下的户外体育旅游可持续发展:减缓与适应

户外体育旅游是户外运动与旅游深度融合,以人们在非惯常的自然环境中,参与徒步、攀岩、露营、骑行、滑雪、水上冲浪等户外运动项目为形式,串联景区景点、度假区的一类旅游活动。作为全球旅游业发展的一个重要新兴板块,户外体育旅游在政策和市场双重驱动下增长显著。

研学旅行背景下旅游景区门票价格的影响因素分析

随着旅游业的不断发展,旅游景区的门票价格成为大众关心的焦点问题。哪些因素如何影响景区票价是本研究的重点。本研究通过整理相关经典文献,总结归纳了四个影响景区票价的主要因素:景区规模、景区等级、产品类型和区域经济水平,并以478家国内4A级和5A级景区为研究对象,构建双对数回归模型,借以分析景区规模和区域经济水平对不同类型、不同等级景区票价的影响情况。研究发现:景区等级越高,景区票价越高;不同类型的景区票价相差较大,休闲娱乐类景区的票价总体较高,历史文化类景区的票价相对较低;景区规模对景区门票价格有显著的正向影响;区域经济水平对景区门票价格有显著的负向影响。景区规模和区域经济水平对不同等级、不同类型景区门票价格的影响不同。

磷脂酰肌醇蛋白聚糖3转录干预对肝癌细胞侵袭和血管新生的抑制作用

目的探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC-3）特异性短发夹RNA（shRNA）对肝癌细胞侵袭和血管新生的抑制作用与机制。方法将GPC-3特异性shRNA转染肝癌细胞，检测GPC-3mRNA及蛋白表达的变化；分析其对细胞增殖、凋亡及细胞侵袭能力的影响。样本均数两两比较采用独立样本f检验，多样本均数比较采用单因素方差分析。结果shRNA转染肝癌细胞的效率大于80％，GPC-3shRNA1转染HepG2、MHCC-97H和Huh7肝癌细胞后，GPC-3mRNA水平分别为2．13±1．10、4．94±0．59、3．66±0．32，与空白对照组的19．34±0．90、20．24±1．61、β．97±1．15相比，f值分别为21．786、15．473、15．004，P值均〈0．001，差异均有统计学意义，且GPC-3shRNAl可明显诱导细胞凋亡，抑制肝癌细胞增殖、运动及侵袭能力。HepG2、MHCC-97H和Huh7肝癌细胞干扰组p-连环蛋白mRNA表达分别为6．82±0．21、4．01±0．52和5．47±O．90，与阴性对照组的12．52±0．30、12．03±0．98、12．45±0．26比较，f值分别为26．903、12．578和12．870，P值均〈0．001，差异均有统计学意义；GlilmRNA水平分别为9．78±1．35、10．78±1．15和10．93±0．97，与阴性对照组的6．49±0．72、6．80±0．79、10．03±0．97比较，f值分别为-3．730±4．918和-3．083，P值均〈0．05，差异均有统计学意义。GPC-3shRNA1还可下调HepG2和MHCC-97H细胞胰岛素样生长因子Ⅱ和血管内皮生长因子表达。结论GPC-3shRNA1可下调GPC-3mRNA水平，通过wnt／β-连环蛋白和Hedgehogs信号通路抑制癌细胞迁移、侵袭和血管新生，提示GPC-3为肝癌基因治疗潜在的分子靶目标。