阿特拉津降解菌株的分离和鉴定

从农药厂废水中分离到６株能以除草剂阿特拉津为唯一氮源生长的细菌，即假单胞菌（Ｐｓｅｕ－ｄｏｍｏｎａｓ ｓｐｐ．）ＡＤ１、ＡＤ２和 ＡＤ６，土壤杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｐ．）ＡＤ４，黄单胞菌（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ ｓｐ．）ＡＤＳ，欧文氏菌（Ｅｒｗｉｎｉａ ｓｐ．）ＡＤ７。ＡＤ１菌株能使无机盐培养基中的 ０．３ｇ／Ｌ阿特拉津在７２ｈ内降解９９，９％。当以ＡＤ１、ＡＤ２、ＡＤ４、ＡＤ５、ＡＤ６和ＡＤ７菌株的总ＤＮＡ为模板进行ＰＣＲ扩增时，除ＡＤ２菌株以外，均得到了与文献报道的假单胞菌ＡＤＰ菌株的阿特拉津氯水解酶基因（ａｔｚＡ）同源的ＰＣＲ产物。

黄杆菌ND3菌株的分离和降解萘的研究

从工业污水中分离出高效降解萘的菌株黄杆菌(Flavobacterium)ND3,该菌株还能降解水杨酸、对羟基本甲酸和苯乙酸,对氨苄青霉素(100μg·ml^(-1))和氯霉素(150μg·ml^(-1))具有抗性,含有一个大质粒.适合该菌株生长的最适培养条件被确定.在最适培养条件下,ND3菌株对萘的降解率达98%以上.

苯甲酸类化合物的微生物降解研究

用富集培养法从工业污水中分离到5个能以苯甲酸为唯一碳源和能源而生长的细苗菌株：不动杆菌（Acinetobactersp.）BJ1，无色杆菌（Achromobactersp.）BY1，假单胞苗（Pseudomonasspp.）SJ1、SY1和SH1、测定了这5个菌株的底物特异性和抗菌素抗性其中BJ1菌株含有1个大质粒和2个小质位在最适培养条件下BJ1菌株对苯甲酸的降解率达98％以上．

降解萘的假单胞菌ND24菌株的分离和萘污染土壤的生物修复

用富集培养法从石油工业废水中分离到高效降解萘的ND24菌株.该菌株能以萘为惟一碳源生长,在48 h内将无机盐培养基中2 g/L的萘降解98.4%.该菌株还能降解水杨酸、对羟基苯甲酸、邻苯二甲酸和苯乙酸.16S rRNA基因测序和同源序列比对表明,ND24菌株属于假单胞菌(Pseudomonassp.).将ND24菌株接种到含有0.2 g/dL萘的灭菌土壤中,经过14 d室温培养以后,萘的去除率为98.2%.

萘降解细菌的分离及其降解和转座基因的分子检测

用富集培养法，从工业废水和活性污泥中分离到9个高效降解萘的细菌菌株（ND7～ND15）．对菌株ND7、ND8、ND9和ND10所进行的16SrDNA序列分析表明，它们都属于假单胞菌属（Pseudomonas）．PCR实验结果表明，上述4个菌株都含有蔡降解基因nahAc、nahG、nahH和catA，ND7和ND8菌株还含有萘降解基因nahU.DNA杂交实验结果表明，上述9个萘降解菌株都含有转座酶基因tnpA1和解体酶基因tnpR．这些结果表明，萘降解细菌的降解基因和转座基因具有高度的保守性．酶学实验证明，ND7、ND8、ND9和ND10菌株都具有儿茶酚1，2-双加氧酶活力和儿萘酚2，3-双加氧酶活力，但在不同菌株中这两种酶的比活力有明显不同．

除草剂阿特拉津生物降解研究进展

阿特拉津（Ａｔｒａｚｉｎｅ）又称氯乙异丙嗪［２－氯－４（乙基）－６－（异丙氨基）－１，３，５－三嗪］，商品名莠去津，是一种广泛使用的三嗪类除草剂，用于阔叶杂草和禾草的防除，如玉米、高梁、甘蔗和库区杂草等。阿特拉津虽然是一种低毒除草剂，但由于它被微生物矿化的过程十分缓慢，在土壤中的半存留期长达４—５７周，所以在施用过这种除草剂的土壤中以及地下水和表面水中，其浓度远远超过３ｐｐｂ的最大允许值，造成对环境的污染［１］。阿特拉津在世界范围内已经使用了近４０年，其在环境中的扩散引起广泛重视，因此研究这种化合物的生物降解机理十分必要。虽然自１９８２年以来先后在诺卡氏菌属（Ｎｏｃａｒｄｉａ）［２，３］、红球菌属（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｕｓ）［４，５］、不动杆菌属（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ）［６］、土壤杆菌属（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）［７］和假单胞菌属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）［１，８，９］等多个细菌属中分离到降解阿特拉津的菌株，但直到９０年代中期，对这一生物降解过程所涉及到的基因、酶和中间代谢物仍知之甚少。自１９９５年Ｗａｃｋｅｔ实验室从施用过阿特拉津的土壤中分离到假单胞菌ＡＤＰ菌株以后［１］，阿特拉津的生物降解机理研究?

产碱杆菌SB1菌株的分离和降解水杨酸的研究

用富集培养法从工业废水中分离到一株能以水杨酸为唯一碳源和能源的产碱杆菌（Alcaligenssp．）SB1．该菌株在优化培养条件下对水杨酸的降解率可达99％以上．此外，它还能降解间羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸和邻苯二甲酸，对氨苄青霉素（Ap）、链霉素（Sm）和氯霉素（Cm）具有抗性，含有一个大质粒．

萘降解质粒pND6-1中萘趋化基因nahY的克隆和核苷酸序列分析

假单胞菌 (Pseudomonas)ND6菌株的萘降解基因位于 10 2kb的质粒 pND6 1上 .以pUC18质粒为载体 ,制备了含有 1.5～ 3 .0kbpND6 1DNA随机片段的基因文库 .通过DNA测序和DNA序列的同源性分析 ,从基因文库中筛选出含有萘趋化基因nahY的克隆 .nahY基因的大小为 16 17bp ,编码的萘趋化蛋白由 5 38个氨基酸组成 ,与假单胞菌G7菌株的nahY基因相比 ,核苷酸序列的同源性是 96 .7% ,编码的氨基酸序列的同源性是 95 % .图 4参

谷胱甘肽S-转移酶5-5和细菌二氯甲烷脱卤素酶的性质比较

通过简便的两步阴离子交换色谱，从遗传工程菌株大肠杆菌JM105中纯化出哺乳动物的谷胱甘肽S-转移酶5－5（GST5－5）．GST5－5以二卤甲烷为底物时的动力学常数、热稳定性和最适pH被测定，并与细菌二氯甲烷脱卤素酶（DM11脱卤素酶）的上述性质进行了比较．

蛋白质内含子和翻译内含子

蛋白质内含子和翻译内含子蔡宝立张富国（南开大学分子生物所，天津３０００７１）（天津教育学院生物系）关键词蛋白质内含子，翻译内含子绝大多数真核基因和某些原核基因是断裂基因，即在基因的ＤＮＡ顺序中插有一些无编码意义的片段。编码顺序称为外显子，非编码顺序称...

质粒

Lederberg于1952年提出“质粒”(plasmid)一词,用来表示所有的染色体外遗传因子。后来,质粒一词专指细菌染色体以外能自主复制的小环状DNA分子,不包括共生生物、病毒以及叶绿体和线粒体基因组。50年代。

假单胞菌DM11菌株的二氯甲烷脱卤素酶研究

二氯甲烷(CH_2Cl_2)被广泛地用作清除剂、溶剂提取剂、冷冻剂和熏蒸剂,是一种主要的环境污染物。1980年 Rittmann 等首次从工业废水中分离出以二氯甲烷为唯一碳源和能源的细菌。

嗜甲基菌DM11菌株的二氯甲烷脱卤素酶是二聚体蛋白

经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定，嗜甲基菌DM11菌株二氯甲烷脱卤素酶的亚基分子量为31000．通过沉降平衡超离心分析和凝胶过滤色谱分析证明，上述脱卤素酶的天然酶的分子量分别是65800和63500．这些结果表明，DM11菌株的二氯甲烷脱卤素酶是二聚体蛋白．

嗜甲基菌DM11菌株二氯甲烷脱卤素酶基因的定点诱变

为了研究嗜甲基菌（Methylophilus）DM11菌株二氯甲烷脱卤素酶的不同氨基酸残基在底物结合、谷胱甘肽（GSH）亲和以及催化活力中的作用，对编码该酶的基因进行了定点诱变研究。将保守的103位色氨酸（W）分别用苯丙氨酸（F）、缬氨酸（V）或天冬酞胺（N）替换，109位精氨酸（R）用亮氨酸（L）替换，117位色氨酸用酪氨酸（Y）或苯丙氨酸替换，得到6种突变酶。其中3种突变酶具有较低的活力，另外3种突变酶没有活力。突变酶W117Y的性质与野生型酶明显不同。

细菌代谢二氯甲烷的酶学和遗传学

细菌代谢二氯甲烷的酶学和遗传学蔡宝立（南开大学分子生物学研究所，天津３０００７１）在工业生产和实验室中，二氯甲烷（ＣＨ＿２Ｃｌ＿２）被广泛地用作溶剂、提取剂和清除剂，是一种主要的环境污染物。它在水中的最大溶解浓度约为１５０ｍｍｏｌ／Ｌ￣［１］。哺乳动...

酚降解菌株的分离、鉴定和在含酚废水生物处理中的应用

从石油化工厂的活性污泥和废水混合物中分离到10个降解酚的细菌菌株,经16S rRNA基因序列分析,5个菌株(PD1、PD2、PD6、PD7和PD39)被鉴定为假单胞菌(Pseudomonassp.),4个菌株(PD4、PD5、PD8和PD9)为不动杆菌(Acinetobactersp.),1个菌株(PD3)为丛毛单胞菌(Comamonassp.).对假单胞菌(Pseudomonassp.)PD39菌株的酚降解特性、最适生长条件、降解底物的范围、儿茶酚1,2-双加氧酶(C12O)和儿茶酚2,3-双加氧酶(C23O)活性、含酚废水的生物处理等,进行了详细研究.结果表明,PD39菌株的最适生长和降解条件是,培养基的起始pH为7.0,培养温度为30℃,酚浓度为800 mg/L,对酚的最大降解浓度为1 200 mg/L.酚浓度为637 mg/L的工业废水经72 h处理酚的去除率达到99.96%.PD39菌株有很好的应用潜力来作含酚废水活性污泥处理系统的强化菌株.

萘降解质粒pND6的分离和鉴定

从工业废水中分离的假单胞菌 (Pseudomonassp .)ND6菌株 ,能以萘为唯一碳源生长 ,使无机盐培养基(MM)中 2g/L的萘在 48h内降解 98% .该菌株含有一个 115kb的大质粒pND6 .DNA杂交实验表明 ,pND6质粒含有与恶臭假单胞菌 (P .putida)G7菌株的NAH7质粒同源的萘降解基因 .图 3表 1参

一株耐热石油烃降解菌的细胞疏水性及乳化、润湿作用研究

从胜利油田油水样中分离到一株能够在60℃高温条件下利用烃类产生生物表面活性剂的菌株芽孢杆菌(Bacillus sp.)A1。结果表明:A1的细胞表面具有很强的疏水性,这有助于菌体细胞对烃类的摄取。该菌株对石油烃具有良好的乳化作用,并可在20%的高盐环境和100℃高温条件下仍显示很高的乳化活性。同时,A1可明显改变油藏岩石表面的润湿性,使其亲水性显著增强。对油藏中的岩石模拟试片石英、灰岩和玻璃作用后的接触角均减小60%以上。油藏中岩石的润湿性能增强,水驱油时更易于剥落滞留在岩石表面上的油滴或油膜,从而提高石油采收率。

2,4-二氯酚降解菌的分离及其特性

从３个不同地点采集的混合土壤中，分离到２株可利用２，４二氯酚为唯一碳源和能源的假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐ．）ＤＣＰ１和ＤＣＰ２．在此基础上，研究探索了菌株ＤＣＰ１降解２，４二氯酚的影响因素和降解过程以及其遗传特性．结果表明：菌株ＤＣＰ１可降解２，４二氯酚，并有氯离子、邻氯酚和醌积累；经检测该菌株中有一条迁移速率比ｐＵＣ１８小的质粒．

农杆菌介导的细菌阿特拉津氯水解酶基因对水稻的遗传转化

研究构建了植物表达载体p1301-atzA,使来源于节杆菌(Arthrobacter sp.)AD1菌株的阿特拉津氯水解酶基因atzA受控于CaMV35s启动子下表达。用农杆菌介导法将植物表达载体p1301-atzA导入粳型保持系津稻107中,经潮霉素抗性筛选,得到可育的再生植株。转基因植株总DNA经PCR和Southern检测表明atzA基因已整合到水稻的基因组中。对转基因植株进行除草剂阿特拉津抗性检测,在喷施浓度为0.133％的阿特拉津溶液后,对照植株和敏感植株死亡,而转基因植株表现出对阿特拉津的抗性,保持正常生长,但不同转化株系的抗性表达水平不同。对转基因植株T,代进行的遗传分析表明,外源基因atzA能稳定遗传给后代,且大多数株系的分离比符合3:1。