不同气候环境中团棵期烟草叶片蛋白质组学分析

【目的】应用比较蛋白组学策略,在蛋白表达水平揭示团棵期烟草对不同气候环境响应的分子机理。【方法】在相同土壤和大田栽培管理条件下,分别在昆明市云南农业大学农场和丽江市玉龙县金庄两个不同气候环境的生态试验点盆栽烤烟品种云烟87,在团棵期进行农艺性状、SPAD值和净光合速率测定,并运用双向电泳和MALDI-TOF-MS质谱鉴定技术研究烟草叶片蛋白质表达谱的变化。【结果】金庄点烟草具有较高的SPAD值和净光合速率,较大的株高、节间距、茎围、叶宽和叶面积等农艺性状参数。蛋白质组学分析表明,在两个生态点烟草叶片中共检测到39个表达量相差2倍以上的蛋白质点,通过MALDI-TOF-MS质谱鉴定和数据库检索注释了33个蛋白质点,相对于昆明点,金庄点有3个(9.09%)特异表达,7个(21.12%)表达量上调,19个(57.57%)表达量下调的蛋白质点,而昆明点有4个(12.12%)特异表达蛋白质点;功能分类表明,它们分别参与光合作用、防御/抗胁迫、蛋白质合成、矿质代谢等细胞过程。【结论】金庄点烟草具有较高SPAD值,净光合速率,较大的株高、节间距、茎围、叶宽和叶面积等农艺性状参数,这与该点烟草叶片中积累较多高光合效率相关的蛋白质相一致,而昆明点烟草叶片则富集较多的叶绿体蛋白质合成、防御/胁迫以及氮、硫等矿质元素代谢相关的蛋白质。该结果初步阐明了丽江烟区烟叶总糖、还原糖含量较高,总氮、烟碱含量偏低特征的分子机制。

不同气候条件对“云烟87”旺长期叶片光合速率及蛋白表达的影响

为揭示烟草植株对不同气候环境响应的分子机理,采用相同土壤栽培和管理,在云南3个不同气候试验点盆栽烤烟品种"云烟87",测定烟株旺长期农艺性状、SPAD值和净光合速率,以iTRAQ标记技术开展叶片差异表达蛋白分析,并对部分差异表达蛋白基因的转录进行q-RT-PCR验证。结果表明:在不同实验点间农艺性状、SPAD值和净光合速率有显著差异;不同生态点间烟叶差异蛋白富集到碳、氮代谢和逆境响应等途径。与昆明烟叶相比,丽江金庄试验点烟叶中光合光反应相关的蛋白上调表达,而与糖呼吸消耗相关的酶类下调表达;丽江片角试验点烟叶糖合成途径相关的酶类上调表达而与呼吸代谢相关酶类则下调表达。丽江片角和金庄试验点烟叶中,蛋白质和氨基酸等含氮化合物合成酶类下调,而与其分解酶类上调表达。随机选取6个差异表达的蛋白质,用q-RT-PCR进行其转录表达水平的间接验证,表明与iTRAQ分析的差异蛋白在mRNA水平上有相似的表达趋势。本研究初步阐明丽江烟叶通过提高碳含量和降低氮含量来形成高"碳氮比"烟叶的气候因子诱发机制。

氮饥饿环境中稻瘟病不同致病力菌株分泌蛋白的双向电泳图谱分析

采用双向电泳技术研究了稻瘟病菌株Y99-63和Y98-16在氮饥饿条件下分泌蛋白群的组成及差异。在稻瘟病菌株Y99-63和菌株Y98-16分泌蛋白的2-DE图谱中分别检测出262±10和253±10个蛋白质点。其中有130个蛋白质点为菌株Y99-63特异表达,121个蛋白质点为Y98-16特异表达,132个蛋白质点为两菌株共同表达。在两菌株共同表达的表达量相差达5倍以上的有38个蛋白质点,其中有25个蛋白质点在菌株Y99-63表达量较大,有13个蛋白质点在菌株Y98-16表达量较大。生物信息学预测稻瘟病菌分泌蛋白的分子量在10～20 kDa以及等电点在5.0～5.5范围内蛋白质点数最多。菌株Y99-63特异表达分泌蛋白的分子量10～20 kDa范围内蛋白质点最多,菌株Y98-16特异表达分泌蛋白的分子量在20～30 kDa范围内蛋白质点数最多,两菌株共同表达的分泌蛋白分子量在10～20 kDa范围内蛋白质点数最多。菌株Y99-63特异表达分泌蛋白的等电点在5.5～6.0范围内蛋白质点数最多,菌株Y98-16特异表达分泌蛋白的等电点在4.5～5.0范围内蛋白质点数最多,两菌株共同表达分泌蛋白等电点在5.0～5.5范围内蛋白质点数最多。稻瘟病菌不同菌株在氮饥饿条件下产生的分泌蛋白有较大差异。

云南曲靖烤烟地下害虫绿色防控技术研究

在云南曲靖烤烟种植区开展地下害虫种群调查,明确为害烤烟的地下害虫主要为小地老虎、细胸金针虫、蛴螬和蝼蛄,其主要分布在30 cm耕作层土壤中.利用本土虫生真菌资源金龟子绿僵菌菌株,创制了生防制剂——10亿孢子/g金龟子绿僵菌颗粒剂.在烤烟地起垄打塘时,撒施金龟子绿僵菌颗粒剂37.5~75.0 kg/hm^(2)对小地老虎和细胸金针虫等主要为害云南烤烟的地下害虫进行防治试验.结果发现,施药量为37.5 kg/hm^(2)和75.0 kg/hm^(2)的5 d后防效分别为83.65%和80.00%,而施药后40 d防效均保持在74.48%.金龟子绿僵菌颗粒剂在前期即对地下害虫起到良好的控制效果,与常规药剂处理防效相当,且绿僵菌制剂对烟苗生长无不良影响,具有促进烟苗生长的作用.

不同品种烟草患黑胫病根际土壤真菌群落结构研究

[目的]揭示不同品种患病根际土壤真菌中的差异显著物种,探讨根际土壤真菌与不同品种烟草互作关系,为品种抗性机理研究以及生物防治提供参考。[方法]采用Illumina MiSeq高通量测序技术,分析云南省8个主栽烟草品种的患病植株根际土壤真菌的群落结构组成与多样性。[结果]8个品种的患病根际土壤真菌OTU丰度值分布在822~1126,各品种间根际土壤真菌多样性与丰富度指数存在显著差异,其中品种K326、云105、云87和云99显著高于其他品种。在门水平上,各品种患病根际土壤真菌主要以子囊菌门(Ascomycota)、被孢霉门(Mortierellomycota)和担子菌门(Basidiomycota)为优势菌门。在属水平上,各处理组主要以Microidium属、镰孢菌属(Fusarium)、腐质霉属(Humicola)、被孢霉属(Mortierella)和链格孢属(Alternaria)等为优势菌属。LEFSe显著差异分析表明:腐质霉属、假丝酵母属(Candida)、小不整球壳属(Plectosphaerella)、链格孢属、丝葚霉属(Papulaspora)、镰孢菌属、Boeremia属、被孢霉属、赤霉菌属(Gibberella)是不同品种烟草患病根际土壤的重要差异显著物种。[结论]不同品种烟草的患病根际土壤真菌群落结构与多样性存在显著差异,且显著差异物种的分布与品种抗性存在一定联系。对黑胫病具有较高抗性的品种(云97、K326、云100和云87)中以有益菌属为主,而在感病和中抗品种(红大、云105、云116和云99)中则聚集了部分病原菌。

稻瘟菌胞外蛋白的提取及电泳方法初探

利用蛋白质组学研究方法对稻瘟菌的胞外蛋白进行分析，可以更好地了解该病原菌的生物学特性和致病机制。蛋白质样品制备和双向电泳，都是蛋白质组学研究的基础。采用冷冻干燥，透析结合法与三氯乙酸-脱氧胆酸钠沉淀法（TCA-DOC沉淀法）提取液体培养稻瘟菌得到的胞外蛋白，利用17cm pH3.0-10.0与17cm pH4.0-7.0两种pH梯度IPG胶条对同一样品进行第一向等电聚焦，12％ SDS-PAGE凝胶进行第二向电泳，银染后用PDQuest软件（V7.4）对电泳图谱进行分析。结果表明，在上述两种提取稻瘟菌胞外蛋白的方法中，TCA-DOC沉淀法具有较好的提取效果，应用该实验方法得到的蛋白质分布在pH4.0-7.0之间的点数达到621个，因此在双向电泳中，采用pH4.0-7.0的胶条具有较好的分辨率。

菜籽油枯有机无机复混肥对烤烟产质量及养分利用率的影响

探索添加300 g·kg–1和400 g·kg–1菜籽油枯制成的有机无机复混肥(以OR30和OR40表示)对烤烟生长、产质量及养分利用率的影响,为提高云南菜籽油枯资源的利用效率和提升烟叶品质提供科学依据。以烤烟品种K326为材料,采用大田试验,设置10个处理:T1,施化肥,即烟草专用复合肥400 kg·hm^(–2)+过磷酸钙362.5 kg·hm^(–2)+硫酸钾160 kg·hm^(–2)(纯氮60 kg·hm^(–2)),T2,施OR30400 kg·hm^(–2)(等氮);T3,施OR30265 kg·hm^(–2)和硝酸钾150 kg·hm^(–2)(等氮);T4,施OR30225 kg·hm^(–2)和硝酸钾150 kg·hm^(–2)(减氮10%);T5,施OR30440 kg·hm^(–2)(增氮10%);T6,施OR40500 kg·hm^(–2)(等氮);T7,施OR40331.2 kg·hm^(–2)和硝酸钾150 kg·hm^(–2)(等氮);T8,施OR40281.2 kg·hm^(–2)和硝酸钾150 kg·hm^(–2)(减氮10%);T9,施OR40550 kg·hm^(–2)(增氮10%);T10,不施肥。结果表明,与化肥(T1)相比,T2、T3、T5、T7和T9促进烟株生长明显,叶面积和叶面积系数分别显著增加1.74%~4.51%、4.47%~19.11%;T4、T5、T7和T9的根鲜物质量、根干物质量和根体积较T1均显著增加。T2、T4、T5、T7和T9增产率为2.69%~7.46%,T2、T5和T9产值较T1分别显著提高10.99%~13.46%。T2、T4、T7和T9中部烟叶总糖、还原糖、氧化钾和水溶性氯含量升高,总氮、烟碱含量下降,烟叶化学成分更加协调。与T1相比,T2、T4、T5、T7和T9显著提高氮素表观利用率9.31%~25.17%,氮素生理利用率提高7.67%~22.32%;T2、T4和T9磷素表观利用率及生理利用率分别提高19.85%~28.05%和14.71%~21.39%;T2、T4、T5和T9分别增加钾素表观利用率及生理利用率8.55%~17.40%和9.06%~21.98%。综合分析表明,适量的油枯有机无机复混肥(T5和T9)或搭配追施硝酸钾(T4和T7)可促进烟株地上部和根部的生长,促进氮、磷、钾吸收,提高烟叶产质量。

减施氮磷钾肥和氮肥基追比对云南曲靖烤烟产质量及养分利用的影响

【目的】为建立云南曲靖烤烟增产增效和环境友好的养分管理模式。【方法】以云烟87为材料,研究在常规施肥量(全部基施)的基础上扣减氮磷钾肥用量(10%、20%、30%、100%)及氮肥基追比(基肥∶追肥为70%∶30%和30%∶70%)对烤烟产质量及氮磷钾利用的影响。【结果】与常规施肥模式相比,减施氮磷钾肥10%~20%+氮肥基追比70%∶30%能促进烟株生长发育,提高烟叶等级结构、产量、产值及氮磷钾养分利用率,使中部和上部烟叶总糖、还原糖、氧化钾含量升高,降低烟叶总氮、烟碱含量,对烟叶水溶性氯含量无影响,使中、上部烟叶化学成分更协调。在氮磷钾施肥量相同的情况下,高追氮比例降低了烤烟的产量及养分利用。【结论】在氮磷钾常规施肥的情况下,减施氮磷钾肥10%且低追氮比例可显著提高烟叶产值、烟叶品质及肥料利用率。最佳养分管理模式罗平点为施纯N 63 kg/hm^2、P2O5126 kg/hm^2、K2O 189 kg/hm^2;沾益点为施纯N 94.5 kg/hm^2、P2O5189 kg/hm^2、K2O 283.5 kg/hm^2,氮肥基追比均为70%∶30%。

云南多雨烟区增密减氮对烤烟产质量及养分利用率的调控效应

为明确增密减氮对烤烟产质量及肥料利用率的调控效应。以烤烟品种“云烟105”为材料,研究种植密度(13890,15150,16665株/hm^2)和施氮水平(0,84,94.5,105 kg/hm^2)及其互作对烤烟产质量及养分利用效率的影响。结果表明:适度增密减氮能显著提高烤烟肥料利用率、产量和产值,使烟叶总糖、还原糖、钾含量显著升高,总氮、烟碱含量降低,对水溶性氯无显著影响,烟叶化学品质更加协调。烟叶化学成分协调性及烤烟氮磷钾利用率显著受年份、密度、施氮及年份×施氮、密度×施氮、年份×密度×施氮互作影响,其中施氮、密度及互作对烟叶化学成分含量效应分别为42.5%,27.3%,18.9%,而其对养分利用率的效应分别为38.2%,25.4%,23.8%。与当前烤烟种植模式相比,增密和减氮10%~20%组合对烤烟增产、提质和增效作用显著,最佳密度和施氮量分别为15150株/hm^2和84.0~94.5 kg/hm^2。

耕作方式对山地烟田烤烟根际土壤真菌群落结构的影响

【目的】探究深耕、深松措施对山地烟田土壤真菌群落结构的影响。【方法】采用大田试验,设置常规旋耕20 cm(RT20,对照)、深耕30 cm(DT30)、深松30 cm(ST30)和深松40 cm(ST40)4个处理,利用Illumina MiSeq高通量测序技术分析了不同耕作处理下旺长期烤烟根际土壤真菌群落结构的变化情况。【结果】(1)与RT20相比,DT30、ST30和ST40处理中根际土壤真菌OTU丰度分别提升了9.19%、13.11%和6.32%,其中DT30、ST30处理所特有的OTUs数分别是RT20的1.30倍和1.18倍;(2)不同深耕和深松处理后根际土壤真菌群落丰富度和多样性均有所增加,其中DT30、ST30和ST40处理的Shannon指数与对照相比分别提升了8.23%、7.46%和4.63%,Chao1指数分别提升了8.27%、13.39%和4.26%;(3)在门、属和种水平上不同耕作处理优势菌群及相对丰度均有显著差异,与RT20相比,DT30、ST30和ST40处理中镰刀菌属(Fusarium)真菌相对丰度分别降低了25.34%、14.53%和18.41%,茎点霉属(Phoma)相对丰度分别降低34.96%、31.17%和33.33%;另外,青霉属(Penicillium)和紫霉属(Purpureocillium)等有益真菌相对丰度较RT20均表现出增加趋势。【结论】深耕和深松措施促进了微生物群落结构的重建,有利于提升烤烟根际土壤真菌群落多样性,并在一定程度降低潜在土传病原真菌的相对丰度,促进有益土壤微生物生长,从而对山地烟田烤烟根际土壤微环境有一定改善作用。

曲靖植烟土壤pH和主要养分空间变异特征及其影响因素

2017—2020年用GPS定位采集云南省曲靖市9个县区核心烟田耕层(0~20 cm)土壤样品6685个,测定pH、有机质、水解性氮、有效磷和速效钾,运用地统计学和地理信息系统(GIS)分析上述指标的空间分布特征及其变异主控因素。结果表明:土壤pH、有机质、水解性氮、有效磷和速效钾变幅分别介于4.16~8.50、2.23~99.93 g/kg、14.88~393.36 mg/kg、2.45~142.78 mg/kg和19.65~991.33 mg/kg,均值分别为6.30、32.83 g/kg、125.42 mg/kg、29.92 mg/kg和270.38 mg/kg,变异系数分别为11.59%、33.54%、29.93%、64.54%和35.18%,均为中等程度变异。pH集中在微酸至中性,较适宜烤烟种植,有机质、有效磷和速效钾含量集中在中等至极高等级,共占研究区总面积的70%以上。半方差分析表明,土壤pH空间自相关性较强,变异受自然因素(土壤类型、质地和降雨)的主导;有机质、水解性氮和速效钾空间自相关性中等,变异受自然和人为因素(施肥)共同影响;有效磷的空间自相关性很弱,人为因素是造成其空间差异的主控因素。克里格空间插值结果揭示土壤pH空间连续性好,整体呈聚集分布,强酸和极强酸土壤主要分布在马龙、宣威和会泽;有机质、水解性氮、有效磷、速效钾呈不规则的块状分布,随机性较强,其中有机质、水解性氮、速效钾的高值区主要在富源、罗平,有效磷较高的区域集中在陆良、罗平。

3株枯草芽孢杆菌对烟草白粉病的防效

为探明3株枯草芽孢杆菌对‘云烟87’白粉病的防效,以枯草芽孢杆菌制得的悬浮剂、菌悬液和低毒化学农药为试验材料,开展其对白粉病防效的研究。室内结果表明,YWF-19-0068、YWF-19-0070、YWF-19-0071生防制剂10倍液对烟草白粉病的防效分别达70.49%、61.15%、69.71%,50倍菌悬液对白粉孢子的萌发抑制率分别达56.92%、56.92%、58.46%。室外结果表明,3株枯草芽孢杆菌制剂不同剂量用药10天后,50倍液的大田防效最优,分别可达46.85%、65.50%、51.70%;选取YWF-19-0070菌株悬浮制剂分别在甲基硫菌灵全量和半量用药一次后,每隔3天使用一次,最后一次用药10天后,甲基硫菌灵全量处理的防效达77.73%以上;甲基硫菌灵半量处理的防效达60.23%以上。

烟草赤星病高效生防内生细菌的分离筛选及发酵培养条件优化

为提高烟叶安全,探索曲靖烟区烟草赤星病生物防控技术,研究烟草内生菌株对烟草赤星病的防控作用。以曲靖烟区分离得到的烟草赤星病病原菌为靶标,采用平板对峙培养法从健康烟株体内分离筛选出生防内生细菌,并应用Design-Expert软件,采用响应面法对其进行发酵培养基的优化。结果表明,从曲靖烟区健康烟株体内分离筛选出15株对烟草赤星病病原真菌链格孢菌具有拮抗作用的菌株,其中编号为YWF-19-0004、YWF-19-0065、YWF-19-0068、YWF-19-0070、YWF-19-0071的5株内生细菌抑菌带宽≥10 mm、抑菌率≥50%;采用响应面法获得YWF-19-0068菌株的优化培养基配方:大豆粉浓度14 g/L,蛋白胨浓度2 g/L,鱼粉浓度2 g/L,蔗糖浓度11 g/L,玉米粉浓度为7 g/L,碳酸钙浓度5 g/L,氯化钠浓度0.3 g/L,磷酸二氢钾浓度0.3 g/L,磷酸氢二钾浓度0.3 g/L,硫酸锰浓度0.2 g/L,硫酸镁浓度0.3 g/L,硫酸铵浓度0.5 g/L,利用优化培养基进行发酵,YWF-19-0068菌株的菌量是基础培养基发酵所得菌量的4.47倍,说明优化后的发酵培养基有助于降低生产成本,为其规模化生产应用奠定了基础。

烟草(云烟87)NBS-LRR类同源抗病基因克隆及分析

【目的】克隆并分析烟草NBS-LRR类抗病基因的同源序列(RGAs),为采用同源克隆技术挖掘烟草抗病基因提供理论参考。【方法】从基于NBS-LRR类抗病基因保守序列设计的简并引物中筛选扩增效果较好的引物用于扩增烟草RGAs,采用DNAMAN 6.0翻译成氨基酸序列,并与已知的其他植物抗病基因进行聚类分析。【结果】克隆获得6条与参比抗病基因具有高度同源性的烟草RGAs,大小在500 bp左右,但仅有4条RGAs具有连续的开放阅读框(ORF)及编码NBS功能结构域的核苷酸序列,命名为TRGA-87-1~TRGA-87-4。这4个烟草RGAs编码的氨基酸序列均含有NBS类抗病蛋白的多个典型保守基序,与已知的多种植物抗病基因编码的氨基酸序列均具有较高的相似性,其中,与烟草相关抗病基因编码的氨基酸序列相似性最高,为97.00%~100.00%,与其他植物的抗病基因编码氨基酸序列相似性为29.00%~53.00%,这些序列可分为3个亚类,其中TRGA-87-2与烟草N和亚麻L6聚为一类(TRGAⅠ),属于TIR-NBS-LRR类;TRGA-87-3和TRGA-87-4与水稻Xa-1和番茄Mi聚为一类(TRGAⅡ),属于non-TIR-NBS-LRR类,TRGA-87-1与拟南芥RPM1聚成一类(TRGAⅢ),属于non-TIR-NBS-LRR类。【结论】同源扩增技术可用于烟草中抗病基因的克隆、功能分析及定位等研究。

生物钾肥对烤烟含钾量及品质影响的研究进展

钾是烤烟生长和发育必不可少的元素之一,烟叶含钾量是评价烟叶品质的重要指标,烟叶含钾量偏低已严重制约国内烟叶生产的发展。因此,提高烟叶含钾量对改善烟叶内在品质具有重要的现实意义。笔者综述了钾元素的生理功能、钾元素对烟叶品质影响、生物钾肥对烤烟生长发育、烟叶含钾量、烟叶品质的影响以及生物钾肥有效施用条件等方面的研究进展,归纳了生物钾肥对烤烟生长发育、产量、品质具有重要决定作用,在此基础探讨了提高烟叶含钾量的有效途径及措施,认为施用生物钾肥是进一步提高中国烟叶内在品质的有效途径之一,最后对生物钾肥今后研究方向进行了展望。

烟草黑胫病植株根际土壤真菌群落多样性及结构分析

【目的】为改善云南烟区植烟土壤微生态环境及从土壤生防菌筛选等角度防治烟草黑胫病提供基础数据及理论依据。【方法】采用Illumina MiSeq高通量测序技术分析了健康与患病烟株根际土壤真菌群落结构。【结果】健康烟株根际土壤(ZCTY)和患病烟株根际土壤(HJTY)真菌OTU数分别为1809和1479个,同时ZCTY的OTU数、特有OTU数分别是HJTY的1.22、1.62倍,且HJTY中的真菌物种量、丰富度和多样性显著降低,ACE、Chao1和Shannon指数较ZCTY分别降低了31.87%、30.47%和0.68%;同时,优势种属中的Soilcoccozyma、镰刀菌属(Fusarium)、Spiromastix和青霉属(Penicillium)在两组间存在显著差异,较ZCTY相比,HJTY中的Soilcoccozyma、镰刀菌属和青霉属相对丰度分别增加了177.06%、54.32%和144.27%,而毛壳菌属(Chaetomium)等有益菌属显著减少,且Spiromastix是HJTY的特有菌属;烟株根际土壤真菌群落与土壤理化因子(pH、有机质、碱解氮、有效磷、速效钾)变化存在一定的相关性,其中油壶菌属与有机质、碱解氮均呈显著负相关,镰刀菌属与碱解氮呈显著正相关,Soilcoccozyma与pH呈显著负相关,与速效钾呈显著正相关,Plectosphaerella与碱解氮、有效磷呈显著负相关,而青霉菌属与碱解氮、有效磷呈显著正相关,外瓶柄霉属(Exophiala)与有机质呈显著正相关。【结论】烟株根际土壤真菌多样性、丰富度的降低及群落结构的改变是烟株患黑胫病后的重要指征之一,其中镰刀菌属、被孢霉属(Mortierella)、青霉属等相关病原菌及腐生菌显著增加,毛壳菌属等有益菌属显著减少,且根际土壤真菌群落受到土壤微生态环境中生物因子和非生物因子的共同影响。

移栽期对冬季烤烟上部烟叶致香成分和质量评价的影响

为揭示冬季烤烟烟叶生长后期致香成分的生成规律,改善冬季烤烟香气品质,以‘KRK26’上部烟叶(B2F)为材料,采用SDE(同时蒸馏萃取)-GC/MSD气质联用法对同一产区4个不同移栽期的相同栽培及初考条件下的烟叶致香成分及相对含量进行检测。结果表明,致香成分总量与感官评吸结果吻合度较好,可能对冬烟烟叶整体香气质量起基础作用;次年1月15日移栽处理(K3)新植二烯含量显著高于其他3个处理,且烤后烟叶评吸质量较优,显示新植二烯含量可能对冬烟烟叶整体香气质量起主导作用;类胡萝卜素降解产物中的大马士酮、香叶基丙酮、3-羟基大马酮及芳樟醇;类西柏烷类致香物质中的茄酮;美拉德反应产物中的糠醛、2,3-二氢呋喃、5-甲基-2-糠醛、3-甲基-2-(5H)-呋喃酮和2,3-二氢苯并呋喃;苯丙氨酸类降解产物中的苯甲醛、苯甲醇、苯乙醛、苯乙醇和吲哚;其他类致香物质中的2-乙酰呋喃、杜烯、棕榈酸甲酯、香叶基香叶基焦磷酸、棕榈酸等,可能是影响冬烟烤后烟叶香气质量的重要成分。研究结果可为云南冬烟栽培技术优化,改善冬烟烟叶香气品质及提高上部烟叶可利用性提供科学依据。

不同质地土壤化肥减施对烤烟产质量及肥料利用的影响

【目的】明确化肥减施和土壤质地对烤烟产质量及氮磷钾肥料利用率的调控效应。【方法】以烤烟品种K326为材料,选择云南曲靖烟区3种质地(砂土、黏土、重壤土)土壤,采用大田试验,设置6个处理:常规施肥[T1(CK)]、减施化肥10%(T2)、减施化肥20%(T3)、有机肥替代10%化肥(T4)、有机肥替代20%化肥(T5)及不施肥(T6)。【结果】曲靖烟区砂土上,与T1(CK)相比,T2、T3可显著提高烟叶等级结构、产量、产值及氮磷钾养分利用率,增加中上部烟叶钾含量,降低总糖、还原糖,对烟叶总氮、烟碱、水溶性氯含量无显著影响,且中、上部烟叶化学成分更协调。黏土上,T2、T5烟株长势与T1(CK)相近,但T2和T5的烟叶上等烟比例、产量、产值及氮磷钾养分利用率较T1(CK)显著提高,中、上部烟叶化学成分协调性更好。重壤土上,与T1(CK)相比,T2、T3、T5对烟株生长无影响,但可提高烟叶上等烟比例、产量、产值、氮磷钾养分利用率及中上部烟叶总糖、还原糖含量,对烟叶总氮、烟碱、钾和水溶性氯含量无显著影响,T2、T3的烟叶化学成分更协调。在相同氮磷钾施肥量下,不同质地土壤上烟株对氮、磷的吸收利用率从高到低为砂土>重壤土>黏土,而钾素利用率为重壤土>黏土>砂土。【结论】在当前烟农氮磷钾用量基础上,砂壤土上直减化肥氮磷钾或有机肥替代化肥潜力为10%;黏壤上直减化肥氮磷钾或有机肥替代化肥潜力为10%~20%;重壤土上化肥氮磷钾直减潜力10%,有机肥替代化肥潜力为10%~20%。

烘烤期烟叶霉烂病病原菌的分离、鉴定及生物学特性

为明确云南省烘烤期烟叶霉烂病的病原,采用分子和形态学鉴定方法,依据柯赫氏法则,对病原菌进行分离和鉴定并将其命名为Rhi-1,并初步研究了该病原菌的生物学特性。结果表明,引起该病害的病原菌为米根霉(Rhizopus oryzae)。菌株Rhi-1的气生菌丝旺盛,质地疏松,孢子囊和孢囊孢子直径分别为53~123μm和2.1~9.0μm,两者均呈球形或椭圆形。孢囊孢子萌发的最高温度为44.6℃,水相介质中孢囊孢子热处理10min的致死温度为54℃,菌丝体热处理30min的致死温度为70℃,最适pH为7.0,最佳培养基为PSA。此结果为研究霉烂病发生机制提供了依据。

健康与感染黑胫病烟株根际土壤细菌群落结构与多样性

【目的】探究健康与感染黑胫病烟株根际土壤的细菌群落结构差异,为该病害的早期预防或生态调控提供科学依据。【方法】利用Illumina MiSeq高通量测序技术分析健康烟株与感染黑胫病烟株根际土壤细菌群落结构差异。【结果】健康和患病烟株根际土壤样品中细菌OTU数分别为4 763个和4 653个。感染黑胫病烟株根际土壤OTU总数较健康烟株菌根际土壤减少2.31%,特有OTU数减少3%。与健康烟株根际土样相比感染黑胫病烟株根际土壤细菌群落多样性水平明显下降。患病烟株根际土壤的Shannon、ACE和Chao1指数分别较健康植株降低了3.05%、21.29%、15.23%。同时,感染黑胫病烟株与健康烟株根际土壤细菌菌群落的优势物种显著不同,感染黑胫病烟株根际土壤中拟杆菌门(Bacteroidota)和粘球菌门(Myxococcota)相对丰度减少59.13%、20.38%;厚壁菌门(Firmicutes)、Methylomirabilota相对丰度分别增加了34.17%、117.19%。属水平上,在健康烟株根际土壤样本中为优势菌属的类诺卡氏菌属(Nocardioides, 4.99%)在感染黑胫病烟株土壤样本中未检测到。【结论】烟草植株根际土壤中细菌群落结构改变及物种多样性降低是烟草黑胫病发生的重要特征。