桔梗素D通过下调成纤维细胞TRPC6表达改善小鼠肺纤维化

目的探究桔梗素D(PD)对肺纤维化的影响及其机制。方法博来霉素(BLM)气道内滴入构建C57BL/6J小鼠肺纤维化模型,再予PD(10 mg/kg)灌胃,28 d后处死小鼠。分组如下:对照组(control)、BLM(10 mg/kg)模型组、BLM(10 mg/kg)+PD(10 mg/kg)组。肺组织石蜡切片HE染色、免疫组化和天狼星红染色评估小鼠肺组织纤维化程度和瞬时受体电位离子通道亚族C成员6(TRPC6)的表达与分布。Westernblot检测肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平。小鼠原代肺成纤维细胞体外培养,分别用PD、TRPC6抑制剂醋酸落叶松酯(LA)预处理后加入转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激细胞,根据加入的TGF-β1和PD浓度不同分组如下:control组、TGF-β1(10 ng/mL)组、PD(2.5μmol/L)+TGF-β1组、PD(5μmol/L)+TGF-β1组和PD(10μmol/L)+TGF-β1组,LA处理分组如下:control组、TGF-β1(10 ng/mL)组和LA(10μmol/L)+TGF-β1组,测定细胞存活率、collagenⅠ、α-SMA和TRPC6的表达水平、活性氧(ROS)生成水平、线粒体膜电位、细胞增殖能力等指标。利用网络药理学方法结合文献分析PD作用于肺纤维化可能通过的机制。结果PD可明显减轻BLM诱导小鼠模型的肺部纤维化程度、减少α-SMA表达(P<0.05)。CCK-8结果显示PD、TGF-β1和LA的最适宜刺激浓度分别是10μmol/L、10 ng/mL和10μmol/L;5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)染色结果显示PD能够有效抑制肺成纤维细胞增殖;2,7-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)染色显示PD能有效减少TGF-β1诱导的细胞ROS生成(P<0.0001);线粒体膜电位检测(Jc-1染色)结果显示PD能有效缓解TGF-β1诱导的细胞线粒体膜电位下降(P<0.001);蛋白电泳结果显示PD能显著抑制TGF-β1诱导的α-SMA和collagenⅠ的表达(P<0.05)。网络药理学结合文献分析发现PD可能通过TRPC6作用于肺纤维化。免疫组织化学结果显示PD明显减轻了BLM诱导的肺组织TRPC6表达。蛋白电泳结果显示PD可明显抑制TGF-β1诱导的TRPC6表达(P<0.05);使用LA可明显抑制细胞TRPC6、α-SMA、collagenⅠ的表达(P<0.05)。结论PD可降低小鼠肺纤维化,其机制可能与下调TRPC6并减少ROS产生有关。

健康人群和慢性阻塞性肺疾病患者的血清维生素D与血嗜酸性粒细胞计数的关系

目的探讨健康人群和慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者血清维生素D缺乏情况及与血嗜酸性粒细胞(EOS)的关系。方法收集南方医科大学南方医院体检中心2017年10月~2021年12月的健康人6163名,男性3781名,女性2382名。根据血清25(OH)D水平分为严重缺乏组(<10 ng/mL)、缺乏组(<20 ng/mL)、不足组(<30 ng/mL)和正常组(≥30 ng/mL)。回顾性纳入2021年4月~2021年6月在我院呼吸科门诊就诊的COPD患者67人为疾病组,并1∶1选取了同期在我院体检中心的67人作为对照组。记录血常规、体质量指数(BMI)等数据。结果健康人群血清25(OH)D(<30 ng/mL)总体缺乏率(包括缺乏和不足)为85.31%,女性缺乏率为89.29%,显著高于男性。6、7、8月份血清25(OH)D水平明显高于12、1、2月份。健康人中血EOS水平在血清25(OH)D严重缺乏组最低,不足组和缺乏组次之,正常组最高(P<0.05)。多重回归分析显示年龄更大、BMI更高及维生素D水平升高均是血EOS升高的危险因素。COPD组(19.66±7.87 ng/mL)血清25(OH)D水平低于健康对照组(26.39±9.28 ng/mL),差异具有统计学意义(P<0.05)。血清25(OH)D水平降低是COPD发生的危险因素。回归分析显示COPD血清25(OH)D水平与血EOS、性别及BMI无明显相关。结论南方地区健康人群和COPD患者血清维生素D水平普遍缺乏,维生素D水平与性别、BMI及血EOS水平关系在健康及疾病状态下不一致。

肺泡一氧化氮在间质性肺疾病诊断及鉴别中的应用价值

目的探讨呼出气一氧化氮(eNO)在间质肺疾病诊断及鉴别诊断中的应用价值。方法根据欧洲呼吸学会关于eNO的指南,收集68例健康者和45例间质性肺疾病(ILD)患者,其中包括18例结缔组织相关间质性肺疾病(CTD-ILD),27例非结缔组织相关间质性肺疾病(non CTD-ILD),在流速50 mL/s和200 mL/s时检测呼出气一氧化氮(FeNO)值和肺泡一氧化氮(CaNO)值,比较组间及亚组间eNO差异,应用受试者工作特征曲线(ROC)分析eNO的预测价值。并在ILD组探索CaNO与肺功能指标的相关性。结果ILD组CaNO、FeNO50、FeNO200水平高于健康对照组(P<0.05);Logistic回归分析显示CaNO和FeNO200是发生ILD的危险因素;ROC曲线分析显示CaNO和FeNO200联合诊断ILD的曲线下面积为0.829(95%CI:0.752~0.906)。在ILD组中,CaNO水平与肺一氧化碳弥散量占预计值的百分比呈负相关(r=-0.471,P<0.05)。ILD组中分组比较显示CTD-ILD组CaNO值明显高于非CTD-ILD组(P<0.05)。ROC曲线分析显示CaNO鉴别CTD-ILD和非CTD-ILD曲线下面积为0.725(95%CI:0.576~0.875)。结论CaNO在诊断ILD和鉴别CTD-ILD方面具有一定的价值。

人体微生态与肺癌的相关性研究进展

肺癌仍是高发病率和高病死率的恶性肿瘤之一,随着新一代测序技术的发展,人体微生态与肺癌的相互关系已成为研究热点。目前越来越多的证据表明微生物细菌群落与包括肺癌在内的恶性肿瘤的发生发展相关,但其相互作用机制仍不明确,本文将人体口腔、肠道、肺部的细菌微生态与肺癌的相关研究予以综述,旨在为临床上诊断与治疗肺癌提供新的思路,同时对人体微生态与肺癌的今后研究方向提出展望。

靶向哮喘气道上皮研究进展

哮喘是一种遗传和环境因素共同作用的异质性疾病,气道上皮损伤是哮喘患者常见的气道病理改变。气道上皮的物理屏障功能和免疫调节功能共同应对病毒、过敏原及大气污染物的刺激和损伤后修复,并在哮喘气道炎症、气道高反应性及气道重塑中发挥重要作用。近年来,针对气道上皮的靶向疗法已经显示出临床治疗价值,有可能成为哮喘,尤其是重度哮喘新的干预靶点。本文将重点探讨气道上皮在哮喘发病中的作用及靶向哮喘气道上皮的治疗策略。

维生素D_3上调蛋白1在哮喘嗜酸粒细胞中的表达及其与细胞活化的关系

目的:探讨维生素D3上调蛋白1(VDUP1)在哮喘患者外周血嗜酸粒细胞(EOS)中的表达及与EOS活化的关系。方法:实验分为对照组、哮喘发作组和缓解组。抽取外周静脉血15mL,计算诱导痰EOS%,测定第1秒最大呼气量占预计值百分比(FEV1.0%)和最大呼气中期流速占预计值百分比(PEF%);ELISA法检测血清嗜酸粒细胞阳离子蛋白(ECP)浓度。RT-PCR及Western blotting方法检测外周血EOSVDUP1表达情况。IL-5与EOS共孵育,检测EOSVDUP1表达情况,ELISA法检测培养上清液ECP浓度。结果:哮喘发作组外周血EOSVDUP1表达均显著低于正常组及缓解组,与诱导痰EOS%及血清ECP浓度呈明显负相关;缓解组基因表达与正常对照组无显著差异,与上述指标也无明显相关。IL-5刺激下,EOSVDUP1表达明显降低,同时伴上清ECP明显升高。结论:哮喘发作时外周血EOSVDUP1表达明显下调,EOSVDUP1表达与血清ECP及诱导痰EOS%呈明显负相关,IL-5促进EOS活化可能与VDUP1通路有关。

2009年美国感染病学会念珠菌病治疗指南要点解读

念珠菌是人类侵袭性真菌感染最常见的病原体，既可引起皮肤、黏膜的非致命性感染，也可侵袭任何器官而危及生命。最近美国感染病学会（IDSA）公布了2009年念珠菌病治疗的新指南，发表在Clinical Infectious Diseases，2009，48（5）：503—535，对2004年的指南进行了修订，有很大的变动，特别是关于念珠菌血症的治疗方面。自2004年以来，涌现了多种新的抗真菌药物，尤其是棘白菌素，以及一些关于念珠菌血症治疗的临床研究的推出。促使新的指南的诞生。新指南解答了念珠菌病治疗中常见的15个问题，每个推荐意见都给出相应的推荐分级（分类、定义见表1），同时给出支持的相关证据。本文就指南更新要点、常见抗念珠菌药、念珠菌血症的治疗、念殊菌病的经验性治疗、念珠菌病的预防性用药分别进行解读。

危重呼吸衰竭患者气管插管时机及支气管灌洗的研究

目的 :探讨慢性阻塞性肺疾病 (COPD )患者呼吸衰竭急性加重期气管插管的恰当时机。方法 :对 2 0 0 0年 1月～ 2 0 0 2年 2月收住院的 2 1例COPD、慢性肺心病急性加重期患者临床资料进行回顾性分析。其中从入院到气管插管及机械通气的时间超过 84h共 5例 ,为晚气管插管组 ;时间不足 84h共 16例 ,为早气管插管组。 2 1例患者予积极的抗感染、激素、支气管扩张剂 ,经鼻 (面 )罩机械通气 1～ 5d(2 4～ 12 0h) ,效果欠佳 ;给予纤支镜检查并引导经鼻气管插管 ,从气管和左右主支气管内吸出大量的黄脓痰 ,立即给予机械辅助通气后 ,行纤支镜支气管灌洗 ,双肺哮鸣音迅速明显减轻 ,表现为少许散在的哮鸣音 ,同时氨茶碱等支气管扩张剂的用量较插管前明显减少 ,并停用激素。结果 :早气管插管组 16例中 15例成功撤机 ,拔除气管插管 ,呼衰治愈出院 ,从入院到气管插管 ,机械通气的平均插管时间 (2 9 8± 5 2 )h ,1例因出现多脏器功能衰竭死亡。晚气管插管组 5例 ,因经济原因放弃治疗自动出院 2例 ,死亡 3例 ,平均插管时间 (10 2 3± 8 2 )h。结论 :对于COPD合并危重哮喘发作患者气管插管的时机为 (1)虽然X线胸片无明显的肺炎渗出性病变 ,无明显嗜睡症状 ,无明显二氧化碳潴留 ,但经一般抗感染解痉等综合治疗无效者 ;

哮喘发作与细胞骨架重建相关基因的差异表达

目的:研究外周血嗜酸性粒细胞(EOS)在哮喘发作时与细胞骨架相关基因的差异表达.方法:应用SuperSMARTcDNAsynthesis技术从总RNA合成足量的双链cD-NA.经液相杂交消减两组共同序列,以抑制性PCR方式扩增差异表达序列.构建上调与下调cDNA文库,菌落PCR扩增差异片段,应用差异筛选技术进一步鉴定差异表达基因并测序,结果通过核酸数据库进行同源性比较.结果:构建了高效的上调与下调消减cDNA文库,经鉴定及同源性分析有6个与细胞骨架重建有关,包括上调基因slingshot磷酸酶(SSH-2L),蛋白磷酸酶1β亚型(PP1Cβ),无功能糖基转移酶样蛋白(DOCK-8),蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型6(PTPN6)与非受体型12(PTPN12);下调基因,肌凝蛋白调节轻链结合蛋白(MIR).结论:这些骨架重建相关基因的差异表达可能参与了哮喘发作,进一步进行功能研究可能为哮喘治疗提供新的作用靶点.

影像组学预测非小细胞肺癌EGFR突变的研究进展

肺癌是发病率和死亡率均位居前列的恶性肿瘤之一,其病理类型中以非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)最为常见。表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)在NSCLC的诊疗过程中至关重要,EGFR突变的精准评估具有重要的临床意义。目前基于活检的EGFR检测方法存在许多局限性。影像组学采用自动或半自动分析方法将影像学数据转化为具有高分辨率的、可挖掘的空间数据,可反映肿瘤的内在异质性。大量研究表明影像组学可无创、准确地实现NSCLC原发病灶与转移灶的EGFR突变预测、突变位点鉴别以及获得性耐药突变识别,本文就NSCLC中EGFR突变状态预测的影像组学研究进展进行综述。

万可宁和克林霉素治疗呼吸道感染的临床观察

目的：比较经生产工艺改良后的口服克林霉素（万可宁）与传统生产工艺生产的口服克林霉素在治疗呼吸道感染时的主要不良反应。方法：呼吸道感染成人患者102例，分为2组，万可宁组52例（男性33例，女性19例，年龄42±18岁）；克林霉素组50例（男性33例，女性17例，年龄43±16岁），用量均为300mg，口服，一日三次，疗程5±3天。结果：临床疗效方面万可宁组和克林霉素组，临床总有效率分别为98．1％和98％。两组有效率差异无显著性意义（P＞0．01）。不良反应方面：克林霉素组不良反应发生率明显高于万可宁组（P＞0．01），不良反应症状计分明显高于万可宁组（P＜0．01）。结论：应用口服生产工艺经过改进，万可宁治疗呼吸道感染的临床疗效与传统工艺生产的克林霉素的临床疗效相似，胃肠道不良反应较传统生产工艺生产的克林霉素明显减少。

后“非典”时期“非典”的鉴别诊断

目前全国内地每日新增传染性非典型肺炎(SARS)临床诊断病例不足10例,已进入后“非典”时期。SARS属于呼吸道传染病之一,具有临床表现、肺部体征及胸部影像学不一致的特点。在没有SARS流行期间也存在“非典型肺炎”(AP),因此在后“非典”时期加深对SARS发病率及临床演变过程的认识,加强对具有相似临床表现特点的疾病如AP、流感病毒性肺炎、肺结核、肺真菌性肺炎等的鉴别诊断,做好同步化的信息资源共享及加强基层一线医疗人员对SARS与AP的认识与培训,对及时发现SARS患者并避免SARS的“过度诊断”是非常重要的。采用临床多专业专家联合会诊是SARS诊断与鉴别诊断的关键,也是对新出现的传染性疾病临床诊断治疗以及预防和隔离的一种有益尝试。

钾通道活化剂对豚鼠气道平滑肌电压依赖性钾通道特性的影响

钾通道活化剂可激活钾离子通道并松驰支气管平滑肌，在急性分离的豚鼠支气管平滑肌细胞上，用膜片钳技术的细胞贴附式和内面向外式研究了其对电压依赖性钾通道的直接作用。结果证实：在全细胞记录条件下，卡吗克林和拉吗克林不影响静息膜电位。但在去极化时可使通道电导从７５．２±５．１ｐＳ分别增大到８５．９±１１．８ｐＳ和８２．１±５．５ｐＳ。通道动力学特性也发生了改变，通道平均开放时间的τｏ２值延长和开放概率显著增加，其中拉吗克林的作用更为强。两者均可诱发通道出现多级开放。表明这两类活化剂可使去极化时钾离子外流增加。

从与“非典”的斗争中理解“科学精神”的内涵

通过分析与“非典”斗争中表现出来的科学精神 ,来理解其深刻而广泛的哲学内涵 ,它包括探索、求实、怀疑、合作、创新等精神 ,以及科学精神在社会生活中的重要作用和重大意义 ,从而动员在全社会提倡科学精神。

豚鼠气管平滑肌细胞钾离子通道动力学特性及对拮抗剂的敏感性

钾离子通道功能与细胞的兴奋性有关，在豚鼠支气管平滑肌细胞膜上，用膜片钳技术证实了一类电压依赖性钾通道的存在，该通道电导为７５±５ｐＳ，翻转电位为－７３±８ｍＶ．动力学特性显示，通道开放时程分布直方图符合双指数拟合．其中τ０２随去极化程度增大而增大．通道开放概率有明显的电压依赖性．该类通道可被四乙胺从膜的内，外侧面阻断，对４－氨基吡啶不敏感．可被铯离子阻断，通道活动与细胞内钙水平降低无关．提示钾离子通道特性在不同组织细胞上有差异．

中分子物质测定在胸腔积液鉴别诊断中的意义

本文测定了正常人、结核性和癌性胸膜炎患者血与胸水中分子物质(MMS)含量。结核性胸膜炎组血中MMS值与正常对照组相比无统计学差异;癌性胸膜炎组血中MMS值明显低于正常对照组和结核性胸膜炎组,但其胸水中MMS值却高于结核性胸膜炎组,且胸水与血中MMS值之比也明显高于结核性胸膜炎组。