左乙拉西坦对自发性癫痫大鼠大发作和小发作的作用(英文)

目的 鉴于左乙拉西坦在各种啮齿类动物上的抗癫痫作用不同 ,未见报告其在自发性癫痫大鼠上的作用 ,故研究之。方法 在大脑海马和皮质部位安置电极 ,观察腹腔注射单剂量左乙拉西坦对自发性癫痫大鼠脑电图的影响。结果 给左乙拉西坦(40 ,80和 16 0mg·kg- 1,ip)后 135～ 16 5min ,癫痫小发作的总持续时间分别下降到给药前水平的 (87±15 ) % ,(34± 7) %和 (39± 19) %。大发作的总持续时间下降到 (81± 2 8) % ,(6 5± 11) %和 (5 2± 7) %。大发作的出现频率下降到 (71± 2 9) % ,(5 4± 12 ) %和 (32± 15 ) %。

学习哈佛教学新理念 搞好药理学课整合教学

药理学课程的整合教学是改革传统教学方法的初步尝试。实践证明 ,启发学生的学习主动性 ,将教学的中心由以教师为主转向以学生为主 ,使药理课程的教学气氛发生了根本改变 ,提高了学生独立分析问题和解决问题的能力。

药理学PBL教学中学生批判性思维能力的培养

批判性思维是一种有目的性、自我调节的判断性思维,它是与以问题为中心的学习(PBL)方式相关的一项技能。到目前为止在我国高等教育中对学生批判性思维能力还没有正式的评价标准,利用改良的CTDI-CV法探讨在药理学PBL教学中如何评价和培养学生的批判性思维能力是一次新的探索。研究表明改良式CTDI-CV调查问卷有助于学生反思个人批判性思维的表现,教师也可在设计教学课程时根据学生的表现加强某方面的学习,使学生充分发挥批判性思维。

康容注射液对家兔颅内压影响的研究

目的研究康容注射液对正常和已经增高的家兔颅内压的作用。方法通过侧脑室插管测定家兔颅内压的变化。观察康容注射液对正常家兔的颅内压的影响以及对硝酸甘油引起的颅内压升高的防治效果。结果单纯静脉注射康容注射液(内含吡拉西坦剂量为750 mg/kg)可使正常家兔的颅内压下降,与用药前的颅内压相比差异显著(P<0.01);连续静脉滴注硝酸甘油0.04mg/kg/min 10 min后,可使正常家兔的颅内压明显升高(净增加20％±4％);在给康容注射液(内含吡拉西坦剂量为750 mg/kg)5/min后开始静脉滴注硝酸甘油0.04 mg/kg/min,康容注射液可完全抑制硝酸甘油引起的家兔颅内压增高作用。结论单纯注射康容注射液可使正常家兔的颅内压下降,提前5 min静脉注射康容注射液对硝酸甘油引起的颅内压增高具有确实的预防作用。

电刺激糖尿病大鼠血管舒张神经反应性变化的研究

目的 :研究不同病期的糖尿病大鼠外周血管舒张神经是否发生病变。方法 :将不同病期链佐霉素(STZ)性糖尿病及对照组大鼠制成毁脑脊髓大鼠模型 ,在用六烃季胺阻断内源性去甲肾上腺素释放及在甲氧明升压基础上 ,对比观察了脊髓内电刺激诱发的外周血管舒张效应。结果 :4周和 8周糖尿病大鼠脊髓内电刺激诱发的血管舒张反应未见明显改变 ,而 12周糖尿病大鼠反应性明显降低。结论 :随着糖尿病病程的延长及病情的进展 ,外周血管舒张神经可能发生病变而导致其功能降低。

国产脑复康对家兔颅内压影响的研究

应用侧脑室插管方法,观察静脉注射脑复康对正常和已经增高的家兔颅内压的影响。实验结果提示,脑复康有降低家兔颅内压的作用,并且对硝酸甘油引起的颅内压升高有明显的防治作用。

HPLC法测定tremor大鼠脑组织中谷氨酸和GABA含量

目的建立测定tremor大鼠(tm)脑内海马组织中GLU及GABA浓度的高效液相色谱(HPLC)方法。方法冰上剥离13wk的tm/Wistar大鼠海马组织,低温匀浆处理,利用邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生HPLC法结合荧光检测器测定GLU和GABA的含量。0.1mol·L-1醋酸钾和甲醇进行二元梯度洗脱,峰面积定量。结果GLU的线性方程为Y^=1E+06X(r2=0.9937),线性范围为0.15～5.88mg·L-1,具有良好的线性关系,在0.74、1.47、3.68mg.L-13个浓度下样本回收率分别为97.7%、98.9%、100.5%;样品中GLU日内变异系数为3.8%,隔日测定后,日间变异系数为5.9%;GABA的线性方程为Y^=4E+06X(r2=0.998),线性范围为0.10～2.15mg·L-1,具有良好的线性关系,在0.2、0.5、1.0mg·L-13个浓度下样本回收率分别为98.3%、101.0%、102.7%;样品GABA日内变异系数为2.3%,隔日测定后,日间变异系数为3.9%。结论该方法较简便、快速且干扰相对较小,满足测定要求,可用于氨基酸的含量测定研究。

自发性癫痫大鼠皮质和海马中GLT-1、EAAC1表达异常

目的探讨自发性癫痫大鼠(SER)皮质和海马中GLT-1、EAAC1 mRNA与蛋白的表达情况。方法应用RT-PCR技术检测GLT-1、EAAC1 mRNA的表达;应用Westernblot方法检测GLT-1、EAAC1蛋白的表达;应用免疫组化方法定位GLT-1、EAAC1蛋白。结果SER皮质中GLT-1蛋白表达低于正常Wistar大鼠(P<0.05);EAAC1 mRNA及蛋白表达均低于正常Wistar大鼠(P<0.01);SER海马中GLT-1蛋白表达高于Wistar大鼠(P<0.01);免疫组化结果显示GLT-1、EAAC1在SER、Wistar大鼠皮质和海马中均有表达,且位于细胞膜上。结论SER皮质中GLT-1、EAAC1表达下调可能促进了癫痫的发生;海马中GLT-1蛋白表达上调可能是一种代偿性神经保护机制。

托吡酯对遗传性癫痫大鼠脑内GAT-1和GAT-3表达的影响

目的探讨托吡酯对TRM大鼠脑内GAT-1和GAT-3 mRNA和蛋白表达的影响。方法分别应用实时定量PCR法和Western blot方法检测Wistar正常组、TRM组、TPM40组和TPM80组脑内GAT-1和GAT-3 mRNA和蛋白表达。结果 GAT-1、GAT-3和β-actin标准曲线相关性良好,基因特异性强。GAT-1 mRNA在TRM组的海马高于正常组(P<0.01);与TRM组比较,TPM80组海马中GAT-1 mRNA明显降低(P<0.05);GAT-3 mRNA在TRM组海马中的表达高于正常组(P<0.05);GAT-1蛋白表达在TRM组的海马高于正常组(P<0.01);与TRM组比较,TPM80组海马中GAT-1蛋白明显降低(P<0.01);GAT-3蛋白在TRM组海马中的表达高于正常组(P<0.05)。结论 TRM组海马内GAT-1及GAT-3的表达增加可能促进了癫痫的发生。托吡酯的抗癫痫作用可能是通过降低海马内GAT-1的表达来实现的,这种调节存在剂量依赖性。

遗传性癫痫大鼠海马内GAT-1和GAT-3表达上调

目的探讨遗传性癫痫大鼠(TRM)海马内GAT-1和GAT-3mRNA与蛋白的表达。方法应用RT-PCR技术检测GAT-1和GAT-3mRNA的表达;应用Westernblot方法检测GAT-1和GAT-3蛋白的表达;应用免疫组化方法定位GAT-1和GAT-3蛋白的分布。结果TRM大鼠海马内GAT-1mR-NA和蛋白表达均高于正常Wistar大鼠(P<0.01);GAT-3mRNA表达高于正常Wistar大鼠(P<0.05);GAT-3蛋白表达亦高于正常Wistar大鼠(P<0.01);免疫组化结果显示GAT-1在TRM和Wistar大鼠海马的CA1、CA3和DG区均有明显分布,且在TRM鼠海马的CA1、CA3和DG区中均比在正常Wistar鼠中明显;而GAT-3蛋白只在TRM和Wistar大鼠海马的CA1区中表达丰富,同时,和正常Wistar鼠比较,TRM鼠海马CA1区中GAT-3蛋白的表达明显增加。结论TRM大鼠海马内GAT-1和GAT-3表达上调可能促进了癫痫的发生,可能是癫痫治疗的靶点。

遗传性癫痫大鼠海马组织Ca^(2+)/Ca_V1.2/CaM/CaMKⅡ信号通路的异常变化

目的研究遗传性癫痫大鼠(tremor,TRM)海马组织电压门控性L型钙离子通道α1C亚单位(CaV1.2)、钙调蛋白(CaM)、钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)和细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)的变化情况。方法应用West-ern blot法与免疫荧光双标法检测TRM海马CA1、CA3和DG区CaV1.2、CaM和磷酸化CaMKⅡ(p-CaMKⅡ)的蛋白表达及分布;激光共聚焦显微镜检测TRM海马组织中[Ca2+]i。结果与正常Wistar大鼠相比,TRM海马组织中CaV1.2和CaM的蛋白表达明显升高(P<0.01),而p-CaMKⅡ的蛋白表达明显下降(P<0.01);免疫荧光双标法结果显示:CaV1.2、CaM、p-CaMKⅡ在CA1、CA3区的锥体细胞和DG区的颗粒细胞群表达丰富,同时CaV1.2与CaM、p-CaMKⅡ与CaM在海马各区域均存在共定位;激光共聚焦显微镜检测TRM海马细胞[Ca2+]i明显增强(P<0.01)。结论Ca2+/CaV1.2/CaM/CaMKⅡ通路的异常变化可能参与遗传性癫痫大鼠的癫痫发生与发展。

无镁诱导培养大鼠海马神经元癫痫放电模型中延迟整流钾电流的变化

目的利用无镁细胞外液诱导原代培养大鼠海马神经元癫痫放电模型来检测延迟整流钾电流的变化。方法采用新生24 h内Wistar大鼠,分离海马神经元进行原代培养。体外培养至12~16 d时,无镁细胞外液处理神经元3 h并恢复正常细胞外液,应用全细胞膜片钳技术记录神经元的放电情况及延迟整流钾电流。结果无镁处理后的神经元存在自发的"癫痫样"放电;无镁诱导可使神经元延迟整流钾电流增大。结论延迟整流钾电流增大可能与无镁诱导体外培养大鼠海马神经元自发异常放电的基础病理机制相关。

自发性癫痫大鼠海马Ⅰ型与Ⅲ型钠通道α亚基表达上调

目的通过对照实验探讨自发性癫痫大鼠(SER)与野生型正常大鼠(WTC)海马Ⅰ型和Ⅲ型电压门控性钠通道α亚基mRNA与蛋白的表达情况。方法发现SER癫痫大发作后即刻提取海马组织总RNA,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)表达α1与α3亚基mRNA;应用免疫荧光与免疫组化定位与表达α1亚基蛋白与α3亚基ⅢN蛋白。结果SER海马Ⅰ型与Ⅲ型钠通道α亚基mRNA表达高于WTC(P<0·01);SER海马Ⅰ型钠通道α亚基蛋白表达高于WTC(P<0·01);α3亚基ⅢN型蛋白在SER成鼠有表达,而WTC成鼠无表达。结论SER脑内海马Ⅰ型与Ⅲ型电压门控性钠通道α亚基表达上调,可能是神经元高兴奋性的原因或癫痫发作的继发表现。

蜈蚣等复方中药对震颤大鼠癫痫小发作的作用

目的 :观察由蜈蚣、僵蚕、钩藤、制南星组成的复方中药对震颤大鼠癫痫小发作的作用。方法 :震颤大鼠脑海马和皮质慢性安插电极 ,连续记录灌胃给药前及给药不同时间后的脑电图。结果 :复方中药明显抑制了震颤大鼠平均每次癫痫小发作的持续时间 (P <0 .0 1) ,在给药 6d、停药 1,2 ,3,4d后分别降到给药前水平的 (71±9) % ,(4 7± 9) % ,(5 2± 11) % ,(5 9± 15 ) %及 (6 8± 18) % ,且在停药 1d后的作用显著强于丙戊酸钠 (P <0 .0 1)。结论 :由蜈蚣、僵蚕、钩藤、制南星组成的复方中药具有明显的对抗震颤大鼠癫痫小发作的作用。

mGluR1在自发性癫痫大鼠海马中的表达

目的检测自发性癫痫大鼠海马中mGluR1的表达情况。方法RT-PCR技术检测鼠海马中mGluR1基因的表达;利用免疫组化和Western blot方法检测鼠海马中mGluR1总蛋白的表达。结果自发性癫痫大鼠海马中mGluR1基因总水平下降(P<0.05),免疫组化显示海马DG区和CA3区的mGluR1蛋白表达均下降(P<0.05),CA1区无变化(P>0.05),mGluR1阳性的神经细胞其密度较正常鼠增强;Western blot检测mGluR1蛋白总量下降(P<0.05)。结论自发性癫痫大鼠海马中总mGluR1表达下调,单一细胞表达增强。

氨己烯酸对自发性癫痫大鼠小发作和大发作的作用

目的研究氨己烯酸对自发性癫痫大鼠的小发作和大发作的作用。方法通过在自发性癫痫大鼠大脑海马和皮质部位安插电极,观察口服氨己烯酸后对自发性癫痫大鼠的脑电图的影响。结果口服氨己烯酸(100mg·kg-1)后3、4、5h癫痫小发作的出现频率分别下降到给药前的(54±5)%、(41±9)%和(34±4)%(P<0.01)。氨己烯酸使大发作的出现频率分别下降到给药前的(68±13)%、(39±13)%和(21±6)%(P<0.01)。氨己烯酸的抑制效应能被GABAA受体特异性拮抗剂荷包牡丹碱拮抗。结论氨己烯酸具有明显的对抗自发性癫痫大鼠的小发作和大发作的作用,对癫痫大发作的抑制效应是通过GABAA受体发挥作用的。

自发性癫痫大鼠海马电压门控性钠通道β_1亚基表达与基因突变分析

目的与正常Wistar大鼠作对比,探讨自发性癫痫大鼠(SER)海马中电压门控性钠通道β1亚基mRNA与蛋白的表达情况及基因突变分析。方法应用RT-PCR技术检测β1亚基mRNA的表达;免疫组化方法定位β1亚基蛋白;免疫印迹方法检测β1亚基蛋白的表达;直接测序技术筛查β1亚基全部外显子基因突变位点。结果SER海马β1亚基mRNA表达高于Wistar大鼠(P<0.05);免疫组化结果显示β1亚基蛋白在SER大鼠海马各区中均有表达,且位于细胞膜上;β1亚基蛋白的表达高于Wistar大鼠(P<0.01);直接测序法筛查了β1亚基全部外显子的突变位点,结果未见任何突变。结论SER海马β1亚基表达异常可能会促进癫痫样兴奋活动的产生,进而构成SER癫痫表型的发作基础。

网络教学平台结合PBL教学方法对临床药学专业学生学习能力的培养

本研究将网络教学平台结合PBL教学方法首次应用于临床药学专业药物毒理学学科的教学中。通过调查问卷比较学生学习主动性、沟通能力以及分析问题、解决问题等学习能力,发现经过此种改革的PBL教学方法学习后,学生的综合学习能力显著提高,收到了良好的教学效果。

自拟羚羊角方对震颤大鼠癫痫小发作作用的实验研究

目的:观察由羚羊角、天麻、白蒺藜、蜈蚣、全蝎等组成的复方中药对震颤大鼠小发作的作用。方法:取震颤大鼠30只,雌雄各半,随机分成5组,分别为高、中、低复方中药组,西药组,蒸馏水组,每组6只。各组大鼠皮质和海马安插电极,连续记录给药前及给药后不同时段的脑电图。结果:低、中、高剂量复方中药组在停药1d后对震颤大鼠小发作的作用最显著。以给药前作为100%,平均每次癫痫小发作时间在停药1d分别降至给药前的(51±9)%,(49±13)%,(42±6)%;15min内癫痫小发作总持续时间分别降至给药前的(60±18)%,(57±14)%,(57±18)%。结论:自拟羚羊角方对震颤大鼠小发作有明显的抑制作用。

PBL在药物毒理学教学中的应用及实践体会

随着PBL教学模式在国内外医学教育领域的不断推广,PBL教学法首次应用于临床药学专业药物毒理学的教学中。教学实践证明,药物毒理学PBL教学改革具有极其重要的意义,培养了学生的综合素质,提高了学生的自学能力,师生从实践过程中受益匪浅,获得良好的教学效果。