样本的病毒核酸浓度与其荧光PCR反应检测Ct值关系分析

为基层兽医实验室制备盲样时,发现特定浓度的核酸通过倍比稀释,其荧光PCR反应的Ct值显示一定的规律性,即存在两个核酸浓度区间,分别是初始浓度与某个浓度之间(区间1)、该浓度与终末稀释浓度(区间2),且区间2内一部分核酸的Ct值比区间1的Ct值低;两个区间内,随着核酸浓度的降低,检测到的Ct值增大。这表明荧光PCR反应检测的Ct值与核酸浓度密切相关,同时也提示在制备病毒滴度低的样本时,需谨慎处理。本研究为增强核酸检测灵敏度提供参考。

Sharpie marker在试管上标记对荧光PCR检测Ct值的影响

为了探明Sharpie marker在试管上标记对荧光PCR检测Ct值的影响,本试验模拟现实工作中可能遇到的各类情形,从Sharpie marker标记试管的各种方式,以对照组、全黑管、管壁全黑管、管壁和盖半黑管、管壁半黑管、盖半黑管和盖全黑管等为对象,通过荧光PCR检测,比较分析Ct值。结果显示,全黑管和盖全黑管对Ct值的影响最大,管壁和盖半黑管与盖半黑管对Ct值的影响较大,而管壁全黑管和管壁半黑管对反应Ct值没有影响。本研究为正确使用Sharpie marker,确保荧光PCR检测结果的准确提供了参考。

市贩鸡肉中一株肠出血性大肠杆菌O157:H7的分离

大肠杆菌O157：H7是一种肠道出血性大肠杆菌（EHEC）,属于肠杆菌科埃希菌属,该型具有很强的耐酸和耐低温能力,可产生大量的Vero毒素引起人和动物出现肠出血性腹泻,儿童与老人易感染出现此症;严重时并发肾衰竭,病死率高,具有荚膜、鞭毛和菌毛;其最适生长温度为30℃~42℃,且广泛分布于自然界,人与人之间或人与家畜之间通过粪污染物经口途径传播。

采用不同ELISA试剂盒对猪瘟抗体水平调查结果的影响

本文采用猪瘟抗体间接ELISA和阻断ELISA检测试剂盒对320份血清样本进行猪瘟抗体检测,符合率达80.63%,对检测结果不一致的样品,利用抗体中和试验(FVNT)做定性检测,结果表明,间接ELISA试剂盒的敏感性和特异性均高于阻断ELISA试剂盒,猪瘟间接ELISA试剂盒更适用于我国猪瘟抗体检测。

重庆地区猪圆环病毒2型的分离鉴定与序列分析

为了解2007年以来重庆地区猪圆环病毒2型（PCV-2）的流行情况,对2007年—2013年重庆地区送检样品进行了PCV-2荧光定量PCR检测,并对阳性样品进行了病毒的分离鉴定,成功分离到12株PCV-2,对分离的12株PCV-2进行了全基因组克隆与序列分析。结果显示,所分离的PCV-2均处于PCV-2b分支,基因组全长均为1 767bp,与PCV-2b参考毒株（AF055394）的核苷酸同源性为96.2%-99.7%,与疫苗SH株的核苷酸同源性为96.0%-98.4%,而与疫苗LG株同源性仅为95.5%-95.8%。研究结果为PCV-2的研究及其感染的防控奠定了基础,也为重庆地区PCV-2疫苗毒株的选择提供了理论依据。

重庆市畜禽产品中沙门氏菌污染状况调查分析

为有效控制畜禽产品中沙门氏菌的污染,以便对污染源和污染途径进行针对性监控,对重庆市屠宰场、农贸市场和超市供应链的畜禽产品中沙门氏菌污染状况进行初步调查分析,同时对从供应链中分离的沙门氏茵进行18种抗生素的药敏试验。结果表明:屠宰环节猪肉的沙门氏菌污染程度较低,为7.27%;经过运输到达销售环节,其污染程度明显上升,最高的是超市环节,高达64.52%。对其所处的环境进行调查分析,发现屠宰场和超市的沙门氏菌污染较严重,尤其是屠宰场容器(88.89%)、台面(55.56%)和超市刀具(50.00%)、地面(46.67%);中型规模屠宰场的沙门氏菌污染风险最大。分离菌株对头孢类药物敏感,对磺胺类药物耐药严重,其次为四环素类和β-内酰胺类,多重耐药情况普遍。

荧光PCR诊断猪流行性腹泻病毒与猪轮状病毒混合感染病例

猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）和猪轮状病毒（PRV）足3种引起猪病毒性腹泻的重要病原。该3种病毒既可单独感染，也可混合感染,

开展实验室认证认可,提升动物疫病检测能力

本文介绍了实验室认证认可制度的发展现状及主要内容,论述了实验室认证认可工作对于提高实验室的质量管理水平及促进畜牧产业和社会发展的重要意义,着重分析了动物疫病检测实验室通过实验室认证认可对人员培训管理、检测设施设备、环境条件及检测结果质量的保障等方面的提升作用。

2021年全球高致病性禽流感疫情分析

为了解2021年全球高致病性禽流感疫情情况,分析其流行趋势,以有效应对疫情发生,从农业农村部(畜牧兽医局)、香港特区卫生防护中心以及台湾地区农业委员会动植物防疫检疫局等官方网站,收集2021年全球高致病性禽流感疫情信息,从时间、空间、群间三个维度进行统计分析。结果显示:2021年全球共有65个国家和地区报告发生高致病性禽流感疫情,疫情数同比增长250.64%;疫情呈现明显的季节性,1月、4—5月、11—12月疫情报告较多,其中12月为疫情高峰;1—8月主要流行H5N8亚型,9月以后H5N1成为主要流行型;欧洲报告的疫情次数最多,其次是亚洲和非洲;感染家禽和野禽种类多,病毒亚型多样。结果表明,2021年全球高致病性禽流感疫情形势十分严峻,我国应及时出台应对措施,强化监测预警,有效防控国内疫情。

猪肺炎支原体MY-99株P46基因的序列分析

提取猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae)MY-99株DNA,利用设计的一对引物扩增编码P46蛋白的基因,将扩增产物克隆到pMD18-T载体,挑取2个克隆株测序。测序结果表明,P46基因全长1134 bp,编码378个氨基酸,序列的182、381和734位有3个TGA,是编码色氨酸Trp的密码子。2个克隆株的测序结果与标准株232株的P46基因序列相比,其同源性分别为99.6%和99.2%。

PCV2 WH株人工感染断奶仔猪复制多系统衰竭综合征

【目的】建立猪圆环病毒2型(PCV2)WH株人工感染断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的动物模型,为探讨PCV2的致病机理及疫苗免疫效果评价奠定基础。【方法】将PCV2WH株通过颈部肌注和滴鼻感染PCV2抗体阴性的7周龄仔猪,攻毒后第4、7 d用钥孔血蓝蛋白(KLH)进行刺激,第7、11 d再腹腔注射巯基乙酸,同时设阴性对照组(单独KLH刺激)。攻毒后第35 d扑杀所有试验猪,观察其组织病变,并取肺脏、淋巴结组织提取病毒DNA,用PCR检测PCV2;取试验猪的肺脏、肝脏、脾脏、肾脏、淋巴结、心脏、膀胱等组织制作石蜡切片,进行HE染色和免疫组化分析。【结果】攻毒组仔猪的临床症状主要表现为发热、消瘦、被毛粗乱、皮肤苍白;攻毒后第35 d扑杀所有试验猪,剖检发现阴性对照组未出现病理变化,而攻毒组仔猪有明显病理变化,从其病变的肺脏、淋巴结、肾脏、脾脏、肝脏、心脏组织中均能检测到PCV2。HE染色结果显示,组织病理学变化主要为间质性肺炎、淋巴细胞缺失、间质性肾炎、肝脏肝窦单核巨噬细胞增生。免疫组化分析结果显示,肺脏支气管上皮细胞呈明显阳性,部分肺泡巨噬细胞可见阳性信号,主要位于胞浆内;肠系膜淋巴结均出现较强阳性信号,主要位于淋巴细胞的胞浆内;肾间质细胞呈明显阳性。【结论】用PCV2 WH株攻毒联合KLH和巯基乙酸反复刺激断奶仔猪能成功复制出PMWS,为后续PCV2疫苗的免疫效果评价及PMWS发病机理研究提供了理想的动物模型。

猪圆环病毒2型CAP蛋白新型表位抗原肽的设计、合成及免疫原性研究

目的设计合成PCV2 CAP的B细胞表位抗原肽并对其进行鉴定。方法采用DNAStar和BcePred分析软件并结合吴玉章氨基酸抗原指数计算方法预测PCV2 CAP的B细胞表位．以此合成4分支多重抗原肽结构．同时串联一个通用型n表位；采用Fmoc法合成4分支PCV2CAP多重抗原肽（MAP），通过高效反相液相色谱（RP-HPLC）、质谱（MS）分析对其进行初步鉴定。以合成的抗原肽免疫昆明系小鼠及兔，观察体液免疫反应。结果初步筛选出3种抗原指数较高的表位，即98～103aa（命名为B98），156～162aa（命名为B156），228～233aa（命名为B228）；合成的多重抗原肽经RP-HPLC层析后，纯度达到92.49％，MS鉴定其相对分子质量一致，误差小于0．1％。以合成的MAP疫苗免疫小鼠及兔后，可产生高滴度的特异性抗PCV2CAP抗体。结论PCV2CAP的B细胞新表位多重抗原肽有免疫原作用，将为PCV2CAP表位肽疫苗的研究奠定基础。

猪圆环病毒2型CAP蛋白B细胞表位预测与分析

基于PCV2 CAP蛋白的氨基酸序列，采用Kyte-Doolittle的亲水性方案、Emini方案、Karplus方案和Jameson-wolf抗原指数方案，辅以对PCV2 CAP蛋白的二级结构柔性区域分析，并结合吴玉章氨基酸抗原指数计算方法预测CAP蛋白的B细胞表位。结果表明，最有可能的B细胞优势表位位于CAP蛋白N端第4～18，23～28，32～41，57～64，96～103，175～182区段和第224～233区段。本研究用多参数预测PCV2 CAP蛋白的B细胞表位，为多肽疫苗的设计提供理论依据。

重庆市羊小反刍兽疫免疫效果监测与分析

采用竞争ELISA方法对从重庆市30个区县的种羊场、商品代饲养场和散养户采集的62284份羊血清样品进行小反刍兽疫(PPR)抗体检测。结果显示:53062份血清抗体合格,个体合格率为85.19%,其中种羊场合格率为93.67(3020/3224),商品代饲养场合格率为86.59%(21179/24458),散养户合格率为83.41%(28863/34602),免疫合格率均高于农业部规定的70%的最低标准。监测结果表明,重庆市羊PPR的免疫效果总体比较理想,同时也说明所使用的PPR疫苗免疫原性较好。

规模猪场仔猪腹泻病的诊断与防制

2010年以来,华东地区出现了大面积的仔猪腹泻病,部分省份的仔猪发病率高达87%,其主要病原为猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒。2012年1月,重庆长寿区一规模猪场暴发严重的仔猪腹泻病,仔猪多在吃初乳后1天左右发病,出现水样腹泻、呕吐、脱水等症状。发病率高达70%,病死率达90%。经血清学和病原学诊断,该病主要由猪流行性腹泻病毒和猪A群轮状病毒引起,并伴发了大肠杆菌病和Kobu病毒病。

DiversiLab系统在食源性致病菌基因分型中的应用

食源性致病菌所引起的食源性疾病已成为世界性的公共卫生问题。据美国疾病控制与预防中心（Centers for Disease Control and Prevention,CDC）报道,美国每年约发生4800万起食源性中毒事件,其中有940万起是由致病菌造成的[1]。据不完全统计,我国食源性疾病暴发年均数10万起,年发病人数超过1亿人次,

重庆市2019年部分禽场生物安全调查

为了解本市不同规模禽场生物安全状况,调查分析养殖环节存在的风险因素,科学指导动物疫病防控工作,保障禽类产品质量安全,维护公共卫生安全和养禽业健康发展,2019年重庆市动物疫病预防控制中心组织开展了重庆市部分规模禽场生物安全调查。

基因分型技术在单核细胞增生性李斯特菌监测溯源上的应用

单核细胞增生性李斯特菌Listeria monocytogenes是一种重要的食源性人畜共患病原菌,能引起人和多种动物流产、脑膜炎、肠胃炎、败血症、死胎等病症。与传统基于表型的分型方法相比,基因分型方法具有简单快速、分辨率高、敏感性强、重复性好等特点,在李斯特菌病病原菌的监测和溯源中具有重要的应用价值。对单核细胞增生性李斯特菌的3类基因分型方法:酶切技术,DNA测序技术和聚合酶链式反应(PCR)扩增技术进行了概述,从分型成本、样本通量、分辨力、灵敏度、重复性、快捷性和普及性等方面比较了3类基因分型方法的主要特点,重点评述了这些方法在单核细胞增生性李斯特菌暴发监测和溯源上的应用案例,为研究不同基因分型方法在单核细胞增生性李斯特菌暴发诊断、分型检测及感染溯源等方面的应用提供参考。

关于煤矿机电运输安全管理的研究

煤矿企业作为我国的支柱型产业之一,确保其安全生产对于提高企业的经济效益和社会效益都有着非常重要的意义。然而,由于一些客观因素的影响,致使煤矿在机电运输的安全管理上存在很多问题,从而严重阻碍了煤矿的正常生产,基于此点原因,加强对煤矿机电运输的安全管理显得尤为重要。本文首先对煤矿机电运输安全管理现状进行剖析,进而分析了设备存在的问题,并在此基础上提出一些对策,期望能够为提高煤矿企业的生产效率给予一定帮助。

安全管理在煤矿机电设备中的应用

在我国现代化煤矿中,都配备着大量的、先进的机电设备和设施。这些设备是煤矿企业从事煤炭生产活动的工具,是煤矿生产的物质技术基础。由于煤矿企业生产条件恶劣,灰尘、淋水、潮湿、顶板垮落、通风不良等众多不利因素都对设备的运行带来严重影响;加之生产区域广,设备种类多、数量大,给设备安全管理带来极大的困难。本文首先阐述了煤矿机电设备与安全管理的关系,其次分析了矿井主要固定设备的安全管理,最后就如何在煤矿机电设备中加强安全管理提出了自己的看法和建议,具有一定的参考价值。