目的研究细胞因子样蛋白1(cytokine-like protein 1,CYTL1)在脓毒症早期天然免疫反应阶段,对中性粒细胞促炎功能的影响。方法利用C57BL/6小鼠,随机数表法随机分为脓毒症组(盲肠结扎穿孔法制备)和对照组(实施假手术),每组6-12只。术后8h...目的研究细胞因子样蛋白1(cytokine-like protein 1,CYTL1)在脓毒症早期天然免疫反应阶段,对中性粒细胞促炎功能的影响。方法利用C57BL/6小鼠,随机数表法随机分为脓毒症组(盲肠结扎穿孔法制备)和对照组(实施假手术),每组6-12只。术后8h后分离小鼠外周血中性粒细胞,用CYTL1重组蛋白作用于细胞。Boyden趋化小室检测CYTL1对细胞的趋化活性;荧光素标记大肠杆菌吞噬试剂盒检测吞噬功能;荧光探针标记后流式细胞术检测氧自由基释放。统计学分析使用SPSS 20.0统计分析软件,符合正态分布的计量资料采用均数士标准差(Mean±SD)表示,组间比较采用成组r检验;计数资料采用率表示,组间比较采用卡方检验。以P<0.05为差异有统计学意义。结果与对照组相比,CYTL1对脓毒症小鼠中性粒细胞有较强的趋化活性[(10.0±2.0)vs(66.3±4.0),r=-21.6,P<0.0001]。与其他趋化因子相比,CYTL1趋化活性较“中间型”趋化因子白细胞介素-8强[(66.3±4.0)vs(21.7±6.5),t=10.1,P=0.001];与“终点型”趋化因子fMLF相比差别不明显[(66.3±4.0)vs(86.0±13.5),t=-2.4,P=0.073]。流式细胞术及共聚焦激光显微镜检测结果显示,与脓毒症组相比,CYTL1蛋白能促进脓毒症小鼠中性粒细胞吞噬大肠杆菌[(7.35±1.66)vs(2.84±0.62),t=4.4,P=0.012],并增加细胞释放氧自由基[(84340.1±5353.5)vs(351018.7±72291.7),t=6.4,P=0.003]。结论在脓毒症天然免疫反应阶段,CYTL1对小鼠中性粒细胞有较强的趋化活性,且能促进细胞吞噬能力及氧自由基释放,提示该因子可能在疾病早期有促进炎症反应的作用。展开更多
文摘目的研究细胞因子样蛋白1(cytokine-like protein 1,CYTL1)在脓毒症早期天然免疫反应阶段,对中性粒细胞促炎功能的影响。方法利用C57BL/6小鼠,随机数表法随机分为脓毒症组(盲肠结扎穿孔法制备)和对照组(实施假手术),每组6-12只。术后8h后分离小鼠外周血中性粒细胞,用CYTL1重组蛋白作用于细胞。Boyden趋化小室检测CYTL1对细胞的趋化活性;荧光素标记大肠杆菌吞噬试剂盒检测吞噬功能;荧光探针标记后流式细胞术检测氧自由基释放。统计学分析使用SPSS 20.0统计分析软件,符合正态分布的计量资料采用均数士标准差(Mean±SD)表示,组间比较采用成组r检验;计数资料采用率表示,组间比较采用卡方检验。以P<0.05为差异有统计学意义。结果与对照组相比,CYTL1对脓毒症小鼠中性粒细胞有较强的趋化活性[(10.0±2.0)vs(66.3±4.0),r=-21.6,P<0.0001]。与其他趋化因子相比,CYTL1趋化活性较“中间型”趋化因子白细胞介素-8强[(66.3±4.0)vs(21.7±6.5),t=10.1,P=0.001];与“终点型”趋化因子fMLF相比差别不明显[(66.3±4.0)vs(86.0±13.5),t=-2.4,P=0.073]。流式细胞术及共聚焦激光显微镜检测结果显示,与脓毒症组相比,CYTL1蛋白能促进脓毒症小鼠中性粒细胞吞噬大肠杆菌[(7.35±1.66)vs(2.84±0.62),t=4.4,P=0.012],并增加细胞释放氧自由基[(84340.1±5353.5)vs(351018.7±72291.7),t=6.4,P=0.003]。结论在脓毒症天然免疫反应阶段,CYTL1对小鼠中性粒细胞有较强的趋化活性,且能促进细胞吞噬能力及氧自由基释放,提示该因子可能在疾病早期有促进炎症反应的作用。