氟-肝素表面修饰人工晶状体的实验研究

目的 研究氟 -肝素表面修饰人工晶状体 ( fluorine- heparin surface modified in-traocular lenses,F- HSM IOL s)的生物相容性 ,为开发新型 IOL 并应用于临床提供理论和实验依据。方法 采用载能离子束联合低温等离子体技术对聚甲基丙烯酸甲酯人工晶状体 ( polym ethyl methacrylate intraocular lenses,PMMA IOL s)进行氟离子与肝素双重表面修饰。通过理化及光学方法检测其性能。体外通过细胞粘附 ,细胞生长实验。体内实验进行兔眼、猕猴眼内植入 ,进行相关的基础及体内研究。比较 F- HSM IOL s与普通 PMMAIOL s的生物相容性。结果 F- HSM IOL s呈淡棕色 ,可阻挡短波光线及紫外线。F- HSM I-OL s表面粘附细胞少、无细胞毒性 ,植入眼内引起的眼部炎症反应轻 ,血 -房水屏障破坏轻 ,并能在一定程度上减低后囊混浊。结论 F- HSM IOL s较目前常用的 PMMA IOL s有更好的生物相容性。已通过国家指定的检测中心 ,按 IOL 国际标准检测 ,性能全部符合国际标准的要求 。

中国白内障扫盲概况

自从新中国建立以来，政对人民健康极为重视。自50年代起即已开始全国性防盲工作。1987年在卫生部领导下建立了全国防盲委员会。根据联合国规定标准进行流行病学抽样调查150多万人。结果表明白内障为我国致盲首要病因。开展了防盲先进县活动。在1988～1996年共完成白内障复明手术175万例。1989年国际捐款、政府支持在天津医科大学建立“世界人工晶体中国天津培训中心”13年培训全国眼科医师2500多人掌握现代人工晶状体植入术治疗白内障，并与学员共同完成本项手术15多万例。本文最后介绍“视觉第一，中国行动”在我国发展概况。这一行动将大力推动我国白内障复明事业的发展。

糖尿病大鼠视网膜中VEGF、PEDF的表达与血-视网膜屏障损伤

目的观察糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠视网膜中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和色素上皮源性因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)的表达及早期血-视网膜屏障的改变,探讨二者之间的关系。方法选取87只健康SD大鼠,应用链-脲佐菌素建立DM大鼠模型,随机分为正常对照组(N)、DM0.5个月组、DM1个月组、DM3个月组及DM5个月组。分别行RT-PCR及Western blot检测大鼠视网膜VEGF、PEDF的mENA及蛋白表达,应用伊文思蓝法及透射电镜法观察血-视网膜屏障损伤情况。结果正常大鼠视网膜有VEGF的mRNA及蛋白表达,DM0.5个月组表达开始增高,光密度值分别为0.5700±0.1580和0.5770±0.0279(均为P<0.05),随病程延长,表达量逐渐增高,至DM5个月组VEGF表达量约为正常对照组的2倍,分别为0.9560±0.0560和0.9790±0.0790(均为P<0.05)。PEDF mRNA表达于正常大鼠视网膜,DM1个月组表达开始减少,光密度值为0.3440±0.0437,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),至DM5个月组视网膜表达量减少至0.2360±0.0455,约为正常对照组的1/2(P<0.05)。PEDF蛋白在各组大鼠视网膜的表达与其mRNA表达趋势一致。伊文思蓝法结果显示DM大鼠视网膜血管渗漏较正常大鼠增强,DM0.5个月组鼠即有增高,达(2.6310±0.2725)μL·g-1·h-1(P<0.05),随病程延长,渗漏逐渐增强,至DM5个月组,伊文思蓝渗漏量达(10.0260±1.1121)μL·g-1·h-1,约为正常对照组的6倍(P<0.05)。同时DM1个月时血-视网膜屏障超微结构发生改变,且呈逐渐加重趋势。结论早期DM大鼠血-视网膜屏障损伤,VEGF的正性表达增多与PEDF的负性表达减少可能对此病理改变起一定的促进作用。

超声乳化、囊袋内人工晶状体植入联合玻璃体切割术治疗增殖性糖尿病视网膜病变

目的:评价晶状体超声乳化、囊袋内人工晶状体植入联合玻璃体切割术治疗增殖性糖尿病视网膜病变的临床效果。方法:回顾性分析了33例(41眼)行晶状体超声乳化、后房型人工晶状体植入、玻璃体切割联合手术治疗增殖性糖尿病视网膜病变患者的病程、视力及手术并发症等临床资料。结果:41眼均为囊袋内植入人工晶状体,后囊膜完整。41眼中36眼(88%)视力提高,视力>0.05者占73%(30/41),>0.2者占46%(19/41),平均随访时间9mo。31眼术前未接受过眼内激光治疗,术中行全视网膜光凝。5眼术后玻璃体再次出血,1眼术后视网膜脱离复发,其中4眼再次行玻璃体视网膜手术。结论:晶状体超声乳化、囊袋内人工晶状体植入联合玻璃体切割术治疗增殖性糖尿病视网膜病变是安全有效的,有利于保持血—房水屏障,减少术后虹膜红变,早期恢复患者视力,避免再次白内障手术或二期人工晶状体植入。

黄色人工晶状体植入对比敏感度和色觉的研究

目的 研究黄色人工晶状体（ＩＯＬ） 植入眼内主观感觉、对比敏感度和色觉的变化。 方法 老年白内障６０ 人（６６ 眼） ，随机分成两组，植入黄色ＩＯＬ３０ 眼，普通ＰＭＭＡＩＯＬ３６ 眼。术后１ 周，１ ，３ ，６ 月时，分别询问主观感觉、测量视力、对比敏感度、色觉。 结果 黄色ＩＯＬ 比普通ＰＭＭＡ ＩＯＬ 在空间对比敏感度的低、中频率上显著升高，主观感觉也较好。结论 黄色ＩＯＬ 比普通ＰＭＭＡＩＯＬ 在空间对比敏感度的低。

视觉发育关键期大鼠视网膜频域OCT测量值的变化特征

背景人类和哺乳动物视觉发育关键期内视网膜处于发育阶段，其各个亚层的正确排列以及细胞的准确定位是视觉信息正常传递的基础之一。频域光学相关断层扫描（SD—OCT）可活体测量并连续观察大鼠视网膜厚度的变化。目的了解视觉发育关键期内SD大鼠视网膜厚度的变化规律。方法选择新生SD大鼠30只，其中10只于出生后14、18、21、24、42d进行双眼眼底SD—OCT扫描，对视网膜厚度以及部分亚层包括内界膜（ILM）至内丛状层（IPL）、内核层（INL）、外核层（ONL）至视网膜色素上皮（RPE）层的厚度进行生物测量。另取20只SD大鼠，分别于14、18、21、24、42d各处死4只大鼠并摘除双眼，制作石蜡切片行苏木精一伊红染色，对视网膜厚度以及部分亚层结构进行测量。并对两种方法测量数据的相关性进行评价。结果大鼠视网膜CirrusHD—OCT图像由内向外可显示视网膜IPL、INL、外丛状层（OPL）、ONL、光感受器内节／外节（IS／OS）层以及RPE层等结构。比较各个时间点的视网膜厚度、ILM至IPL厚度、INL厚度以及ONL至RPE层厚度，差异均有统计学意义（F=15．425，P=0．000；F=3．973，P=0．007；F=17．529，P：0．000；F=7．038，P=0．000）。随大鼠日龄的增加，视网膜厚度、INL厚度及ONL至RPE层厚度均呈递减趋势。测量视网膜组织切片各对应层次厚度，并与OCT测量结果进行线性回归分析，结果表明两种方法测量的视网膜厚度、INL厚度以及ONL至RPE层厚度均呈正相关（r=0．794，P=0．000；r=0．784，P=0．000；r=0．681，P=0．000）。结论CirrusHD—OCT可以清晰地显示并测量大鼠视网膜各主要层次，且与组织学测量具有较好的相关性。视觉发育关键期内大鼠视网膜逐渐变薄，OCT测量主要表现为INL厚度和ONL至RPE层厚度减少。

角膜缘损伤模型静脉移植兔骨髓间充质干细胞体内动态分布特点的初步研究

目的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,MMSCs)取材方便,可使器官、组织的修复和重建成为可能,但MMSCs在体内的分布、归巢等问题一直是研究热点和难点。文中探讨角膜缘损伤模型静脉移植兔MMSCs的体内动态分布特点。方法选用2.5 kg,月龄2个月的新西兰大白兔60只,入笼养至7 d。随机分为2组,每组30只,正常兔作为对照组,角膜缘碱烧伤兔(制备右眼)作为实验组。分别进行静脉移植MMSCs,观察动物进食、休息状态、行为、排便,是否有腹泻、毛色变化、脱毛等;观察眼部是否有睑球粘连、感染。分别于细胞移植后第3、21、60天耳缘静脉抽取2ml外周血后,空气栓塞处死兔(每组每次处死6只),将眼、肺、心、肝、脾、肾、肌肉和脑组织作冰冻切片,片厚4μm。结果对照组移植术后不同天数MMSCs细胞数目比较的差异无统计学意义(P>0.05);实验组移植术后第3天,外周血中的MMSCs数量较高(2.98±0.11)个,与第21、60天比较,差异有统计学意义(P<0.05),且移植MMSCs的起始数量与外周血中第3天的流式细胞学检测结果呈正相关(r=0.567,P<0.05)。2组间移植术后第3、21、60天细胞数目比较的差异均有统计学意义(P<0.05)。激光共聚焦显像镜下可观察到外源性MMSCs迁移至角膜。对照组在角膜、虹膜、视网膜、脉络膜、虹膜可偶见MMSCs分布。实验组MMSCs数量由多至少依次为角膜缘、角膜中央、结膜、视网膜、脉络膜、虹膜;且MMSCs在角膜缘的分布有"聚集现象";MMSCs经静脉移植后,心、肝、脾肺、肾、肌肉、脑均可见到分布。移植术后不同时间,肺MMSCs数量变化差异有统计学意义(P<0.05),而脾组织中MMSCs数量变化差异无统计学意义(P>0.05)。结论在角膜损伤修复过程中,静脉移植MMSCs可归巢至角膜损伤部位,在全身实质器官中均有分布,肺组织是主要截流场所,脾是MMSCs破坏与溶解场所。

共聚焦显微镜下LASIK术后角膜基质的变化

目的研究准分子激光原位角膜磨镶术(LASIK)术后角膜基质的改变。方法选择LASIK患者24例(48眼),于术后第1、10、30和90 d进行角膜中央部位共聚焦显微镜检查。结果48眼(100%)角膜瓣基质有微皱褶,在瓣与基质床界面处可见高反光颗粒。界面上下可见激活细胞,激活细胞所在区域深度与角膜瓣厚度呈负相关性(r1=-0.554,P=0.047);与削切深度呈正相关(r2=0.559,P=0.010),后基质细胞术后有所增加,1个月(P=0.000)时达到最高,3个月时又下降,但仍高于术前(P=0.000)。结论LASIK术后角膜基质可见微皱和高反光颗粒,基质细胞被激活,界面两侧基质中出现无细胞区。后基质细胞密度有所增加。

5-氟尿嘧啶抑制兔晶状体上皮细胞增殖及眼内毒性的研究

目的 研究 5 氟尿嘧啶 ( 5 Fu)对兔晶状体上皮细胞 (LECs)增殖的影响及眼内毒性。方法 传代兔LECs添加不同质量浓度的 5 Fu ,作用一定时间后 ,MTT法测定OD值。选取对LECs增殖有明显抑制效果的质量浓度 ,进行兔眼前房注射 ,4天后进行角膜内皮分析和眼内炎性细胞分析。结果 体外实验质量浓度为 0 2 5 μg/ml有显著的抑制效果(P <0 0 5 ) ;前房注射的 5 Fu达 5mg/ml时 ,表现出角膜内皮形态改变及前节炎性反应 ,随质量浓度升高 ,程度加重。结论 5 Fu对兔LECs增殖的体外抑制呈时间依赖性和质量浓度依赖性 ,前房注射 5 Fu产生的眼毒性与其质量浓度正相关。

激光周边虹膜成形术

闭角型青光眼的原因是解剖结构的异常,这种异常最终引起房角关闭,眼压升高。许多年以来,人们一直寻找各种方法打开房角,降低眼压。激光周边虹膜成形术就是简单而有效的打开房角的方法。该技术适用于各种类型的闭角型青光眼,尤其适用于不能行虹膜切开或虹膜切开不能消除非瞳孔阻滞因素的情况,可以制止药物治疗无效的闭角型青光眼的急性发作。

兔角膜缘干细胞两种培养方法的比较

目的对采用消化法和组织块法培养兔角膜缘干细胞进行对比,以期确定合理的角膜缘干细胞体外培养方法。方法采用3T3成纤维细胞滋养层培养体系,分别用消化法和组织块法培养兔角膜缘上皮细胞,用免疫组织化学技术检测培养的细胞中ΔNp63的表达。采用流式细胞技术分析分离的角膜缘上皮细胞悬液中间质细胞的含量,采用扫描电镜观察去除上皮的角膜缘基质表面。结果采用消化法培养,培养的细胞中ΔNp63表达较多,细胞最终可以分化为复层上皮结构。在分离的细胞悬液中,间质细胞含量小于5%,扫描电镜显示角膜缘上皮细胞能被完全消化。结论在角膜缘干细胞的培养中,在干细胞的含量方面,消化法培养要明显优于组织块法培养。

肿瘤坏死因子对晶状体上皮细胞的粘附移行作用

目的 :探讨肿瘤坏死因子α (tumornecrosisfactorα ,TNF α)对晶状体上皮细胞在细胞外基质上的粘附移行作用 ,以及在此过程中整合素分子的表达情况。方法 :借助细胞粘附实验和移行实验研究TNF α对体外培养的牛晶状体上皮细胞在细胞外基质上的粘附和移行 ,以及整合素抗体封闭后对细胞的影响。TNF α对细胞表面整合素的表达调节经免疫荧光染色后由流式细胞仪检测。结果 :TNF α可以明显促进晶状体上皮细胞在Ⅳ型胶原、层粘蛋白、纤维连接蛋白上的粘附移行。抗体封闭实验表明整合素 β1、α2、α3、α5亚基参与细胞的粘附 ,在细胞移行中发挥主要作用的是α亚基而非 β亚基。流式细胞仪检测表明TNF α可上调晶状体上皮细胞中整合素的表达。结论 :胶原、层粘蛋白、纤维连接蛋白是晶状体囊的主要成分 ,肿瘤坏死因子α促进晶状体上皮细胞与晶状体囊膜成分的粘附移行 ,该作用的发挥至少部分通过TNF

氟-肝素表面修饰人工晶状体的制备及物理光学性能的研究

目的以氟－肝素对聚甲基丙烯酸甲酯（ＰＭＭＡ）人工晶状体进行表面修饰，并测定其物理光学性能。方法利用载能离子束联合低温等离子体技术对ＰＭＭＡ人工晶状体进行氟－肝素表面修饰，通过物理光学方法对不同剂量表面修饰的人工晶状体进行透光率、分辨率、屈光度及袢的抗拉强度的测定。结果氟－肝素修饰人工晶状体氟离子剂量为２×１０１４～５×１０１４ｉｏｎｓ／ｃｍ２，其机械、光学性能和未修饰人工晶状体比较无明显区别，在短波光线及紫外线区（３６０～４９０ｎｍ）修饰人工晶状体的透光率明显低于未修饰人工晶状体。结论氟－肝素修饰人工晶状体有效地阻挡了短波光线及紫外线，起到保护视网膜的作用。

白内障摘出人工晶状体植入后眼内炎临床分析

目的探讨白内障术后眼内炎的发病原因及手术效果.方法回顾性分析2000年1月～2004年8月收治的白内障摘出联合人工晶状体植入术后眼内炎5例(5眼),其中3例为糖尿病.5例均行细菌培养及药敏实验,根据病情4例行玻璃体切除联合玻璃体腔抗生素注射,1例单纯玻璃体腔注药.结果本组5例中4例眼内炎细菌培养呈阳性:2例为表皮葡萄球菌,1例粪肠球菌,1例醋酸钙不动杆菌.5例眼内炎均得到控制,除1例外,4例恢复良好视功能.结论糖尿病患者白内障术后感染性眼内炎的发生机率较大,积极采取玻璃体切除联合玻璃体腔注药对恢复有用视力是必要的.白内障术后急性眼内炎预后较差.

氧诱导视网膜病变小鼠模型新生血管变化规律及VEGF的动态表达

目的观察氧诱导视网膜病变(oxygen induced retinopathy,OIR)小鼠模型新生血管变化规律及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的动态表达,利用VEGF的变化反映OIR模型视网膜组织中新生血管的发生发展。方法80只C57BL/6J新生幼鼠随机分为OIR组和对照组,每组各40只。OIR组7d龄鼠暴露在(75±2)%浓度的高氧状态下5d,随后在正常空气环境下饲养;对照组小鼠,均在正常空气环境下饲养。2组均于12d龄(P12)、14d龄(P14)、17d龄(P17)、21d龄(P21)随机抽取2组小鼠各10只(20眼)处死,利用视网膜组织切片,HE染色计数突破视网膜内界膜的内皮细胞核数,分析视网膜新生血管增生情况;实时荧光定量RT-PCR(real time RT-PCR)观察VEGF mRNA的动态表达规律。结果突破视网膜内界膜的内皮细胞核数显示对照组小鼠视网膜新生血管P12、P14、P17、P21分别为0.27±0.12、0.30±0.15、0.31±0.13、0.40±0.17,自始至终很少见到突破内界膜的内皮细胞核;OIR组小鼠视网膜新生血管P12、P14、P17、P21分别为0.41±0.16、10.25±2.68、34.14±1.79、8.12±2.13,P17达高峰,以后逐渐下降。real time RT-PCR显示对照组视网膜病变中VEGF mRNAP12、P14、P17、P21分别为9.29±0.13、9.52±0.17、10.49±0.24、10.51±0.29;P12时表达相对较高,以后逐渐下降。OIR组视网膜病变中VEGF mRNAP12、P14、P17、P21分别为10.45±0.11、7.41±0.48、8.53±0.32、10.56±0.17;P12表达较低,P14达高峰,以后逐渐下降。2组VEGF mRNA P12、P14、P17时表达差异均有统计学意义(均为P<0.05),在P21时表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论VEGF是重要的血管生成因子,利用VEGF mRNA的动态表达可以映射视网膜新生血管的发生发展过程,为进一步研究奠定基础。

转化生长因子β诱导晶状体上皮细胞凋亡

目的 探讨转化生长因子 β(TGF β)对体外培养的牛眼晶状体上皮细胞凋亡的作用。 方法 MTT法测定细胞经不同浓度TGF β作用后的增殖情况 ;以TUNEL技术研究TGF β作用不同时间后细胞凋亡的变化。 结果 TGF β可显著抑制晶状体上皮细胞的增殖 ,抑制率高达 35 %。原位凋亡测定显示TGF β作用 30min至 8h可明显诱导晶状体上皮细胞凋亡 ,阳性细胞核由边缘着色逐渐变为整个核均匀着色。结论 转化生长因子 β抑制晶状体上皮细胞增殖的一个重要途径是诱导细胞凋亡。

准分子激光屈光性角膜切削术对角膜内皮细胞的影响

目的 探讨分析准分子激光屈光性角膜切削术 (PRK)治疗近视后对角膜内皮细胞的影响。方法 对 10 1只眼PRK术后者 ,用接触型镜面反光角膜内皮显微镜 (KonanSP 5 5 0 0型 ,日本 )检测不同部位角膜内皮细胞 ,并统计分析其在不同度数范围内的平均细胞密度、细胞面积的变异系数和六角形细胞的百分率。结果 平均细胞密度在C组平均下降 10 % ;A ,B组的下降无统计学意义。细胞面积的变异系数及六角形细胞百分率均在C组有明显改变。结论 PRK术对极高度近视 (切削角膜厚度超过 15 0 μm)的角膜内皮细胞有较大影响 ,随时间推移未发现进一步的变化。

血管内皮生长因子及其受体与糖尿病视网膜病变

视网膜新生血管形成和黄斑水肿是糖尿病视网膜病变(diabeticretinopathy,DR)的主要临床表现,也是DR主要的致盲原因。目前研究表明血管内皮生长因子(vascularen-dothelialgrowthfactor,VEGF)在糖尿病视网膜微血管并发症的发生中发挥重要作用,因此VEGF成为当今DR治疗干预的一个研究热点。本文就VEGF及其受体在DR中的表达及其相关治疗措施进行综述。

白内障超声乳化术后当日眼压升高临床观察

目的 对白内障超声乳化术后当日眼压升高进行临床观察与分析。方法 无术中并发症的晶状体超声乳化术2 0 0眼 ,分为 2 %甲基纤维素及医用透明质酸钠两组 ,对术前眼压 ,术后 4～ 8h及 2 4h眼压进行观察与分析。结果 术后当日眼压升高发生率平均为 3 5 .5 6% ,甲基纤维素组为 46 0 0 % ,医用透明质酸钠组为 2 5 0 0 % ,差别有统计学意义 (P <0 .0 1)。术后 4～ 8h为眼压升高峰值期。结论 晶状体超声乳化术后当日可发生眼压升高。对复杂病例术中应尽量选用高质量黏弹剂并于术后密切观察眼压变化。

晶状体超声乳化联合小梁切除术治疗青光眼合并白内障临床观察

目的探讨可调节缝线在晶状体超声乳化及人工晶状体植入术联合小梁切除术及术中应用丝裂霉素(MMC)的临床效果。方法66例(66眼)行透明角膜切口超声乳化及人工晶状体植入,标准小梁切除术,术中应用丝裂霉素和经透明角膜可调节缝线,术后观察眼压、视力及并发症,随访时间>6月。结果平均随访(10.22±3.13)月。术后视力提高者占66.67%,不变24.24%,下降9.09%。术前平均眼压(26.43±12.75)mmHg(1mmHg=0.133kPa)。术后随访期末眼压<21mmHg占94.33%,功能性滤过泡(Ⅰ型和Ⅱ型)89.39%,非功能性滤过泡(Ⅲ型)6.06%,薄壁滤过泡4.55%。并发症包括角膜水肿,浅前房,前房渗出等。结论可调节缝线在晶状体超声乳化及人工晶状体植入术联合小梁切除术及丝裂霉素,操作简单,不引起刺激症状,减少术后早期并发症。