枸杞提取物对过氧化氢诱导的人视网膜色素上皮细胞氧化损伤的保护作用

目的:体外通过过氧化氢(H2O2)诱导视网膜色素上皮(RPE)细胞造成氧化损伤,观察枸杞提取物对人视网膜色素上皮(ARPE-19)细胞活性的影响,探讨枸杞提取物通过抗氧化对ARPE-19细胞的保护作用。方法:采用不同浓度H2O2诱导体外ARPE-19细胞的氧化损伤,确定最佳浓度;采用MTT法检测枸杞含药血清对ARPE-19细胞活力的影响,确定安全有效的药物浓度;观察各组细胞的形态,划痕试验检测各组ARPE-19细胞的活力;Western Blot法检测各组细胞Nrf2/ARE信号通路相关因子Nrf2的质蛋白和核蛋白的表达水平;试剂盒检测氧化应激水平的相关指标活性氧(ROS)含量、还原型谷胱甘肽(GSH)含量及过氧化氢酶(CAT)活力。结果:当H2O2浓度为200μmol/L,作用2 h时,ARPE-19细胞出现明显的氧化损伤(P<0.01);不同浓度的枸杞含药血清对ARPE-19细胞的干预效果不同,在2.5%、5%、10%的浓度下对损伤的ARPE-19细胞具有明显的促进增殖的作用(P<0.05),故选择2.5%、5%、10%浓度的枸杞含药血清进行下一步实验,与模型组相比,枸杞含药血清组细胞形态良好,长势均匀;细胞内的ROS含量显著降低(P<0.01),GSH含量明显上升(P<0.05),CAT活力显著升高(P<0.01);Nrf2质蛋白表达增强(P<0.05),核蛋白表达减弱(P<0.05)。结论:枸杞含药血清能够提高ARPE-19细胞自身的抗氧化能力,从而对ARPE-19细胞产生保护作用。

骨碎补总黄酮调控H型血管影响大鼠股骨Masquelet诱导膜模型的骨重建

背景:多项研究发现,骨碎补总黄酮可促进诱导膜中血管新生、改善诱导膜生物性能、加速诱导膜技术骨重建,但相关分子机制仍需进一步探究。目的:观察骨碎补总黄酮通过调控H型血管对大鼠股骨Masquelet诱导膜模型骨重建的影响。方法:将36只雄性SD大鼠按体质量分层后随机分为空白组、模型组、中药组,每组12只,3组均建立4 mm右后肢股骨骨缺损模型,模型组与中药组骨缺损处充填聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥;造模后6周,空白组骨缺损处填充大鼠自体尾骨,模型组与中药组取出诱导膜内的骨水泥后植入大鼠自体尾骨。植骨第3天开始,中药组灌胃给予骨碎补总黄酮157.5 mg/(kg·d),其余两组灌胃给予生理盐水,连续给药至植骨后8周。植骨后8周取材进行相关检测。结果与结论:①X射线片显示,空白组缺损区骨折线清晰,仅有少量骨痂形成;模型组缺损区可见不连续皮质骨,骨缺损区仍存在;中药组缺损区充满新生骨组织,骨髓腔与部分皮质骨形成,骨折线消失。②Micro-CT扫描显示,空白组缺损区新生骨量较少,模型组缺损区骨小梁数量明显增多,中药组大量新生骨组织填充于骨缺损区。③苏木精-伊红染色显示,空白组缺损区仅见少量新骨形成,成骨质量较差;模型组缺损区有较多的新骨形成,但骨组织内夹杂有部分纤维结缔组织;中药组缺损区可见大量新骨形成,成骨质量最佳。④CD31/Emcn免疫荧光双标染色显示,空白组骨缺损区新生骨组织内H型血管数量稀少、分布稀疏;相比空白组,模型组骨缺损区骨组织内含更多H型血管,血管呈相对规则的条状分布;中药组骨缺损区H型血管数量最多,并且血管分布密集。⑤结果表明,骨碎补总黄酮可通过上调H型血管表达增强成血管-成骨作用,提高大鼠股骨Masquelet诱导膜模型成骨效能、促进骨重建。

明目消朦预处理对H_2O_2诱导人视网膜色素上皮细胞凋亡及氧化应激损伤的影响

目的观察明目消朦(MMXM)预处理对H_2O_2诱导人视网膜色素上皮细胞(RPE细胞)凋亡和氧化应激损伤的影响。方法取对数生长的RPE细胞,将细胞分为4组,A组加入含MMXM的无血清培养基,MMXM的终浓度为0. 5 mg/m L,24 h后加入200μmol/m L的H_2O_2(以制备氧化应激损伤模型); B组加入无血清的基础培养基,24 h后加入200μmol/m L的H_2O_2; C组加入含MMXM的无血清培养基,MMXM的终浓度为0. 5 mg/m L; D组加入无血清的基础培养基。比较各组细胞调亡率及ROS、MDA、SOD、GSH-PX。结果与B组比较,其余3组细胞凋亡率降低(P均<0. 05);与C、D组比较,A、B组细胞凋亡率升高(P均<0. 05)。与D组比较,A、B组ROS(+)、MDA升高,ROS(-)、SOD、GSH-PX降低(P均<0. 05);与B组比较,其余3组ROS(-)、SOD、GSH-PX升高,ROS(+)、MDA降低(P均<0. 05)。结论 MMXM预处理能有效减少H_2O_2诱导的RPE细胞凋亡,并可预防细胞氧化损伤。

糖尿病视网膜病变的临床表现和中西医治疗

糖尿病视网膜病变是临床上一种常见眼病,已迅速成为现代社会重要致盲眼病,中药辨证论治和眼底激光光凝治疗是临床上较为合理和有效的治疗方法。但早期防治糖尿病是预防DR的重要手段。活血化瘀是中药的主要治则。

益气养阴化痰方对H2O2诱导人视网膜色素上皮细胞凋亡及补体旁通路的影响分析

目的探究中医益气养阴化痰方对氧化应激下人视网膜色素上皮细胞(RPE)凋亡及补体旁通路相关因子的影响。方法将对数生长的RPE细胞分为空白组、H_(2)O_(2)组、MMXMP组、MMXMP+H_(2)O_(2)组。观察细胞形态改变,并通过流式细胞技术检测RPE细胞凋亡,Elisa检测RPE细胞CFH含量检测,Real-Time PCR检测RPE细胞C3a、miRNA146a mRNA表达情况。结果H_(2)O_(2)组较空白组RPE细胞凋亡数及凋亡率升高,差异有统计学意义(P<0.05)。H_(2)O_(2)组RPE细胞的CFH含量少于空白组,C3a、miRNA146a、mRNA表达高于空白组差异有统计学意义(P<0.05)。MMXMP组这两项指标与空白组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。MMXMP预处理组可明显降低C3a、miRNA146a mRNA的表达,增加CFH蛋白含量,差异有统计学意义(P<0.05)。结论益气养阴化痰方能有效抑制H_(2)O_(2)损伤所致ARPE-19细胞凋亡,减低miRNA146a mRNA的表达,增加CFH蛋白含量,减少细胞C3a mRNA的表达,从而保护视网膜色素上皮细胞的作用。

玻璃体腔注射康柏西普治疗BRVO继发黄斑水肿的临床疗效观察

目的:研究玻璃体腔注射康柏西普治疗视网膜分支静脉阻塞(BRVO)继发黄斑水肿(ME)的临床疗效。方法:回顾性分析。选取2016-03/2018-05经本院诊治的BRVO继发ME患者86例86眼,根据治疗方式不同分对照组患者43例43眼给予玻璃体腔注射雷珠单抗治疗,研究组患者43例43眼给予玻璃体腔注射康柏西普治疗。随访6mo,比较两组患者治疗前、治疗后1、3、6mo的黄斑中心区厚度(CMT)和最佳矫正视力(BCVA),记录随访期间两组患者的注射次数及并发症发生情况。结果:治疗后1、3、6mo时,研究组患者LogMAR BCVA(0.57±0.29、0.42±0.21、0.38±0.12)和CMT(343.56±46.23、316.68±38.25、283.56±29.47μm)与对照组(LogMAR BCVA:0.58±0.30、0.43±0.23、0.40±0.13;CMT:345.47±46.53、317.83±38.46、284.34±29.56μm)比较无差异(P>0.05);研究组患者平均注射次数(2.25±1.16次)明显低于对照组[(4.37±1.58)次,P<0.05];治疗期间两组患者均未出现持续性高眼压、眼内炎、视网膜脱落、玻璃体出血等并发症。结论:玻璃体腔注射康柏西普治疗BRVO继发ME的疗效显著,安全性好,可明显减少注射次数。

丹栀逍遥散加减联合糖皮质激素治疗肝郁气滞型视神经炎疗效观察

目的:观察丹栀逍遥散加减联合糖皮质激素治疗肝郁气滞型视神经炎的临床疗效。方法:采取平行对照、完全随机、单中心的临床试验方法,将106例肝郁气滞型视神经炎患者分为对照组和观察组,对照组予糖皮质激素治疗,观察组予丹栀逍遥散加减联合糖皮质激素治疗,观察两组的治疗效果。结果:治疗后两组患者视力、视野、P100潜伏期、振幅和RNFL厚度组内和组间对比差异显著(P<0.05)。观察组和对照组的总有效率、不良反应发生率差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:丹栀逍遥散加减联合糖皮质激素治疗肝郁气滞型视神经炎疗效显著,不良反应发生率低,值得临床推广。

“补肾壮骨”中药应用于骨组织工程支架修复节段性骨缺损

背景:节段性骨缺损为骨科难题,现有治疗手段效果欠佳。新兴骨组织工程技术在节段性骨缺损修复方面展现出巨大的潜力,但仅使用人工支架进行骨缺损修复,成骨性能往往难以满足需求,负载活性因子又存在价格昂贵、不稳定等问题。中药取材广泛、价格低廉,“补肾壮骨”中药有效成分有充当外源性生物因子的潜力,中药复合支架展现出良好的骨组织修复效果。目的:介绍几种常用的骨组织工程支架材料,及骨碎补、淫羊藿、杜仲等“补肾壮骨”代表药物在支架材料上的复合应用,探讨“补肾壮骨”中药应用于骨组织工程支架修复节段性骨缺损的潜力。方法:由第一作者检索中国知网(CNKI)、万方、PubMed和Web of Science数据库,以“中药,补肾,骨碎补,淫羊藿,杜仲,骨缺损,骨修复,骨组织工程,支架”为中文检索词,以“Chinese medicine,Tonifying kidney,Drynariae,Epimedium,Eucommia,bone defects,Bone repair,Bone Tissue Engineering,Scaffold”为英文检索词,检索2007-2022年期间关于“补肾壮骨”中药应用于骨组织工程支架修复节段性骨缺损的文章。结果与结论:①现有骨组织工程支架材料包括生物陶瓷材料、医用金属材料及聚合物材料,因各材料的性能差异可复合使用以弥补单一材料的缺陷。②外源性生长因子结合骨组织工程支架修复节段性骨缺损疗效确切,但生长因子存在不稳定性、单价昂贵等问题。③现代药理学发现“补肾壮骨”中药对骨髓间充质干细胞有显著促进成骨分化作用,可替代生长因子在骨组织工程支架中的角色。④将“补肾壮骨”中药及其活性成分与支架材料融合,所制备复合支架在修复节段性骨缺损上展现出独特优势,应用前景广阔。

临界骨缺损动物模型评估骨组织工程支架成骨效能的价值

背景:临界骨缺损的修复一直是创伤骨科医师面临的临床难题。随着临床技术与生物材料的发展,Ilizarov,Masquelet以及骨组织工程等技术正逐步取代传统自体骨及同种异体骨移植术成为骨修复领域的研究热点。其中尤以骨组织工程支架最具发展潜力,但在骨组织工程支架正式应用于临床前,进行大量基础研究必不可少,而动物实验意义最大,因此选择合适的临界骨缺损动物实验模型对验证骨组织工程支架成骨效能非常重要。目的:系统总结不同种类临界骨缺损动物模型的优缺点,评估各类骨组织工程支架在临界骨缺损动物模型中的成骨效能。方法:检索中国知网、万方、Web of Science、Cochrane Library和PubMed数据库,中文检索词为“骨缺损,动物模型,骨组织工程,支架,骨修复,骨再生”,英文检索词为“Bone defects,Animal models,Bone tissue engineering,scaffolds,Bone repair,Bone regeneration”,最终将临界骨缺损动物模型和其应用于评估骨组织工程支架成骨效能的相关实验研究文献62篇进行综述。结果与结论:①目前关于临界骨缺损的具体定义仍不明确,各类骨缺损动物模型如何建立临界缺损尚未取得共识。②检索迄今发表建立的小鼠、大鼠、兔、猪、犬和羊临界骨缺损动物模型文章,发现国内外学者在建立临界骨缺损模型时基本遵循骨缺损大小为实验期间内无法自愈的原则,但在具体数值上则存在不一。③大鼠颅骨、股骨和兔股骨髁为较合适的临界骨缺损模型部位选择,二者具有来源广泛、实验环境要求低、容易饲养、造模成本低和可操作性强等优点,适合大规模造模。但与绵羊和猪等大动物相比,存在骨骼偏小、骨组织成分与人体骨存在一定差异性、难以完全模拟人体骨愈合过程的缺点。④骨组织工程支架在进行细胞实验评估生物相容性及成骨活性后,可借助稳定的临界骨缺损动物模型证实其体内成骨效能及生物安全性,大鼠颅骨、股骨和兔股骨髁临界骨缺损模型分别适合于膜内成骨和软骨内成骨的初步评估,而绵羊、猪胫骨临界骨缺损为较理想的大动物模型,推荐用于临床前评价。⑤未来研究将深入探讨骨组织工程支架成骨的分子机制,有望帮助研发出可媲美自体骨成骨效能的人工支架材料,对攻克大段骨缺损这一临床棘手问题具有重要意义。

基于slit-RoBo信号通路探讨骨碎补总黄酮对诱导膜技术骨重建的作用机制

目的基于slit-RoBo信号通路探讨骨碎补总黄酮对诱导膜技术骨组织重建的影响。方法选取48只SD大鼠(雄性SPF级),依据体重分层结果随机分为空白组、模型组、中药中剂量组和中药高剂量组,每组12只。建立诱导膜实验模型,二期植骨后第2 d各中药组给予不同浓度骨碎补总黄酮灌胃,等量生理盐水干预空白组及模型组。术后8周行影像学检查,PCR检测CD31、Emcn、slit3、ROBO相关基因表达。结果X线结果显示模型组成骨优于空白组,而中药高、中剂量组较模型组成骨更佳。CD31、Emcn、slit3、ROBOmRNA表达,模型组较空白组提高(P<0.05);中药中、高剂量组较模型组表达明显上调(P<0.05)。结论骨碎补总黄酮通过slit-RoBo信号通路调控血管偶联成骨促进诱导膜技术骨重建。

复明片对青光眼术后视神经功能恢复的疗效观察

我们在近几年临床工作中，应用复明片配合青光眼术后治疗，并取得一些临床经验。现介绍如下：

手法复位杉树皮夹板固定治疗儿童尺桡骨远端骨折30例疗效观察

目的:观察杉树皮夹板结合手法复位治疗儿童尺桡骨远端骨折的临床疗效。方法:选取本院诊治的尺桡骨远端干骺端骨折患儿60例,均接受闭合手法复位,随机分为观察组(杉树皮夹板固定)和对照组(超肘腕石膏固定),每组30例。分析比较两组初次复位前后影像学结果,分别于复位后1、2、4、6周及5个月进行随访,记录再移位率、影像学结果、VSA疼痛评分以及有无并发症出现;6周、10周、5个月随访时,采用Mayo腕关节功能评分评价患肢功能。结果:所有患儿均获得随访。前4周再移位比例观察组(5/30)低于对照组(13/30)(P<0.05);前3周VAS疼痛评分观察组均低于对照组(P<0.05或P<0.01);复位前后两组影像学比较无统计学意义(P>0.05);5个月后残留成角观察组为(5.4±2.3)°,对照组为(9.4±3.6)°,差异有统计学意义(P<0.01);6周及10周随访,Mayo腕关节功能评分观察组分别为(79.7±7.0)分、(88.6±8.2)分,对照组为(74.7±6.4)分、(81.7±8.0分),差异均有统计学意义(P<0.01),5个月后随访,两组比较无统计学意义(P>0.05)。结论:杉树皮小夹板联合中医手法复位治疗儿童尺桡骨远端骨折的临床疗效确切,可有效减少再移位及早期腕关节僵硬等并发症。

明目消朦片治疗非增殖性糖尿病视网膜病变的临床研究

目的研究明目消朦片防治非增殖性糖尿病视网膜病变(NPDR)的有效性与安全性。方法前瞻性随机对照研究,将符合纳入标准的NPDR患者(气阴两虚兼痰瘀互结证)54例,随机分为试验组和对照组各27例。两组均根据患者具体情况给予基础治疗。试验组给予明目消朦片;对照组给予羟苯磺酸钙胶囊(导升明),治疗12周,随访12个月。观察治疗前后患者视力、微血管瘤、荧光渗漏面积、视网膜中央厚度(CRT)、中医证候评分、血液流变学及安全性指标等。结果(1)BCVA:两组在治疗后12周、6个月、12个月均较治疗前视力提高,与同组治疗前比较,均有统计学意义(P<0.05)。两组间在不同时间比较,均无统计学意义(P>0.05);(2)微血管瘤和渗漏面积:两组在治疗后12周,微血管瘤和渗漏面积均较治疗前有减少,与同组治疗前比较,均有统计学意义(P<0.05),而两组间比较,无统计学意义(P>0.05);(3)CRT:两组在治疗后12周,两组间比较,无统计学意义(P>0.05);(4)中医证候积分:两组治疗4周及12周后中医证候积分呈下降趋势,与治疗前比较均有统计学意义(P<0.05)。两组间比较,治疗后4周和12周,均有统计学意义(t_(4周)=4.110,t12周=22.528,均P=0.000);(5)临床疗效:两组在治疗后12周,试验组总有效率是81.5%;对照组为51.8%,有统计学意义(χ^(2)=5.333,P=0.021)。(6)不良反应:两组在试验过程中均未发生任何不良反应。结论明目消朦片对NPDR患者在提高视力、减少微血管瘤、改善微循环及患者中医证候评分等方面有一定作用。

鼻部聚焦超声治疗慢性肥厚性鼻炎临床疗效观察

目的:讨论高能聚焦超声治疗慢性肥厚性鼻炎临床疗效。方法:采用海极翼超声波鼻炎治疗仪对84例慢性肥厚性鼻炎患者进行聚焦超声治疗,观察治疗后的临床症状、体征及疗效。结果:聚焦超声治疗后持续性鼻塞、鼻塞性鼻音等症状明显缓解,总有效率96%,术后无瘢痕、出血、粘连等后遗症。结论:高能聚焦超声是治疗慢性肥厚性鼻炎的一种有效、不良反应少的治疗方法。

青睫症方治疗青光眼睫状体炎综合征临床观察

目的观察自拟青睫症方治疗青光眼睫状体炎综合征的疗效。方法选取准新余市中医院五官科青光眼睫状体炎综合征患者30例。其中对照组15例给予妥布霉素地塞米松滴眼液联合布林佐胺滴眼液治疗;治疗组15例在对照组基础上联合自拟青睫症方治疗,制定症状、体征积分表,分别观察治疗组与对照组治疗后1、2周的症状、体征指标变化,填写积分表并对比其疗效及其眼压。结果治疗组总有效率93.33%(14/15)高于对照组80.00%(12/15)(P<0.05);治疗后1、2周,治疗组中医证候评分、眼压低于对照组(P<0.05)。结论自拟青睫症方治疗青光眼睫状体炎综合征的疗效确切,突出表现在改善睫状充血体征,控制眼压、缩短病程上,值得临床大力推广。

黄连素-柚皮苷双重载药复合微球的制备及其抗菌-成骨性能评估研究

目的研制一种可同时释放抗菌药物黄连素(berberine,BBR)与促成骨药物柚皮苷(naringin,NG)的载药复合微球,以期用于治疗感染性骨缺损。方法将NG负载于介孔生物玻璃微球(mesoporous bioactive glasses,MBG)获得载药微球(NG-MBG),随后使用聚多巴胺(polydopamine,PDA)对微球进行包裹,以及使用BBR对包裹的PDA涂层进行修饰,获得双重载药复合微球(NG-MBG@PDA-BBR)。取上述制备复合微球,利用扫描电镜、X射线衍射、比表面积及孔容分析仪、傅里叶红外光谱仪进行理化性能表征;测量NG、BBR载药率以及释放量;与金黄色葡萄球菌、大肠杆菌共培养12 h后对菌落计数并计算抑菌率,观察其抗菌性能;与大鼠BMSCs共培养,24、72 h后通过活/死细胞荧光染色与细胞计数试剂盒8法评估生物相容性,7、14 d后分别行ALP染色与茜素红染色评估其成骨性能。结果成功构建NG-MBG@PDA-BBR和3种对照微球(MBG、MBG@PDA及NG-MBG@PDA)。扫描电镜观察示,NG-MBG@PDA-BBR呈粗糙片层结构,而MBG微球表面光滑,MBG@PDA和NG-MBG@PDA呈包裹团聚结构;比表面积分析显示MBG存在介孔结构,具备载药潜力;小角度X线衍射示NG成功负载于MBG;而X射线衍射图谱对比示各组微球均呈现非晶态;傅里叶红外光谱示NG-MBG@PDA-BBR中存在NG和BBR特征峰。且NG-MBG@PDA-BBR具有良好药物缓释能力,NG和BBR均呈现早期突释与后期缓释表现。NG-MBG@PDA-BBR能抑制金黄色葡萄球菌及大肠杆菌生长,抗菌能力高于MBG、MBG@PDA及NG-MBG@PDA(P<0.05);4种微球生物相容性在72 h时差异有统计学意义(P<0.05)。ALP和茜素红染色示NG-MBG@PDA-BBR的ALP阳性面积和钙结节数量高于MBG、NGMBG(P<0.05),与NG-MBG@PDA差异无统计学意义(P>0.05)。结论NG-MBG@PDA-BBR对NG与BBR均具有缓释作用,提示其具有理想成骨与抗菌双重性能。